專(zhuān)利名稱(chēng)：對(duì)皮膚創(chuàng)傷的酶清創(chuàng)術(shù)的裝置和方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及在皮膚創(chuàng)傷中失活組織清創(chuàng)術(shù)的裝置和方法，所述裝置包括多個(gè)高度和角度可調(diào)節(jié)的引入導(dǎo)管、至少一個(gè)引出導(dǎo)管、以及圍繞皮膚創(chuàng)傷形成封塞的縫合的工具。
背景技術(shù)：
急性和慢性的疾病，例如糖尿病和牛皮癬、或急性損傷引起皮膚嚴(yán)重的損傷。這樣的損傷可涉及皮膚整個(gè)的厚度，并且可經(jīng)常包括更深層的組織，在其中整個(gè)損傷帶的損傷深度是不同的。損傷的皮膚失去健康皮膚的解剖結(jié)構(gòu)，因?yàn)榻琴|(zhì)層至少部分被破壞，并且緊接著皮膚的內(nèi)層不再?gòu)耐饨绛h(huán)境受到保護(hù)。而且，受損的皮膚典型地包括死痂、病的和/或不正常的細(xì)胞，它們必須被移去以使痊愈。死痂留在原地，會(huì)擴(kuò)展和深化損傷到鄰近的未損傷的組織。死痂也能作為細(xì)菌生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，和感染源、污染源、和可致命的敗血病源。
移去死痂、病的和/或不正常的細(xì)胞，也叫作″清創(chuàng)術(shù)″，是通過(guò)手術(shù)方法或者酶的方法施行。手術(shù)是清創(chuàng)術(shù)最普通的方法，在其中小的壞死面積被從整個(gè)損傷皮膚切除。此方法限于小的非正切表面。它也包括移去大塊的正常組織，后者如果被保留，可用作天然痊愈過(guò)程的一個(gè)來(lái)源。手術(shù)過(guò)程也是長(zhǎng)的、貴的和需要復(fù)雜的醫(yī)學(xué)資源。
美國(guó)專(zhuān)利No.3,910,266描述一種方法和裝置，它們提供承壓流體的噴射，用于穿透皮膚并插入美容劑或治療劑于皮膚。美國(guó)專(zhuān)利No.5,697,920描述使用承壓流體的噴射和刷子的機(jī)械清創(chuàng)術(shù)方法。美國(guó)專(zhuān)利No.5,941,859；5,989,211和6,264,666描述用于提供和移去皮膚的漂洗液體的醫(yī)學(xué)設(shè)備。手持的手術(shù)裝置，適于通過(guò)使用承壓流體噴射，基本用作鋒利的手術(shù)工具以移去病組織，描述于美國(guó)專(zhuān)利No.5,037,431。美國(guó)專(zhuān)利No.5,358,494描述沖洗敷料，沖洗敷料包括提供沖洗液的管道和附于管道頂?shù)囊r墊，其中襯墊適于填充創(chuàng)傷腔，由此支持創(chuàng)傷壁。但是以上專(zhuān)利描述的方法和裝置不適于提供封閉的系統(tǒng)，以封塞特定的治療區(qū)域。而且，這些方法和裝置不能提供包圍創(chuàng)傷和能在其中抗累積壓力的封閉的環(huán)境。
美國(guó)專(zhuān)利No.4,969,881描述高壓氧敷料，適于用氧氣流治療身體酸痛，通過(guò)使用氣體給氣系統(tǒng)，經(jīng)過(guò)合適的供應(yīng)管敷料提供氧氣。此發(fā)明所述敷料不適于從創(chuàng)傷區(qū)引流分泌物或過(guò)多的治療材料和/或提供給創(chuàng)傷區(qū)一個(gè)治療液的流。
美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)出版No.2003/0050594描述一種創(chuàng)傷治療體系，適合治療有不同機(jī)械力量梯度的創(chuàng)傷，特別是真空，系統(tǒng)有傳導(dǎo)裝置、收集裝置和建立所述梯度的源頭，特別是一個(gè)泵，連于傳導(dǎo)裝置。美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)出版No.2003/0225441描述一個(gè)裝置，適于供應(yīng)熱療液到病人的所選的面積，裝置包括敷料器以維持液體在期望的溫度，敷料器通過(guò)一個(gè)連接于其上的泵產(chǎn)生的負(fù)壓吸附所選的面積。
美國(guó)專(zhuān)利No.6,135,116為創(chuàng)傷治療描述了一個(gè)方法，包括提供肺壓縮治療和同時(shí)協(xié)助封閉治療的真空。美國(guó)專(zhuān)利No.6,767,334描述一個(gè)創(chuàng)傷治療裝置，適于提供正壓給創(chuàng)傷點(diǎn)，裝置包括襯墊以插入創(chuàng)傷，泵和液體管道，以輸導(dǎo)液體通過(guò)襯墊到達(dá)創(chuàng)傷，文式管流動(dòng)連通以創(chuàng)造在襯墊和創(chuàng)傷腔的吸收，和貯器以收集從創(chuàng)傷排出的液體。
美國(guó)專(zhuān)利No.1,385,346；6,398,767；6,458,109和EP1014905描述固定于皮膚表面創(chuàng)傷周?chē)姆罅?。每種敷料包括相對(duì)于創(chuàng)傷表面的固定位置的單個(gè)輸液管和單個(gè)引流管。國(guó)際專(zhuān)利申請(qǐng)出版No.WO 03/01136指定給本發(fā)明的共同受讓人，描述了從活組織移去細(xì)胞的裝置。裝置包括引入導(dǎo)管，適于在組織上加入酶溶液流，和引出導(dǎo)管，適于移去多余的液體和殘骸。引出導(dǎo)管的出口和皮膚之間的距離可通過(guò)螺釘機(jī)構(gòu)調(diào)節(jié)。上述發(fā)明描述的每個(gè)敷料和裝置包括單個(gè)輸液管(引入導(dǎo)管)，有對(duì)著創(chuàng)傷的固定位置。因此，這些敷料和裝置不適于深層地穿透進(jìn)創(chuàng)傷，不適于對(duì)不易于接觸的區(qū)域輸入。
一篇由本發(fā)明的發(fā)明人寫(xiě)的文章，發(fā)表在本申請(qǐng)的優(yōu)先權(quán)日之后，描述應(yīng)用活性蛋白水解酶流幾個(gè)小時(shí)以提供有效的清創(chuàng)術(shù)(Freeman等人，wound16201-205，June 2004)。沒(méi)有酶的緩沖液流是無(wú)效的。而且，用靜止的酶溶液治療相似的時(shí)間階段沒(méi)有效果，并且沒(méi)有可見(jiàn)的變化。
酶清創(chuàng)術(shù)優(yōu)于機(jī)械和手術(shù)清創(chuàng)術(shù)，主要因?yàn)樗偬弁?，以及不包括流失大量的血。?yīng)用蛋白水解酶于清創(chuàng)術(shù)是本領(lǐng)域的已知技術(shù)(G.Rodeheaver，1975，Am.J.Surg.129(5)537-544)。這些酶包括通常源于植物的，例如木瓜(木瓜蛋白酶)，無(wú)花果(無(wú)花果蛋白酶)和菠蘿(菠蘿蛋白酶)。源于菠蘿植株的水解酶，用在從哺乳動(dòng)物宿主的活組織消化、切割和分離非活性的組織，特別是痂組織，描述于美國(guó)專(zhuān)利No.4,197,291；4,226,854；4,307,081；4,329,430和5,830,739及其它中。美國(guó)專(zhuān)利No.6,017,531描述了一種蛋白水解組合物，包括溶蛋白弧菌(Vibrioproteolyticus)產(chǎn)生的細(xì)胞外中性蛋白酶。
從局部應(yīng)用蛋白水解酶得到的治療活性的程度，除了其它以外，取決于那些酶的內(nèi)在催化特征。局部應(yīng)用包括蛋白水解酶的組合物相關(guān)的主要問(wèn)題是酶的催化活性由于創(chuàng)傷區(qū)局部的低pH而迅速減弱，因此，酶分子在創(chuàng)床表面和/或敷料表面的吸收阻止它們進(jìn)入創(chuàng)床的其它區(qū)域并且創(chuàng)傷滲出物中部分成分對(duì)酶活性有抑制(作用)。相應(yīng)地，獲得穩(wěn)定的酶制劑經(jīng)常是復(fù)雜的。
發(fā)明概要本發(fā)明涉及皮膚創(chuàng)傷失活組織的清創(chuàng)術(shù)的裝置和方法。本發(fā)明的裝置克服了背景技術(shù)的缺點(diǎn)，通過(guò)提供治療溶液恒流進(jìn)入皮膚創(chuàng)傷的創(chuàng)床，由多個(gè)可調(diào)的引入導(dǎo)管。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式中，治療溶液可包括催化活性蛋白水解酶。
可以理解，這里所用的術(shù)語(yǔ)″皮膚創(chuàng)傷″和″創(chuàng)傷″是根據(jù)其最廣的含義解釋的，以描述包括失活組織的受損皮膚，包括但不限于，慢性皮膚潰瘍(例如，糖尿病性潰瘍和褥瘡)和燒傷。皮膚創(chuàng)傷可擴(kuò)散到整個(gè)或部分的皮膚層并且可進(jìn)一步擴(kuò)散到下面的肌肉和組織。
