專(zhuān)利名稱(chēng)：微生物培養(yǎng)片及其制造方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用于菌數(shù)檢查等的微生物培養(yǎng)片，詳細(xì)而言，涉及一種由于培養(yǎng)層被在基片的規(guī)定范圍內(nèi)形成圖案，因而培養(yǎng)材料的浪費(fèi)少且操作簡(jiǎn)便的微生物培養(yǎng)片。
背景技術(shù)：
作為確認(rèn)微生物的存在或者測(cè)定微生物數(shù)的方法，有瓊脂平板混釋法。在該瓊脂平板混釋法中，由于使用預(yù)先形成在已滅菌的培養(yǎng)皿的瓊脂培養(yǎng)基，因而需要用于對(duì)瓊脂培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌的高壓滅菌器和用于無(wú)菌地進(jìn)行微生物檢查的檢查室，另外，對(duì)于從微生物的取樣到樣品液的制備、分注、與培養(yǎng)基的混釋、培養(yǎng)、計(jì)數(shù)的微生物檢查操作， 要求熟練。于是，正在開(kāi)發(fā)具備不需要高度熟練、能夠簡(jiǎn)便地進(jìn)行微生物檢查的干燥培養(yǎng)基的微生物培養(yǎng)片。例如，在專(zhuān)利文獻(xiàn)1中，公開(kāi)了一種片狀培養(yǎng)裝置，其在防水性基體上具備通過(guò)粘合劑均勻地粘合了含有凝膠化劑、營(yíng)養(yǎng)成分的冷水可溶粉末的粘合劑層。對(duì)于通過(guò)粘合層使浸在凝膠化劑和微生物的生長(zhǎng)培養(yǎng)基中的濾紙與膜粘合的現(xiàn)有裝置，由于濾紙不具有透明性，細(xì)菌菌落的計(jì)數(shù)困難，另外，很難分離每個(gè)菌落，鑒于這些問(wèn)題完成該片狀培養(yǎng)裝置， 通過(guò)經(jīng)由粘合劑直接固定凝膠化劑和營(yíng)養(yǎng)成分的方法來(lái)解決使濾紙介于之間的裝置存在的問(wèn)題。另外，專(zhuān)利文獻(xiàn)1中還記載有如下內(nèi)容在使用上述片狀培養(yǎng)裝置時(shí)，通過(guò)將具有重量的環(huán)狀輪樣的型板暫時(shí)放置在蓋板上，從而使被檢液以限定在特定的區(qū)域內(nèi)的方式擴(kuò)散。在專(zhuān)利文獻(xiàn)2中，公開(kāi)了一種片狀培養(yǎng)裝置，其包括基材、形成在該基材面上的包括有非吸收性培養(yǎng)面的臺(tái)座以及蓋板，并且使培養(yǎng)基附著在上述培養(yǎng)面和/或者蓋板的底面。利用經(jīng)由粘合劑將冷水可溶粉末粘合在基體上的現(xiàn)有方法，由于形成不規(guī)則形狀和尺寸的粘合物，因而不能將凝膠化劑、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、抑制劑、指示劑等培養(yǎng)基構(gòu)成成分維持在適當(dāng)濃度，鑒于這樣的問(wèn)題完成該片狀培養(yǎng)裝置。根據(jù)專(zhuān)利文獻(xiàn)2中記載的片狀培養(yǎng)裝置，使用者不需要特別的設(shè)備和操作，能夠使水性試樣擴(kuò)散為均勻的形狀和尺寸。此外，在專(zhuān)利文獻(xiàn)2的實(shí)施例中，利用如下的方法制造片狀培養(yǎng)裝置。首先，在臺(tái)座底部的一個(gè)面上涂布含有膠的肉汁溶液即培養(yǎng)液之后，在溫度100°C下使水分蒸發(fā)。然后，使熱敏粘合劑、聚苯乙烯發(fā)泡體以及聚丙烯酸酯PSA貼合在上述臺(tái)座底部的另一個(gè)面上，將所得到的層積體沖裁成直徑5. Icm0在將該沖裁后的層積體以PSA—側(cè)為下方的方式貼合在基材面上之后，使蓋板附著在上述基材的邊緣，從而制造片狀的培養(yǎng)裝置。在專(zhuān)利文獻(xiàn)3中，公開(kāi)了一種微生物培養(yǎng)器，其在方形的粘著片上層積圓形的多孔質(zhì)基體層和水溶性高分子化合物層，在其上再配設(shè)有方形的透明膜。在該微生物培養(yǎng)器中，通過(guò)向多孔質(zhì)基體層上添加樣品液，樣品液被多孔質(zhì)基體層保持。于是，由于該被保持著的樣品液的水分，與多孔質(zhì)基體層接觸的水溶性高分子化合物層溶解，進(jìn)而產(chǎn)生水溶性高分子化合物水溶液，由該高分子化合物水溶液和生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)成分構(gòu)成微生物能夠生長(zhǎng)發(fā)育的環(huán)境。此外，在該微生物培養(yǎng)器中，由于溶解的水溶性高分子化合物層為高粘度溶液，因而微生物不會(huì)侵入至水溶性高分子化合物層內(nèi)部，在溶解的水溶性高分子化合物層與多孔質(zhì)基體層一體化的工序中，微生物被上推到多孔質(zhì)基體層的表面。因此，菌落形成在多孔質(zhì)層的表面或者表面附近。通過(guò)以上述多孔質(zhì)基體層為上方的方式使其粘結(jié)在粘合片上，再以與上述多孔質(zhì)基體層接觸的方式覆蓋透明膜，從而該微生物培養(yǎng)器能夠用作輕量而體積小且容易處理的片狀微生物培養(yǎng)器。此外，作為上述水溶性高分子，公開(kāi)了皂化度為75% 95%、分子量為25000 250000的聚乙烯醇。在專(zhuān)利文獻(xiàn)4中，公開(kāi)了一種微生物培養(yǎng)片，其在防水性的基片的整個(gè)面上涂布培養(yǎng)基混合物和吸水性樹(shù)脂而形成培養(yǎng)層，在該培養(yǎng)層上形成有用于限定所要接種的被檢液的擴(kuò)散的疏水性油墨外框?qū)印４送?，在?zhuān)利文獻(xiàn)4的實(shí)施例中，將厚度100 μ m的透明的雙軸延伸聚酯膜作為基片，在該基片上，利用逗號(hào)涂布機(jī)(二二一夕一)以干燥時(shí)的涂布量為30g/m2的方式涂布在聚氧化乙烯(聚乙烯氧化物)的甲苯溶液中混合了營(yíng)養(yǎng)成分和氯化三苯基四唑(鐺)而得的培養(yǎng)層形成用涂布液，在形成的培養(yǎng)層上，通過(guò)疏水性油墨的絲網(wǎng)印刷而形成有成為外框?qū)拥?、?nèi)徑50mm、外徑70mm的環(huán)形圖案。現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)專(zhuān)利文獻(xiàn)專(zhuān)利文獻(xiàn)1 日本專(zhuān)利特公平2-49705號(hào)公報(bào)專(zhuān)利文獻(xiàn)2 日本專(zhuān)利特表2004-515236號(hào)公報(bào)專(zhuān)利文獻(xiàn)3 國(guó)際公開(kāi)WO 01/044437號(hào)公報(bào)專(zhuān)利文獻(xiàn)4 日本專(zhuān)利特開(kāi)平8480377號(hào)公報(bào)

發(fā)明內(nèi)容
發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題然而，由于微生物的培養(yǎng)材料昂貴，因而優(yōu)選能夠減少其使用量。但是，在專(zhuān)利文獻(xiàn)4中，在基材膜上的整個(gè)區(qū)域上層積有培養(yǎng)層，在微生物的培養(yǎng)所必需的部分以外也形成有培養(yǎng)層，因而浪費(fèi)了昂貴的材料。另外，在專(zhuān)利文獻(xiàn)2、專(zhuān)利文獻(xiàn)3中，在膜上全面涂布了培養(yǎng)液之后，將其一部分沖裁掉，將貼在基材上的部分作為培養(yǎng)層，在這一點(diǎn)上，仍然浪費(fèi)材料。另外，微生物培養(yǎng)片優(yōu)選制造時(shí)工序簡(jiǎn)便。在這一點(diǎn)上，上述專(zhuān)利文獻(xiàn)1記載的培養(yǎng)裝置通過(guò)粘合劑使作為凝膠化劑、營(yíng)養(yǎng)成分的冷水可溶粉末均勻地粘合在基體上而形成培養(yǎng)層，雖然可以說(shuō)是簡(jiǎn)便的方法，但是在該方法中，微生物容易與粘合劑成分接觸。因此，粘合劑成分有可能會(huì)對(duì)微生物的生長(zhǎng)發(fā)育帶來(lái)影響，因而不能說(shuō)優(yōu)選。相反，在專(zhuān)利文獻(xiàn)2記載的片狀培養(yǎng)裝置中，不使用粘合劑，而在包含聚酯膜的臺(tái)座底部上，通過(guò)涂布作為凝膠化劑而含有瓜爾豆膠的肉汁溶液而形成培養(yǎng)層。然而，在專(zhuān)利文獻(xiàn)2記載的片狀培養(yǎng)裝置中，如上所述，在膜上整面涂布了培養(yǎng)液之后，進(jìn)行沖裁加工，再利用粘合劑將所得到的沖裁加工品貼合在基材上而形成培養(yǎng)層，因而制造工序繁雜。專(zhuān)利文獻(xiàn)3中記載的微生物培養(yǎng)器由于也進(jìn)行與專(zhuān)利文獻(xiàn)2中記載的片狀培養(yǎng)裝置同樣的操作，因而制造工序仍然
夢(mèng)芬
糸 7Τ< ο在專(zhuān)利文獻(xiàn)2記載的片狀培養(yǎng)裝置中，培養(yǎng)基溶液含有水，因而必須在高溫條件下進(jìn)行加熱干燥，營(yíng)養(yǎng)成分、凝膠化劑、顯色指示劑、基質(zhì)以及基材可能會(huì)由于加熱而被分
4解。因此，能夠使用的營(yíng)養(yǎng)成分或者凝膠化劑、顯色指示劑、基質(zhì)以及基材受到限制。這對(duì)于使用聚乙烯醇水溶液的專(zhuān)利文獻(xiàn)3中記載的微生物培養(yǎng)器也是同樣的。在專(zhuān)利文獻(xiàn)4記載的微生物培養(yǎng)片中，作為培養(yǎng)基混合物使用了聚氧化乙烯的甲苯溶液，但甲苯也是超過(guò) 100°C的高沸點(diǎn)的有機(jī)溶劑，從這一點(diǎn)來(lái)看，所能夠使用的材料仍然受到限制。而且，為了快速地進(jìn)行，被檢液的接種操作也優(yōu)選簡(jiǎn)便。然而，在專(zhuān)利文獻(xiàn)1記載的培養(yǎng)裝置中，為了控制被檢液的擴(kuò)散，必須暫時(shí)將具有重量的環(huán)狀輪樣的型板放置在蓋板上，將被檢液限定在特定區(qū)域內(nèi)，很難說(shuō)操作簡(jiǎn)便。另外，在專(zhuān)利文獻(xiàn)3記載的微生物培養(yǎng)器中，為了抑制被檢液的擴(kuò)散而包含了多孔質(zhì)基體的培養(yǎng)層。因此，被檢液的吸水時(shí)間變長(zhǎng)，對(duì)于使用者來(lái)說(shuō)，容易浪費(fèi)操作時(shí)間。另外，在專(zhuān)利文獻(xiàn)3記載的微生物培養(yǎng)器中，為了防止培養(yǎng)時(shí)的干燥，使蓋板覆蓋在被檢液接種后的培養(yǎng)層上，但是由于上述培養(yǎng)層吸水而體積增加，如果不慎重地緊貼粘著片與蓋板，有時(shí)會(huì)產(chǎn)生成為培養(yǎng)時(shí)干燥的原因的間隙。另夕卜，如果在吸水后按壓培養(yǎng)層，則被檢液有時(shí)會(huì)從多孔質(zhì)基體滲出，操作者必須慎重地進(jìn)行操作。在這一點(diǎn)上，也容易浪費(fèi)操作時(shí)間。在專(zhuān)利文獻(xiàn)4記載的微生物培養(yǎng)片中，為了限定所接種的被檢液的擴(kuò)散，設(shè)置有疏水性油墨外框?qū)?。由于該外框?qū)有纬稍谂囵B(yǎng)層上，因而隨著被檢液的滴下，外框?qū)拥南虏亢兴袝r(shí)外框?qū)幼冃位虮粰z液浸潤(rùn)至外框?qū)拥南虏亢屯庵?