具有低lps的乳品類組合物的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種生產(chǎn)具有低LPS的乳品類食物組合物的方法，該方法包括以下步驟：（a）提供貯存時(shí)間小于264小時(shí)的奶；及（b1）用孔徑為0.01μm～2μm的微過濾器處理所述奶以至少得到酪蛋白富集的部分和乳清蛋白富集的部分，或（b2）處理奶以去除至少98wt%的革蘭氏陰性菌并將其中去除至少98wt%的革蘭氏陰性菌的奶加熱至60～90℃。本發(fā)明的方法非常適于提供乳品類食物組合物，其中，存在小于5100EU?LPS/升的即用食物組合物，或其中，存在小于39EU?LPS/克的干燥的產(chǎn)品。
【專利說明】具有低LPS的乳品類組合物
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種提供奶蛋白的方法。具體地，本發(fā)明涉及一種制造具有低脂多糖(LPS)濃度的奶蛋白組合物的方法。更具體地，本發(fā)明涉及一種制造用于嬰兒配方奶粉和幼兒配方奶粉的具有低LPS濃度的奶蛋白組合物的方法?！颈尘凹夹g(shù)】
[0002]腸道中的上皮完整性對(duì)(例如，在哺乳動(dòng)物中的)最佳上皮屏障是至關(guān)重要的。與革蘭氏陽性菌相比，革蘭氏陰性菌的外膜含有為內(nèi)毒素的脂多糖(LPS)。單個(gè)細(xì)菌細(xì)胞含有大約3.5X106的LPS分子。LPS是復(fù)雜的帶負(fù)電荷的分子，由被稱為O-特異性鏈的遠(yuǎn)端多糖鏈、核心多糖和被稱為脂質(zhì)A的脂質(zhì)部分組成。LPS在動(dòng)物和人類中起到產(chǎn)生誘導(dǎo)強(qiáng)炎癥反應(yīng)的內(nèi)毒素的作用，并且涉及幾種疾病(例如敗血癥)的發(fā)展。LPS的毒性部分是由兩個(gè)磷酸葡糖胺殘基和至少6個(gè)脂肪酸組成的脂質(zhì)A部分。這兩個(gè)磷酸基團(tuán)對(duì)LPS的生物活性是必不可少的。當(dāng)并入革蘭氏陰性菌的細(xì)胞膜的外小葉(outer leaflet)時(shí)，LPS分子是相對(duì)無毒的，因?yàn)橹|(zhì)A部分或多或少地被收藏起來(stown away)。然而，當(dāng)分離的或垂死的細(xì)菌自發(fā)地將LPS釋放到哺乳動(dòng)物的循環(huán)中時(shí)，釋放的LPS可與幾種蛋白(諸如白蛋白、乳鐵蛋白、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)和細(xì)菌通透性增加蛋白(BPI))相互作用。LPS結(jié)合蛋白(LBP)是在這方面中最重要的蛋白。LBP-LPS復(fù)合物結(jié)合至從骨髓系的細(xì)胞膜(巨噬細(xì)胞、單核細(xì)胞和多形核白細(xì)胞)釋放之后的⑶14 (“分化14的簇”)。⑶14需要輔助受體復(fù)合物、Toll樣受體4/骨髓分化-2復(fù)合物(TLR4/MD-2)以啟動(dòng)細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)傳導(dǎo)級(jí)聯(lián)。此級(jí)聯(lián)促進(jìn)NF-K B的核易位和諸如腫瘤壞死因子a (TNF α )的促炎性細(xì)胞因子的轉(zhuǎn)錄。TNFa和其它促炎性細(xì)胞因子誘導(dǎo)血管通透性、增強(qiáng)的血液流量和嗜中性粒細(xì)胞向LPS源的募集以及全身性反應(yīng)(諸如發(fā)熱)。LPS在高濃度時(shí)通過過度刺激TLR4信號(hào)傳導(dǎo)而變得有毒性，產(chǎn)生導(dǎo)致不良反應(yīng)(諸如感染性休克)的過度炎癥反應(yīng)。對(duì)LPS或其它細(xì)菌抗原(例如，鞭毛蛋白或T細(xì)胞表位)的異常免疫反應(yīng)已被證實(shí)與炎癥性腸病(IBD)和壞死性小腸結(jié)腸炎(NEC)有關(guān)。NEC主要影響早產(chǎn)嬰兒，并假定是由對(duì)在出生之后移生在腸道中的共生生物的不成熟免疫反應(yīng)所引起的。早產(chǎn)嬰兒可能具有受損的LPS感知，因?yàn)樗麄內(nèi)笔LR4誘導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中的必要分子，并因此當(dāng)微生物移生在不成熟腸中時(shí)新生兒易患NEC,因?yàn)榧棺祫?dòng)物所遇到的LPS最豐富的來源之一是他們的常駐腸道微生物叢。這些腸道微生物叢在成年宿主內(nèi)不引起病理性炎癥。還有跡象表明，LPS在全身性炎癥的誘導(dǎo)中起著重要作用。由于新生嬰兒在頭幾個(gè)月或他們的一生中他們的腸道上皮具有較高的滲透性，所以致病物質(zhì)有較高的機(jī)會(huì)跨越上皮屏障并在兒童體內(nèi)誘導(dǎo)炎癥。
[0003]原料奶可含有顯著數(shù)量的革蘭氏陰性菌。出于健康安全的原因，通過巴氏殺菌和消毒技術(shù)來殺滅食品中包括革蘭氏陰性菌的細(xì)菌。不幸地，殺滅革蘭氏陰性菌不會(huì)導(dǎo)致革蘭氏陰性菌的膜的完全降解，并且LPS分子很大程度上保持完整并因此被釋放到組合物中。此外，在食物組合物的加工過程中，由于食品加工技術(shù)引起的剪切力而使LPS從細(xì)菌壁釋放出來。LPS在100°C下是熱穩(wěn)定的并且在食品加工過程中保存下來。
[0004]嬰兒食物和其它乳品類產(chǎn)品中的蛋白常常來自源于奶酪制作工藝中的乳漿(whey)部分。乳漿部分含有許多營養(yǎng)乳漿蛋白，諸如α-乳白蛋白和β_乳球蛋白。在制作奶酪的加工過程中，常常首先對(duì)奶進(jìn)行熱處理以殺滅包括革蘭氏陰性菌的細(xì)菌并使不需要的酶失活。如上所述，這些處理會(huì)使LPS釋放到奶中。因此在奶酪制作工藝中，LPS可最終存在于乳漿部分中。此外，在制作嬰兒配方奶粉或其它乳品類食物中的乳漿部分的下一個(gè)加工步驟中，可再次發(fā)生革蘭氏陰性菌的污染，因此可以進(jìn)行額外的熱處理。雖然可以通過這種方式使細(xì)菌數(shù)受到控制，但是這可以產(chǎn)生最終存在于配方奶粉中的增加量的LPStJn上所述，高LPS負(fù)載不是在嬰兒配方奶粉中所希望的。
[0005]另一種提供可用于生產(chǎn)嬰兒配方奶粉或其它乳品類食物的蛋白部分的方法是使用微過濾的方法。使用微過濾提供來自奶的蛋白部分的背景參考文獻(xiàn)是US5169666。該文中，牛奶經(jīng)過低溫超過濾或微過濾。
[0006]另一個(gè)背景參照文獻(xiàn)是EP1133238。該文中，通過在升高的溫度(通常為50°C )下使還沒有經(jīng)熱處理或至多經(jīng)過中度熱處理的奶經(jīng)過微過濾來制造來源于乳漿的蛋白組合物。
[0007]另外的背景參考文獻(xiàn)是W02008/127104。這涉及適合作為例如嬰兒食物的成分的乳清蛋白(serum protein)產(chǎn)品，該乳清蛋白產(chǎn)品是通過利用孔徑為0.3?0.5 μ m的膜在IO0C?20°C的溫度下對(duì)牛奶進(jìn)行微過濾而得到的。