本發(fā)明的方法和裝置提供有效的失活組織的清創(chuàng)術(shù)，無(wú)需任何手術(shù)介入。本發(fā)明的裝置優(yōu)于本領(lǐng)域已知的其它非手術(shù)的清創(chuàng)術(shù)裝置，因?yàn)樗鼧?gòu)造成連續(xù)地供應(yīng)治療溶液，特別是包括催化活性清創(chuàng)酶的溶液，到任何期望的深度和以任何的角度。因此，本發(fā)明適于治療多種創(chuàng)傷，包括深層皮膚創(chuàng)傷例如II期和III期的創(chuàng)傷。裝置可進(jìn)一步適于在創(chuàng)傷處產(chǎn)生和維持正壓或負(fù)壓，如上面的描述，已知是增進(jìn)痊愈的。因此，本發(fā)明的裝置可適于包括酶的清創(chuàng)術(shù)和負(fù)/正壓的結(jié)合療法。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式中，提供治療皮膚創(chuàng)傷的敷料器，所述敷料器包括(a)屏蔽罩單元，其具有至少一個(gè)形成于其中的孔，和(b)工具，以固定所述敷料器于皮膚創(chuàng)傷周?chē)钠つw；其中所述屏蔽罩單元包括(i)多個(gè)引入導(dǎo)管，每個(gè)所述多個(gè)引入導(dǎo)管具有第一縱軸，并且構(gòu)造成通過(guò)所述至少一個(gè)孔沿著其縱軸可調(diào)；并且(ii)至少一個(gè)引出導(dǎo)管，其具有第二縱軸。
根據(jù)一個(gè)實(shí)施方式，屏蔽罩單元包括多個(gè)孔，其中每個(gè)所述多個(gè)引入導(dǎo)管和至少一個(gè)引出導(dǎo)管伸展通過(guò)所述的多個(gè)孔中的每一個(gè)相應(yīng)的孔。
根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，所述至少一個(gè)引出導(dǎo)管構(gòu)造成通過(guò)相應(yīng)的孔是可調(diào)節(jié)的。
根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，敷料器進(jìn)一步包括多個(gè)加封單元，每個(gè)加封單元構(gòu)造成防止每個(gè)引入導(dǎo)管的外徑和其相應(yīng)孔之間的流體的通過(guò)。根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，裝置進(jìn)一步包括至少一個(gè)加封單元，加封單元構(gòu)造成防止至少一個(gè)引出導(dǎo)管的外徑和其相應(yīng)孔之間的流體的通過(guò)。
根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，每個(gè)所述多個(gè)引入導(dǎo)管有一個(gè)近端和一個(gè)遠(yuǎn)端，所述遠(yuǎn)端構(gòu)造成面對(duì)所述皮膚創(chuàng)傷。根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，每個(gè)所述多個(gè)引入導(dǎo)管相對(duì)于屏蔽罩單元的位置和角度是可調(diào)的。根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，每個(gè)所述多個(gè)引入導(dǎo)管的遠(yuǎn)端平滑地彎曲，以形成不造成外傷的頂端。根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，至少一個(gè)引入導(dǎo)管的遠(yuǎn)端的開(kāi)口是相對(duì)于引入導(dǎo)管的中心軸成角度的。根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，遠(yuǎn)端包括多個(gè)開(kāi)口。
根據(jù)一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式，每個(gè)引入導(dǎo)管是透明的。根據(jù)另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式，每個(gè)引入導(dǎo)管是由柔性的彈性體構(gòu)成的。根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，柔性的彈性體包括一種物質(zhì)，并選自聚硅氧烷、聚氨基甲酸酯、天然橡膠、氯丁橡膠和乙烯基乙酸乙酯組成的組。
根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，每個(gè)引入導(dǎo)管沿其縱軸是可伸長(zhǎng)的或可縮短的。根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，敷料器進(jìn)一步包括可調(diào)節(jié)的螺釘機(jī)構(gòu)，其與每個(gè)所述引入導(dǎo)管連通，因此將每個(gè)引入導(dǎo)管沿其縱軸伸長(zhǎng)或縮短。
根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，敷料器進(jìn)一步包括至少一個(gè)貯器，其與多個(gè)引入導(dǎo)管流體連通。根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，至少一個(gè)貯器適于保存治療溶液。根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，至少一個(gè)貯器是由選自塑料、玻璃、鋼和陶瓷組成的組的物質(zhì)制成的。
根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，敷料器進(jìn)一步包括接頭，其與至少一個(gè)引入導(dǎo)管和至少一個(gè)貯器流體連通，接頭適于打開(kāi)或關(guān)閉至少一個(gè)引入導(dǎo)管和所述至少一個(gè)貯器之間的流體連通。根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，接頭包括至少一個(gè)元件，選自路厄氏鎖和閥門(mén)工具組成的組。
根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，敷料器進(jìn)一步包括分離器，其與至少一個(gè)引入導(dǎo)管和至少一個(gè)貯器流體連通，分離器適于從所述至少一個(gè)貯器可逆地?cái)嚅_(kāi)和重連接至少一個(gè)引入導(dǎo)管。
根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，敷料器進(jìn)一步包括控制儀，其與至少一個(gè)引入導(dǎo)管和至少一個(gè)貯器流體連通，控制儀適于控制流體從至少一個(gè)貯器到至少一個(gè)引入導(dǎo)管的流速。根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，控制儀選自蠕動(dòng)泵和滴注計(jì)數(shù)器組成的組。
根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，敷料器進(jìn)一步包括溫度調(diào)節(jié)儀，其與至少一個(gè)貯器連通，因此影響所述至少一個(gè)貯器內(nèi)流體的溫度。根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，敷料器進(jìn)一步包括溫度調(diào)節(jié)儀，其與所述多個(gè)引入導(dǎo)管的至少一個(gè)引入導(dǎo)管連通，因此影響流經(jīng)所述至少一個(gè)引入導(dǎo)管的流體的溫度。
根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，敷料器進(jìn)一步包括至少一個(gè)過(guò)濾器，其安裝于所述多個(gè)引入導(dǎo)管的至少一個(gè)引入導(dǎo)管內(nèi)，以過(guò)濾至少一個(gè)引入導(dǎo)管的流體。
根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，敷料器進(jìn)一步包括收集貯器，其與至少一個(gè)引出導(dǎo)管流體連通，并且構(gòu)造成收集從所述至少一個(gè)引出導(dǎo)管排出的流體。
根據(jù)另一個(gè)可選擇的實(shí)施方式，敷料器進(jìn)一步包括多個(gè)貯器，其中所述多個(gè)貯器的第一貯器適于儲(chǔ)藏包括至少一種催化非活性蛋白酶的第一溶液，以及在所述多個(gè)貯器中的第二貯器適于儲(chǔ)藏包括能活化所述至少一種催化非活性蛋白酶的試劑的第二溶液，第一貯器和第二貯器相互流體連通，以及所述第一和第二貯器中的至少一個(gè)進(jìn)一步與所述多個(gè)引入導(dǎo)管的至少一個(gè)引入導(dǎo)管流體連通。根據(jù)一個(gè)可選擇的實(shí)施方式，敷料器進(jìn)一步包括混合腔，其與所述第一個(gè)和第二個(gè)貯器以及所述至少一個(gè)引入導(dǎo)管流體連通，其中混合腔適于儲(chǔ)藏催化活性蛋白水解混合物，包括所述的第一和第二溶液。根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，混合腔進(jìn)一步包括混合工具。