，很難穩(wěn)定地使用。而且，在微生物檢查中，菌落的計(jì)數(shù)必須正確進(jìn)行。然而，在專(zhuān)利文獻(xiàn)1、專(zhuān)利文獻(xiàn) 2中，由于不僅在紙基材的上面形成培養(yǎng)層，而且在蓋板上也形成培養(yǎng)層，因而有時(shí)不能夠得到充分的可識(shí)別性。另外，在專(zhuān)利文獻(xiàn)3記載的微生物培養(yǎng)器中，由于培養(yǎng)層由多孔質(zhì)基體構(gòu)成，因而菌體會(huì)進(jìn)入多孔質(zhì)基體。因此，如果菌體進(jìn)行繁殖，則所產(chǎn)生的菌落難以看到， 尤其是在菌體接近地繁殖的情況下，菌落計(jì)數(shù)有時(shí)會(huì)變得困難。本發(fā)明就是鑒于上述的問(wèn)題點(diǎn)而完成的，目的在于提供能夠?qū)嘿F的培養(yǎng)材料的使用限定在必要部分、制造時(shí)的工序簡(jiǎn)便、使用者能夠簡(jiǎn)便且穩(wěn)定地使用的微生物培養(yǎng)片。用于解決課題的手段本發(fā)明對(duì)微生物培養(yǎng)片進(jìn)行了詳細(xì)地研究，其結(jié)果發(fā)現(xiàn)(1)通過(guò)印刷或者涂布而在基片上圖案形成培養(yǎng)層，能夠減少昂貴的培養(yǎng)基材料的使用；( 作為培養(yǎng)液，通過(guò)使用含有選自由凝膠化劑、營(yíng)養(yǎng)成分、顯色指示劑、選擇劑以及基質(zhì)組成的組中的至少一種的聚乙烯吡咯烷酮溶液，能夠通過(guò)圖案形成而廉價(jià)且簡(jiǎn)便地形成規(guī)定形狀的培養(yǎng)層；(3)通過(guò)使用醇溶液作為用于培養(yǎng)液的溶劑，能夠防止在溶劑除去時(shí)可能產(chǎn)生的混合成分的變質(zhì)；以及(4)通過(guò)圖案形成培養(yǎng)層，不使用環(huán)狀的型板，僅通過(guò)蓋上蓋板而不等待被檢液被吸水就能使被檢液擴(kuò)散為一定面積，然后，通過(guò)再形成框?qū)?，能夠防止被檢液的遺漏，從而完成了本發(fā)明。即，在本發(fā)明中，提供一種微生物培養(yǎng)片，具有基片、形成在上述基片上的培養(yǎng)層以及覆蓋上述培養(yǎng)層的蓋板，其中，上述培養(yǎng)層是對(duì)含有選自由凝膠化劑、營(yíng)養(yǎng)成分、顯色指示劑、選擇劑以及基質(zhì)組成的組中的至少一種的和聚乙烯吡咯烷酮的培養(yǎng)液進(jìn)行圖案形成而得到的層。另外，在本發(fā)明中，提供一種具有基片、形成在上述基片上的培養(yǎng)層以及覆蓋上述培養(yǎng)層的蓋板的微生物培養(yǎng)片的制造方法，其中，上述制造方法包括將在聚乙烯吡咯烷酮的醇溶液中含有選自由凝膠化劑、營(yíng)養(yǎng)成分、顯色指示劑、選擇劑以及基質(zhì)組成的組中的至少一種的培養(yǎng)液圖案形成在上述基片上之后，除去上述培養(yǎng)液中含有的上述醇從而形成上述培養(yǎng)層的培養(yǎng)層形成工序。提供一種具有基片、形成在上述基片上的培養(yǎng)層以及覆蓋上述培養(yǎng)層的蓋板的微生物培養(yǎng)片的制造方法，其中，上述基片預(yù)先形成有在形成有上述培養(yǎng)層時(shí)包圍上述培養(yǎng)層的外周的凸?fàn)畹陌杷詷?shù)脂的框?qū)?，在上述框?qū)拥膬?nèi)側(cè)，對(duì)在聚乙烯吡咯烷酮的醇溶液中含有選自由凝膠化劑、營(yíng)養(yǎng)成分、顯色指示劑、選擇劑以及基質(zhì)組成的組中的至少一種的培養(yǎng)液進(jìn)行圖案形成，然后除去上述培養(yǎng)液中含有的上述醇，從而形成上述培養(yǎng)層。發(fā)明效果根據(jù)本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片，由于培養(yǎng)層被圖案形成在基片上，因而能夠?qū)⑽⑸锏呐囵B(yǎng)材料的使用僅限定在必要的部分，進(jìn)而能夠減少昂貴材料的使用量。另外，根據(jù)本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片，由于將聚乙烯吡咯烷酮作為了培養(yǎng)液的必需成分，因而能夠廉價(jià)且簡(jiǎn)便地圖案形成規(guī)定形狀的培養(yǎng)層。而且，由于在本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片中圖案形成了培養(yǎng)層，因而通過(guò)在被檢液滴下后，迅速地覆蓋蓋板，使被檢液自然地?cái)U(kuò)散到一定范圍，操作性?xún)?yōu)異。根據(jù)本發(fā)明的第一微生物培養(yǎng)片的制造方法，由于在基片上圖案形成培養(yǎng)層，因而能夠避免昂貴材料的浪費(fèi)。另外，由于圖案形成是印刷或者涂布等廉價(jià)的方法，因而也能夠降低制造成本。而且，根據(jù)本發(fā)明的第一微生物培養(yǎng)片的制造方法，由于在培養(yǎng)液形成圖案時(shí)，使用醇作為溶劑，因而容易除去溶劑，并且，由于溶劑的沸點(diǎn)低，因而能夠有效地避免混合成分的熱分解。本發(fā)明的第二微生物培養(yǎng)片的制造方法，由于在基片上預(yù)先形成有在已形成上述培養(yǎng)層時(shí)包圍上述培養(yǎng)層外周的凸?fàn)畹摹杷詷?shù)脂的框?qū)?，因而即使接種被檢液，框?qū)右膊粫?huì)變形而一直穩(wěn)定，作業(yè)的操作性和穩(wěn)定性?xún)?yōu)異。另外，根據(jù)本發(fā)明的第二微生物培養(yǎng)片的制造方法，由于在基片上形成有包圍培養(yǎng)層外周的框?qū)?，因而能夠更可靠地防止被檢液的遺漏，進(jìn)而使接種時(shí)的作業(yè)效率提高。


圖1是示出本發(fā)明涉及的微生物培養(yǎng)片的一個(gè)示例的平面圖(a)和截面圖(b)，是示出在基片的大致中央形成有圓形的培養(yǎng)層的方式的圖。圖2是示出本發(fā)明涉及的微生物培養(yǎng)片的一個(gè)示例的截面圖，其中，圖2(a)是示出基片為多層結(jié)構(gòu)的方式的圖，圖2(b)是示出培養(yǎng)層為多層結(jié)構(gòu)的方式的圖。圖3是示出本發(fā)明涉及的微生物培養(yǎng)片的一個(gè)示例的展開(kāi)圖(a)和截面圖(b)，是示出在基片上形成有培養(yǎng)層、在蓋板上形成有特定成分層的方式的圖。圖4是示出本發(fā)明涉及的微生物培養(yǎng)片的一個(gè)示例的平面圖(a)和截面圖(b)，是示出在基片上形成有培養(yǎng)層和框?qū)拥姆绞降膱D。圖5是示出本發(fā)明涉及的微生物培養(yǎng)片的一個(gè)示例的截面圖，是示出在基片上形成有培養(yǎng)層和框?qū)?，并且特定成分層以與上述框?qū)拥膬?nèi)側(cè)相對(duì)的方式形成于蓋板的方式的圖。圖6是示出本發(fā)明涉及的微生物培養(yǎng)片的一個(gè)示例的截面圖，是示出在基片上形成有培養(yǎng)層和框?qū)?，特定成分層以與上述框?qū)拥膬?nèi)側(cè)相對(duì)的方式且粘合層以與上述框?qū)酉鄬?duì)的方式形成于蓋板的方式的圖。圖7是本發(fā)明涉及的微生物培養(yǎng)片的一個(gè)示例，是在基片上形成有框?qū)拥慕孛鎴D，其中，圖7(a)是示出基片為多層結(jié)構(gòu)的方式的圖，圖7(b)是示出培養(yǎng)層為多層結(jié)構(gòu)的方式的圖。圖8是示出本發(fā)明涉及的微生物培養(yǎng)片的一個(gè)示例的圖，是示出在基片上形成有外周被框?qū)影鼑亩鄠€(gè)培養(yǎng)層，蓋板被固定在基片上的方式的平面圖(a)和截面圖(b)。圖9是示出本發(fā)明涉及的微生物培養(yǎng)片的一個(gè)示例的圖，是示出在連接設(shè)置有蓋板的基片上形成有外周被框?qū)影鼑呐囵B(yǎng)層的方式的展開(kāi)圖(a)、截面圖(b)以及示出上述蓋板折彎且培養(yǎng)層被覆蓋的方式的截面圖(C)。圖10是示出本發(fā)明涉及的微生物培養(yǎng)片的一個(gè)示例的圖，是示出蓋板由雙面膠帶固定設(shè)置于形成有培養(yǎng)層的基片上的方式的截面圖。圖11是示出本發(fā)明涉及的微生物培養(yǎng)片的一個(gè)示例的圖，是示出蓋板由雙面膠帶固定設(shè)置于形成有培養(yǎng)層和框?qū)拥幕系姆绞降慕孛鎴D。圖12是示出本發(fā)明涉及的微生物培養(yǎng)片的一個(gè)示例的外觀立體圖。圖13是示出本發(fā)明涉及的微生物培養(yǎng)片的一個(gè)示例，是在基片上形成有框?qū)拥耐庥^立體圖。圖14是示出實(shí)施例1的微生物培養(yǎng)片的菌落生長(zhǎng)狀態(tài)的圖。圖15是示出實(shí)施例6的微生物培養(yǎng)片的菌落生長(zhǎng)狀態(tài)的圖。
具體實(shí)施例方式下面，將詳細(xì)地說(shuō)明本發(fā)明的具體的實(shí)施方式，但是本發(fā)明不受以下實(shí)施方式的任何限定，可以在本發(fā)明的目的范圍內(nèi)進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兏鼇?lái)加以實(shí)施。[微生物培養(yǎng)片]本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片是一種具有基片、形成在上述基片上的培養(yǎng)層以及覆蓋上述培養(yǎng)層的蓋板的微生物培養(yǎng)片，其中，上述培養(yǎng)層是對(duì)含有選自由凝膠化劑、營(yíng)養(yǎng)成分、 顯色指示劑、選擇劑以及基質(zhì)組成的組中的至少一種的和聚乙烯吡咯烷酮的培養(yǎng)液進(jìn)行圖案形成而得到的層。本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片優(yōu)選在上述培養(yǎng)層的外周形成有包含疏水性樹(shù)脂的框?qū)印?另外，上述凝膠化劑優(yōu)選為高分子多糖類(lèi)。而且，上述凝膠化劑在上述培養(yǎng)基中的含量?jī)?yōu)選相對(duì)于上述聚乙烯吡咯烷酮100質(zhì)量份為100 600質(zhì)量份。而且，上述基片和/或上述蓋板優(yōu)選包含透明塑料片，上述蓋板可以被固定設(shè)置于基片。(1)微生物培養(yǎng)片的構(gòu)成圖1 (a)、(b)示出本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片的優(yōu)選實(shí)施方式的一個(gè)示例。圖1 (a)是平面圖，圖1(b)是圖1(a)的A-A’截面圖。圖1示出在方形的基片(10)的大致中央上形成培養(yǎng)層(30)且以覆蓋上述培養(yǎng)層 (30)的方式設(shè)置有方形的蓋板GO)的方式。在本發(fā)明中，具有培養(yǎng)層(30)被圖案形成于基片(10)這一特征，如圖2(a)的截面圖所示，基片(10)既可以是包含基片(11)與基片(13) 這2層的多層片，而且也可以是還層積有塑料以外的其他層的多層片。另外，如圖2(b)所示，培養(yǎng)層(30)可以由2層以上的多層構(gòu)成。