[0008]包括上述方法的現(xiàn)有技術(shù)的方法可提供適合于生產(chǎn)嬰兒配方奶粉和其它乳品類產(chǎn)品的蛋白部分，但是它們不涉及使LPS含量減小至最小量，因此蛋白部分中的LPS含量且因此最終奶制品中的LPS含量可能會(huì)相當(dāng)高。例如，LPS不經(jīng)微過濾方法去除并且可能最終存在于滲透部分中。
[0009]EP1359924B1公開了乳酸菌和雙歧桿菌(特別是那些具有疏水性表面的乳酸菌和雙歧桿菌)具有結(jié)合內(nèi)毒素的能力。疏水性的乳酸菌或雙歧桿菌應(yīng)具有至少80%H的疏水性百分比(％H)。當(dāng)這些細(xì)菌生長時(shí)，它們可以結(jié)合高達(dá)95%的存在的LPS分子。然而，LPS分子仍然存在于組合物中，并從而通過例如在組合物加工過程中的熱處理或剪切力而從疏水性細(xì)菌上分離下來。此外，如果不想將疏水性細(xì)菌添加到組合物中，目前還沒有一種令人滿意的產(chǎn)生低水平LPS的組合物的方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0010]因此，本發(fā)明希望得到一種微生物安全的、而且還具有低LPS負(fù)載的組合物。本發(fā)明提供了解決方案。
[0011]在第一方面中，本發(fā)明涉及一種生產(chǎn)具有低LPS的乳品類食物組合物的方法，該方法包括以下步驟:
[0012](a)提供貯存時(shí)間小于264小時(shí)的奶；
[0013](b)使用孔徑為0.01 μ m?2 μ m的微過濾器處理所述奶以至少得到酪蛋白富集的部分和乳清蛋白富集的部分。
[0014]在第二方面中，本發(fā)明涉及一種生產(chǎn)具有低LPS的乳品類食物組合物的方法，該方法包括以下步驟:
[0015](a)提供貯存時(shí)間小于264小時(shí)的奶；
[0016](b)處理所述奶以去除至少98wt%的革蘭氏陰性菌；
[0017](c)將其中去除至少98wt%的革蘭氏陰性菌的所述奶加熱至60°C?90°C。[0018]在另一個(gè)方面中，本發(fā)明涉及一種生產(chǎn)具有低LPS的乳品類食物組合物的方法，該方法包括以下步驟:
[0019](a)提供貯存時(shí)間小于264小時(shí)的奶；
[0020](b)處理所述奶以去除至少98wt%的革蘭氏陰性菌；
[0021](c)將其中去除至少98wt%的革蘭氏陰性菌的所述奶加熱至60°C?90°C ；
[0022](d)使用孔徑為0.01 μ m?2 μ m的微過濾器處理所述奶以至少得到酪蛋白富集的部分和乳清蛋白富集的部分。
[0023]在另外一個(gè)方面中，本發(fā)明涉及一種乳品類食物組合物，該乳品類食物組合物包括小于4000E3EU LPS/升的即用組合物，或包括小于30E3EU LPS/克的干燥的產(chǎn)品。
【具體實(shí)施方式】
[0024]本發(fā)明涉及一種具有低LPS負(fù)載的乳品類組合物。
[0025]在原料奶中，存在革蘭氏陰性菌以及革蘭氏陽性菌和可能會(huì)破壞奶的酶。由于這些原因，通常對(duì)奶進(jìn)行巴氏殺菌或消毒以殺滅細(xì)菌并使酶失活。在熱處理中及在奶處理的其它加工(諸如乳油化(creaming)和同質(zhì)化)過程中，可使存在的細(xì)菌破裂。當(dāng)革蘭氏陰性菌破裂時(shí)，LPS被釋放到奶中。不幸的是，LPS是熱穩(wěn)定的，從而在這些處理后，奶負(fù)荷有可能仍會(huì)造成傷害且尤其是在諸如嬰兒的弱勢(shì)群體中造成傷害的LPS。奶中的LPS的量依賴于奶中的革蘭氏陰性菌的量。奶中的革蘭氏陰性菌的量越多，則釋放到奶中的LPS也將越多。當(dāng)未對(duì)奶進(jìn)行巴氏殺菌或消毒時(shí)，奶時(shí)間越久，存在于奶中的革蘭氏陰性菌也越多，因?yàn)檫@些細(xì)菌在低溫下貯存期間會(huì)生長并繁殖。
[0026]在農(nóng)場(chǎng)中，來自奶牛的奶首先被貯存在冷罐中以使奶保持新鮮直到奶被收集并運(yùn)輸?shù)侥碳庸すS。在正常情況下，一般每2?3天收集一次奶。在2?3天內(nèi)所有奶牛的奶被收集到冷罐中。因此，運(yùn)輸?shù)侥虖S的奶是不同時(shí)期(age)的奶的混合物。這意味著，在奶牛的擠奶和奶到達(dá)工廠之間的時(shí)間對(duì)于首先收集在罐中的奶可能是約3?4天，而對(duì)于最后收集的奶可能僅是0.5?I天。
[0027]本發(fā)明中，奶的貯存時(shí)間被定義為最久的奶(oldest milk)(即，在農(nóng)場(chǎng)被首先收集在貯存罐中的奶)的貯存時(shí)間。貯存時(shí)間是奶牛擠奶的時(shí)間和奶或由此來源的產(chǎn)品被加工成干燥的產(chǎn)品或最終濃縮產(chǎn)品的時(shí)間之間的時(shí)間。貯存時(shí)間從而包括:在農(nóng)場(chǎng)中的罐中的時(shí)間、運(yùn)輸時(shí)間、在工廠中的貯存時(shí)間和在工廠中的加工時(shí)間。通常情況下，貯存時(shí)間可能長達(dá)約2周。對(duì)于許多乳品類產(chǎn)品(諸如嬰兒配方奶粉)，蛋白部分的一部分常常是從奶酪制造工藝中的乳清中得到的。對(duì)于這種具有乳清部分的產(chǎn)品，奶牛擠奶和最終產(chǎn)品(諸如干燥的嬰兒配方奶粉)之間的總時(shí)間可能長達(dá)約3周。
[0028]在本發(fā)明中，最長貯存時(shí)間為264小時(shí)或11天。這是最久的奶的最長貯存時(shí)間。正如前面所說的，到達(dá)奶廠的奶是不同時(shí)期的奶的混合物，最久的奶可能已在農(nóng)場(chǎng)的罐中貯存了長達(dá)3?4天，而最新的奶可能僅貯存了半天之久。因此，在奶牛的擠奶和使奶并入干燥的產(chǎn)品或成品濃縮物中之間的最長時(shí)間是264小時(shí)或11天。貯存時(shí)間優(yōu)選為250?40小時(shí)，更優(yōu)選為220?60小時(shí)，甚至更優(yōu)選為200?80小時(shí)，更優(yōu)選為180?100小時(shí)，更優(yōu)選為160?110小時(shí)，甚至更優(yōu)選為150?130小時(shí)，且最優(yōu)選為145?135小時(shí)。適合的貯存時(shí)間也可以為10.5?1.5天，更適合地為10?2天，更適合地為9.5?2.5天，更適合地為9?3天,甚至更適合地為8.5?3.5天,更適合地為8?4天,甚至更適合地為7.5?4.5天,更適合地為7?5天,甚至更適合地為6.5?5.5天,且更適合地為6?5天。
[0029]奶牛擠奶和到達(dá)奶廠花費(fèi)的時(shí)間(到達(dá)時(shí)間)也非常重要，并優(yōu)選地應(yīng)盡可能地短。還應(yīng)理解的是，到達(dá)時(shí)間是存在于擠奶的混合物中的最久的奶的時(shí)間。在優(yōu)選實(shí)施方式中，到達(dá)時(shí)間小于3天或小于70小時(shí)。到達(dá)時(shí)間優(yōu)選小于2.5天，更優(yōu)選小于2天，甚至更優(yōu)選小于1.5天，更優(yōu)選小于I天，且最優(yōu)選小于0.5天。適合地，到達(dá)時(shí)間小于60小時(shí)，更優(yōu)選小于50小時(shí),甚至更優(yōu)選小于35小時(shí),更優(yōu)選小于25小時(shí),且最優(yōu)選小于15小時(shí)。因?yàn)槭垢锾m氏陰性菌的奶的污染保持為最小值是很重要的，所以奶的擠奶、貯存和轉(zhuǎn)移以及在奶廠中的處理是以衛(wèi)生或無菌的方式來完成的。