根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，敷料器進(jìn)一步包括真空源，其與至少一個(gè)引出導(dǎo)管流體連通，因此在封塞的皮膚創(chuàng)傷產(chǎn)生負(fù)壓。
根據(jù)一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式，治療溶液包括有效劑量的至少一種催化活性蛋白酶。根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，至少一種催化活性蛋白酶。根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，至少一種催化活性蛋白酶選自木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶、纖維蛋白溶酶原活化因子、纖維蛋白溶酶、肥大細(xì)胞蛋白酶、溶酶體水解酶、鏈激酶、胃蛋白酶、弧菌溶血素、磷蝦蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶、膠原蛋白酶、彈性蛋白酶、分散酶(dipase)、蛋白酶K、梭狀芽孢桿菌多功能蛋白酶和枯草桿菌蛋白酶組成的組。
根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，固定敷料器到皮膚的工具包括附于屏蔽罩的第一平面，以及構(gòu)造成包圍和粘附創(chuàng)傷的第二平面。根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，粘附工具是透明的。根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，粘附工具是生物相容的。根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，第二平面由保護(hù)性的可拆卸的膜覆蓋。
根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，所述多個(gè)引入導(dǎo)管其中至少一個(gè)包括操作地連接其上的可彎曲的線，并沿所述至少一個(gè)引入導(dǎo)管的第一縱軸伸展。根據(jù)一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式，所述可彎曲的線的延伸不超過(guò)所述至少一個(gè)引入導(dǎo)管的遠(yuǎn)端。根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，可彎曲的線包括可彎曲和有彈性的剛性材料。根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，可彎曲的線包括一種選自銀、鉑、不銹鋼和聚合物組成的組的物質(zhì)。根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，所述至少一個(gè)引入導(dǎo)管包括儲(chǔ)藏流體的第一縱向管腔和構(gòu)造成儲(chǔ)藏可彎曲的線的第二縱向管腔。
本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方式中，提供治療皮膚創(chuàng)傷的一種裝置，所述裝置包括(a)間隔物，以封閉包括皮膚創(chuàng)傷的區(qū)域，所述間隔物有面對(duì)皮膚的底面，和面對(duì)屏蔽罩的頂面，其中底面包括固定間隔物于所述皮膚創(chuàng)傷周?chē)つw的粘附工具；和(b)敷料器，包括屏蔽罩單元，所述屏蔽罩單元包括(i)多個(gè)引入導(dǎo)管，每個(gè)所述多個(gè)引入導(dǎo)管有第一縱軸，并且構(gòu)造成沿其縱軸通過(guò)所述至少一個(gè)孔是可調(diào)節(jié)的；(ii)至少一個(gè)引出導(dǎo)管，其具有第二縱軸；以及(iii)工具，以固定敷料器于間隔物的頂面。
根據(jù)一個(gè)實(shí)施方式，間隔物包括彈性體。根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，彈性體是泡沫樣材料。根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，間隔物包括一種選自聚硅氧烷、聚硅氧烷泡沫、聚氨基甲酸酯、天然橡膠、氯丁橡膠和乙烯基乙酸乙酯泡沫組成的組的材料。根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，固定間隔物于皮膚的粘附工具包括一種選自熱塑性的樹(shù)脂、壓力敏感的粘合劑、水膠體粘合劑和橡膠組成的組的材料。根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，間隔物的底面覆蓋保護(hù)性可拆卸的膜。
根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，間隔物有預(yù)定的閉合形狀。根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，間隔物有連續(xù)延伸的形狀并原位形成閉合的形狀。
在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方式中，提供治療皮膚創(chuàng)傷的一種方法，所述方法包括(a)提供敷料器，所述敷料器包括其中至少有一個(gè)孔形成的屏蔽罩單元，以及固定敷料器于皮膚創(chuàng)傷周?chē)つw的工具，其中所述屏蔽罩單元包括(i)多個(gè)引入導(dǎo)管，每個(gè)所述多個(gè)引入導(dǎo)管有第一縱軸，并且構(gòu)造成沿其縱軸通過(guò)所述至少一個(gè)孔是可調(diào)節(jié)的；(ii)至少一個(gè)引出導(dǎo)管，其具有第二縱軸；(b)將所述工具放置于所述皮膚創(chuàng)傷周?chē)つw上，于是固定裝置于所述皮膚創(chuàng)傷周?chē)つw以獲得封塞的創(chuàng)傷；(c)通過(guò)流體連通連接多個(gè)引入導(dǎo)管于至少一個(gè)貯器，其中至少一個(gè)貯器包括清創(chuàng)溶液，清創(chuàng)溶液包括至少一種催化活性蛋白酶；(d)起始清創(chuàng)溶液的流，從至少一個(gè)貯器通過(guò)多個(gè)引入導(dǎo)管的至少一個(gè)引入導(dǎo)管到封塞的創(chuàng)傷；以及(e)從所述封塞的創(chuàng)傷通過(guò)至少一個(gè)引出導(dǎo)管引流所述溶液。
根據(jù)一個(gè)實(shí)施方式，方法進(jìn)一步包括調(diào)節(jié)每個(gè)所述多個(gè)引入導(dǎo)管相對(duì)于所述屏蔽罩的位置和角度。
根據(jù)一個(gè)可選擇的實(shí)施方式，方法包括(a)提供包括敷料器的裝置，所述敷料器包括有至少一個(gè)孔形成于其中的屏蔽罩單元，以及固定敷料器的工具，其中所述屏蔽罩單元包括(i)多個(gè)引入導(dǎo)管，每個(gè)所述多個(gè)引入導(dǎo)管有第一縱軸，并且構(gòu)造成沿其縱軸通過(guò)所述至少一個(gè)孔是可調(diào)節(jié)的；(ii)至少一個(gè)引出導(dǎo)管，其具有第二縱軸；(b)提供封塞皮膚創(chuàng)傷的間隔物，所述間隔物有面對(duì)皮膚的底面，和面對(duì)所述敷料器屏蔽罩的頂面，其中底面包括固定間隔物于皮膚創(chuàng)傷周?chē)つw的粘附工具；(c)固定間隔物的底面于皮膚創(chuàng)傷周?chē)つw；(f)固定敷料器于間隔物的頂面，由此獲得封塞的創(chuàng)傷；(g)通過(guò)流體連通連接多個(gè)引入導(dǎo)管于至少一個(gè)貯器，其中至少一個(gè)貯器包括清創(chuàng)溶液，清創(chuàng)溶液包括至少一種催化活性蛋白酶；(h)起始清創(chuàng)溶液的流，從至少一個(gè)貯器通過(guò)多個(gè)引入導(dǎo)管的至少一個(gè)引入導(dǎo)管到封塞的創(chuàng)傷；以及(i)從所述封塞的創(chuàng)傷通過(guò)至少一個(gè)引出導(dǎo)管引流所述溶液。
根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，步驟(c)進(jìn)一步包括將封閉介質(zhì)分散于封塞的創(chuàng)傷的周?chē)抢锝佑|間隔物的邊緣但不被其覆蓋。