通過(guò)圖案形成而制作的培養(yǎng)層(30)的形狀并不限于圖1所示的圓形，也可以是正方形、長(zhǎng)方形、其他多角形、不定形。如圖3(a)的展開(kāi)圖所示，本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片可以在基片(10)和蓋板00) 這兩片上分別形成有培養(yǎng)層30和含有粘合劑成分、營(yíng)養(yǎng)成分以及其他成分的特定成分層 (30' ) ο例如，在培養(yǎng)層(30)與上述特定成分層(30’ )這兩層中含有凝膠化劑的情況下， 由于基片上的培養(yǎng)層(30)與設(shè)在蓋板00)上的特定成分層(30’ )被相對(duì)地配設(shè)，因而例如在基片(10)上的培養(yǎng)層(30)上接種了被檢液之后，如果用蓋板GO)覆蓋培養(yǎng)層(30)， 則上述被檢液被培養(yǎng)層(30)與特定成分層(30’ )吸水，進(jìn)而能夠在培養(yǎng)層(30)與特定成分層(30’ )這兩層上觀察微生物。另外，如果使培養(yǎng)層(30)中含有指示劑，則在滅菌處理時(shí)也會(huì)存在因指示劑而使著色明顯的菌，在那種情況下，通過(guò)使上述指示劑含有在特定成分層(30’ )中，能夠防止滅菌處理時(shí)的著色。圖3(b)是橫截面圖。另外，如圖4(a)的平面圖和圖4(b)的A_A’線截面圖所示，本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片可以是在基片(10)的大致中央形成有培養(yǎng)層(30)，在上述培養(yǎng)層的外周形成有圓形的框?qū)覱0)的培養(yǎng)片。采用框?qū)覱0)能夠更加可靠地限定接種到培養(yǎng)層(30)的被檢液的吸水范圍。此外，框?qū)覱0)的形狀不限于圓形，可以是方形、橢圓形、多角形、不定形等任一種，優(yōu)選以能夠確保接種到培養(yǎng)層(30)的被檢液的吸水范圍為規(guī)定面積的方式形成框?qū)印?另外，在該方式中，如圖5的截面圖所示，還可以在蓋板00)上，以與基片(10)上的培養(yǎng)層 (30)相對(duì)的方式形成有特定成分層(30’)。而且，如圖6所示，可以以與上述框?qū)覱0)相對(duì)的方式在蓋板GO)上形成有粘著層(50)。通過(guò)框?qū)覱0)與粘著層(50)緊貼，能夠更有效地防止培養(yǎng)層(30)的干燥或者污
^fe ο如圖7(a)的截面圖所示，在本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片中，即使在基片(10)的表面形成包含疏水性樹(shù)脂的框?qū)覱0)的情況下，基片(10)可以是包含基片(11)與基片(1 這2 層的多層片的方式，也可以是層積塑料以外的其他層的多層片。另外，如圖7(b)的截面圖所示，即使在包含疏水性樹(shù)脂的框?qū)覱0)形成在基片(10)的表面的情況下，培養(yǎng)層(30) 也可以由2層以上的多層構(gòu)成。另外，培養(yǎng)層(30)也可以在基片(10)上存在多個(gè)。圖8(a)、(b)示出多個(gè)培養(yǎng)層 (30)、包圍這些培養(yǎng)層外周的凸?fàn)畹?、包含疏水性?shù)脂的框?qū)覱0)以及在基片(10)的端部固定地設(shè)置了覆蓋上述培養(yǎng)層(30)的蓋板00)的方式。圖8 (a)是平面圖，圖8(b)是圖 8(a)的A-A’截面圖。在圖8中，蓋板00)采用的是為了能夠覆蓋培養(yǎng)層(30)且緊貼框?qū)覱0)的上部而形成有2個(gè)角部(C1、C2)的方式。此外，也可以與圖8不同地，以與形成在上述基片(10)上的培養(yǎng)層(30)相對(duì)的方式在蓋板G0)上形成有特定成分層(30’)。上述培養(yǎng)層(30)的等效圓的直徑優(yōu)選為20 80nm，更優(yōu)選為30 70nm。向微生物培養(yǎng)片滴下的被檢液一般為1ml，如果是上述范圍，則能夠?qū)Ρ粰z液進(jìn)行充分吸水。一般而言，框?qū)覱0)的高度被制作成比培養(yǎng)層的高度高100 1200 μ m，優(yōu)選高 200 1000 μ m,更優(yōu)選高300 800 μ m。如果是上述范圍，則在被檢液接種到培養(yǎng)層(30) 之后，覆蓋了蓋板G0)時(shí)，可以更可靠地防止被檢液的遺漏，另外，不會(huì)在培養(yǎng)層(30)與蓋板G0)之間形成空隙，被檢液可以快速地?cái)U(kuò)散至框?qū)?0)。另外，在被檢液被培養(yǎng)層吸水之后，也能夠保持培養(yǎng)層(30)與蓋板00)的緊貼性。由于可以立即覆蓋蓋板G0)而不等待接種后的被檢液被培養(yǎng)層吸水，因而能夠使接種時(shí)的作業(yè)效率提高?？?qū)拥膶挾炔⒉幌抻诰鶆虻膶挾?，而最?xì)部的寬度優(yōu)選為0. 5 5. 0mm，更優(yōu)選為 1. 0 3. 0mm。如果為上述范圍，則即使在培養(yǎng)層吸水而膨潤(rùn)的情況下，框?qū)拥男螤钜膊粫?huì)變形，進(jìn)而能夠使被檢液在規(guī)定區(qū)域擴(kuò)散。此外，框?qū)涌梢允菃我坏模硗?，也可以是在上述框?qū)拥耐鈧?cè)再形成框?qū)拥?重框的框?qū)印?2)基片在本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片中，由于在基片上對(duì)含有選自由凝膠化劑、營(yíng)養(yǎng)成分、顯色指示劑、選擇劑以及基質(zhì)組成的組的至少一種和聚乙烯吡咯烷酮的培養(yǎng)液進(jìn)行圖案形成，因而基片必須具有耐溶劑性、適于印刷性。另外，作為微生物培養(yǎng)片，也要求耐水性，并且也要求具有可以承受形成培養(yǎng)層時(shí)的干燥處理的耐熱性?；梢詾閱螌?，也可以為2 層以上的層積片。在基片為單層的情況下，能夠適當(dāng)使用例如聚酯、聚乙烯、聚丙烯、聚苯乙烯、聚碳酸酯、聚氯乙烯等塑料片。如果采用這些塑料薄片，由于透明性?xún)?yōu)異，因而能夠利用來(lái)自基片的透過(guò)光觀察微生物菌落，進(jìn)而可識(shí)別性提高。但是，能夠使用通過(guò)發(fā)泡而呈白色的薄片、被著色成任意一種顏色的薄片。根據(jù)培養(yǎng)菌的不同，不限于透明，有時(shí)通過(guò)著色易于對(duì)生長(zhǎng)發(fā)育的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，可以適當(dāng)選擇。另外，作為層積片，能夠例示出層積了 2種以上上述塑料片的層積片。另外，也可以適當(dāng)使用在上述塑料片上層積了紙基材的層積片、在紙基材上涂布了合成樹(shù)脂的層積片。作為這種層積片，例如，能夠例示出聚乙烯膜與紙基材的層積片。而且，以合成樹(shù)脂為主原料的合成紙也能夠用作基片。作為這種合成紙，能夠例示出日本YuPo公司生產(chǎn)的商品名“YuPo”或者東洋紡生產(chǎn)的“Crisper”等。為了使與上述培養(yǎng)層的緊貼性提高，在本發(fā)明中使用的基片可以是對(duì)圖案形成培養(yǎng)層的一側(cè)預(yù)先進(jìn)行了表面處理的基片。作為這種表面處理，包括電暈放電處理、臭氧處理、使用了氧氣或氮?dú)獾牡蜏氐入x子處理、輝光放電處理、使用化學(xué)藥品等進(jìn)行處理的氧化處理以及其他預(yù)處理等。另外，在本發(fā)明中使用的基片可以是預(yù)先涂布錨涂劑(anchor coating-agent), 進(jìn)行了表面處理的基片。作為這種錨涂劑，能夠例示出異氰酸酯類(lèi)(聚氨酯類(lèi))、聚乙烯亞胺類(lèi)、聚丁二烯類(lèi)、有機(jī)鈦類(lèi)以及其他錨涂劑。更優(yōu)選為以如下物質(zhì)為主要成分的例如，甲苯二異氰酸酯、二苯基亞甲基二異氰酸酯、多亞甲基多亞苯基多異氰酸酯(Polymethylene polyphenylene polyisocyanate)等芳香族聚異氰酸酯，或者通過(guò)六亞甲基二異氰酸酯、苯二甲基二異氰酸酯(xylylene diisocyanate)等脂肪族聚乙氰酸酯等多官能異氰酸酯與聚酯類(lèi)多元醇、聚醚類(lèi)多元醇、聚丙烯酸脂多元醇以及其他羥基含有化合物的反應(yīng)而得到的聚醚型聚氨酯類(lèi)樹(shù)脂、聚酯型聚氨酯類(lèi)樹(shù)脂、聚丙烯酸脂型聚氨酯類(lèi)樹(shù)脂。基片優(yōu)選平坦、沒(méi)有卷曲，其厚度沒(méi)有特別限制，通常為25 1500 μ m,優(yōu)選為 50 500 μ m。(3)培養(yǎng)層在本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片中，設(shè)在基片上的培養(yǎng)層是對(duì)含有選自由凝膠化劑、營(yíng)養(yǎng)成分、顯色指示劑、選擇劑以及基質(zhì)組成的組中的至少一種和聚乙烯吡咯烷酮的培養(yǎng)液進(jìn)行圖案形成而得到，將聚乙烯吡咯烷酮作為培養(yǎng)液的必需成分。(i)聚乙烯吡咯烷酮在本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片中，聚乙烯吡咯烷酮是培養(yǎng)液的必需成分，具有調(diào)整培養(yǎng)液的粘度的作用。如果采用聚乙烯吡咯烷酮，則通過(guò)調(diào)整溶劑中的濃度能夠容易地進(jìn)行粘度調(diào)整，因而能夠使選自由凝膠化劑、營(yíng)養(yǎng)成分、顯色指示劑、選擇劑以及基質(zhì)組成的組中的至少一種均勻地分散，另外，能夠僅在必要部分上進(jìn)行圖案形成，不會(huì)浪費(fèi)昂貴材料。 而且，如果圖案形成后除去溶劑，則由于聚乙烯吡咯烷酮成膜性高，因而能夠攝取凝膠化齊U、營(yíng)養(yǎng)成分而成膜。另外，由于與基材也具有良好的緊貼性，因而能夠不使用粘合劑地形成培養(yǎng)層，不會(huì)像現(xiàn)有微生物培養(yǎng)片那樣因粘合劑成分而影響微生物的發(fā)育。(ii)凝膠化劑在本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片中，在培養(yǎng)液中可以含有凝膠化劑。通過(guò)圖案形成含有凝膠化劑的培養(yǎng)液而形成的培養(yǎng)層，一旦接種被檢液，則會(huì)增粘或凝膠化，因而變?yōu)閷?duì)菌的培育有益的粘度。另外，由于在增粘后能夠與蓋板緊貼，因而能夠抑制培養(yǎng)時(shí)培養(yǎng)層的干燥。
