本發(fā)明涉及一種人工養(yǎng)殖白蟻的飼料。

背景技術(shù)：

盡管有部分白蟻種類是重要的有害生物，但白蟻更是重要的資源昆蟲。大多數(shù)白蟻種類在降解纖維素類物質(zhì)最主要的節(jié)肢動(dòng)物類群，不但發(fā)揮著重要的生態(tài)作用，同時(shí)也是重要的纖維素生物降解酶系及其基因資源的重要來源（劉小琳等，2015）。而且，白蟻也具有重要營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和藥用價(jià)值（吳小楠等，1995；banjoetal.,2006），所以包括臺(tái)灣乳白蟻在內(nèi)許多白蟻種類都是一種優(yōu)良的家禽及珍惜野生動(dòng)物飼料或飼料添加成分。因此，白蟻的擴(kuò)大飼養(yǎng)，具有廣闊的市場(chǎng)前景。但是，白蟻的人工擴(kuò)大飼養(yǎng)，仍有許多共性技術(shù)問題需要解決，其中有效的人工飼料是其中限制性技術(shù)之一，目前尚無一種有效的白蟻人工飼料，白蟻飼料的研究是白蟻資源化利用有待解決的關(guān)鍵技術(shù)之一。

目前，白蟻飼養(yǎng)中的飼料主要使用木板或木段。臺(tái)灣乳白蟻的飼養(yǎng)喂食松木板，成本高，林木資源消耗大，資源浪費(fèi)，空間需求大，缺乏標(biāo)準(zhǔn)化的技術(shù)指標(biāo)，難以大量飼養(yǎng)時(shí)使用。在防治餌劑的研制中，有將甘蔗渣、纖維素粉、松木粉、秸稈、麩皮等作為餌料使用，但是用于白蟻飼料的應(yīng)用技術(shù)研究較少。誘食信息素在長(zhǎng)鼻白蟻的下唇腺提取物中首次被發(fā)現(xiàn)。reinhard和kaib（2001）發(fā)現(xiàn)白蟻下唇腺分泌物中誘食信息素的化學(xué)組分普遍存在（reinhardetal.，2002），相同或極為相似的化合物經(jīng)鑒定其主要成分為對(duì)苯二酚（hydroquinone）及其類似物。誘食信息素能夠刺激白蟻在食物周圍聚集取食，使取食利用最大化。達(dá)爾文澳白蟻、桑特散白蟻對(duì)誘食信息素有顯著的趨向性（reinhardetal.，2001，2002），黑翅土白蟻則對(duì)對(duì)苯二酚無行為響應(yīng)（黃求應(yīng)，2006）。但是，臺(tái)灣乳白蟻（coptotermesformosanus）中雖然存在對(duì)苯二酚，但是單一的對(duì)苯二酚并不能起到誘食作用，對(duì)苯二酚容易被氧化失去作用，需要多組分共同發(fā)揮誘食作用（reinhardetal.，2002；sillam-dussesetal.,2012）。所以，白蟻誘食信息素存在種間特異性（rainaetal.，2005），而相關(guān)的應(yīng)用研究非常有限。因此，將白蟻誘食信息素應(yīng)用到白蟻飼料的相關(guān)應(yīng)用技術(shù)亟待研究。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

基于此，本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種有效的乳白蟻人工飼料，并提供其制備方法，該飼料可用于乳白蟻屬白蟻的高效擴(kuò)大養(yǎng)殖，解決了乳白蟻資源化利用過程中，白蟻飼料的人工化、標(biāo)準(zhǔn)化、環(huán)?；?、低成本化的問題。

一種具有誘食作用的乳白蟻飼料，含有以下重量份數(shù)的組分：甘蔗渣50-60份、玉米秸稈30-45份、對(duì)苯二酚0.0001-0.0002份、茶多酚0.0001-0.002份、木糖1-3份、酵母粉2-4份、羥甲基纖維素0.5-1份、黃原膠0.5-1份、防腐劑0.1-0.6份。

各組分重量份數(shù)優(yōu)選為：甘蔗渣54份、玉米秸稈36份、對(duì)苯二酚0.00015份、茶多酚0.0009份、木糖3份、酵母粉4份、羥甲基纖維素0.8份、黃原膠0.8份、山梨酸鉀0.5份。