根據(jù)一個(gè)實(shí)施方式，通過(guò)流體連通連接多個(gè)引入導(dǎo)管到至少一個(gè)貯器，在封塞的創(chuàng)傷周?chē)峁┎荒軡B透液體的封閉。根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，方法進(jìn)一步包括連接至少一個(gè)引出導(dǎo)管于收集貯器，所述收集貯器構(gòu)造成儲(chǔ)藏從所述至少一個(gè)引出導(dǎo)管排出的流體。根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，連接至少一個(gè)引出導(dǎo)管于收集貯器，在封塞的創(chuàng)傷周?chē)峁┎荒軡B透氣體的封閉。根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，不能滲透氣體的封閉是真空封閉的。
根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，方法進(jìn)一步包括提供控制儀，所述控制儀與所述多個(gè)引入導(dǎo)管的至少一個(gè)引入導(dǎo)管以及至少一個(gè)貯器流體連通，因此起始受控制的流體的流，從至少一個(gè)貯器流過(guò)至少一個(gè)引入導(dǎo)管。根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，控制儀選自蠕動(dòng)泵和滴注計(jì)數(shù)器組成的組。
根據(jù)一個(gè)可選擇的實(shí)施方式，方法進(jìn)一步包括放置至少一個(gè)貯器于高出創(chuàng)傷的位置，因此通過(guò)重力起始從至少一個(gè)貯器經(jīng)過(guò)多個(gè)引入導(dǎo)管到達(dá)創(chuàng)傷的清創(chuàng)液流。根據(jù)另一個(gè)可選擇的實(shí)施方式，方法進(jìn)一步包括提供多個(gè)控制儀，每個(gè)控制儀與多個(gè)引入導(dǎo)管的相應(yīng)的引入導(dǎo)管以及至少一個(gè)貯器流體連通，因此通過(guò)單獨(dú)的控制儀獨(dú)立地控制每個(gè)引入導(dǎo)管的流速。根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，控制儀是夾子或滴注腔。
根據(jù)一個(gè)可選擇的實(shí)施方式，方法進(jìn)一步包括放置至少一個(gè)貯器和收集貯器在相對(duì)于封塞的創(chuàng)傷和相對(duì)于彼此的預(yù)定的位置，由此產(chǎn)生在封塞的創(chuàng)傷的壓力。根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，方法進(jìn)一步包括在封塞的創(chuàng)傷產(chǎn)生負(fù)壓。
根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，溶液從至少一個(gè)貯器經(jīng)過(guò)多個(gè)引入導(dǎo)管的流速在1ml/hour到10ml/hour范圍內(nèi)。根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，溶液從至少一個(gè)貯器經(jīng)過(guò)多個(gè)引入導(dǎo)管的流動(dòng)持續(xù)30分鐘到6小時(shí)。
根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，方法進(jìn)一步包括提供至少一個(gè)元件，所述元件與至少一個(gè)貯器以及多個(gè)引入導(dǎo)管的至少一個(gè)引入導(dǎo)管流體連通，所述元件選自以下組成的組控制儀，適于控制從至少一個(gè)貯器到至少一個(gè)引入導(dǎo)管的流速；分離器，其與多個(gè)引入導(dǎo)管的至少一個(gè)引入導(dǎo)管以及至少一個(gè)貯器流體連通，因此從所述至少一個(gè)貯器可逆地?cái)嚅_(kāi)和重連接所述至少一個(gè)引入導(dǎo)管；接頭，適于打開(kāi)和關(guān)閉至少一個(gè)貯器和至少一個(gè)引入導(dǎo)管之間的流體連通；過(guò)濾器，為過(guò)濾至少一個(gè)引入導(dǎo)管內(nèi)的溶液流；混合儀，為混合至少一個(gè)貯器內(nèi)的溶液；溫度調(diào)節(jié)儀，為影響至少一個(gè)貯器內(nèi)溶液的溫度；真空源，其與至少一個(gè)引出導(dǎo)管流體連通，適于在封塞的皮膚創(chuàng)傷產(chǎn)生負(fù)壓；和收集貯器，其與至少一個(gè)引出導(dǎo)管流體連通，構(gòu)造成接收從至少一個(gè)引出導(dǎo)管的近端排出的流體。
本發(fā)明的其它目標(biāo)、特點(diǎn)和優(yōu)點(diǎn)將由以下描述和圖示而變得清楚。


圖1A和1B是裝置等距和側(cè)面的圖示，依據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式構(gòu)建和操作；圖2是使用圖1A和1B的裝置分散(或沖流)和收集治療溶液的體系的圖示；圖3是依據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式的裝置的橫截面觀；圖4是依據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方式的裝置的橫截面觀；圖5是依據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方式的裝置的橫截面觀；圖6是依據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方式的裝置的橫截面觀；圖7是依據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方式的裝置的橫截面觀；圖8是依據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方式的裝置的橫截面觀；圖9是依據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方式的裝置的橫截面觀；圖10是依據(jù)本發(fā)明的蛋白酶溶液敷料器和接通機(jī)構(gòu)的放大的橫截面觀；圖11是根據(jù)本發(fā)明的蛋白酶溶液敷料器的放大的底面(面對(duì)皮膚的表面)觀，所述蛋白酶溶液敷料器包括蛋白酶溶液引入導(dǎo)管口和引出導(dǎo)管口；圖12是本發(fā)明裝置包括的，代表特定優(yōu)選實(shí)施方式的敷料器的橫截面觀，可用于本發(fā)明在皮膚上的應(yīng)用；圖13展示試驗(yàn)裝備，同時(shí)在6只小鼠的治療面積上(A)以及在同一個(gè)動(dòng)物的6個(gè)單獨(dú)的面積上(B)沖流酶溶液；圖14顯示治療的小鼠皮膚組織切片，用沒(méi)有蛋白水解酶的液體(A)和有包括木瓜蛋白酶(B)、胰蛋白酶和菠蘿蛋白酶(C)、胰蛋白酶(D)以及胃蛋白酶(E)的液體，沖流3小時(shí)；圖15顯示創(chuàng)傷的皮膚切片，在用包括胰蛋白酶和膠原蛋白酶的溶液沖流之前(A)和之后(B)；圖16展示皮膚的燒傷切片，在用包括膠原蛋白酶和嗜熱菌蛋白酶的溶液沖流之前(A)和之后(B)；圖17顯示皮膚的燒傷切片，在用包括木瓜蛋白酶的溶液沖流之前(A)和之后(B)。

發(fā)明內(nèi)容
界定術(shù)語(yǔ)″皮膚創(chuàng)傷″和″創(chuàng)傷″是可以在此互換使用的，以描述包括失活組織的受損組織，包括但不限于，慢性皮膚潰瘍(例如，糖尿病性潰瘍和褥瘡)和燒傷。皮膚創(chuàng)傷可擴(kuò)散到整個(gè)或部分的皮膚層并且可進(jìn)一步擴(kuò)散到下面的肌肉和組織。
″X(qián)期″通常用于分類(lèi)皮膚創(chuàng)傷。創(chuàng)傷類(lèi)型根據(jù)創(chuàng)傷的嚴(yán)重程度分期。分期系統(tǒng)應(yīng)用于燒傷創(chuàng)傷、褥瘡和其它幾類(lèi)潰瘍和創(chuàng)傷。I期為表面創(chuàng)傷，特征在于皮膚的表面變紅。皮膚沒(méi)有破。這樣的創(chuàng)傷可能是，除了其它以外，開(kāi)始的褥瘡和同時(shí)趨于痊愈，當(dāng)壓力在此面積釋放時(shí)。II期特征在于破或不破的水皰，其中至少皮膚的部分層是受損的。II期褥瘡或壓力創(chuàng)傷可發(fā)展進(jìn)入III期褥瘡或壓力創(chuàng)傷。III期創(chuàng)傷擴(kuò)散到皮膚的所有層，并可能包括嚴(yán)重感染。IV期創(chuàng)傷擴(kuò)散到整個(gè)皮膚并包括下層肌肉、腱和骨骼。這種類(lèi)型的創(chuàng)傷如不積極治療能產(chǎn)生威脅生命的感染。V期是晚期創(chuàng)傷分類(lèi)，指非常深的，已進(jìn)入肌肉層并包括下層器官和骨骼的。在某些情況截肢手術(shù)可能是必須的。
術(shù)語(yǔ)″失活組織″用于此指壞死組織或痂，來(lái)自皮膚潰瘍或燒傷，它們由干血、化膿的滲出物、以及通常存在于表皮和真皮皮膚層的變性的蛋白的復(fù)合混合物組成。變性的蛋白主要是膠原、彈力蛋白、纖維蛋白、血紅蛋白和其它凝固蛋白。膠原占皮膚干重的大約75％并且是壞死殘骸和痂的主要組成。半活力的、缺乏抵抗力的膠原的帶，其保護(hù)性粘多糖鞘已受損或被破壞，錨定壞死組織于創(chuàng)傷表面。必須全部清除這些帶，以便從基質(zhì)分離壞死材料。這樣徹底的清創(chuàng)術(shù)之后允許肉芽組織在痊愈過(guò)程中發(fā)育。