[0030]原則上，提供給本發(fā)明的加工的奶可以來自任何產(chǎn)奶的動(dòng)物，主要是牛，并特別是奶牛(成年母牛)。但除了牛，下面的動(dòng)物也為奶制品提供人類使用的奶:駱駝、驢、山羊、馬、馴鹿、綿羊、水牛、牦牛和駝鹿。最優(yōu)選地，在本發(fā)明中使用的奶是奶牛的奶。
[0031]一般利用孔徑在0.01?2微米、優(yōu)選0.1?1.2微米、更優(yōu)選0.2?0.5微米且最優(yōu)選0.15?0.45微米的范圍內(nèi)的微過濾器來進(jìn)行微過濾。適合的微過濾器是本領(lǐng)域中已知的，并且包括，例如，螺旋纏繞聚合物或陶瓷類系統(tǒng)。
[0032]對(duì)于微過濾，可以使用用于橫流微過濾器的任何常規(guī)裝置。從而，例如，可以使用螺旋纏繞的微過濾膜，例如，如EP-A-1673975中所描述的。優(yōu)選地，使用具有多個(gè)螺旋纏繞單元(module)的加工系統(tǒng)。已發(fā)現(xiàn)有益的是:在橫流微過濾加工中，采取措施以降低跨越膜的跨膜壓力，以這樣的方式使得跨膜壓力最大為2.5巴。由于這個(gè)原因，優(yōu)選地，在根據(jù)本發(fā)明的方法中的微過濾過程中使跨膜壓力保持相對(duì)低(也就是說，最大2.5巴)。例如，在2巴的最大跨膜壓力下已得到關(guān)于滲透物的蛋白組合物的良好結(jié)果。平均跨膜壓力可能會(huì)變化，并且例如為0.1?1.8巴。在【具體實(shí)施方式】中，最大跨膜壓力為0.2?1.5巴，更優(yōu)選為0.3?1.2巴，更優(yōu)選為0.5?I巴，且最優(yōu)選為0.6?0.8巴。
[0033]代替減小跨膜壓力的不同解決方案可以是使用在膜層的孔隙度或厚度中具有梯度的微過濾膜。
[0034]在根據(jù)本發(fā)明的方法中，可以使用孔徑為0.1?1.2 μ m的標(biāo)準(zhǔn)微過濾膜。如一般已知的，孔徑影響滲透物和滲余物的最終蛋白組成。根據(jù)本發(fā)明，孔徑證明具有一定影響力，特別是對(duì)乳清蛋白:酪蛋白的比例和β酪蛋白在酪蛋白中的所占的比例具有一定影響力。在實(shí)施方式中，使用孔徑為0.2?0.5 μ m，優(yōu)選為0.15?0.45 μ m的膜(例如螺旋纏繞的膜)。
[0035]從包括非變性奶蛋白并具有足夠的微生物質(zhì)量(microbiological quality)的奶開始執(zhí)行微過濾步驟。這可指原料(未處理的)奶，或指經(jīng)歷溫和的熱處理但尚未經(jīng)歷高于90°C的溫度的奶。奶可以是:全脂奶或已或多或少地經(jīng)脫脂的奶，原料奶，已離心除菌(bactofuge)的奶或已細(xì)菌過濾(bactofilter)的奶,或在溫和條件下經(jīng)巴氏殺菌的奶，或在低溫下從粉末狀的奶粉復(fù)原的奶。優(yōu)選地，使用非熱處理的脫脂的奶。如果已經(jīng)過熱處理，那么熱處理是在低于革蘭氏陰性菌破裂的溫度，優(yōu)選低于80°C的溫度下完成。適合地，奶和從奶得到的產(chǎn)品在加工過程未經(jīng)過在高于75°C，更優(yōu)選未經(jīng)過高于70°C，甚至更優(yōu)選未經(jīng)過高于65°C，也更優(yōu)選未經(jīng)過高于60°C，更優(yōu)選未經(jīng)過高于55°C，最優(yōu)選未經(jīng)過高于50°C的溫度的熱處理。
[0036]微過濾步驟可以在O?65°C的溫度下進(jìn)行。優(yōu)選地，微過濾在25?65°C或O?25°C的溫度下進(jìn)行。更優(yōu)選地，微過濾步驟在O?25°C的溫度下進(jìn)行，更優(yōu)選在5?20°C的溫度下進(jìn)行，最優(yōu)選在10?15°C的溫度下進(jìn)行。在另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，微過濾步驟在25?65°C的溫度下進(jìn)行，更優(yōu)選在35?60°C的溫度下進(jìn)行，且最優(yōu)選在45?55°C的溫度下進(jìn)行。
[0037]微過濾將奶分離成滲透物和滲余物。滲余物是酪蛋白富集的部分，而滲透物是乳清蛋白富集的部分。在酪蛋白富集的部分中，酪蛋白占總蛋白的量多于在尚未經(jīng)過微過濾的奶中酪蛋白占總蛋白的量。優(yōu)選地，酪蛋白富集的部分包括的酪蛋白占總蛋白的量比未微過濾的奶多l(xiāng)wt%,更優(yōu)選多5wt%,最優(yōu)選多10wt%。在乳清蛋白富集的部分中乳清蛋白占總蛋白的量多于在尚未經(jīng)過微過濾的奶中乳清蛋白總占蛋白的量。優(yōu)選地，乳清蛋白富集的部分包括的乳清蛋白占總蛋白的量比未微過濾的奶多20wt%,更優(yōu)選多40wt%,最優(yōu)選多60wt%o
[0038]在優(yōu)選實(shí)施方式中，在60?85°C的溫度下完成加熱步驟，更優(yōu)選在65?80°C的溫度下完成加熱步驟，且最優(yōu)選在70?75°C的溫度下完成加熱步驟。適合的加熱方案為在60?85°C下進(jìn)行I?2分鐘或在70?72 °C的溫度下進(jìn)行5?30秒。
[0039]在優(yōu)選實(shí)施方式中，在60?65°C的溫度下進(jìn)行I?10分鐘或在65?85°C的溫度下進(jìn)行5?180秒，優(yōu)選在65?76°C的溫度下進(jìn)行10?120秒，最優(yōu)選在66?71 °C的溫度下進(jìn)行5?180秒來完成加熱步驟。
[0040]在另一個(gè)方面中，本發(fā)明涉及一種生產(chǎn)具有低LPS的乳品類食物組合物的方法，該方法包括以下步驟:
[0041](a)提供貯存時(shí)間小于264小時(shí)的奶；
[0042](b)處理所述奶以去除至少98wt%的革蘭氏陰性菌；
[0043](c)將其中去除至少98wt%的革蘭氏陰性菌的所述奶加熱至60°C?90°C。
[0044]為了微生物安全，處理奶以去除至少98wt%的革蘭氏陰性菌。優(yōu)選地，以完整細(xì)胞的方式去除革蘭氏陰性菌。在優(yōu)選實(shí)施方式中，去除革蘭氏陰性菌以使得細(xì)菌細(xì)胞保持完整，并優(yōu)選使得盡可能少的LPS且最優(yōu)選沒有額外的LPS被釋放到經(jīng)處理的奶中。已知的細(xì)菌去除技術(shù)如孔徑為0.5?2.5微米的細(xì)菌過濾、離心或使用抗體去除革蘭氏陰性菌。但是應(yīng)當(dāng)理解的是，可能有去除革蘭氏陰性菌的其它方法。只要它去除至少98%的革蘭氏陰性菌并且對(duì)食品是安全的，則任何方法都是適合的。去除意味著從產(chǎn)品中清除革蘭氏陰性菌，而與殺滅(例如:巴氏殺菌和消毒方法)革蘭氏陰性菌但該菌仍然存在于產(chǎn)品中形成對(duì)比。
[0045]使用孔徑為0.5?2.5微米的過濾器進(jìn)行的細(xì)菌過濾去除了大于約0.5?2.5微米的革蘭氏陰性菌和孢子。適合地，細(xì)菌過濾器的孔徑為0.7?2微米，且更優(yōu)選為I?