作為這種凝膠化劑，能夠適當(dāng)使用高分子多糖類(lèi)，能夠例示出角叉膠(角叉菜)、 瓜爾豆膠、黃原膠(*夕1，xanthan gum)、羥乙基纖維素、羧甲基纖維素、刺槐豆膠、藻膠(藻朊)等。如果采用這些高分子多糖類(lèi)，則由于隨著被檢液的滴下而在水中增粘或者凝膠化，因而菌的發(fā)育良好，另外，由于透明性高，因而菌落的可識(shí)別性?xún)?yōu)異，并且，由于增粘而與蓋板緊貼，因而能夠抑制培養(yǎng)時(shí)的干燥。在本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片中，這些高分子多糖尤其能夠適當(dāng)使用瓜爾豆膠。這是因?yàn)椋蠣柖鼓z在低濃度下就呈現(xiàn)出極高的粘度， 因此少量就能夠形成適于菌發(fā)育的環(huán)境。瓜爾豆膠由一年生的豆科植物、瓜爾豆種子的胚乳部制造。(iii)營(yíng)養(yǎng)成分在本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片中，在培養(yǎng)液中可以含有營(yíng)養(yǎng)成分。作為營(yíng)養(yǎng)成分，例如，如果是一般生菌檢查用，則可以使用酵母提取物/蛋白胨/葡萄糖混合物、肉提取物/ 蛋白胨混合物、蛋白胨/大豆胨/葡萄糖混合物等或者在它們中添加了磷酸氫二鉀和/或氯化鈉的混合物。如果是大腸桿菌、大腸菌群檢查用，則可以使用去氧膽酸鈉/蛋白胨/檸檬酸鐵銨/氯化鈉/磷酸氫二鉀/乳糖/蛋白胨/乳糖/磷酸氫二鉀等。如果是葡萄球菌用，則可以使用肉提取物/蛋白胨/氯化鈉/甘露糖醇/卵黃混合物、蛋白胨/肉提取物/ 酵母提取物/丙酮酸鈉/甘氨酸/氯化鋰/亞碲酸鹽卵黃液混合物等。如果是弧菌用，則可以使用酵母提取物/蛋白胨/蔗糖/硫代硫酸鈉/檸檬酸鈉/膽酸鈉/檸檬酸鐵/氯化鈉/牛膽汁等。如果是腸球菌用，則可以使用牛腦提取物/心臟提取物/蛋白胨/葡萄糖 /磷酸氫二鉀/氮化鈉等。如果是真菌用，則可以使用蛋白胨/葡萄糖混合物、酵母提取物 /葡萄糖混合物、馬鈴薯提取物/葡萄糖混合物等。在本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片中，能夠根據(jù)所要發(fā)育的微生物的不同，從這些物質(zhì)中選擇一種或一種以上的營(yíng)養(yǎng)成分來(lái)混合使用。此夕卜，在培養(yǎng)層中不含營(yíng)養(yǎng)成分時(shí)或者營(yíng)養(yǎng)成分不足時(shí)，可以向被檢液添加營(yíng)養(yǎng)成分，進(jìn)而使微生物生長(zhǎng)發(fā)育。(iv)顯色指示劑、選擇劑、基質(zhì)等其他成分在本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片中，也可以在培養(yǎng)液中含有顯色指示劑、選擇劑、基質(zhì)等其他成分。顯色指示劑通過(guò)與在培養(yǎng)過(guò)程中發(fā)育的微生物代謝而產(chǎn)出的特異物質(zhì)反應(yīng)、識(shí)別 PH變化、與酶反應(yīng)等而顯色，進(jìn)而使菌落著色，因而具有使菌落數(shù)的計(jì)數(shù)變得極其容易的效果。作為這種顯色指示劑，具體而言，包括氯化三苯基四唑(鐺)(以下表示為T(mén)TC)、對(duì)甲苯基四唑紅、四唑紫、對(duì)甲苯基四唑藍(lán)( 歹卜1J >歹卜，/ 1J々A —)等四唑鹽或者中性紅混合物；酚紅、溴百里酚藍(lán)、百里酚藍(lán)混合物等PH指示劑。在培養(yǎng)液中可以含有抑制檢測(cè)目標(biāo)以外的微生物生長(zhǎng)發(fā)育的選擇劑。作為這種選擇劑，可以使用抗生素、合成抗菌劑等抗生劑，色素、表面活性劑、無(wú)機(jī)鹽等。作為抗生素，能夠例示出甲氧西林、頭孢美唑、頭孢克肟、頭孢他啶、頭孢磺啶、桿菌肽、多粘菌素B、利福平、新生霉素、黏菌素、林可霉素、氯霉素、四環(huán)素、鏈霉素等，作為合成抗菌劑，能夠例示出 磺胺劑、萘啶酮酸、喹乙醇等。另外，作為色素，能夠例示出具有抑菌或者殺菌作用的結(jié)晶紫、亮綠、孔雀綠、亞甲藍(lán)等。另外，作為表面活性劑，能夠例示出=Tergitol 7、十二烷基硫酸鹽、月桂基硫酸鹽等。另外，作為無(wú)機(jī)鹽類(lèi)，能夠例示出亞硒酸鹽、亞碲酸鹽、亞硫酸鹽、 氮化鈉、氯化鋰、草酸鹽、高濃度的氯化鈉等。除這些以外，還能夠使用?；悄懰猁}、甘氨酸、 膽汁粉、膽汁酸鹽、脫氧膽酸鹽等。這些成分既可以以粉末形式添加，也可以將它們?nèi)芙庥谌軇┲螅缁旌系缴鲜鼍垡蚁┻量┩橥拇既芤褐?，作為培養(yǎng)液。此外，由于顯色指示劑的種類(lèi)不同，也有在滅菌處理時(shí)著色明顯的顯色指示劑，也可以使培養(yǎng)層中不含顯色指示劑，而是在被檢液中含有顯色指示劑，使其顯色。另外，在本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片中，不限于由1層形成培養(yǎng)層的情況，可以由2層以上的多層構(gòu)成。例如，可以由在聚乙烯吡咯烷酮溶液⑴中含有凝膠化劑(ii)的培養(yǎng)液形成第1培養(yǎng)層，在其上由在聚乙烯吡咯烷酮溶液(i)中含有凝膠化劑(ii)和營(yíng)養(yǎng)成分 (iii)的培養(yǎng)液形成第2培養(yǎng)層，作為在本發(fā)明中所要使用的培養(yǎng)層。另外，可以?xún)H在第1 培養(yǎng)層中混合凝膠化劑，也可以由在聚乙烯吡咯烷酮溶液(i)中含有凝膠化劑(ii)的培養(yǎng)液形成第1培養(yǎng)層，在其上由在聚乙烯吡咯烷酮溶液(i)中含有營(yíng)養(yǎng)成分(iii)的培養(yǎng)液形成第2培養(yǎng)層，作為在本發(fā)明中所要使用的培養(yǎng)層。另外，根據(jù)顯色指示劑、選擇劑的組合不同，有時(shí)由于混合而發(fā)生反應(yīng)，通過(guò)使它們含有在不同的層中能夠防止混合反應(yīng)。另外，通過(guò)將顯色指示劑形成在最上層，能夠使菌落的可識(shí)別性提高。因此，在例如營(yíng)養(yǎng)成分中含有形成混合反應(yīng)的成分A與成分B的情況下，可以通過(guò)層積從聚乙烯吡咯烷酮溶液(i) +凝膠化劑(ii)+營(yíng)養(yǎng)成分(iii)中除去了 A 成分的第1培養(yǎng)層與從聚乙烯吡咯烷酮溶液(i) +凝膠化劑(ii) +顯色指示劑(iv) +營(yíng)養(yǎng)成分(iii)中除去了 B成分的第2培養(yǎng)層這2層來(lái)作為培養(yǎng)層，另外，可以通過(guò)依次層積從聚乙烯吡咯烷酮溶液(i) +凝膠化劑(ii) +營(yíng)養(yǎng)成分(iii)中除去了 A成分的第1培養(yǎng)層、 從聚乙烯吡咯烷酮溶液(i) +凝膠化劑(ii) +營(yíng)養(yǎng)成分(iii)中除去了 B成分的第2培養(yǎng)層與包含聚乙烯吡咯烷酮溶液(i) +凝膠化劑(ii) +顯色指示劑(iv)的第3培養(yǎng)層這3層來(lái)作為培養(yǎng)層。另外，混合反應(yīng)不限于含有在營(yíng)養(yǎng)成分中的情況，也有時(shí)因與選擇劑、顯色指示劑的關(guān)系而發(fā)生混合反應(yīng)。不論在哪一種情況下，通過(guò)將成分A與B分開(kāi)到不同的層中，能夠避免混合反應(yīng)。在本發(fā)明中，在由多層構(gòu)成培養(yǎng)層的情況下，構(gòu)成多層結(jié)構(gòu)的任一培養(yǎng)層只要是對(duì)含有選自由凝膠化劑、營(yíng)養(yǎng)成分、顯色指示劑、選擇劑以及基質(zhì)組成的組中的至少一種和聚乙烯吡咯烷酮的培養(yǎng)液進(jìn)行圖案形成而得到的就可以，而其他層的組成并不限定于上述，圖案形成的方法也不限。(ν)圖案形成本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片中的培養(yǎng)層是上述培養(yǎng)液被圖案形成在上述基片上而成。 在本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片中，由于被圖案形成有培養(yǎng)層，因而在被檢液滴下后，迅速地覆蓋蓋板，從而使被檢液自然地在一定范圍擴(kuò)散，且操作性?xún)?yōu)異。在本發(fā)明中，所謂“圖案形成”， 是指在上述基片上，將上述培養(yǎng)液印刷、涂布、涂工、噴霧等為預(yù)定的形狀，而其方法并無(wú)特別限定。因此，在圖案形成中，能夠使用絲網(wǎng)印刷、凹版印刷、凸版印刷、轉(zhuǎn)印印刷、柔板印刷以及其他印刷；采用分配器或者噴墨等的涂布、使用刮棒等進(jìn)行涂布的刮棒涂布或者刮刀涂布、模具涂布等涂工；噴涂方式等噴霧以及其他方法。(4)蓋板在本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片中，蓋板優(yōu)選被固定設(shè)置于基片。蓋板具有防止由培養(yǎng)中的落下菌等引起的污染同時(shí)防止培養(yǎng)層的水分蒸發(fā)的作用。蓋板在具有防水性、水蒸氣不透過(guò)性的同時(shí)，為了在微生物培養(yǎng)后能夠通過(guò)蓋板對(duì)菌落進(jìn)行觀察和計(jì)數(shù)，因此優(yōu)選透明的，例如，能夠使用在上述基片中列舉的聚乙烯、聚丙烯等聚烯烴；聚酯、聚酰胺、聚苯乙烯、聚碳酸酯、聚氯化乙烯等塑料片。在本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片中，如果上述基片和覆蓋膜透明，則也能夠用來(lái)自微生物培養(yǎng)片背面的投射光觀察，另外，也能夠用從側(cè)面射入的入射光來(lái)觀察。即，從蓋板一側(cè)和基片一側(cè)都能夠?qū)溥M(jìn)行觀察和計(jì)數(shù)，因而觀察方法和計(jì)測(cè)方法的選擇范圍變寬。此外，如果考慮到蓋板的開(kāi)閉等操作性，尤其優(yōu)選聚酯膜、聚烯烴膜。另外，在基片上，可以進(jìn)行在基片項(xiàng)中記載的電暈放電處理等表面處理。此外，根據(jù)所培養(yǎng)的微生物的種類(lèi)不同，蓋板優(yōu)選具有適當(dāng)?shù)臍怏w透過(guò)性，主要是氧透過(guò)性或氧不透過(guò)性，考慮到這一點(diǎn)進(jìn)行選定即可。蓋板優(yōu)選在為了接種被檢液而從基片上拿起時(shí)可以確保適度的柔軟性。因此，蓋板的厚度優(yōu)選10 200 μ m左右，更優(yōu)選20 70 μ m左右。此外，蓋板雖然是什么樣的形狀都可以，但為了防止雜菌的進(jìn)入，必須形成為能夠覆蓋培養(yǎng)層的比培養(yǎng)層大的尺寸。在本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片中，在蓋板上，可以在與形成于基片的培養(yǎng)層相對(duì)的位置上具有通過(guò)涂布特定成分溶液而成的特定成分層，該特定成分溶液是在溶解或者分散有粘合劑樹(shù)脂的液體中混合有選自由凝膠化劑、營(yíng)養(yǎng)成分、顯色指示劑、選擇劑以及基質(zhì)組成的組中的一種以上而成。如上所述，在本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片中，形成于基片的培養(yǎng)層是對(duì)含有聚乙烯吡咯烷酮和凝膠化劑等的培養(yǎng)液進(jìn)行圖案形成而得到的，可以是不含有顯色指示劑的方式。在這種情況下，雖然也能夠向被檢液中添加顯色指示劑來(lái)培養(yǎng)，但如果在蓋板上對(duì)包含粘合劑溶液與TTC試劑等顯色指示劑的特定成分液進(jìn)行圖案形成而形成特定成分層，則能夠省去向被檢液中添加顯色指示劑的麻煩，并且利用粘合劑的緊貼性，也能夠確?？勺R(shí)別性。作為粘合劑，能夠使用聚乙烯亞胺或者聚氧化乙烯(聚乙烯氧化物)、丙烯酸類(lèi)聚合物等水溶性或者溶解于醇的樹(shù)脂等。如果能夠發(fā)揮混合在特定成分層中的成分的功能，則也可以使用疏水性粘合劑的溶解液或者分散液等。蓋板上的上述特定成分層只要至少存在于與基片的培養(yǎng)層相對(duì)的位置即可，也可