術(shù)語(yǔ)″清創(chuàng)術(shù)″用于此指從創(chuàng)傷移去非活性組織的方法，以防止感染和促進(jìn)痊愈，因?yàn)閯?chuàng)傷的痊愈是復(fù)雜的過(guò)程，它經(jīng)常由于創(chuàng)床中非活性、壞死的組織的存在而進(jìn)一步復(fù)雜化。
術(shù)語(yǔ)″創(chuàng)床準(zhǔn)備″用于此解釋為它最廣泛的含義，并且指創(chuàng)傷的總體處理以加速內(nèi)源痊愈或促進(jìn)治療藥征的效果。急性創(chuàng)傷的創(chuàng)床準(zhǔn)備包括清創(chuàng)術(shù)和移去壞死組織和細(xì)菌。慢性創(chuàng)傷中，創(chuàng)床準(zhǔn)備更復(fù)雜，因?yàn)槎鄶?shù)壞死物質(zhì)不能易于接觸到，因此創(chuàng)床準(zhǔn)備進(jìn)一步包括移去滲出物。
實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的優(yōu)選模式本發(fā)明涉及治療皮膚的一種裝置和方法。該裝置提供治療溶液進(jìn)入皮膚創(chuàng)傷的創(chuàng)床的恒流，通過(guò)多個(gè)可調(diào)的引入導(dǎo)管。多個(gè)引入導(dǎo)管相對(duì)于皮膚創(chuàng)傷的位置和角度是可調(diào)節(jié)的，由此對(duì)任何期望的深度和以任意角度連續(xù)地提供治療溶液。
本發(fā)明一般應(yīng)用于從皮膚創(chuàng)傷控制地移去或恢復(fù)細(xì)胞，包括但不限于，壓力潰瘍和慢性開(kāi)放創(chuàng)傷例如褥瘡和糖尿病性潰瘍。慢性創(chuàng)傷創(chuàng)床的準(zhǔn)備需要有效的壞死物質(zhì)的酶清創(chuàng)和連續(xù)地移去滲出物(Falanga，Wounds，1445-57，2002)。慢性創(chuàng)傷中的壞死物質(zhì)不易接觸。而且，慢性創(chuàng)傷可能產(chǎn)生大量的滲出物，它們抑制重要固有細(xì)胞的增殖和功能，并且包含降解細(xì)胞外基質(zhì)蛋白的蛋白酶。因此，本發(fā)明特別適于治療慢性皮膚創(chuàng)傷，因?yàn)樗鼘?duì)創(chuàng)傷內(nèi)和表面失活組織提供特別有效的酶清創(chuàng)術(shù)，同時(shí)連續(xù)移去滲出物、殘骸和從創(chuàng)傷排出的治療溶液。本發(fā)明的裝置適于以任何的角度和深度沖流清創(chuàng)酶溶液，以傳輸酶溶液進(jìn)入不易接觸的區(qū)域。
可以明白本發(fā)明不限于應(yīng)用于以下的描述或圖示關(guān)于構(gòu)建和布置組成部分的細(xì)節(jié)。本發(fā)明能是其它實(shí)施方式，或以不同方式實(shí)踐或執(zhí)行。并且，可以明白用于此的詞匯和術(shù)語(yǔ)是為了描述的目的而不應(yīng)當(dāng)作限制。
參考圖1A、1B和2，它們圖示敷料器，通常命名為200，根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方式構(gòu)建和操作，以提供治療溶液恒流進(jìn)入皮膚創(chuàng)傷的創(chuàng)床。
圖1A和1B是敷料器200的等距的圖示和側(cè)面觀。圖2是使用圖1的敷料器200分散(或沖流)和收集治療溶液的體系的圖示。
敷料器200包括屏蔽罩單元202，屏蔽罩單元構(gòu)造成儲(chǔ)藏多個(gè)引入導(dǎo)管204和至少一個(gè)引出導(dǎo)管206。屏蔽罩單元202可進(jìn)一步包括多個(gè)引流開(kāi)口205，其與至少一個(gè)引出導(dǎo)管206流體連通。因此，聚集在封塞的創(chuàng)傷和屏蔽罩單元中的流體，可由引流開(kāi)口205收集并導(dǎo)入引出導(dǎo)管206。敷料器200進(jìn)一步包括工具208以固定敷料器200于皮膚創(chuàng)傷(例如潰瘍)周?chē)钠つw。工具208可連接于屏蔽罩202，或在固定敷料器于皮膚創(chuàng)傷周?chē)つw時(shí)臨時(shí)地附于屏蔽罩。
敷料器200可連接于貯器210，貯器可儲(chǔ)存治療溶液。治療溶液可通過(guò)引入口212給藥，并且可通過(guò)至少一個(gè)引出口214收集進(jìn)入小室或廢物收集器216，例如，如以下會(huì)進(jìn)一步描述的。而且，多個(gè)引入導(dǎo)管和至少一個(gè)引出導(dǎo)管能構(gòu)造成多種布置以適應(yīng)不同位置的不同創(chuàng)傷。例如，多個(gè)引入導(dǎo)管204可被連接于單個(gè)貯器210以及反之亦然。
屏蔽罩202可能包括合適的形狀和結(jié)構(gòu)，以固定包括引入導(dǎo)管204和引出導(dǎo)管206的多個(gè)導(dǎo)管。圖1A和1B中描述的作為例子的實(shí)施方式中，屏蔽罩212包括圓錐形的形狀，在鄰近創(chuàng)床處有更寬的直徑。屏蔽罩212包括多個(gè)孔220，每個(gè)孔構(gòu)造成與它相應(yīng)的引入和/或引出導(dǎo)管的直徑匹配。本領(lǐng)域有經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)人員可以理解單個(gè)孔可用于固定多個(gè)引入和/或引出導(dǎo)管。
每個(gè)多個(gè)引入導(dǎo)管204可構(gòu)造成相對(duì)屏蔽罩單元202的位置和角度是可調(diào)節(jié)的，由此允許治療溶液給藥到特定的創(chuàng)床部位。因此，引入導(dǎo)管能夠深層地穿進(jìn)創(chuàng)傷并適于輸入一般不易接觸的區(qū)域。
引入導(dǎo)管204的遠(yuǎn)端222可構(gòu)造成面對(duì)皮膚創(chuàng)傷，并且遠(yuǎn)端222可順滑地彎曲成不造成外傷的頂端。而且，引入導(dǎo)管204的遠(yuǎn)端222的開(kāi)口224可在引入導(dǎo)管204內(nèi)的任何部分形成，例如其末端或沿導(dǎo)管的長(zhǎng)度，如圖1A的例子所示。
引入導(dǎo)管204可由任何合適的材料制成，例如可彎曲的彈性體，包括例如聚硅氧烷、聚氨基甲酸酯、天然橡膠、氯丁橡膠和乙烯基乙酸乙酯。每個(gè)引入導(dǎo)管可以是無(wú)色的和透明的以使操作者觀察到輸導(dǎo)到創(chuàng)床的流體的質(zhì)量和穩(wěn)定性。
本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式中，引入導(dǎo)管204可構(gòu)造成沿其縱軸可伸長(zhǎng)的或可縮短的，如本領(lǐng)域已知的。例如，可調(diào)節(jié)的螺釘機(jī)構(gòu)可能適于每個(gè)引入導(dǎo)管，因此將每個(gè)引入導(dǎo)管沿其縱軸伸長(zhǎng)或縮短。
類(lèi)似地，引出導(dǎo)管可構(gòu)造成沿其縱軸可伸長(zhǎng)的或可縮短的，如本領(lǐng)域已知的。
優(yōu)選地，每個(gè)引入和引出導(dǎo)管應(yīng)該安裝合適的加封單元，例如″O″環(huán)，以防止導(dǎo)管外徑和它相應(yīng)的孔之間流體的流動(dòng)。
固定工具208可包括本領(lǐng)域已知的任何合適的粘附工具，以粘附敷料器200于治療的皮膚。固定工具208可包括第一平面208a，它合適粘附于屏蔽罩202，和第二平面208b構(gòu)造為以粘附于皮膚。優(yōu)選地，固定工具208的尺寸大于治療的創(chuàng)床，以保證給藥于創(chuàng)床的流體保持在創(chuàng)床內(nèi)。工具208可由柔性的材料制成，例如粘性膜，能符合創(chuàng)傷部位的解剖學(xué)。在一些實(shí)施方式，第一平面208a也包括粘合劑。
粘附工具可以是生物相容的，并且固定工具208的底面可由保護(hù)性的可拆卸的膜覆蓋，并在敷料器200粘附創(chuàng)床周?chē)つw之前移去。
本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式中，每個(gè)引入導(dǎo)管204可包括合適的可彎曲的線226，它沿引入導(dǎo)管204的縱軸伸展，并適于連接其上?？蓮澢木€能維持在治療過(guò)程中引入導(dǎo)管204的角度和形狀?？蓮澢木€226可構(gòu)造成不超過(guò)引入導(dǎo)管204的遠(yuǎn)端(靠近創(chuàng)床)。可彎曲的線可由柔韌的和有彈性的剛性材料形成，例如銀、鉑、不銹鋼和聚合物。
引入導(dǎo)管204可包括縱向第一腔，獨(dú)立于所述導(dǎo)管的主要腔，構(gòu)造成儲(chǔ)藏可彎曲的線226在其中。