1.5微米。這種細(xì)菌過濾的適合的例子是除菌捕捉(bactocatch)。在優(yōu)選實(shí)施方式中，在O?65°C的溫度下，優(yōu)選在35?60°C的溫度下，且最優(yōu)選在45?55°C的溫度下執(zhí)行去除革蘭氏陰性菌和孢子的過濾。
[0046]革蘭氏陰性菌也可通過離心去除。以高速(例如，5000rpm?8000rpm)對(duì)奶進(jìn)行離心以去除革蘭氏陰性菌。適合的離心速率為5500rpm?7500rpm,更適合地為6000rpm?7000rpm。適合地,通過離心除菌機(jī)(bactofuge)(前Tetrapack)去除革蘭氏陰性菌。
[0047]另一種去除革蘭氏陰性菌的適合的方法是使用抗體?？梢栽O(shè)計(jì)抗體以識(shí)別特定的革蘭氏陰性菌或范圍廣泛的革蘭氏陰性菌。優(yōu)選地，抗體被固定到柱子或珠子上以使得可易于去除該抗體。
[0048]在優(yōu)選實(shí)施方式中，至少98.5%的革蘭氏陰性菌被去除，更優(yōu)選至少99%的革蘭氏陰性菌被去除，并且更優(yōu)選至少99.5%的革蘭氏陰性菌被去除。最優(yōu)選至少99.9%或甚至100%的革蘭氏陰性菌被去除。
[0049]在去除至少98%的革蘭氏陰性菌之后，進(jìn)行加熱步驟以使不需要的酶和通過細(xì)菌去除步驟尚未被去除的其它病原體失活。加熱對(duì)微生物安全具有另一影響。因?yàn)榇蠖鄶?shù)革蘭氏陰性菌被去除，所以奶也可以經(jīng)過高達(dá)90°C的熱處理。留下的革蘭氏陰性菌的破裂可能將它們的LPS釋放到奶中，但由于所留下革蘭氏陰性菌的量非常低，即使發(fā)生了 LPS釋放，奶中LPS的量也非常低。優(yōu)選地，在生產(chǎn)食品的加工過程中，奶和從奶得到的產(chǎn)品未經(jīng)過高于85°C，更優(yōu)選未經(jīng)過高于80°C，且最優(yōu)選未經(jīng)過高于70°C的熱處理。在優(yōu)選實(shí)施方式中，在60?65°C的溫度下進(jìn)行I?10分鐘或在65?85°C的溫度下進(jìn)行5?180秒，優(yōu)選在65?76°C的溫度下進(jìn)行10?120秒，最優(yōu)選在66?71V的溫度下進(jìn)行5?180秒來完成加熱步驟。
[0050]適合的溫和的巴氏殺菌技術(shù)在60?65°C的溫度下進(jìn)行I?2分鐘,或70?74°C、優(yōu)選在70?72 °C的溫度下進(jìn)行5?30秒。
[0051]本發(fā)明的優(yōu)選方面提供了一種方法，該方法包括以下步驟:
[0052](a)提供貯存時(shí)間小于264小時(shí)的奶；
[0053](b)處理所述奶以去除至少98wt%的革蘭氏陰性菌；
[0054](c)將其中去除至少98wt%的革蘭氏陰性菌的所述奶加熱至60°C?90°C ；
[0055](d)使用孔徑為0.01-2 μ m的微過濾器處理所述奶以至少得到酪蛋白富集的部分和乳清蛋白富集的部分。
[0056]細(xì)菌去除步驟和微過濾步驟可以以任何順序來進(jìn)行，然而優(yōu)選地是在細(xì)菌去除步驟之后進(jìn)行加熱步驟。在優(yōu)選實(shí)施方式中，細(xì)菌去除步驟在微過濾步驟之前進(jìn)行，且最優(yōu)選加熱步驟在微過濾步驟之前進(jìn)行。
[0057]適合地，對(duì)已經(jīng)過轉(zhuǎn)溶處理的奶進(jìn)行微過濾和/或革蘭氏陰性菌的去除步驟。可以使用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何適合的方法進(jìn)行轉(zhuǎn)溶。適合的方法是離心，其中，較重的蛋白和碳水化合物與較輕的脂肪顆粒分離。優(yōu)選地，奶被轉(zhuǎn)溶至脂肪含量為約70wt%的原始脂肪含量，更優(yōu)選為約50wt%的原始脂肪含量，更優(yōu)選為約25wt%的原始脂肪含量，且最優(yōu)選為約10wt%的原始脂肪含量。
[0058]為了制作食物組合物，使用酪蛋白富集的部分和/或乳清蛋白富集的部分。在優(yōu)選實(shí)施方式中，將乳清蛋白富集的部分與酪蛋白富集的部分結(jié)合，或?qū)⑷榍宓鞍赘患牟糠峙c另一種貯存時(shí)間小于264小時(shí)的奶制品結(jié)合。適合地，貯存時(shí)間小于264小時(shí)的奶制品已經(jīng)過其中至少98wt%的革蘭氏陰性菌被去除的處理，并且已經(jīng)過高于60?90°C的溫度的熱處理。優(yōu)選地，將乳清蛋白富集的部分和/或酪蛋白富集的部分或奶結(jié)合，以得到在乳品類組合物中酪蛋白:乳清蛋白的比例為0.1?2.5，優(yōu)選為0.2?2，更優(yōu)選為0.3?1，最優(yōu)選為0.4?0.7。[0059]在另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，將脂肪添加到組合物中。脂肪可以是任何脂肪，但優(yōu)選植物性脂肪。適合的脂肪包括:向日葵油、豆油、紅花油、菜籽油、棕櫚油、棕櫚仁油、米糠油、橄欖油、花生油和椰子油。乳脂、黃油及其它動(dòng)物性脂肪(諸如豬油)也是適合的。魚油和藻油也是非常適合的。脂肪可以是不同脂肪的組合。適合地，脂肪是植物油與乳脂、奶油、黃油奶(butter milk)或黃油的混合物。優(yōu)選地,至少25wt%的脂肪包括乳脂或黃油；更優(yōu)選地，至少40wt%的脂肪包括乳脂或黃油。
[0060]另外，其它成分(諸如維生素、礦物質(zhì)、不飽和脂肪酸、益生元、益生菌、蛋白、抗體、核苷酸、抗氧化劑、包括磷脂的極性脂質(zhì))可以被添加到食物組合物中。例如，常規(guī)添加到食物組合物中的是:碳水化合物，諸如乳糖和低聚糖；脂質(zhì)和諸如維生素、氨基酸、礦物質(zhì)、牛磺酸、肉堿、核苷酸和多胺類等的成分；和抗氧化劑，諸如BHT、抗壞血酸棕櫚酸酯、維生素Ε、α_胡蘿卜素和β-胡蘿卜素、葉黃素、玉米黃質(zhì)、番茄紅素和卵磷脂。此外，食物組合物可以富含多不飽和脂肪酸，諸如Y -亞麻酸、二高-Y -亞麻酸、花生四烯酸、十八碳四烯酸、二十碳五烯酸、廿二碳六烯酸和二十二碳五烯酸?？紤]到腸道菌群的適合發(fā)展，可以添加益生菌(諸如乳酸桿菌和/或雙歧桿菌)以及益生元。益生菌的優(yōu)選組合是，例如，乳酸雙歧桿菌(Bif idobacterium Iactis)和 / 或動(dòng)物雙歧桿菌(Bif idobacterium animal is)與鼠李糖乳桿菌(L.rhamnosis)、干酪乳桿菌(L.casei)、副干酪乳桿菌(L.paracasei)、唾液乳桿菌(L.salivarius)或羅伊氏乳桿菌(L.reuteri)。益生元的實(shí)例包括:巖藻糖寡糖(fuco-oligosaccharide)、果糖寡糖和/或半乳糖寡糖,短鏈和長鏈的唾液酸基(巖藻糖)寡糖((fuco) sialyloligosaccharides)、支鏈的(低聚)糖、唾液酸富集的奶制品或它們的衍生物；可能會(huì)或可能不會(huì)被水解的菊粉、角豆粉、樹膠，纖維等。