12以是涂布在蓋板的整個(gè)面。這是因?yàn)?，粘合劑溶液便宜，顯色指示劑的使用量少。另外，特定成分層也可以含有凝膠化劑。上述特定成分層不限于1層的情況，可以是2層以上的多層。在上述特定成分層的形成中，能夠使用絲網(wǎng)印刷、凹版印刷、凸版印刷、轉(zhuǎn)印印刷、 柔板印刷以及其他印刷；采用分配器或者噴墨等的涂布、使用刮棒等進(jìn)行涂布的刮棒涂布或者刮刀涂布、模具涂布等涂工；噴涂方式等的噴霧以及其他方法。此外，也可以進(jìn)行圖案形成。在本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片中，蓋板不限于固定設(shè)置于微生物培養(yǎng)片的情況。因此， 可以使用另外準(zhǔn)備的蓋板來(lái)覆蓋接種有被檢液的培養(yǎng)層。但是，如果是使蓋板預(yù)先固定設(shè)置于基片的方式，則操作容易。此外，在基片上尚未印刷方格印刷花紋的情況下，可以在蓋板上預(yù)先用不溶于水且不會(huì)對(duì)微生物的生長(zhǎng)發(fā)育帶來(lái)影響的油墨印刷方格印刷花紋。印刷的版式與基片同樣， 從著色劑、樹(shù)脂、溶劑等選擇范圍廣的方面考慮優(yōu)選凹版印刷。關(guān)于方格的大小，Icm見(jiàn)方左右是適當(dāng)?shù)摹?5)框?qū)釉诒景l(fā)明的微生物培養(yǎng)片中，優(yōu)選在上述培養(yǎng)層的外周形成有包含疏水性樹(shù)脂的框?qū)?。如果形成有框?qū)?，則在被檢液接種到培養(yǎng)層并覆蓋了蓋板的情況下，被檢液迅速地?cái)U(kuò)散至框?qū)?，因而能夠覆蓋蓋板而不等待被檢液被培養(yǎng)層吸水，能夠在短時(shí)間內(nèi)進(jìn)行接種操作。另外，通過(guò)框?qū)幽軌蚋煽康胤乐贡粰z液的遺漏，進(jìn)而能夠提高接種時(shí)的作業(yè)效率。在培養(yǎng)層中含有凝膠化劑的情況下，被檢液被框?qū)觾?nèi)側(cè)的培養(yǎng)層吸水，凝膠化劑增粘，進(jìn)而能夠利用培養(yǎng)層與蓋板的緊貼性來(lái)防止培養(yǎng)層的干燥。另外，即使在培養(yǎng)層中不含凝膠化劑的情況下，由于聚乙烯吡咯烷酮溶解、增粘，利用培養(yǎng)層與蓋板的緊貼性能夠防止培養(yǎng)層的干燥。如果培養(yǎng)層與蓋板的緊貼性?xún)?yōu)異，則沒(méi)有必要在蓋板上形成用于菌落形成的層等，能夠確保菌落優(yōu)異的可識(shí)別性?？?qū)拥膶挾炔⒉幌薅ㄓ诰鶆虻膶挾龋罴?xì)部的寬度優(yōu)選為0. 5 5. 0mm，更優(yōu)選為 1. 0 3. 0mm。如果為上述范圍，則即使在培養(yǎng)層吸水而膨潤(rùn)的情況下，框?qū)拥男螤钜膊粫?huì)變形，進(jìn)而能夠使被檢液在規(guī)定的區(qū)域擴(kuò)散。在本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片中，形成在基片上的框?qū)拥母叨戎谱鞯帽扰囵B(yǎng)層的高度高100 1200 μ m,更優(yōu)選高200 1000 μ m,尤其優(yōu)選高300 800 μ m。如果低于100 μ m, 就不能夠在擴(kuò)散后抑制被檢液的擴(kuò)散，有時(shí)發(fā)生泄漏。另一方面，如果超過(guò)1200 μ m,則在被檢液接種時(shí)，會(huì)在培養(yǎng)層與蓋板之間產(chǎn)生過(guò)度的空間部，因而難以確保與蓋板的緊貼性，在培養(yǎng)中培養(yǎng)層容易干燥，或者，即使蓋板與培養(yǎng)層暫且緊貼的情況下，在被檢液被培養(yǎng)層吸水之后，由于過(guò)度的空間，蓋板從培養(yǎng)層剝離，有可能引起培養(yǎng)層干燥。如果為上述范圍，則能夠一邊使培養(yǎng)層對(duì)被檢液進(jìn)行吸水，一面使被檢液擴(kuò)散到整個(gè)面，并且能夠更可靠地防止遺漏，也能夠確保與蓋板的緊貼性。另外，上述框?qū)有纬稍诨?。如果在培養(yǎng)層上形成框?qū)?，則在培養(yǎng)層由于被檢液的吸水而膨潤(rùn)變?yōu)槟z狀時(shí)，框?qū)佑锌赡茏冃?，因而?yōu)選將其直接形成在基片上。如果框?qū)有纬稍诨?，則作業(yè)的操作性和穩(wěn)定性?xún)?yōu)異。在本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片中，由于框?qū)邮怯墒杷詷?shù)脂形成的，框?qū)蛹炔晃?，也不溶解，能夠防止被檢液的遺漏。作為形成框?qū)拥氖杷詷?shù)脂，并沒(méi)有特別限定，能夠適當(dāng)使用UV固化樹(shù)脂、熱熔樹(shù)脂、熱發(fā)泡油墨或者UV發(fā)泡劑等，這些樹(shù)脂可以被著色。作為UV固化樹(shù)脂，能夠例示出對(duì)于自由基型，可以例舉丙烯酸酯類(lèi)、不飽和聚酯類(lèi)；對(duì)于陽(yáng)離子型，可以例舉環(huán)氧丙烯酸酯類(lèi)、氧雜環(huán)丁烷類(lèi)、乙烯基醚類(lèi)等，但并不限定于這些。另外，作為熱熔樹(shù)脂，能夠適當(dāng)使用軟化點(diǎn)溫度120°C以下、更優(yōu)選100°C以下的樹(shù)脂。如果超過(guò)120°C，則基片有可能卷曲。作為在本發(fā)明中能夠適當(dāng)使用的熱熔樹(shù)脂，可以列舉出聚氨酯類(lèi)、聚酰胺類(lèi)、聚烯烴類(lèi)、聚酯類(lèi)、乙烯醋酸乙烯酯類(lèi)、苯乙烯丁二烯橡膠類(lèi)或者聚氨酯橡膠類(lèi)等合成橡膠類(lèi)，但并不限定于這些。作為疏水性樹(shù)脂，能夠適當(dāng)使用熱發(fā)泡油墨或者UV發(fā)泡劑等。例如，能夠使用作為粘合劑的聚氨酯類(lèi)樹(shù)脂、聚酰胺類(lèi)樹(shù)脂、聚氯乙烯類(lèi)樹(shù)脂、聚丙烯酸酯類(lèi)樹(shù)脂、聚酯類(lèi)樹(shù)脂；氯化聚丙烯等聚烯烴類(lèi)樹(shù)脂以及使用了氯化橡膠或環(huán)化橡膠等橡膠類(lèi)的油墨。這些油墨與其說(shuō)僅是疏水性的，不如說(shuō)是防水性更合適，根據(jù)這一點(diǎn)，在上述樹(shù)脂中添加了聚硅氧烷類(lèi)或者蠟類(lèi)的油墨更優(yōu)選。尤其是用于框?qū)拥氖杷詷?shù)脂是疏水性、防水性的同時(shí)，還必須將涂膜的厚度變厚，在上述的樹(shù)脂中添加現(xiàn)有公知的發(fā)泡劑等以作為發(fā)泡油墨使用是有效的。作為這種UV發(fā)泡油墨，能夠例示出如下這樣的紫外線固化型發(fā)泡油墨在至少包括丙烯酸酯活性稀釋劑或者甲基丙烯酸酯活性稀釋劑等活性稀釋劑；聚氨酯丙烯酸酯光聚合性低聚物、聚酯丙烯酸酯光聚合性低聚物、環(huán)氧丙烯酸酯光聚合性低聚物、丙烯酸類(lèi)光聚合性低聚物、特殊光聚合性低聚物等光聚合性低聚物以及光聚合引發(fā)劑的紫外線固化型油墨中含有無(wú)機(jī)發(fā)泡劑、有機(jī)發(fā)泡劑、液體發(fā)泡劑等發(fā)泡劑而形成。此外，在上述疏水性樹(shù)脂中，作為添加劑，可以添加消泡劑、聚合抑制劑、顏料分散劑等。另外，可以在不足15質(zhì)量％的范圍內(nèi)含有通常使用的著色顏料，而如果超過(guò)15質(zhì)量％，則由于可能抑制發(fā)泡，因而往往不優(yōu)選。在本發(fā)明中，作為疏水性樹(shù)脂，雖然上述全都能夠適當(dāng)使用，但UV固化樹(shù)脂或者熱熔樹(shù)脂尤其適合。其理由是，框?qū)拥男纬杀仨毦哂幸欢ǜ叨鹊膱D案形成，這2種樹(shù)脂在非溶劑系統(tǒng)的狀態(tài)下容易通過(guò)基于分配器(dispenser)等的涂布進(jìn)行形狀加工，然后，再通過(guò)光照射或者冷卻容易使其固化，僅此即可圖案形成。另外，在本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片中，可以將疏水性材料的中空品粘合在培養(yǎng)層的外周而形成框?qū)印Ａ硗?，也有使用壓花加工品作為基片的方法。例如，如果在基片上形成了框?qū)拥男螤顬橥範(fàn)畹膲夯庸て?，則可以在上述凸?fàn)畹膬?nèi)側(cè)形成培養(yǎng)層，另一方面，形成培養(yǎng)層的地方以凹部方式形成，由此以凸?fàn)罘绞叫纬傻氖Ｓ嗖糠帜軌蛴米骺驅(qū)?。另外，在使用厚的疏水性基材作為基片，并將形成培養(yǎng)層的部分削成凹狀，進(jìn)而將剩余部分作為框?qū)拥姆椒ㄖ?，如果將凸?fàn)钚纬蔀榭虻男螤?，并在該凸?fàn)畹膬?nèi)側(cè)形成培養(yǎng)層， 則能夠?qū)⑸鲜鐾範(fàn)钣米骺驅(qū)?。但是，并不限定于這些方法。(6)粘著層在本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片中，能夠在基片、蓋板上形成粘著層。這樣的粘著層以固定覆蓋了培養(yǎng)層的蓋板并防止培養(yǎng)層的水分蒸發(fā)或者污染為目的而配設(shè)，只要能夠密封基片，可以使用任何種類(lèi)的粘著劑。如果考慮到作業(yè)性，則優(yōu)選以基片與蓋板能夠再粘合的程度具有弱的粘著力的粘著劑。例如，優(yōu)選橡膠類(lèi)粘著劑或丙烯酸類(lèi)粘著劑，尤其優(yōu)選使用再
14剝離型和微粘著型的丙烯酸類(lèi)粘著劑。具體而言，能夠使用通過(guò)以下方式得到的粘著劑使含有羧基或者羥基、氨基等官能團(tuán)的單體2 15質(zhì)量份與丙烯酸丁酯、2-乙基己基丙烯酸酯等碳原子數(shù)為2 12的丙烯酸酯100質(zhì)量份共聚，在所得到的聚合物中作為粘著賦予劑而添加松香、二甲苯樹(shù)脂、苯酚樹(shù)脂等，再利用三聚氰胺類(lèi)、異氰酸酯類(lèi)、環(huán)氧化合物等進(jìn)行交聯(lián)。另外，粘著層是任何形狀都可以，優(yōu)選以能夠在基片與蓋板的粘合部分沒(méi)有間隙地粘合的方式配設(shè)。粘著層的厚度沒(méi)有特別限制，只要能夠確保蓋板可以覆蓋形成于基片的培養(yǎng)層且與基片粘合的粘著性就可以。在本發(fā)明中，如果能夠用蓋板密封培養(yǎng)層，則不限于粘著層，也可以是使用握持部件、或者配設(shè)鎮(zhèn)石的方法等。(7)方格印刷層在本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片上，可以層積有方格印刷層。從著色劑、樹(shù)脂、溶劑等的選擇范圍廣的方面考慮，方格印刷優(yōu)選凹版印刷等。關(guān)于方格的大小，Icm見(jiàn)方左右是適當(dāng)?shù)?。如上所述，這種方格印刷層可以形成在基片或者蓋板上，而在本發(fā)明中，在使用將紙基材層積于塑料薄片而得到的層積片作為上述基片的情況下，可以在這種紙基材上形成方格印刷層。(8)微生物培養(yǎng)組件在本發(fā)明中，能夠組合上述微生物培養(yǎng)片與含有特定成分的被檢液作為微生物培養(yǎng)組件。如上所述，在本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片中，形成在基片上的培養(yǎng)層是將含有凝膠化齊U、營(yíng)養(yǎng)成分、顯色指示劑、選擇劑和基質(zhì)等至少一種和聚乙烯吡咯烷酮的培養(yǎng)液通過(guò)印刷或者涂布等進(jìn)行圖案形成而得的層，在這種情況下，能夠由凝膠化劑、營(yíng)養(yǎng)成分、顯色指示齊U、選擇劑以及基質(zhì)中向被檢液添加上述培養(yǎng)層中不含有的成分進(jìn)行培養(yǎng)。尤其是，在含有滅菌處理及其他工序中易于受到變質(zhì)、變色、分解等的成分的情況下，是有效的。作為能夠用于這種微生物組件的微生物培養(yǎng)片，可以是在上述蓋板上形成有特定成分層的微生物培養(yǎng)片。能夠向被檢液添加在特定成分層或者形成在基片上的培養(yǎng)層中不含有的成分進(jìn)行培養(yǎng)。