敷料器可包括控制儀，控制儀與至少一個(gè)引入導(dǎo)管和至少一個(gè)貯器流體連通，控制儀適于控制從至少一個(gè)貯器到至少一個(gè)引入導(dǎo)管的流體流速。控制儀可以選自蠕動(dòng)泵和滴注計(jì)數(shù)器組成的組?？刂苾x確定的流速是用新鮮催化活性酶溶液代替封塞的創(chuàng)傷點(diǎn)的酶溶液所需的任何速率。流速可在1ml/小時(shí)到10ml/小時(shí)范圍以?xún)?nèi)。更慢或更快的流速范圍也包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)，只要速率適于提供皮膚創(chuàng)傷失活組織有效的清創(chuàng)術(shù)。
根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，敷料器進(jìn)一步包括真空源，其與至少一個(gè)引出導(dǎo)管流體連通，因此在封塞的皮膚創(chuàng)傷產(chǎn)生負(fù)壓。在創(chuàng)傷點(diǎn)真空的使用已顯示在創(chuàng)傷的痊愈過(guò)程中有治療價(jià)值，如公布于例如美國(guó)專(zhuān)利No.6,135,116；6,695,823；6,767,334和美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)出版No.20020143286；20030040687和20030050594及其它，所有這些指定于KCI Licensing，Inc.。然而，單獨(dú)的真空在無(wú)有效的清創(chuàng)術(shù)時(shí)，不能有助于慢性創(chuàng)傷的創(chuàng)床準(zhǔn)備或創(chuàng)傷的內(nèi)部而非只是表面包含有壞死物質(zhì)的急性創(chuàng)傷的創(chuàng)床準(zhǔn)備。壞死組織不是被移去后就消失的恒定現(xiàn)象，而是壞死組織持續(xù)在皮膚創(chuàng)傷聚集，由于創(chuàng)傷處正在發(fā)生的程序性細(xì)胞死亡(Falanga，同前)。例如在壓力潰瘍，有足夠的血流的持續(xù)周期或伴隨周期性局部缺血(來(lái)自壓力)的縮短的水腫周期以及增加的水腫。因此，壞死材料周期性在創(chuàng)傷內(nèi)聚集，需要清除。
根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，敷料器進(jìn)一步包括溫度調(diào)節(jié)儀，其與至少一個(gè)貯器連通，因此影響所述至少一個(gè)貯器的流體的溫度。根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，敷料器進(jìn)一步包括溫度調(diào)節(jié)儀，并與所述多個(gè)引入導(dǎo)管的至少一個(gè)引入導(dǎo)管連通，因此影響所述至少一個(gè)引入導(dǎo)管的流體的溫度。
根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，敷料器進(jìn)一步包括至少一個(gè)過(guò)濾器，放置于所述多個(gè)引入導(dǎo)管的至少一個(gè)引入導(dǎo)管內(nèi)，以過(guò)濾至少一個(gè)引入導(dǎo)管流經(jīng)的流體。
本發(fā)明的進(jìn)一步實(shí)施方式，提供裝置240用于治療皮膚創(chuàng)傷，裝置包括敷料器200并且進(jìn)一步包括間隔物230，其固定于創(chuàng)傷周?chē)钠つw表面，以封塞包括創(chuàng)傷的區(qū)域。間隔物230可包括本領(lǐng)域已知的有彈力的不能滲透液體的材料，或彈性體，例如泡沫樣材料。間隔物230可包括任何合適的材料例如聚硅氧烷、聚硅氧烷泡沫、聚氨基甲酸酯、天然橡膠、氯丁橡膠和乙烯基乙酸乙酯泡沫。
間隔物的一個(gè)表面可合適地固定于屏蔽罩，而底面包括合適的工具以固定間隔物230于皮膚，合適的工具由合適的材料形成例如熱塑性樹(shù)脂、壓力敏感粘合劑、水膠體粘合劑和橡膠。固定間隔物230于皮膚和敷料器的工具可用保護(hù)性的可拆卸的膜覆蓋，在間隔物粘附皮膚和敷料器時(shí)移去。
現(xiàn)在參考圖3-12，圖示了裝置80和敷料器24，以在皮膚創(chuàng)傷上和經(jīng)過(guò)皮膚創(chuàng)傷沖流和收集包括有效劑量蛋白酶的溶液。
裝置80的一個(gè)實(shí)施方式示于圖3。根據(jù)這個(gè)實(shí)施方式的裝置80，包括第一貯器10，以?xún)?chǔ)藏包括至少一種蛋白酶有效劑量的溶液。第一貯器10可依據(jù)重復(fù)的用途由耐用的、惰性的、無(wú)孔的材料制成，例如玻璃、金屬或塑料。第一貯器10可在使用之間進(jìn)行消毒，通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法包括浸潤(rùn)或干熱、或防腐劑、氣體或輻射的使用。另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式，第一貯器10由非耐用的、用完即可丟棄的材料制成，例如金屬箔、塑料或?qū)硬蚪n紙板或紙，為單次使用、無(wú)菌和密封儲(chǔ)藏。第一貯器10的尺寸可以是足夠包括完成單個(gè)酶手術(shù)過(guò)程足夠的蛋白酶溶液的體積，或更小，在手術(shù)過(guò)程中必須補(bǔ)充。第一貯器10典型地為約1升體積，但可以從100mL到幾升變化。
一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，混合蛋白酶溶液的混合儀12與第一貯器10流體連通，以防止蛋白酶溶液成分不一致的分散?；旌蟽x12可以在第一貯器10的外部或內(nèi)部。混合可通過(guò)旋轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)完成，例如腔內(nèi)的轉(zhuǎn)子或旋轉(zhuǎn)片，或通過(guò)振動(dòng)的或旋轉(zhuǎn)的振蕩運(yùn)動(dòng)，例如振動(dòng)的或旋轉(zhuǎn)的平臺(tái)。
另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，第一貯器10與溫度調(diào)節(jié)儀14流體連通，以加熱和/或冷卻蛋白酶溶液到催化活性活化的優(yōu)選的溫度。溫度調(diào)節(jié)儀14可以是輻射地或熱對(duì)流的開(kāi)口腔，接收蛋白酶溶液流，或優(yōu)選地，是容納加熱和/或冷卻的液體浴或固體模塊的流體連通元件，例如玻璃或塑料導(dǎo)管，消除蛋白酶流與溫度調(diào)節(jié)儀14的直接液體接觸，并且減少蛋白酶溶液被期望的污染物污染的危險(xiǎn)。
這里所用的術(shù)語(yǔ)″流體連通″主要指選擇或非選擇的液體和/或半液體物質(zhì)在指定的元件之間傳輸?shù)哪芰Α＿@樣的傳輸可通過(guò)例如通道、導(dǎo)管、膜、管道、小孔和/或毛細(xì)管完成。
在本發(fā)明的進(jìn)一步實(shí)施方式，第一貯器10與過(guò)濾器16流體連通，過(guò)濾器16用于蛋白酶溶液使用前的除菌。過(guò)濾器16優(yōu)選地是封閉的(除了導(dǎo)入和引出口)、包括過(guò)濾膜的除菌的屏蔽罩，以除去大于例如0.25微米的顆粒，除去一般的細(xì)菌污染。一個(gè)這樣的市場(chǎng)上可得到的過(guò)濾器分類(lèi)在名為Complete Sterifil System(Sigma Chemical Company，Inc.)。本發(fā)明的進(jìn)一步實(shí)施方式中，第一貯器10與泵18流體連通，泵18用于在正壓下從第一貯器10到敷料器24(詳細(xì)圖示于以下)沖流蛋白酶溶液。因此，蛋白酶被遞送到治療的位點(diǎn)，并帶有足夠的力量影響機(jī)械的“剝離”運(yùn)動(dòng)，此外還有對(duì)基質(zhì)蛋白的酶解。本發(fā)明提供的對(duì)創(chuàng)傷組織直接的、機(jī)械的力量和酶瓦解的創(chuàng)新聯(lián)合，使從治療表面去除細(xì)胞和組織成為可能。
泵18可以是氣泵、活塞驅(qū)動(dòng)的液泵、注射器泵或壓縮器。本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式中，泵18優(yōu)選地是變速蠕動(dòng)泵，通過(guò)可變流體連通元件上的壓力操縱，消除與蛋白酶溶液的直接液體接觸以及隨后污染的危險(xiǎn)。變速的特征進(jìn)一步提供用于皮膚病學(xué)創(chuàng)傷的蛋白酶溶液流的強(qiáng)度控制。一個(gè)這樣的市場(chǎng)上可得到的蠕動(dòng)泵分類(lèi)在名為Masterflex Economy(AldrichChemical Company，Inc.)。本發(fā)明的一個(gè)可選擇的實(shí)施方式中，蛋白酶溶液的流受重力的影響，后者通過(guò)升高第一貯器10高于其它與其流體連通的元件實(shí)現(xiàn)。