[0061]應(yīng)該理解的是，可能必需要濃縮食品。如果采用濃縮方法時(shí)，期望使用溫和的濃縮方法，使得濃縮的產(chǎn)品中小于25wt%的蛋白是變性的。適合的濃縮方法是:正滲透法、反滲透法、膜蒸懼、冷凍濃縮、薄膜旋轉(zhuǎn)錐形蒸發(fā)器(thin-film spinning cone evaporator)和刮膜式蒸發(fā)器?？梢酝ㄟ^降低停留時(shí)間的分布和/或改進(jìn)的熱傳遞以使變性最小化來優(yōu)化濃縮技術(shù)。
[0062]干燥的產(chǎn)品由于降低水平的水或甚至缺乏水，而具有較長保存期限的優(yōu)勢(shì)。此外，干燥的產(chǎn)品較輕并具有較小的體積，使得運(yùn)輸更容易。然而，常規(guī)的干燥技術(shù)會(huì)使大量存在的蛋白變性。因此，干燥優(yōu)選是溫和的干燥步驟，使得在已干燥的產(chǎn)品中小于25%的蛋白變性。適合的干燥步驟是:噴霧干燥、在表面活性組分的存在下的干燥、氣體注入、具有超臨界CO2的干燥、冷凍干燥。在本發(fā)明中，干燥的產(chǎn)品是含有至少70wt%的干物質(zhì)，優(yōu)選至少75wt%的干物質(zhì),更優(yōu)選至少80wt%的干物質(zhì),更優(yōu)選至少85wt%的干物質(zhì),更優(yōu)選至少90wt%的干物質(zhì),更優(yōu)選至少95%的干物質(zhì)且最優(yōu)選至少98wt%的干物質(zhì)的產(chǎn)品。
[0063]應(yīng)理解的是，本發(fā)明的食品可以是任何乳品類且包含蛋白的食品，諸如酸乳酪、甜點(diǎn)、乳飲料、奶油、鮮奶油、酸奶、冰淇林、乳酪、乳醬。然而，由于本發(fā)明的方法獲得低LPS負(fù)載，因此本發(fā)明的方法特別適合于用于嬰兒和幼兒的食品、醫(yī)藥食物、用于老年人的食物和保健食物。
[0064]本發(fā)明還涉及一種能夠根據(jù)本發(fā)明的方法得到的乳品類食物組合物。
[0065]本發(fā)明的方法提供了含有非常少的LPS的食物組合物。如前所述，從EP1359924B1可知，乳酸菌和雙歧桿菌(特別是那些具有疏水表面的乳酸菌和雙歧桿菌)具有結(jié)合內(nèi)毒素的能力。本發(fā)明提供了降低LPS的量而不添加乳酸菌和雙歧桿菌的方法。因此，優(yōu)選實(shí)施方式包括食物組合物，該食物組合物含有小于4000E3EU LPS/升的即用食物組合物，更優(yōu)選含有小于3500E3EU LPS/升的即用組合物，更優(yōu)選含有小于3000E3EU LPS/升的即用組合物，更優(yōu)選含有小于2000E3EU LPS/升的即用組合物，更優(yōu)選含有小于1300E3EU LPS/升的即用組合物，甚至更優(yōu)選含有700E3EU LPS/升的即用組合物，且最優(yōu)選含有200E3EU LPS/升的即用組合物。對(duì)于干燥的產(chǎn)品，食物組合物適合地包括小于30E3EU LPS/克的干燥的產(chǎn)品，更適合地包括小于15E3EU LPS/克的干燥的產(chǎn)品，甚至更適合地包括小于10E3EU LPS/克的干燥的產(chǎn)品，更適合地包括小于7E3EU LPS/克的干燥的產(chǎn)品，甚至更適合地包括小于5E3EU LPS/克的干燥的產(chǎn)品，且最優(yōu)選地包括小于1.5E3EU LPS/克的干燥的產(chǎn)品。優(yōu)選地，食物組合物不包括具有至少80%H的疏水性百分比的乳酸菌和雙歧桿菌。
[0066]然而，本發(fā)明的食物組合物可包括乳酸菌和雙歧桿菌，且這將更進(jìn)一步降低組合物中LPS的量。適合地，本發(fā)明的食物組合物包括小于5100EU LPS/升的即用組合物，更優(yōu)選包括小于5000EU LPS/升的即用組合物，優(yōu)選包括小于4500EU LPS/升的即用組合物，更優(yōu)選包括小于4000EU LPS/升的即用組合物，更優(yōu)選包括小于3000EU LPS/升的即用組合物，甚至更優(yōu)選包括小于2500EU LPS/升的即用組合物，更優(yōu)選包括小于2000EU LPS/升的即用組合物，更優(yōu)選包括小于1500EU LPS/升的即用組合物，更優(yōu)選包括小于1000EU LPS/升的即用組合物，甚至更優(yōu)選包括小于750EU LPS/升的即用組合物，更優(yōu)選包括小于500EULPS/升的即用組合物，甚至更優(yōu)選包括小于250EU LPS/升的即用組合物，更優(yōu)選包括小于150EU LPS/升的即用組合物，且最優(yōu)選包括小于100EU LPS/升的即用組合物。對(duì)于干燥的產(chǎn)品，食物組合物適合地包括至少39EU LPS/克的干燥的產(chǎn)品，更適合地包括小于35EULPS/克的干燥的產(chǎn)品，更適合地包括小于30EU LPS/克的干燥的產(chǎn)品，甚至更適合地包括小于25EU LPS/克的干燥的產(chǎn)品，更優(yōu)選地包括小于20EU LPS/克的干燥的產(chǎn)品，更適合地包括小于15EU LPS/克的干燥的產(chǎn)品，甚至更優(yōu)選包括小于IOEU LPS/克的干燥的產(chǎn)品，更適合地包括小于5EU LPS/克的干燥的產(chǎn)品，更適合地包括小于2EU LPS/克的干燥的產(chǎn)品，且最適合地包括小于IEU LPS/克的干燥的產(chǎn)品。優(yōu)選地，食物組合物包括優(yōu)選具有至少80%H的疏水性百分比的乳酸菌和雙歧桿菌。
[0067]EU代表內(nèi)毒素單位 。10內(nèi)毒素單位(EU)約等于Ing的內(nèi)毒素。應(yīng)理解的是，在本說明書中使用的E符號(hào)代表“乘以10的…次冪”，從而代替科學(xué)記數(shù)法中的X10，也稱為帶有表示冪的上標(biāo)的標(biāo)準(zhǔn)形式或指數(shù)形式。