(9)制造方法⑴培養(yǎng)層的形成在本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片中，只要能夠在上述基片上形成對(duì)含有選自由凝膠化齊U、營(yíng)養(yǎng)成分、顯色指示劑、選擇劑以及基質(zhì)組成的組中的至少一種和聚乙烯吡咯烷酮的培養(yǎng)液進(jìn)行圖案形成而得的培養(yǎng)層，其制造方法不限。另外，只要是能夠?qū)⑸鲜雠囵B(yǎng)液涂布為基片的預(yù)定形狀的方法，則圖案形成的方法沒(méi)有特別限制，可以是上述印刷、涂布、涂工、噴霧等任意方法。優(yōu)選，制備使聚乙烯吡咯烷酮的醇溶液含有選自由凝膠化劑、營(yíng)養(yǎng)成分、顯色指示劑、選擇劑以及基質(zhì)組成的組中的至少一種的培養(yǎng)液，在將該培養(yǎng)液圖案形成在基片上之后，除去上述培養(yǎng)液中所含有的上述醇溶液，形成培養(yǎng)層。在本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片的制造方法中，從基片與培養(yǎng)層的緊貼性、圖案形成的容易程度等理由來(lái)說(shuō)，優(yōu)選使用聚乙烯吡咯烷酮的醇溶液。作為醇，能夠適當(dāng)使用碳原子數(shù)1 5的醇。例如，能夠使用甲醇、乙醇、異丙醇、丁醇等1種或者2種以上的混合液。在這些醇中，優(yōu)選甲醇、乙醇、異丙醇?，F(xiàn)有技術(shù)，為了溶解營(yíng)養(yǎng)成分而一直使用水或者甲苯等高沸點(diǎn)溶劑，但為了除去溶劑必須在高溫下加熱，這可能引起培養(yǎng)層中所含的成分或者基材的熱分解。另外，在溶劑除去中必須使用過(guò)量的熱能，進(jìn)而成為成本上升的一個(gè)原因，而且， 由于溶劑除去時(shí)間也變長(zhǎng)，因而也成為生產(chǎn)效率下降的一個(gè)原因。在本發(fā)明中，使用聚乙烯吡咯烷酮，而作為其溶劑，使用低沸點(diǎn)的上述醇，從而能夠避免培養(yǎng)液中所含有的成分或者基材的熱變性，以及能夠提高生產(chǎn)效率。此外，在不損害上述宗旨的范圍內(nèi)，也能夠使用在醇中混合了三氯甲烷等副溶劑的溶劑。之所以將聚乙烯吡咯烷酮作為培養(yǎng)液的必需成分，是因?yàn)橥ㄟ^(guò)如上所述地調(diào)整濃度，能夠使選自由凝膠化劑、營(yíng)養(yǎng)成分、顯色指示劑、選擇劑以及基質(zhì)組成的組中的至少一種均勻地分散，而且，由于能夠容易調(diào)整粘度，因而能夠采用所得到的培養(yǎng)液進(jìn)行圖案形成。此外，由于聚乙烯吡咯烷酮具有優(yōu)異的成膜性和與基材的緊貼性，因而能夠在基片上形成培養(yǎng)層而不使用粘合劑，進(jìn)而能夠避免粘合劑對(duì)微生物生長(zhǎng)發(fā)育的阻礙。醇與聚乙烯吡咯烷酮的比例，相對(duì)于聚乙烯吡咯烷酮100質(zhì)量份，溶劑為100 10000質(zhì)量份，更優(yōu)選為300 2000質(zhì)量份，尤其優(yōu)選為900 1400質(zhì)量份。這是因?yàn)?，如果超過(guò)10000質(zhì)量份，則凝膠化劑等的分散性將顯著下降，相反，如果低于100質(zhì)量份，則培養(yǎng)液的粘度上升，對(duì)圖案形成的適應(yīng)性下降。在本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片中，如果構(gòu)成培養(yǎng)液的凝膠化劑能夠進(jìn)行圖案形成，則就沒(méi)有必要將其溶解于上述聚乙烯吡咯烷酮的醇溶液中。因而，在本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片的制造方法中，能夠以粉末方式添加凝膠化劑。以粉末方式添加時(shí)的凝膠化劑的平均粒徑為5 500 μ m，更優(yōu)選為10 200 μ m。這是因?yàn)椋绻骄皆谏鲜龇秶鷥?nèi)，則分散性?xún)?yōu)異。如果超過(guò)500μπι，則分散性下降，有時(shí)圖案形成適應(yīng)性受到損害。但是，也可以將它們?nèi)芙庥谌軇┲校倩旌系缴鲜鼍垡蚁┻量┩橥拇既芤褐?，以作為培養(yǎng)液。凝膠化劑在上述培養(yǎng)液中的混合量相對(duì)于聚乙烯吡咯烷酮100質(zhì)量份為100 600質(zhì)量份，更優(yōu)選為250 400質(zhì)量份。如果凝膠化劑的混合量在上述范圍內(nèi)，則由于被檢液滴下時(shí)的水分而增粘或者凝膠化，進(jìn)而能夠形成有益于菌育成的粘度。如果低于100 質(zhì)量份，則有時(shí)培養(yǎng)層的粘度不足，另一方面，如果超過(guò)600質(zhì)量份，則培養(yǎng)層就會(huì)變硬，有時(shí)菌的發(fā)育降低。此外，由于聚乙烯吡咯烷酮的皮膜有時(shí)硬且脆，因而可以添加可塑劑。作為能夠添加的可塑劑，能夠例示出醚酯衍生物類(lèi)可塑劑、甘油或者甘油衍生物類(lèi)可塑劑、丙二醇或者二醇衍生物類(lèi)可塑劑、二醇醚衍生物類(lèi)可塑劑、多羥基羧酸衍生物類(lèi)可塑劑、苯二甲酸衍生物類(lèi)可塑劑等，但并不限于這些。在本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片的制造方法中，使用上述培養(yǎng)液進(jìn)行圖案形成，尤其是， 能夠使用上述培養(yǎng)液，通過(guò)分配器涂布等適當(dāng)?shù)匦纬膳囵B(yǎng)層。如上所述，培養(yǎng)層可以是2層以上的多層。例如，只要是將在聚乙烯吡咯烷酮的醇溶液中分散有凝膠化劑和營(yíng)養(yǎng)成分的粉末的培養(yǎng)液圖案形成于基片，然后，通過(guò)圖案形成來(lái)層積在聚乙烯吡咯烷酮的醇溶液中分散或溶解了顯色指示劑的培養(yǎng)液，則能夠形成進(jìn)一步提高了菌落可識(shí)別性的培養(yǎng)層。此外，在本發(fā)明中，在培養(yǎng)層為由第1培養(yǎng)層與第2培養(yǎng)層構(gòu)成的2層時(shí)，可以采用不同的方法進(jìn)行圖案形成。例如，用分配器涂布以對(duì)第1培養(yǎng)層1進(jìn)行圖案形成，對(duì)于第2培養(yǎng)層的圖案形成，可以使用噴霧等其他方法。在本發(fā)明中，在將培養(yǎng)液圖案形成在基片上之后，除去上述培養(yǎng)液中所含有的醇。 已經(jīng)清楚，通過(guò)使用在聚乙烯吡咯烷酮中混合有凝膠化劑等的培養(yǎng)層，則能夠與瓊脂培養(yǎng)基同樣地對(duì)微生物菌落進(jìn)行觀察和計(jì)數(shù)，并且可識(shí)別性極其地優(yōu)異。由于凝膠化劑是水溶性的，因而一般是在被制備為水溶液之后涂布在基材上，但是在除去水時(shí)必須進(jìn)行高溫且長(zhǎng)時(shí)間的加熱處理，并且由于在制備水溶液時(shí)粘度高，因而有時(shí)混入氣泡等。根據(jù)本發(fā)明， 由于使凝膠化劑等粉末分散在聚乙烯吡咯烷酮的醇溶液中，因而能夠避免氣泡的混入，由于沒(méi)有使用水，因而能夠在低溫且短時(shí)間內(nèi)進(jìn)行干燥。另外，凝膠化劑等僅僅分散在聚乙烯吡咯烷酮的醇溶液中而尚未溶解，因而能夠防止培養(yǎng)液的粘度上升，由此能夠順利地進(jìn)行圖案形成。而且，在所得到的培養(yǎng)層中，由于上述成分被聚乙烯吡咯烷酮覆蓋，因而如果接種被檢液，則聚乙烯吡咯烷酮立即進(jìn)行溶解，上述成分進(jìn)行溶解或吸水。因此，能夠在被檢液接種后，立即用蓋板覆蓋。另外，在聚乙烯吡咯烷酮溶解或者含有凝膠化劑的情況下，上述成分增粘而與蓋板緊貼，因而能夠防止干燥，同時(shí)還能夠確保極其優(yōu)異的可識(shí)別性。在本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片中，在蓋板上形成特定成分層時(shí)，可以涂布在粘合劑溶液中含有選自由凝膠化劑、營(yíng)養(yǎng)成分、顯色指示劑、選擇劑以及基質(zhì)所組成的組中的1種以上的特定成分溶液，形成特定成分層。涂布方法可以是全面涂布，也可以是圖案形成。在進(jìn)行圖案形成時(shí)，與培養(yǎng)層的形成同樣，可以是印刷、涂布、涂工、噴霧等。培養(yǎng)層的干燥只要能夠除去培養(yǎng)液中所含有的上述醇即可，能夠按照溫度、壓力等現(xiàn)有公知的方法進(jìn)行干燥。在本發(fā)明中，形成在基片上的培養(yǎng)層的厚度在干燥時(shí)為50 1000 μ m，更優(yōu)選為 200 600 μ m。另外，涂布量干燥時(shí)為5 400g/m2，更優(yōu)選為100 300g/m2。在上述范圍內(nèi)，能夠形成最適合于菌發(fā)育的粘度的培養(yǎng)層。(ii)框?qū)拥男纬杀景l(fā)明的微生物培養(yǎng)片可以在基片的表面且培養(yǎng)層的外周形成框?qū)??？驅(qū)幽軌蚴褂檬杷詷?shù)脂來(lái)形成。此外，框?qū)拥闹圃旆椒](méi)有特別限制。也能夠使用預(yù)先形成有框?qū)拥幕?。作為形成有框?qū)拥幕?，是表面至少具有疏水性?shù)脂的基片，并可以列舉通過(guò)對(duì)該疏水性樹(shù)脂部分進(jìn)行壓花加工從而將凸部形成為框的形狀。然后，如果在上述凸部的內(nèi)側(cè)形成培養(yǎng)層，則能夠制造本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片。另外，也能夠?qū)⑿纬膳囵B(yǎng)層的地方壓花加工成凹狀，將形成在凹部外周的凸部作為框?qū)印Ｗ鳛樵诨闲纬膳囵B(yǎng)層之前形成框?qū)拥姆椒?，例如，能夠?qū)⑹杷詷?shù)脂板打通為規(guī)定形狀，再將其粘合在基片上，作為框?qū)?。另外，在使用厚的疏水性?shù)脂板作為基片，將形成培養(yǎng)層的部分削成凹狀，進(jìn)而將剩余部分作為框?qū)拥姆椒ㄖ?，如果將凸部形成為框的形狀，在該凸部的?nèi)側(cè)再形成培養(yǎng)層，則能夠?qū)⑸鲜鐾共孔鳛榭驅(qū)佣褂?。另外，也可以使用上述的UV固化油墨、熱熔油墨、熱發(fā)泡油墨或者UV發(fā)泡劑等作為疏水性樹(shù)脂，進(jìn)行圖案形成，形成框?qū)?。這些是無(wú)溶劑系統(tǒng)，能夠通過(guò)分配器涂布等容易加工圖案形成，也容易固化，因而尤其優(yōu)選。在使用上述UV固化油墨等作為疏水性樹(shù)脂來(lái)形成框?qū)拥那闆r下，也可以將上述疏水性樹(shù)脂溶解于適當(dāng)?shù)娜軇┲?，再通過(guò)印刷、涂布、涂工等進(jìn)行圖案形成。作為印刷方法，除了絲網(wǎng)印刷以外，還可以為凹版印刷、凸版印刷、轉(zhuǎn)印印刷、柔版印刷以及其他等印刷方式。另外，能夠使用利用刮棒等涂布為規(guī)定形狀的刮棒涂布、刮刀涂布、模具涂布等涂工、分配器等涂布以及其他方法。在疏水性樹(shù)脂為UV固化油墨或者UV發(fā)泡油墨的情況下，在圖案形成后，照射UV。 作為紫外線(UV)照射條件，累積光量為50 2000mJ/cm2，更優(yōu)選為100 lOOOmJ/cm2，能夠并用紫外線照射燈的光與熱。能夠發(fā)泡的照射條件的范圍根據(jù)發(fā)泡劑的種類(lèi)不同而變化。 在一次不能夠確保規(guī)定的高度的情況下，可以通過(guò)多次的印刷來(lái)形成框?qū)?。作為紫外線照射燈，能夠使用金屬鹵化物燈、水銀燈等。在形成了培養(yǎng)層之后形成框?qū)訒r(shí)，能夠使用上述的UV固化油墨、熱熔油墨、熱發(fā)泡油墨或者UV發(fā)泡劑等，通過(guò)圖案形成來(lái)形成框?qū)?。