通常，敷料器24用于在皮膚上沖流溶液和接觸皮膚。敷料器24包括具有面對(duì)皮膚開(kāi)口的屏蔽罩，至少一個(gè)引入導(dǎo)管和至少一個(gè)引出導(dǎo)管。所述至少一個(gè)引入導(dǎo)管和至少一個(gè)引出導(dǎo)管各為穿過(guò)皮膚部分和在皮膚部分上沖流溶液提供通道，所述皮膚部分由面對(duì)皮膚的開(kāi)口限定，其中溶液流的高度通過(guò)至少一個(gè)引入導(dǎo)管和至少一個(gè)引出導(dǎo)管的至少之一的開(kāi)口是可調(diào)節(jié)的，如此敷料器24物理地符合非平滑皮膚表面。
術(shù)語(yǔ)″高度″用于此指引入導(dǎo)管從開(kāi)口108伸展到創(chuàng)傷的長(zhǎng)度。長(zhǎng)度也可以是開(kāi)口108和面對(duì)創(chuàng)傷的引入導(dǎo)管頂之間的距離。
敷料器24與第一貯器10流體連通，設(shè)計(jì)并構(gòu)建以限制蛋白酶在治療中流經(jīng)和接觸皮膚部分的流。敷料器24包括兩個(gè)口，引入口20作為從第一貯器10接收蛋白酶溶液，以及引出口22作為從治療的皮膚病學(xué)創(chuàng)傷移去蛋白酶溶液和細(xì)胞。敷料器24進(jìn)一步包括凹陷的面對(duì)皮膚的表面28，被敷料器24向下突出的外框包圍，構(gòu)成限定的、局部的治療區(qū)域，以防止鄰近組織暴露于蛋白水解活性。
敷料器24的一個(gè)實(shí)施方式示于圖10-12。引入口20和引出口22提供蛋白酶溶液流的直接的液體運(yùn)動(dòng)，促成機(jī)械“剝離”效應(yīng)，提高細(xì)胞內(nèi)基質(zhì)的酶瓦解以及從治療創(chuàng)傷的表面去除細(xì)胞。敷料器24可附于皮膚表面，通過(guò)向皮膚的壓力，壓力可通過(guò)當(dāng)事的操作者或由治療的個(gè)體、重力、連接于周?chē)つw表面的粘合劑或其它工具施加，適合有要治療的創(chuàng)傷的機(jī)體部分。一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式敷料器24包括連接機(jī)構(gòu)26，它包括兩個(gè)或多個(gè)柔韌的元件，其可調(diào)節(jié)地連接以允許合圍圓柱狀的機(jī)體部分(例如四肢或軀干)以及通過(guò)張力施加對(duì)皮膚的壓力，例如帶片和皮帶扣或有齒的帶的緊固件。
敷料器24可由耐用的、無(wú)孔的材料構(gòu)建，包括，但不限于玻璃、金屬、塑料或橡膠，并且可以是能重復(fù)使用的或優(yōu)選的用完即可丟棄的。敷料器24優(yōu)選地能通過(guò)氣體、化學(xué)物、濕或干熱、或輻射滅菌，而且提供為封閉的和滅菌的以供使用。另一個(gè)實(shí)施方式中，敷料器24是″推拉″套管，典型地應(yīng)用于組織灌流技術(shù)，例如由Arancibia，S.描述在″Push-pullPerfusion Technique In Neuroendocrinology″，Ann.Endocrinol.(Paris)48，410-18(1987)，它包括一個(gè)進(jìn)流導(dǎo)管，其凹陷在一個(gè)更寬的流出導(dǎo)管，造成局部蛋白酶溶液的流，受限于更寬的流出導(dǎo)管的直徑。
現(xiàn)在參考圖10，包括在本發(fā)明裝置的敷料器的作為例子的實(shí)施方式的橫截面觀。敷料器24包括有引入導(dǎo)管102和引出導(dǎo)管104的屏蔽罩100。通過(guò)引入導(dǎo)管102進(jìn)入的流體直接地通過(guò)第一導(dǎo)管結(jié)構(gòu)106到達(dá)治療區(qū)107，治療區(qū)107由多少是圓錐形的聚硅氧烷結(jié)構(gòu)114限定，其具有面對(duì)皮膚直徑9mm的開(kāi)口108。放在第一導(dǎo)管結(jié)構(gòu)106內(nèi)的第二導(dǎo)管結(jié)構(gòu)110用于引導(dǎo)流體從治療區(qū)107到引出104。O-環(huán)112用于限制流進(jìn)入第一導(dǎo)管結(jié)構(gòu)106內(nèi)的預(yù)期方向。螺釘機(jī)構(gòu)116允許調(diào)節(jié)第二導(dǎo)管結(jié)構(gòu)110的開(kāi)口118相對(duì)治療區(qū)107的面對(duì)皮膚開(kāi)口108的高度。優(yōu)選地，如在此示例地描述的泵，是用于從貯器引流到引入102。引流管用于從引出104引流。
根據(jù)本發(fā)明，裝置80優(yōu)選地進(jìn)一步包括細(xì)胞收集器30，后者與第一貯器10和敷料器24流體連通，細(xì)胞收集器用于收集從治療的創(chuàng)傷表面除去的蛋白酶溶液和細(xì)胞，并且提供廢液或?qū)⒁ㄟ^(guò)裝置80再循環(huán)的液體的流出物。收集的細(xì)胞可用于組織學(xué)檢測(cè)和/或細(xì)胞培養(yǎng)程序。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，細(xì)胞收集器30包括過(guò)濾器32，以收集和分離從皮膚病學(xué)創(chuàng)傷除去的細(xì)胞。收集器30和濾器32優(yōu)選地是提供為無(wú)菌的、用完即可丟棄的模塊單位，例如the Complete Sterifil System(Sigma，Israel)。本發(fā)明的進(jìn)一步實(shí)施方式，它特別示于圖4，通過(guò)恒流離心40分離細(xì)胞收集器30中的液體和細(xì)胞部分。恒流離心提供更高的液體處理能力，在蛋白酶溶液流出物到達(dá)時(shí)快速?gòu)姆罅掀?4移去，并且為檢測(cè)和/或培養(yǎng)濃縮創(chuàng)傷細(xì)胞。
可以理解，在本發(fā)明的內(nèi)容中，通過(guò)細(xì)胞收集器30收集的創(chuàng)傷細(xì)胞是暴露于蛋白酶活性的，在到達(dá)細(xì)胞收集器30的蛋白酶流的液體成分的分離過(guò)程中。細(xì)胞形態(tài)和代謝完整性的保留，而且因此的診斷價(jià)值，可能部分依賴(lài)于它們延長(zhǎng)的與蛋白酶接觸的限制。因此，在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，細(xì)胞收集器30構(gòu)建成在中間過(guò)程允許移去和/或取樣細(xì)胞。這可能會(huì)受蛋白酶溶液通過(guò)敷料器24的流周期性的中斷，移去過(guò)濾器32的過(guò)濾元件，和重置新鮮的過(guò)濾元件的影響。可選擇的，整個(gè)細(xì)胞收集器30可以在手術(shù)過(guò)程中置換為新鮮的細(xì)胞收集器單元。恒流離心40是細(xì)胞收集的工具，離心操作可周期性的停止以允許從離心機(jī)轉(zhuǎn)子移去收集的細(xì)胞。更優(yōu)選地，離心會(huì)提供濃縮細(xì)胞的連續(xù)的流出物，用以檢測(cè)和/或細(xì)胞培養(yǎng)。
可以注意到細(xì)胞收集器30的液體流出物包括大量的活性蛋白酶溶液，沒(méi)有細(xì)胞和組織殘骸部分，它們通過(guò)過(guò)濾器32和/或離心40已被移去，過(guò)濾器32和/或離心40可被循環(huán)使用。因此，在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，細(xì)胞收集器30的液體流出物被再引到敷料器24和泵18的至少一種蛋白酶溶液″上游″的流。通過(guò)單向閥連接影響細(xì)胞收集器流出物和蛋白酶溶液流之間的流體連通，確保流體單向流向敷料器24。因此，通過(guò)重復(fù)使用細(xì)胞收集器30的流出物取得操作的顯著的經(jīng)濟(jì)效益，有效地減少每次治療所需的蛋白酶溶液的體積。
其它的酶手術(shù)裝置80的實(shí)施方式描述于圖5-9，在每個(gè)例子溫度調(diào)節(jié)儀14、過(guò)濾器16、泵18、敷料器24和細(xì)胞收集器30基本如前面所述。
一個(gè)實(shí)施方式中，描述于圖5，裝置80包括，除了第一貯器10，還有第二貯器34和第三貯器36，用以分別包括基本非活性第一蛋白酶溶液和第二蛋白酶活性溶液。因此，蛋白酶溶液在使用前可以穩(wěn)定的、非活性形式制備和儲(chǔ)存，當(dāng)和第一貯器10中的活性溶液混合后才獲得基本的催化活性。
在進(jìn)一步實(shí)施方式中，描述于圖6，酶手術(shù)裝置80包括第一貯器10和第二貯器38，以分別包括第一種基本非活性蛋白酶和第二種活性溶液。因此，放置于第一貯器10的粉末、冷凍脫水的和/或其它，不含水的、穩(wěn)定的蛋白酶制劑可儲(chǔ)存直到使用，最小化自動(dòng)裂解和催化活性的喪失。第一10和第二38貯器是流體連通的，以通過(guò)混合儀12混合其內(nèi)含物時(shí)提供催化活性蛋白酶溶液。