[0068]適合地根據(jù)LAL凝膠-凝塊檢測(cè)(LAL gel-clot assay)或動(dòng)力學(xué)顯色LAL檢測(cè)(Gehring 等人,Environmental Int2008; 34:1132-1136)測(cè)量 LPS 的量。當(dāng)變形細(xì)胞溶解物(LAL)是鱟(Limulus polyphemus)的血細(xì)胞(變形細(xì)胞)的水性提取物。LAL與細(xì)菌內(nèi)毒素或革蘭氏陰性菌的膜組分中的脂多糖(LPS)發(fā)生反應(yīng)。LAL含有在LPS的存在下在一系列反應(yīng)中被活化成當(dāng)凝固級(jí)聯(lián)(Limulus coagulation cascade)的酶。該反應(yīng)是LAL測(cè)試的基礎(chǔ)，用于細(xì)菌內(nèi)毒素的檢測(cè)和定量。含有酶的LAL可以分裂來自發(fā)色底物的發(fā)色團(tuán)(對(duì)硝基苯胺(PNA))，從而在動(dòng)力學(xué)顯色LAL檢測(cè)中產(chǎn)生黃色。
[0069]然而嵌入脂質(zhì)復(fù)合物(諸如從源自乳脂球的奶中的磷脂)中的或結(jié)合到乳酸菌和雙歧桿菌上的LPS掩蓋來自LPS-結(jié)合蛋白(LPB)的脂質(zhì)A部分并因此逃過檢測(cè)。因此，在此情況下，可以通過使脂質(zhì)復(fù)合物的水性懸浮液與適合的洗滌劑(諸如在US6015716中描述的Lubrol-PX?)結(jié)合來檢測(cè)存在于食物組合物中的LPS的量。
[0070]根據(jù)本發(fā)明的方法產(chǎn)生了酪蛋白富集的部分和乳清蛋白富集的部分。優(yōu)選地，酪蛋白富集的部分包括占總蛋白大于81wt%的酪蛋白，更優(yōu)選包括占總蛋白大于85wt%的酪蛋白，甚至更優(yōu)選包括占總蛋白大于90wt%的釀蛋白，且最優(yōu)選包括占總蛋白大于95wt%的酪蛋白。
[0071]還優(yōu)選地是乳清蛋白富集的部分包括占總蛋白大于20wt%的乳清蛋白，更優(yōu)選包括占總蛋白大于30wt%的乳清蛋白，甚至更優(yōu)選包括占總蛋白大于40wt%的乳清蛋白，更優(yōu)選包括占總蛋白大于45wt%的乳清蛋白，更優(yōu)選包括占總蛋白大于50wt%的乳清蛋白，甚至更優(yōu)選包括占總蛋白大于55wt%的乳清蛋白，且最優(yōu)選包括占總蛋白大于60wt%的乳清蛋白。
[0072]在另一個(gè)方面中，本發(fā)明涉及一種乳品類食物組合物，其中，酪蛋白:乳清蛋白的比例為0.1?4.0。優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明的組合物即用產(chǎn)品包括I?40wt%的蛋白和在干燥的產(chǎn)品中包括10?80wt%的蛋白，更優(yōu)選即用產(chǎn)品包括20?30wt%的蛋白或在干燥的產(chǎn)品中包括20?60wt%的蛋白，最優(yōu)選即用產(chǎn)品包括3?25wt%的蛋白或在干燥的產(chǎn)品中包括30?50界七％的蛋白。對(duì)于嬰兒配方奶粉，酪蛋白:乳清蛋白的合適比例為0.1?4，優(yōu)選為0.2?2.5，更優(yōu)選為0.3?1，最優(yōu)選為0.4?0.7。對(duì)于醫(yī)療營養(yǎng)品或老年人的營養(yǎng)品，酪蛋白:乳清蛋白的合適比例為3?15，更優(yōu)選為4?12，更優(yōu)選為5?11，甚至更優(yōu)選為6?10，且最優(yōu)選為7?9。
[0073]乳品類食物組合物還可以包括以下量的脂肪:即用產(chǎn)品包括0.5?15wt%的脂肪和在干燥的產(chǎn)品中包2?40wt%的脂肪，更優(yōu)選即用產(chǎn)品中包括I?8wt%的脂肪和在干燥的產(chǎn)品中包括3?30wt%的脂肪，最優(yōu)選即用產(chǎn)品中包括2?5wt%的脂肪和在干燥的產(chǎn)品中包括5?20被％的脂肪。脂肪可以是任何脂肪，但最優(yōu)選植物性脂肪。適合的脂肪包括:向日葵油、豆油、紅花油、菜籽油、棕櫚油、棕櫚仁油、米糠油、橄欖油、花生油和椰子油。乳月旨、奶油、黃油乳或黃油及其它動(dòng)物性脂肪(諸如豬油)也是適合的。魚油和藻油也是非常適合的。脂肪可以是不同脂肪的組合。適合地，脂肪為植物油與黃油的混合物。優(yōu)選地，至少25wt%的脂肪包括黃油，更優(yōu)選至少40wt%的脂肪包括黃油。
[0074]在優(yōu)選實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的組合物包括2?4.5g/L即用產(chǎn)品，優(yōu)選2.5?4g/L即用產(chǎn)品，且最優(yōu)選3?3.5g/L即用產(chǎn)品的量的β-酪蛋白。適合地，干燥的產(chǎn)品含有10?50mg β -酪蛋白/克干燥的產(chǎn)品，更適合含有15?40mg β酪蛋白/克干燥的產(chǎn)品，且最優(yōu)選含有20?30mgi3酪蛋白/克干燥的產(chǎn)品。
[0075]在另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的組合物包括2?4.5g/L即用產(chǎn)品，優(yōu)選2.5?48/1即用產(chǎn)品，且最優(yōu)選3?3.58/1即用產(chǎn)品的量的α乳白蛋白。適合地，干燥的產(chǎn)品含有10?50mga乳白蛋白/克干燥的產(chǎn)品，更適合地15?40mg a乳白蛋白/克干燥的產(chǎn)品，且最優(yōu)選20?30mg a乳白蛋白/克干燥的產(chǎn)品。
[0076]在另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的組合物在即用產(chǎn)品中包括小于2g/L的a酪蛋白，更優(yōu)選小于lg/L的a酪蛋白，甚至更優(yōu)選小于100mg/L的a酪蛋白且最優(yōu)選在即用產(chǎn)品中包括小于10mg/L的a酪蛋白。在即用產(chǎn)品中甚至小于lmg/L的a酪蛋白是非常適合的。在干燥的產(chǎn)品中，優(yōu)選存在小于15mga酪蛋白/克干燥的產(chǎn)品，更優(yōu)選存在小于500mcg/g的a酪蛋白，且最優(yōu)選在干燥的產(chǎn)品中存在100mcg/g的a酪蛋白。[0077]在另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的組合物在即用產(chǎn)品中包括小于2g/L的β乳球蛋白，更優(yōu)選小于lg/L的β乳球蛋白，甚至更優(yōu)選小于100mg/L的β乳球蛋白，且最優(yōu)選在即用產(chǎn)品中包括10mg/L的β乳球蛋白。在即用產(chǎn)品中甚至小于lmg/L的β乳球蛋白是非常適合的。在干燥的產(chǎn)品中，優(yōu)選存在小于15mgi3乳球蛋白/克干燥的產(chǎn)品，更優(yōu)選在干燥的產(chǎn)品中存在小于Imgii乳球蛋白/克干燥的產(chǎn)品，更優(yōu)選在干燥的產(chǎn)品中存在小于500mcg/g且最優(yōu)選存在小于100mcg/g的β乳球蛋白。