一種上述具有誘食作用的乳白蟻飼料的制備方法，制備步驟為：

1）將木糖、羥甲基纖維素、黃原膠、酵母粉、防腐劑混合均勻；

2）將對(duì)苯二酚和茶多酚分別配置成0.5-1.5mg/ml濃度的溶液，混合后加入上述混合物中；

3）將甘蔗渣、玉米秸稈粉碎，過80-100目篩，加入步驟2）所得混合物中混合均勻；

4）將上述混合材料加入2-3倍重量的水，混勻并壓平，制作成餅狀；

5）所有制成餅狀的飼料餅正面穿2-5cm孔6-8個(gè)，風(fēng)干。

進(jìn)一步的，步驟4）所述餅為10cm×5cm×1cm的方餅。

進(jìn)一步的，所述乳白蟻為臺(tái)灣乳白蟻。本發(fā)明的飼料同樣適用于乳白蟻屬的其它種的白蟻。

本發(fā)明具有如下有益效果：

乳白蟻（等翅目(isoptera)鼻白蟻科(rhinotermitidae)乳白蟻屬(coptotermes)）為木食性白蟻，本發(fā)明的白蟻飼料以甘蔗渣、玉米秸稈為主要原料，滿足乳白蟻生長(zhǎng)發(fā)育的需求，原料容易獲得，成本低。對(duì)苯二酚和茶多酚為白蟻誘食成份，對(duì)苯二酚為白蟻誘食信息素主要化合物，通過茶多酚對(duì)對(duì)苯二酚的誘食提到顯著的增效作用，可明顯增加白蟻的取食量。木糖、酵母粉，提高白蟻飼料的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，或補(bǔ)充白蟻生長(zhǎng)所需營(yíng)養(yǎng)成分，而且能夠起到一定的白蟻引誘作用。黃原膠、羥甲基纖維素可被白蟻取食，增加一定的保水性和白蟻飼料的固化成型。白蟻飼料餅穿孔可以進(jìn)一步提高飼料與白蟻的接觸面積，提高白蟻的取食效率。

本發(fā)明的飼料不但可以用于飼養(yǎng)乳白蟻屬的白蟻，如臺(tái)灣乳白蟻，也可以作為基餌用于乳白蟻餌劑，具有顯著的誘食作用而提高餌劑的作用效果。本發(fā)明具有顯著的引誘和促進(jìn)取食的效果，極大地提高白蟻的取食效率，方法操作簡(jiǎn)單方便，材料來源容易，廢物利用，保護(hù)環(huán)境，降低成本，節(jié)省儲(chǔ)存空間，利于標(biāo)準(zhǔn)化、規(guī)范化、規(guī)模化飼養(yǎng)。

附圖說明

圖1為代謝產(chǎn)物檢測(cè)分析試驗(yàn)中對(duì)照組對(duì)對(duì)苯二酚增效處理組的差異代謝物篩選火山圖。

具體實(shí)施方式

為使本發(fā)明的上述目的、特征和優(yōu)點(diǎn)能夠更加明顯易懂，下面結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明的具體實(shí)施方式做詳細(xì)的說明。

實(shí)施例1

一種具有誘食作用的臺(tái)灣乳白蟻飼料，由以下重量份數(shù)的組分組成：甘蔗渣54份、玉米秸稈36份、對(duì)苯二酚0.00015份、茶多酚0.00075份、木糖3份、酵母粉4份、羥甲基纖維素0.8份、黃原膠0.8份、山梨酸鉀0.5份。

實(shí)施例2

一種具有誘食作用的臺(tái)灣乳白蟻飼料，由以下重量份數(shù)的組分組成：甘蔗渣50份、玉米秸稈45份、對(duì)苯二酚0.0001份、茶多酚0.0005份、木糖1份、酵母粉2份、羥甲基纖維素1份、黃原膠0.5份、山梨酸鉀0.1份。

實(shí)施例3

一種具有誘食作用的臺(tái)灣乳白蟻飼料，由以下重量份數(shù)的組分組成：甘蔗渣54份、玉米秸稈36份、對(duì)苯二酚0.0002份、茶多酚0.001份、木糖2份、酵母粉3份、羥甲基纖維素0.5份、黃原膠1份、山梨酸鉀0.6份。