此時(shí)，在培養(yǎng)層中含有因UV照射而變質(zhì)的成分時(shí)，優(yōu)選，在UV照射時(shí)，用金屬等覆蓋培養(yǎng)層。另外，可以將疏水性樹(shù)脂板打通為規(guī)定形狀，并將其粘合在形成有培養(yǎng)層的基片的在上述培養(yǎng)層外周的基片上，形成框?qū)?。在本發(fā)明中，框?qū)拥男纬膳c上述培養(yǎng)層的形成首先進(jìn)行哪一個(gè)都可以，而如果首先進(jìn)行培養(yǎng)層的形成，則由于通過(guò)圖案形成而制備的培養(yǎng)層是薄層，因而在其后能夠容易形成框?qū)?。另一方面，如果首先形成框?qū)?，則利用分配器等能夠容易地在框?qū)觾?nèi)對(duì)培養(yǎng)液進(jìn)行圖案形成，以制備培養(yǎng)層。在基片上形成框?qū)訒r(shí)，優(yōu)選，在培養(yǎng)層的外周與培養(yǎng)層緊貼地形成，在框?qū)优c培養(yǎng)層之間不形成間隙。在框?qū)优c培養(yǎng)層之間具有間隙時(shí)，在將被檢液接種到培養(yǎng)層的情況下， 被檢液會(huì)存留在上述間隙內(nèi)，有時(shí)被檢液很難均勻擴(kuò)散。要不形成間隙地形成框?qū)优c培養(yǎng)層，簡(jiǎn)便的方法是預(yù)先形成框?qū)樱⒃诳驅(qū)觾?nèi)對(duì)上述培養(yǎng)液進(jìn)行圖案形成。作為圖案形成方法，能夠適當(dāng)進(jìn)行基于分配器的涂布。現(xiàn)有技術(shù)由于難以不形成間隙地形成框?qū)优c培養(yǎng)層， 因而可以推測(cè)出，即使在形成框?qū)拥那闆r下，也是在培養(yǎng)層的上面形成了框?qū)?。根?jù)本發(fā)明，通過(guò)使用在聚乙烯吡咯烷酮的醇溶液中含有選自由凝膠化劑、營(yíng)養(yǎng)成分、顯色指示劑、 選擇劑以及基質(zhì)組成的組中的至少一種的培養(yǎng)液，能夠進(jìn)行圖案形成，并且在框?qū)拥膬?nèi)部， 能夠不形成間隙地圖案形成培養(yǎng)層，因而被檢液能夠均勻地?cái)U(kuò)散，進(jìn)而能夠制造性能高的微生物培養(yǎng)片。(iii)蓋板的固定設(shè)置由于本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片是在將被檢液接種到培養(yǎng)層之后用蓋板覆蓋培養(yǎng)層， 對(duì)其進(jìn)行培養(yǎng)，因而蓋板的一部分被固定設(shè)置于基片在操作上是簡(jiǎn)便的。但是，在直接壓印 (stamp)、擦拭試驗(yàn)等時(shí)、通過(guò)沒(méi)有蓋板來(lái)提高作業(yè)效率時(shí)，可以取下蓋板。在蓋板和基片由同一部件構(gòu)成的情況下，可以通過(guò)熱封或者層壓粘合以及其他方法來(lái)將另行制作的蓋板固定設(shè)置在基片上，而在蓋板和基片上可以使用相同材質(zhì)的材料， 如圖9(a)的展開(kāi)圖、圖9(b)的截面圖所示，基片(10)與蓋板00)保持著連結(jié)設(shè)置而在基片(10)上形成框?qū)覱0)與培養(yǎng)層(30)，再將蓋板00)折彎而形成微生物培養(yǎng)片。圖9 (c) 示出其截面圖。根據(jù)該方法，即使在蓋板上形成特定成分層(30’)或者粘著層(50)的情況下，由于基片(10)與蓋板00)被連結(jié)設(shè)置，因而也能夠在與基片(10)上的培養(yǎng)層(30)相對(duì)的位置上準(zhǔn)確且簡(jiǎn)便地形成特定成分層(30’)。另外，如圖10和圖11的橫截面圖所示，可以由不同部件構(gòu)成蓋板G0)與基片(10)，用雙面膠帶(60)等粘貼蓋板(40)與形成有培養(yǎng)層(30)的基片(10)。圖12和圖13示出在蓋板00)上形成有方格印刷，蓋板GO)與形成有培養(yǎng)層(30) 的基片(10)在端部粘合的本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片的外觀立體圖。在圖13中，在培養(yǎng)層(30) 的周?chē)纬捎锌驅(qū)?0)。本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片實(shí)施伽瑪射線照射或者環(huán)氧乙烷氣體滅菌等滅菌，得到為本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片的產(chǎn)品。本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片能夠根據(jù)所含有的微生物營(yíng)養(yǎng)成分的種類(lèi)、所使用的基片、蓋板的通氣性以及其他因素，進(jìn)行各種微生物的培養(yǎng)。實(shí)施例接下來(lái)，列舉實(shí)施例來(lái)具體地說(shuō)明本發(fā)明，而這些實(shí)施例并不對(duì)本發(fā)明作任何限制。制造例1在130g的甲醇中溶解20g的聚乙烯吡咯烷酮(日本觸媒公司生產(chǎn)，商品名“聚乙烯吡咯烷酮K-90”)，并在其中分散60g的瓜爾豆膠粉末(三晶公司生產(chǎn)，商品名“Neovisco G",200目型)，作為營(yíng)養(yǎng)成分還混合20. 16g的胰蛋白胨(Becton，Dickinson and Company 公司生產(chǎn)，商品名“BACT TRYPT0NE”)、2. 58g 的酵母提取物(Becton，Dickinson and Company公司生產(chǎn)，商品名“YEAST EXTRACT”)以及1. 03g的葡萄糖(和光純藥公司生產(chǎn)， 商品名“D-(+)-GLUC0SE”)而制備培養(yǎng)液，將該培養(yǎng)液在聚對(duì)苯二甲酸乙二酯膜(帝人杜邦公司生產(chǎn)，商品名“帝人蒂托綸膜(teijin tetoron f ilm) ”)上的必要部分進(jìn)行圖案形成之后，在50°C下干燥15分鐘，形成了培養(yǎng)層。干燥時(shí)的培養(yǎng)層的厚度為大約250 μ m。然后，使用分配器，將UV固化油墨(日本十條化工公司生產(chǎn)，商品名“Ray Cure GA 4100-2”) 涂布為寬度1. 0mm、高度750 μ m、直徑52mm的圓狀之后，使用水銀燈照射了累積光量250mJ/ cm2的紫外線，使其固化，進(jìn)而在培養(yǎng)層的周?chē)檬杷詷?shù)脂形成了框?qū)?。然后，將蓋板(日本Tohcello公司生產(chǎn)，OPP膜，型號(hào)“OP U_1(單面電暈放電處理)”，厚度40μπι)層積在上述聚對(duì)苯二甲酸乙二酯膜上，在粘合端部之后，用Y線滅菌， 得到了本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片。(實(shí)施例1)將Ε. coli(ATCC 25922)用液體培養(yǎng)基(TRYPTIC SOY BROTH)在 37°C振蕩培養(yǎng)了 M小時(shí)。然后，用滅菌生理食鹽水將所得到的被檢液稀釋成菌數(shù)為102/ml，添加TTC，制備了培養(yǎng)試驗(yàn)用被檢液。用已滅菌過(guò)的移液管將Iml該培養(yǎng)試驗(yàn)用被檢液接種到通過(guò)制造例 1的方法制造的微生物培養(yǎng)片的培養(yǎng)層上，再將蓋板放到其上面，使被檢液擴(kuò)散到整個(gè)培養(yǎng)層。然后，靜置約1分鐘，形成凝膠，得到了實(shí)施例1的培養(yǎng)試驗(yàn)用試樣。培養(yǎng)試驗(yàn)用試樣制備了 5個(gè)。(實(shí)施例2)除使用K. pneumoniae (ATCC 13883)代替Ε. coli作為菌株來(lái)制備培養(yǎng)試驗(yàn)用被檢液以外，采用與實(shí)施例1同樣的方法，得到了實(shí)施例2的培養(yǎng)試驗(yàn)用試樣。(實(shí)施例3)除使用E. cloacae (ATCC 13536)代替E. coli作為菌株來(lái)制備培養(yǎng)試驗(yàn)用被檢液以外，采用與實(shí)施例1同樣的方法，得到了實(shí)施例3的培養(yǎng)試驗(yàn)用試樣。(實(shí)施例4)
除使用C. freundii (JCM 1657)代替Ε. coli作為菌株來(lái)制備了培養(yǎng)試驗(yàn)用被檢液以外，采用與實(shí)施例1同樣的方法，得到了實(shí)施例4的培養(yǎng)試驗(yàn)用試樣。(實(shí)施例5)除使用S. aureus (ATCC 25923)代替Ε. coli作為菌株來(lái)制備培養(yǎng)試驗(yàn)用被檢液以夕卜，采用與實(shí)施例1同樣的方法，得到了實(shí)施例5的培養(yǎng)試驗(yàn)用試樣。(比較例1)將實(shí)施例1的培養(yǎng)試驗(yàn)用被檢液Iml添加到皮氏培養(yǎng)皿中，與利用現(xiàn)有稀釋法準(zhǔn)備的標(biāo)準(zhǔn)瓊脂培養(yǎng)基20ml混釋?zhuān)玫搅吮容^例1的培養(yǎng)試驗(yàn)用試樣。(比較例2)除使用實(shí)施例2的培養(yǎng)試驗(yàn)用被檢液以外，采用與比較例1同樣的方法，得到了比較例2的培養(yǎng)試驗(yàn)用試樣。(比較例3)除使用實(shí)施例3的培養(yǎng)試驗(yàn)用被檢液以外，采用與比較例1同樣的方法，得到了比較例3的培養(yǎng)試驗(yàn)用試樣。(比較例4)除使用實(shí)施例4的培養(yǎng)試驗(yàn)用被檢液以外，采用與比較例1同樣的方法，得到了比較例4的培養(yǎng)試驗(yàn)用試樣。(比較例5)除使用實(shí)施例5的培養(yǎng)試驗(yàn)用被檢液以外，采用與比較例1同樣的方法，得到了比較例5的培養(yǎng)試驗(yàn)用試樣。[培養(yǎng)試驗(yàn)]將實(shí)施例1 5和比較例1 5的培養(yǎng)試驗(yàn)用試樣放入孵卵器中，在37°C下培養(yǎng)了 48小時(shí)。然后，分別測(cè)量了培養(yǎng)后產(chǎn)生的菌落數(shù)。另外，在圖14示出使用了本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片的實(shí)施例1的培養(yǎng)試驗(yàn)用試樣的菌落生長(zhǎng)狀態(tài)。比較了實(shí)施例1 5的培養(yǎng)試驗(yàn)用試樣和比較例1 5的培養(yǎng)試驗(yàn)用試樣的菌落數(shù)，結(jié)果為，不論在培養(yǎng)了 E. coli、K. pneumoniae λ Ε. cloacae、C. freundii、S. aureus 哪一種菌的情況下，兩者的相互關(guān)聯(lián)都極其良好。另外，觀察了使用本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片的實(shí)施例1的培養(yǎng)試驗(yàn)用試樣的菌落生長(zhǎng)狀態(tài)，結(jié)果為可識(shí)別性?xún)?yōu)異(圖14)。可以認(rèn)為，根據(jù)本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片，通過(guò)增粘的凝膠化劑和聚乙烯吡咯烷酮，蓋板與培養(yǎng)層緊貼，因而得到了這樣的結(jié)果。