[0078]除了或代替人類母乳之外，嬰兒配方奶粉通常用于上至18個(gè)月大的嬰兒。幼兒配方奶粉通常是指用于18?48個(gè)月的兒童的后繼配方奶粉。顯然地，它并不排除按照本發(fā)明將所得到的乳蛋白和乳蛋白組合物用于其它目的，諸如腸內(nèi)食物、兒童的醫(yī)療營養(yǎng)品和老人的醫(yī)療營養(yǎng)品。
[0079]將理解的是，按照本發(fā)明提供的任何營養(yǎng)組合物(諸如嬰兒配方奶粉或幼兒配方奶粉)可以包括其它任何常規(guī)成分。例如，常規(guī)添加到嬰幼兒食物和治療性組合物中的碳水化合物，諸如乳糖和低聚糖；脂質(zhì)和諸如維生素、氨基酸、礦物質(zhì)、?；撬?、肉堿、核苷酸和多胺類等成分；以及抗氧化劑，諸如ΒΗΤ、抗壞血酸棕櫚酸酯、維生素Ε、α -胡蘿卜素和β -胡蘿卜素、葉黃素、玉米黃質(zhì)、番茄紅素和卵磷脂。脂質(zhì)大多是蔬菜來源的。此外，食物或治療性組合物可以富含多不飽和脂肪酸，諸如Y -亞麻酸、二高-Y -亞麻酸、花生四烯酸、十八碳四烯酸、二十碳五烯酸、廿二碳六烯酸和二十二碳五烯酸?？紤]到腸道菌群的適合發(fā)展，可以添加益生菌(諸如乳酸桿菌和/或雙歧桿菌)以及益生元。益生菌的優(yōu)選組合是，例如，乳酸雙歧桿菌和/或動(dòng)物雙歧桿菌與鼠李糖乳桿菌、干酪乳桿菌、副干酪乳桿菌、唾液乳桿菌或羅伊氏乳桿菌。益生元的實(shí)例包括:巖藻糖_、果糖-和/或半乳糖-低聚糖；短鏈和長鏈的唾液酸基(巖藻糖)低聚糖、支鏈的(低聚)糖、唾液酸富集的奶制品或它們的衍生物；可能會(huì)或可能不會(huì)水解的菊粉、角豆粉、樹膠，纖維等。
[0080]本發(fā)明還涉及根據(jù)本發(fā)明的酪蛋白富集的部分和乳清蛋白富集的部分在生產(chǎn)食物組合物、優(yōu)選嬰兒配方奶粉中的應(yīng)用。本發(fā)明還涉及如權(quán)利要求24要求保護(hù)的血清富集的部分和奶和/或奶蛋白濃縮物在生產(chǎn)食物組合物、優(yōu)選嬰兒配方奶粉中的應(yīng)用，在該奶中，至少98wt%的革蘭氏陰性菌被去除并且該奶已經(jīng)過在60?90°C的溫度下的熱處理；在該奶蛋白濃縮物中，至少98wt%的革蘭氏陰性菌被去除并且該奶蛋白濃縮物已經(jīng)過在60?90°C的溫度下的熱處理。
[0081]優(yōu)選地，血清富集的部分和/或酪蛋白富集的部分在生產(chǎn)食物組合物中的應(yīng)用是:其中，酪蛋白:乳清蛋白的比例為0.1?2.5或3?15。對(duì)于嬰兒配方奶粉，酪蛋白:乳清蛋白的比例適合地為0.1?2.5，優(yōu)選為0.2?2，更優(yōu)選為0.3?I，最優(yōu)選為0.4?
0.7。對(duì)于醫(yī)療營養(yǎng)品和老年人的營養(yǎng)品，適合的酪蛋白:乳清蛋白的比例為3?15，更優(yōu)選為4?12,更優(yōu)選為5?11,甚至更優(yōu)選為6?10,且最優(yōu)選為7?9。
[0082]在下面非限制性的實(shí)施例中說明本發(fā)明。
[0083]實(shí)施例1
[0084]使用微過濾制備低LPS/內(nèi)毒素的奶蛋白產(chǎn)品
[0085]將貯存時(shí)間為72小時(shí)的原料奶離心(溫度:50?55°C )以分離奶油并得到脫脂奶。
[0086]在下一步驟中，將奶在陶瓷微過濾器(孔徑1.5 μ m，溫度50_55°C )上進(jìn)行過濾，并隨后進(jìn)行巴氏殺菌(72.5°C，20s )，并冷卻至6°C，然后貯存在6°C下的罐中。在此罐中的最大貯存時(shí)間為24小時(shí)。
[0087]對(duì)新得到的脫脂奶和所得的已微過濾的奶進(jìn)行采樣，以測(cè)定菌落總數(shù)(在30°C下，CFU/ml)和內(nèi)毒素(EU/g DM)ο結(jié)果示于表1中。
[0088]表1
[0089]
【權(quán)利要求】
1.一種生產(chǎn)具有低LPS濃度的乳品類食物組合物的方法，包括以下步驟: Ca)提供貯存時(shí)間小于264小時(shí)的奶； (b)使用孔徑為0.01 μ m~2 μ m的微過濾器處理所述奶以至少得到酪蛋白富集的部分和乳清蛋白富集的部分。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述方法包括加熱步驟。
3.—種生產(chǎn)具有低LPS的乳品類食物組合物的方法，包括以下步驟: Ca)提供貯存時(shí)間小于264小時(shí)的奶； (b)處理所述奶以去除至少98wt%的革蘭氏陰性菌； (c)將其中去除至少98wt%的革蘭氏陰性菌的所述奶加熱至60V~90O。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，額外地包括以下步驟: (c)處理所述奶以去除至少98wt%的革蘭氏陰性菌； Cd)將其中去除至少98wt%的革蘭氏陰性菌的所述奶加熱至60V~90°C。
5.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的方法，其中，所述去除至少98被％的革蘭氏陰性菌的處理選自由以下步驟組成的組: 孔徑為0.5微米~2.5微米的細(xì)菌過濾，優(yōu)選在25°C~65°C的溫度下； 離心； 使用抗體去除革蘭氏陰性菌。
6.根據(jù)前述權(quán)利要求中任意一項(xiàng)所述的方法，其中，在生產(chǎn)所述乳品類食物組合物的加工過程中，所述奶和由此得到的產(chǎn)品沒有經(jīng)過高于90°C的熱處理。
7.根據(jù)前述權(quán)利要求中任意一項(xiàng)所述的方法，其中，在O~65°C的溫度下進(jìn)行所述微過濾。
8.根據(jù)前述權(quán)利要求中任意一項(xiàng)所述的方法，其中，所述微過濾的孔徑為0.05微米~1.2微米，更優(yōu)選為0.1微米~0.8微米，且最優(yōu)選為0.15微米~0.5微米。