上述三個(gè)實(shí)施例飼料的制備方法為：

1）將木糖、羥甲基纖維素、黃原膠、酵母粉、山梨酸鉀混合均勻；

2）將對(duì)苯二酚和茶多酚分別配置成1mg/ml的溶液，混合后加入上述混合物中；

3）將甘蔗渣、玉米秸稈粉碎，過80-100目篩，加入步驟2）所得混合物中混合均勻；

4）將上述混合材料加入2-3倍重量的水，混勻并壓平，制作成10cm×5cm×1cm方餅狀；

5）所有制成餅狀的飼料餅正面穿2-5cm孔6-8個(gè)，風(fēng)干后使用。

下面通過實(shí)驗(yàn)對(duì)本發(fā)明的效果進(jìn)行說明。

1.1白蟻飼料配方對(duì)臺(tái)灣乳白蟻取食量的影響

使用本發(fā)明實(shí)施例1的白蟻飼料餅，每個(gè)重復(fù)取50頭工蟻和5頭兵蟻，喂食15天后，計(jì)算每個(gè)飼料餅重量減少。以1g松木板粉為飼料的飼料餅為對(duì)照。每個(gè)處理設(shè)5個(gè)重復(fù)。結(jié)果顯示，臺(tái)灣乳白蟻對(duì)本配方飼料的取食量顯著高于對(duì)照（f=21.462，df=1，8，p=0.002）。

1.2誘食成份選擇性實(shí)驗(yàn)

培養(yǎng)皿內(nèi)兩個(gè)對(duì)角放置兩個(gè)倒扣過來的50ml燒杯，以超純水處理的濾紙片（2×2cm）置于燒杯內(nèi)作為對(duì)照，另一個(gè)燒杯內(nèi)分別放置其它不同溶液處理的濾紙片，在兩個(gè)燒杯口相對(duì)的中間位置釋放50頭工蟻，恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)（27±1℃，rh80±5%，l:d=0:24h）30min后，觀察記錄每個(gè)燒杯內(nèi)白蟻的數(shù)量。設(shè)9個(gè)茶多酚處理組，以0.2ng/ul對(duì)苯二酚溶液?jiǎn)为?dú)處理作為對(duì)照組，設(shè)4個(gè)重復(fù)。

不同濃度對(duì)苯二酚與茶多酚混配比例的各處理組的選擇率，均高于0.2ng/ul對(duì)苯二酚單獨(dú)處理，但是僅有1ng/ul對(duì)苯二酚與茶多酚以質(zhì)量比1:5的處理組，則與對(duì)照具有顯著差異（p=0.034）（表1）。

表1對(duì)苯二酚聯(lián)合茶多酚對(duì)臺(tái)灣乳白蟻選擇率的影響

1.3誘食成份非選擇性實(shí)驗(yàn)

在培養(yǎng)皿內(nèi)均勻的平鋪一層薄薄的蛭石，將處理好的濾紙片（2×2cm）放在培養(yǎng)皿內(nèi)，每個(gè)培養(yǎng)皿內(nèi)放入45頭工蟻和5頭兵蟻，將培養(yǎng)皿加蓋全部放入恒溫恒濕培養(yǎng)箱內(nèi)，每天檢查記錄，然后在每塊濾紙上加100ul超純水，觀察5d后取出濾紙片60℃烘箱，12h后取出在干燥器中隔夜稱重，記錄濾紙消耗量。茶多酚設(shè)9個(gè)處理，設(shè)4個(gè)重復(fù)。

當(dāng)對(duì)苯二酚聯(lián)合抗氧化劑茶多酚時(shí)，各處理組的取食率均高于0.2ng/ul對(duì)苯二酚單獨(dú)處理及對(duì)照組，但是當(dāng)對(duì)苯二酚濃度為0.2ng/ul及0.1ng/ul時(shí)，相應(yīng)處理組與對(duì)照組之間沒有明顯差異（p<0.05），而1ng/ul對(duì)苯二酚與茶多酚的質(zhì)量比為1：1（p=0.013）和1:5（p=0.002）處理，其取食率與對(duì)照組之間均有顯著差異性（表2）。1ng/ul對(duì)苯二酚處理組，臺(tái)灣乳白蟻的取食率隨著茶多酚比例的增高而逐漸升高?？梢姴瓒喾訉?duì)對(duì)苯二酚具有取食增效作用，但是對(duì)苯二酚濃度及混配比例對(duì)于誘食效果有影響。