[制造例2]在聚對(duì)苯二甲酸乙二酯膜(帝人杜邦公司生產(chǎn)，商品名“帝人蒂托綸膜”)上，使用分配器將熱可塑性樹(shù)脂(日本小西公司生產(chǎn)，商品名“MP93”)涂布為寬度1.0mm、高度 750 μ m、直徑52mm的圓狀，形成了框?qū)?。然后，?10ml的甲醇中溶解20g的聚乙烯吡咯烷酮(日本觸媒社生產(chǎn)，商品名“聚乙烯吡咯烷酮K-90”)，并在其中分散60g的瓜爾豆膠粉末(三晶公司生產(chǎn)，商品名 "NEOVISCO G",400目型)，作為營(yíng)養(yǎng)成分還混合20. 16g的胰蛋白胨(Becton, Dickinson and Company 公司生產(chǎn)，商品名 ‘‘BACT TRYPT0NE，，)、2. 5 的酵母提取物(Becton，Dickinson and Company公司生產(chǎn)，商品名‘‘YEAST EXTRACT”)以及1. 03g的葡萄糖(和光純藥公司生產(chǎn)，商品名“ D-⑴-GLUCOSE ”)，制備了培養(yǎng)液。使用分配器將該含有營(yíng)養(yǎng)成分、凝膠化劑的培養(yǎng)液涂布在形成于基材上的框?qū)拥目騼?nèi)，然后，在50°C下干燥15分鐘，形成了培養(yǎng)層。干燥時(shí)的層的厚度為大約250 μ m。然后，將進(jìn)行了方格印刷的蓋板(日本Tohcello公司生產(chǎn)，OPP膜，型號(hào)“0P U-I (單面電暈放電處理)”，厚度40 μ m)層積在上述聚對(duì)苯二甲酸乙二酯膜上，在粘合了端部之后，用Y線滅菌，得到了本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片。此外，所得到的框?qū)拥母叨葹?750 μ m(與培養(yǎng)層的高度之差+500 μ m)，寬度為1mm。[制造例3]除了形成了高度600 μ m的框?qū)右酝?，采用與制造例2同樣的方法，得到了本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片。與培養(yǎng)層的高度之差為+350 μ m。[制造例4]除了形成了高度950 μ m的框?qū)右酝?，采用與制造例2同樣的方法，得到了本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片。與培養(yǎng)層的高度之差為+700 μ m。(實(shí)施例6)將Ε. coli(ATCC 25922)用液體培養(yǎng)基(TRYPTIC SOY BROTH)在 37°C振蕩培養(yǎng)了 M小時(shí)。然后，用滅菌生理食鹽水將所得到的被檢液稀釋成菌數(shù)為IO2Ail，再添加TTC，制備了培養(yǎng)試驗(yàn)用被檢液。用已滅菌過(guò)的移液管將Iml該培養(yǎng)試驗(yàn)用被檢液接種到通過(guò)制造例 2的方法制造的微生物培養(yǎng)片的培養(yǎng)層上，再將蓋板放到其上面，使被檢液擴(kuò)散到了框?qū)觾?nèi)的整個(gè)培養(yǎng)層。然后，靜置大約1分鐘，形成凝膠，得到了實(shí)施例6的培養(yǎng)試驗(yàn)用試樣。培養(yǎng)試驗(yàn)用試樣制備了 5個(gè)。(實(shí)施例7)除使用K. pneumoniae (ATCC 13883)代替Ε. coli作為菌株來(lái)制備培養(yǎng)試驗(yàn)用被檢液以外，采用與實(shí)施例6同樣的方法，得到了實(shí)施例7的培養(yǎng)試驗(yàn)用試樣。(實(shí)施例8)除使用E. cloacae (ATCC 13536)代替E. coli作為菌株來(lái)制備培養(yǎng)試驗(yàn)用被檢液以外，采用與實(shí)施例6同樣的方法，得到了實(shí)施例8的培養(yǎng)試驗(yàn)用試樣。(實(shí)施例9)除使用C. freundii (JCM 1657)代替E. coli作為菌株來(lái)制備培養(yǎng)試驗(yàn)用被檢液以夕卜，采用與實(shí)施例6同樣的方法，得到了實(shí)施例9的培養(yǎng)試驗(yàn)用試樣。(實(shí)施例10)除使用S. aureus (ATCC 25923)代替E. coli作為菌株來(lái)制備培養(yǎng)試驗(yàn)用被檢液以夕卜，采用與實(shí)施例6同樣的方法，得到了實(shí)施例10的培養(yǎng)試驗(yàn)用試樣。(比較例6)將在實(shí)施例6中制備的培養(yǎng)試驗(yàn)用被檢液Iml添加到皮氏培養(yǎng)皿中，并與現(xiàn)有稀釋法準(zhǔn)備的標(biāo)準(zhǔn)瓊脂培養(yǎng)基20ml混釋?zhuān)玫搅吮容^例6的培養(yǎng)試驗(yàn)用試樣。(比較例7)除使用在實(shí)施例7中制備的培養(yǎng)試驗(yàn)用被檢液以外，采用與比較例6同樣的方法， 得到了比較例7的培養(yǎng)試驗(yàn)用試樣。(比較例8)
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除使用在實(shí)施例8中制備的培養(yǎng)試驗(yàn)用被檢液以外，采用與比較例6同樣的方法， 得到了比較例8的培養(yǎng)試驗(yàn)用試樣。(比較例9)除使用在實(shí)施例9中制備的培養(yǎng)試驗(yàn)用被檢液以外，采用與比較例6同樣的方法， 得到了比較例9的培養(yǎng)試驗(yàn)用試樣。(比較例10)除使用在實(shí)施例10中制備的培養(yǎng)試驗(yàn)用被檢液以外，采用與比較例6同樣的方法，得到了比較例10的培養(yǎng)試驗(yàn)用試樣。(實(shí)施例11)除使用通過(guò)制造例3的方法制造的微生物培養(yǎng)片以外，采用與比較例6同樣的方法，得到了實(shí)施例11的培養(yǎng)試驗(yàn)用試樣。(實(shí)施例12)除使用通過(guò)制造例4的方法制造的微生物培養(yǎng)片以外，采用與比較例6同樣的方法，得到了實(shí)施例12的培養(yǎng)試驗(yàn)用試樣。[培養(yǎng)試驗(yàn)]將實(shí)施例6 12和比較例6 10的培養(yǎng)試驗(yàn)用試樣放入到孵卵器中，在37°C下培養(yǎng)了 48小時(shí)。然后，分別測(cè)量了培養(yǎng)后所生成的菌落數(shù)。將其結(jié)果示出在表1中。另外， 在圖15中示出使用了本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片的實(shí)施例6的培養(yǎng)試驗(yàn)用試樣的菌落生長(zhǎng)狀態(tài)。表權(quán)利要求
1.一種微生物培養(yǎng)片，具有基片、形成在所述基片上的培養(yǎng)層以及覆蓋所述培養(yǎng)層的蓋板，其中，所述培養(yǎng)層是對(duì)含有選自由凝膠化劑、營(yíng)養(yǎng)成分、顯色指示劑、選擇劑以及基質(zhì)組成的組中的至少一種的和聚乙烯吡咯烷酮的培養(yǎng)液進(jìn)行圖案形成而得到的層。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的微生物培養(yǎng)片，其特征在于，所述培養(yǎng)液含有聚乙烯吡咯烷酮和凝膠化劑。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的微生物培養(yǎng)片，其特征在于，所述凝膠化劑是高分子多糖類(lèi)。
4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的微生物培養(yǎng)片，其特征在于，所述凝膠化劑在所述培養(yǎng)液中的含量相對(duì)于所述聚乙烯吡咯烷酮100質(zhì)量份為100 600質(zhì)量份。
5.根據(jù)權(quán)利要求1至4中任一項(xiàng)所述的微生物培養(yǎng)片，其特征在于，在所述培養(yǎng)層的外周形成有包含疏水性樹(shù)脂的框?qū)印?br> 6.根據(jù)權(quán)利要求1至5中任一項(xiàng)所述的微生物培養(yǎng)片，其特征在于，所述基片和/或所述蓋板包含透明塑料片。
7.根據(jù)權(quán)利要求1至6中任一項(xiàng)所述的微生物培養(yǎng)片，其特征在于，所述蓋板被固定設(shè)置于所述基片。
8.—種微生物培養(yǎng)片的制造方法，所述微生物培養(yǎng)片具有基片、形成在所述基片上的培養(yǎng)層以及覆蓋所述培養(yǎng)層的蓋板，其中，所述制造方法包括將在聚乙烯吡咯烷酮的醇溶液中含有選自由凝膠化劑、營(yíng)養(yǎng)成分、 顯色指示劑、選擇劑以及基質(zhì)組成的組中的至少一種的培養(yǎng)液圖案形成在所述基片上之后，除去所述培養(yǎng)液中含有的所述醇，從而形成所述培養(yǎng)層的培養(yǎng)層形成工序。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的微生物培養(yǎng)片的制造方法，其特征在于，在所述培養(yǎng)層形成工序后，實(shí)施通過(guò)疏水性樹(shù)脂進(jìn)行圖案形成而形成包圍所述培養(yǎng)層的外周的凸?fàn)畹目驅(qū)拥目驅(qū)有纬晒ば颉?br> 10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的微生物培養(yǎng)片的制造方法，其特征在于，在所述培養(yǎng)層形成工序前，實(shí)施通過(guò)疏水性樹(shù)脂的圖案形成而預(yù)先形成在形成了所述培養(yǎng)層時(shí)包圍所述培養(yǎng)層的外周的凸?fàn)畹目驅(qū)拥目驅(qū)有纬晒ば颉?br> 11.一種微生物培養(yǎng)片的制造方法，所述微生物培養(yǎng)片具有基片、形成在所述基片上的培養(yǎng)層以及覆蓋所述培養(yǎng)層的蓋板，其中，所述基片預(yù)先形成有在形成有所述培養(yǎng)層時(shí)包圍所述培養(yǎng)層的外周的凸?fàn)畹陌杷詷?shù)脂的框?qū)?，在所述框?qū)拥膬?nèi)側(cè)，對(duì)在聚乙烯吡咯烷酮的醇溶液中含有選自由凝膠化劑、營(yíng)養(yǎng)成分、 顯色指示劑、選擇劑以及基質(zhì)組成的組中的至少一種的培養(yǎng)液進(jìn)行圖案形成，然后除去所述培養(yǎng)液中含有的所述醇，從而形成所述培養(yǎng)層。
全文摘要
本發(fā)明提供一種能夠?qū)嘿F的培養(yǎng)材料的使用限定在必要部分、制造時(shí)的工序簡(jiǎn)便、使用者能夠簡(jiǎn)便且穩(wěn)定地使用的微生物培養(yǎng)片。本發(fā)明的微生物培養(yǎng)片是一種具有基片、形成在所述基片上的培養(yǎng)層以及覆蓋所述培養(yǎng)層的蓋板的微生物培養(yǎng)片，其中，所述培養(yǎng)層是對(duì)含有選自由凝膠化劑、營(yíng)養(yǎng)成分、顯色指示劑、選擇劑以及基質(zhì)組成的組中的至少一種的和聚乙烯吡咯烷酮的培養(yǎng)液進(jìn)行圖案形成而得到的層。
文檔編號(hào)C12M1/16GK102471747SQ201080030428
公開(kāi)日2012年5月23日 申請(qǐng)日期2010年7月14日 優(yōu)先權(quán)日2009年7月14日
發(fā)明者齋藤累, 木下麻衣, 植木哲司, 馬場(chǎng)琢磨 申請(qǐng)人:大日本印刷株式會(huì)社