9.根據(jù)前述權(quán)利要求中任意一項(xiàng)所述的方法，其中，在微過濾過程中的跨膜壓力小于2.5 巴。
10.根據(jù)前述權(quán)利要求中任意一項(xiàng)所述的方法，其中，在25°C~65°C或O~25°C的溫度下進(jìn)行所述微過濾。
11.根據(jù)權(quán)利要求2~10中任意一項(xiàng)所述的方法,其中，所述奶在60V~65°C的溫度下被加熱I分鐘~10分鐘，或在65°C~85°C的溫度下被加熱5秒~180秒,優(yōu)選在65°C~760C的溫度下被加熱10秒~120秒，最優(yōu)選在66°C~71°C的溫度下被加熱5秒~180秒。 11.根據(jù)前述權(quán)利要求中任意一項(xiàng)所述的方法，其中，所述奶的貯存時(shí)間為200小時(shí)~80小時(shí)。
12.根據(jù)前述權(quán)利要求中任意一項(xiàng)所述的方法，包括以下步驟: Ca)提供貯存時(shí)間小于264小時(shí)的奶； (b)處理所述奶以去除至少98wt%的革蘭氏陰性菌； (c)將其中去除至少98wt%的革蘭氏陰性菌的所述奶加熱至60V~90°C； (d)使用孔徑為0.01 μ m-2 μ m的微過濾器處理所述奶以至少得到酪蛋白富集的部分和乳清蛋白富集的部分。
13.根據(jù)前述權(quán)利要求中任意一項(xiàng)所述的方法，其中，在所述微過濾的步驟和/或革蘭氏陰性菌的去除步驟之前，所述奶經(jīng)過轉(zhuǎn)溶處理。
14.根據(jù)前述權(quán)利要求中任意一項(xiàng)所述的方法，其中，所述乳清蛋白富集的部分與所述酪蛋白富集的部分或與貯存時(shí)間小于264小時(shí)的奶蛋白產(chǎn)品混合，以得到在乳品類組合物中的酪蛋白:乳清蛋白的比例為0.1~4.0，優(yōu)選為0.2~2，更優(yōu)選為0.3~1，最優(yōu)選為0.4 ~0.7。
15.根據(jù)前述權(quán)利要求中任意一項(xiàng)所述的方法，其中，脂肪被添加到所述組合物中。
16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的方法，其中，至少25wt%的所述脂肪包括黃油。
17.根據(jù)前述權(quán)利要求中任意一項(xiàng)所述的方法，其中，選自由維生素、礦物質(zhì)、多不飽和脂肪酸、益生元、益生菌、蛋白、抗體、核苷酸、抗氧化劑和磷脂組成的組中的成分被添加到所述組合物中。
18.根據(jù)前述權(quán)利要求中任意一項(xiàng)所述的方法，其中，存在干燥步驟。
19.根據(jù)前述權(quán)利要求中任意一項(xiàng)所述的方法，其中，所述食物組合物選自由嬰兒配方奶粉、醫(yī)藥食物、營養(yǎng)食物組合物、酸乳酪、飲料、醬類或奶油組成的組。
20.根據(jù)前述權(quán)利要求中任意一項(xiàng)所述的方法，其中，所述奶為牛奶，優(yōu)選為奶牛的奶。
21.一種能通過根據(jù)前述權(quán)利要求中任意一項(xiàng)所述的方法得到的乳品類食物組合物。
22.一種乳品類食物 組合物，其中，存在小于4000E3EU LPS/升的即用食物組合物，或其中，存在小于30E3EU LPS/克的干燥的產(chǎn)品。
23.根據(jù)權(quán)利要求22所述的乳品類食物組合物，其中，存在小于5100EULPS/升的即用食物組合物，或其中，存在小于39EU LPS/克的干燥的產(chǎn)品。
24.根據(jù)權(quán)利要求21~23中任意一項(xiàng)所述的乳品類食物組合物，所述乳品類食物組合物包括乳酸菌和雙歧桿菌，優(yōu)選所述乳酸菌和雙歧桿菌具有至少80%H的疏水性。
25.根據(jù)權(quán)利要求21~24中任意一項(xiàng)所述的組合物，其中，所述組合物是酪蛋白富集的部分，在該酪蛋白富集的部分中大于80wt%的蛋白是酪蛋白。
26.根據(jù)權(quán)利要求21或25所述的方法，其中，所述組合物是乳清蛋白富集的部分，在該乳清蛋白富集的部分中大于30wt%的蛋白是乳清蛋白。
27.根據(jù)權(quán)利要求21~26中任意一項(xiàng)所述的組合物，其中，β-酪蛋白占總酪蛋白的量為至少37%，優(yōu)選為至少39%，更優(yōu)選為至少41%。
28.根據(jù)權(quán)利要求21~27中任意一項(xiàng)所述的組合物，其中，酪蛋白:乳清蛋白的比例為0.1~4.0，優(yōu)選為0.2~2.5，更優(yōu)選為0.3~1，最優(yōu)選為0.4~0.7。
29.根據(jù)權(quán)利要求21~28中任意一項(xiàng)所述的組合物，該組合物包括脂肪，其中，所述脂肪包括至少25wt%的黃油。
30.根據(jù)權(quán)利要求21~29中任意一項(xiàng)所述的組合物，其中，所述食物組合物選自由嬰兒配方奶粉、醫(yī)藥食物、營養(yǎng)食物組合物、酸乳酪、飲料、醬類或奶油組成的組。
31.根據(jù)權(quán)利要求25所述的酪蛋白富集的部分和根據(jù)權(quán)利要求26所述的乳清蛋白富集的部分在生產(chǎn)食物組合物、優(yōu)選嬰兒配方奶粉中的應(yīng)用。
32.根據(jù)權(quán)利要求26所述的乳清蛋白富集的部分和奶和/或奶蛋白濃縮物在生產(chǎn)食物組合物、優(yōu)選嬰兒配方奶粉中的應(yīng)用，在所述奶中，至少98%的革蘭氏陰性菌被去除并且所述奶已經(jīng)過在60V~90°C的溫度下的熱處理；在所述奶蛋白濃縮物中，至少98%的革蘭氏陰性菌被去除并且所述奶蛋白濃縮物已經(jīng)過在60°C~90°C的溫度下的熱處理。
33.根據(jù)權(quán)利要求21~32中任意一項(xiàng)所述的組合物， 其中，優(yōu)選在洗滌劑的存在下，根據(jù)LAL檢測(cè)或動(dòng)力學(xué)顯色LAL檢測(cè)來測(cè)量LPS的量。
【文檔編號(hào)】A23L1/305GK103781368SQ201280043032
【公開日】2014年5月7日 申請(qǐng)日期:2012年7月13日 優(yōu)先權(quán)日:2011年7月13日
【發(fā)明者】安德里斯·迪爾克·西曼絲瑪, Y·P·德弗里斯, 阿努克·雷歐妮·弗埃特斯瑪, 寶拉·瑪麗亞·萊安德羅·加爾西亞, 阿爾伯特·萬德爾帕特 申請(qǐng)人:弗里斯蘭品牌有限公司