表2對(duì)苯二酚聯(lián)合茶多酚對(duì)臺(tái)灣乳白蟻取食率的影響

1.4代謝產(chǎn)物檢測(cè)分析

設(shè)置單純纖維素處理為對(duì)照組（x組）和一個(gè)經(jīng)對(duì)苯二酚與茶多酚處理的為處理組（t`組），每個(gè)處理6個(gè)重復(fù)。為了比較分析處理組對(duì)白蟻代謝產(chǎn)物的影響，檢測(cè)數(shù)據(jù)結(jié)果進(jìn)行峰提取，基線矯正，峰對(duì)齊及定性定量。峰對(duì)齊時(shí)運(yùn)用保留時(shí)間指數(shù)法，參數(shù)設(shè)置為5000，過濾在質(zhì)控中出峰量少于50%的峰。單變量統(tǒng)計(jì)分析使用t檢驗(yàn)，多元變量統(tǒng)計(jì)分析使用主成分分析、正交偏最小二乘法-判別分析opls-da分析，經(jīng)200次建立對(duì)應(yīng)的opls-da模型并獲取隨機(jī)模型的r2和q2值，進(jìn)行opls-da置換檢驗(yàn)。將篩選差異代謝物的結(jié)果以火山圖（volcanoplot）的形式進(jìn)行可視化處理。顯著差異代謝產(chǎn)物篩選條件為檢驗(yàn)p值小于0.05，同時(shí)模型第一主成分的變量投影重要度vip大于1。

經(jīng)液氮淬滅和低溫保存的待檢測(cè)樣品，進(jìn)行樣品的分離提純和衍生化。各處理稱量白蟻樣本質(zhì)量30mg于ep管中，加入0.4ml提取液，再加入20μll-2-氯苯丙氨酸，渦旋10s，加入瓷珠，45hz研磨儀處理4min，超聲5min（冰水浴），4℃條件下，13000rmp離心15min，取0.36ml上層透明濾液于2ml進(jìn)樣瓶中，從每個(gè)進(jìn)樣瓶中移取30ul上清液，渦旋10s，在真空濃縮器中干燥提取物，加入30ul甲氧胺鹽試劑，混勻，于80℃烘箱中孵30min，每個(gè)樣品中迅速加入40ulbstfa，70℃條件下孵育1.5h。采用氣相色譜gc-tof-ms（gc色譜儀agilent7890b,agilent,usa，質(zhì)譜儀lecochromatofpegasusht,leco,usa）檢測(cè)。上機(jī)檢測(cè)分析條件，進(jìn)樣量：1μl；載氣：氦氣；前進(jìn)樣口吹掃流速：3mlmin?1；柱流速：1mlmin?1；柱溫：50℃保持1min，以10℃每分鐘的速率上升至310℃，保持8分鐘；前進(jìn)樣口溫度：280℃；傳輸線溫度：270℃；離子源溫度：220℃；電離電壓：-70ev；掃描方式：50-500m/z；掃描速率：20spectra/sec；溶劑延遲：455s。

對(duì)照組對(duì)對(duì)苯二酚增效處理組的差異代謝物篩選火山圖參見圖1。火山圖橫坐標(biāo)代表該組對(duì)比各物質(zhì)的倍數(shù)變化（取以2為底的對(duì)數(shù)），縱坐標(biāo)表示學(xué)生t檢驗(yàn)的p-value（取以10為底的對(duì)數(shù)），每個(gè)點(diǎn)代表一個(gè)代謝物，散點(diǎn)越大代表opls-da模型的vip值越大。散點(diǎn)不同灰度代表最終的篩選結(jié)果，顯著上調(diào)的代謝產(chǎn)物以深灰色表示，顯著下調(diào)的代謝產(chǎn)物以黑色表示，沒有顯著差異的代謝物以淺灰色表示。結(jié)果顯示，對(duì)苯二酚經(jīng)茶多酚增效后，對(duì)臺(tái)灣乳白蟻代謝產(chǎn)物產(chǎn)生了顯著性的影響。

以上所述實(shí)施例僅表達(dá)了本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，其描述較為具體和詳細(xì)，但并不能因此而理解為對(duì)發(fā)明專利范圍的限制。應(yīng)當(dāng)指出的是，對(duì)于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干變形和改進(jìn)，這些都屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。因此，本發(fā)明專利的保護(hù)范圍應(yīng)以所附權(quán)利要為準(zhǔn)。