圖7-9描述酶手術(shù)裝置80，設(shè)計(jì)成接收蛋白酶、蛋白酶溶液和/或蛋白酶活性溶液的準(zhǔn)備貯器或安瓿。一個(gè)實(shí)施方式，描述于圖7，容器42設(shè)計(jì)成接收模塊貯器或安瓿44，包括催化活性蛋白酶溶液，影響與敷料器24、細(xì)胞收集器30以及裝置80其它″下游″元件的流體連通。因此，裝置80可與標(biāo)準(zhǔn)的、預(yù)先制備的、儲(chǔ)存的酶溶液一起操作，以增加使用的簡(jiǎn)單性和遞送的蛋白酶活性的準(zhǔn)確性，減少被治療皮膚表面感染的危險(xiǎn)。
如在此詳述和以后的權(quán)利要求部分所用，術(shù)語(yǔ)″貯器″和″安瓿″互換地指單獨(dú)的、封閉的容器，能與其它器皿、容器或設(shè)備建立流體連通。這樣的貯器或安瓿典型地包括液體或液體樣物質(zhì)，可設(shè)計(jì)成通過(guò)互補(bǔ)的容器或屏蔽罩精確地嚙合。封閉的貯器或安瓿為制備和儲(chǔ)存活性溶液和試劑提供了方便、標(biāo)準(zhǔn)的工具，用于操作例如酶手術(shù)裝置80。
另一個(gè)實(shí)施方式中，描述于圖8，第一容器46接收第一模塊貯器或安瓿48，后者包括非活性、穩(wěn)定的蛋白酶溶液，而第二容器50接收第二模塊貯器或安瓿52，后者包括蛋白酶活性溶液。第一容器46和第二容器50與混合腔54流體連通，混合腔54用于提供流體接觸以及第一貯器48和第二貯器52內(nèi)容物的混合，活化穩(wěn)定的、非活性蛋白酶。如上所述的混合儀12可放于混合腔54內(nèi)。
另一個(gè)實(shí)施方式，描述于圖9，第一容器58接收第一模塊貯器或安瓿60，后者包括穩(wěn)定的、非活性的蛋白酶制劑，以粉末的、冷凍脫水的和/或其它不含水的形式。第二容器62接收第二模塊貯器或安瓿64，后者包括活性溶液。第一容器58和第二容器62與混合機(jī)構(gòu)56流體連通，提供不含水的蛋白酶制劑在活性溶液中的接觸和有效的分散。
傳統(tǒng)機(jī)械和非機(jī)械的治療和除去皮膚創(chuàng)傷方法例如剃刀或解剖刀切除、CO2激光手術(shù)、冷凍手術(shù)、電烙術(shù)和電切除，伴隨疼痛、應(yīng)力外傷、出血、瘢痕形成、感染、色素沉著以及分裂鄰近和下面的組織。皮膚創(chuàng)傷和創(chuàng)傷更溫和的蛋白水解消化已顯示提供這樣的創(chuàng)傷的優(yōu)良的愈合，減少瘢痕形成、出血和感染的發(fā)病率。實(shí)際上，蛋白酶制劑通常用于促進(jìn)痊愈和減少CO2激光手術(shù)創(chuàng)傷的瘢痕形成。
蛋白酶溫和地分裂皮膚組織的完整性的能力已經(jīng)使蛋白水解酶用于治療，作為皮膚創(chuàng)傷機(jī)械或激光手術(shù)的治療的輔助或替代選擇。為了這樣的酶治療克服以上所述手術(shù)、電手術(shù)、冷凍手術(shù)和激光手術(shù)方法的缺點(diǎn)(疼痛、瘢痕形成、應(yīng)力外傷、色素沉著以及分裂鄰近的組織)，希望蛋白水解方法易于和徹底地水解皮膚創(chuàng)傷發(fā)現(xiàn)的多種蛋白；在生理pH和溫度下起作用；與輔助治療相容(例如，麻醉劑、清潔劑、局部抗體)；不影響正常創(chuàng)傷痊愈或使皮膚移植復(fù)雜化。并且，重要的是提供保留和貯藏分離的、除去的細(xì)胞生存能力的工具，以用于組織學(xué)檢查或細(xì)胞培養(yǎng)；以允許蛋白酶局部和限制的使用，以及提供酶制劑的穩(wěn)定，防止pH、溫度和自動(dòng)蛋白水解效應(yīng)。這些和其它有益的考慮由本發(fā)明第一次作為整體的進(jìn)展發(fā)表。因此，本發(fā)明提供的好處包括溫和的酶組織除去，通過(guò)局部定向的蛋白酶流機(jī)械″剝離″運(yùn)動(dòng)而增強(qiáng)，通過(guò)包括麻醉劑提供減少疼痛和創(chuàng)傷痊愈，蛋白酶溶液中的促凝劑/抗促凝劑和抗體以及可獲得的除去的皮膚細(xì)胞用于從治療的創(chuàng)傷的組織學(xué)檢查和/或細(xì)胞培養(yǎng)。此外，蛋白酶溶液流的溫度、pH和流速的控制，穩(wěn)定的酶制劑的局部活化的提供確保了準(zhǔn)確、有效的催化活性送到創(chuàng)傷表面。
蛋白酶廣泛地用于非活性組織的清創(chuàng)術(shù)，例如，由Mekkes，J.R.等人描述的(同上)；調(diào)節(jié)通過(guò)CO2激光手術(shù)刻畫(huà)的皮膚，例如，由Gaspar，L.等人描述的(同上)；和老化，例如，屬于Norton等人發(fā)表于美國(guó)專(zhuān)利No.5,976,556，開(kāi)發(fā)酶消化細(xì)胞外基質(zhì)的蛋白成分的能力，并且不損傷健康的組織。選擇合適的酶制劑、使用的方法、治療的程度，著重于殘骸和非活性組織的除去。因?yàn)槟z原、彈力蛋白、纖維蛋白和蛋白多糖是皮膚細(xì)胞外基質(zhì)的主要成分，在異常的條件下例如瘢痕瘤、傷疤、疣和纖維化甚至明顯地增多，所以膠原蛋白酶、彈性蛋白酶和透明質(zhì)酸酶、以及其組合，已被最經(jīng)常地用于皮膚病學(xué)創(chuàng)傷的治療。然而，使用酶的這些治療方法只限于局部使用和皮內(nèi)注射。
因此，Pinnell在美國(guó)專(zhuān)利No.4,645,668，教導(dǎo)通過(guò)重復(fù)的皮內(nèi)注射蛋白酶治療和預(yù)防痤瘡和肥厚性瘢痕、瘢痕瘤、皺紋和蜂窩組織，蛋白酶主要地是膠原蛋白酶以及另外的透明質(zhì)酸酶。作者取得多數(shù)治療的創(chuàng)傷的顯著的解決，顯示蛋白酶消化基質(zhì)組織的效力，報(bào)道了很少的，如果有，副反應(yīng)。然而，要求幾周的重復(fù)的皮內(nèi)注射來(lái)取得期望的效果。除了這個(gè)治療方法的不適和耗時(shí)的特點(diǎn)以外，沒(méi)有可能從創(chuàng)傷保留細(xì)胞，迫使在酶治療前使用傳統(tǒng)的、手術(shù)的活組織檢查方法。相似地，de Faire等人在美國(guó)專(zhuān)利No.5,958,406中，教導(dǎo)治療多種與細(xì)胞粘附過(guò)程有關(guān)的情況，用多功能酶磷蝦蛋白酶，包括胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶、彈性蛋白酶、膠原蛋白酶和外肽酶活性。進(jìn)行皮膚和內(nèi)部創(chuàng)傷治療，通過(guò)局部、非腸道、氣溶膠、全身的、肌內(nèi)的和皮內(nèi)的遞送蛋白酶組合物。蛋白酶的皮內(nèi)注射被建議治療傷疤和瘢痕瘤創(chuàng)傷。因此，治療區(qū)域細(xì)胞的收集和保留是不可能的，如在其它皮膚病學(xué)的酶治療程序中，不提供給藥后蛋白酶活性的控制。
局部使用，或注射蛋白酶對(duì)于原位保留的催化活性的水平提供很少的控制，伴有自動(dòng)蛋白水解和正常皮膚溶解和造成不可預(yù)料降解的酸性過(guò)程。雖然許多局部或皮內(nèi)的蛋白酶遞送的操作依賴(lài)于個(gè)體、確定治療長(zhǎng)度的經(jīng)驗(yàn)的結(jié)果，但是建議局部治療使用酸性蛋白酶，相容于正常的人類(lèi)皮膚的pH，能確保對(duì)活性酶劑量的更大的控制，如描述于屬于Norton等人的美國(guó)專(zhuān)利5,976,556。然而，在上述的發(fā)明中，如其它局部酶使用，目前沒(méi)有在治療后控制酶活性的方法。
因此，根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)方面，提供治療皮膚創(chuàng)傷的方法，所述方法包括從皮膚創(chuàng)傷的創(chuàng)床除去失活組織和細(xì)胞，方法的效果通過(guò)使用包括有效劑量的至少一種蛋白酶的溶液流于創(chuàng)床上并與創(chuàng)床接觸。通過(guò)聯(lián)合對(duì)細(xì)胞內(nèi)基質(zhì)蛋白的酶解和流體力對(duì)創(chuàng)床的機(jī)械瓦解，失活的的細(xì)胞和組織被從組織移去，并進(jìn)一步從創(chuàng)傷點(diǎn)移去。蛋白酶溶液通過(guò)流應(yīng)用于創(chuàng)傷的表面上提供了精確定位和酶活性大小和持續(xù)時(shí)間的控制，通過(guò)治療過(guò)程中控制酶的濃度、酶溶液的pH、溫度、疏水性/親水性、流的強(qiáng)度、持續(xù)時(shí)間和與蛋白酶溶液接觸的位點(diǎn)。如上所述，本發(fā)明的裝置提供對(duì)酶治療的多種控制，通過(guò)例如混合儀12、溫度調(diào)節(jié)儀14、泵18和敷料器24。
如在此所用術(shù)語(yǔ)″蛋白酶″指任何生物活性分子，典型地是多肽，有酶肽水解酶活性，包括內(nèi)肽酶和/或外肽酶活性。
在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，蛋白酶是，但不限于，弧菌溶血素、磷蝦蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶、膠原蛋白酶、彈性蛋白酶、分散酶、蛋白酶K、梭狀芽孢桿菌多功能蛋白酶和枯草桿菌蛋白酶。這些代表目前通常用于治療方法的蛋白酶，已顯示不期望的副反應(yīng)的低發(fā)病率，商業(yè)上能得到純品、純化的或基因工程形式，例如，Esperase(超酶)、Subtilisin A(枯草桿菌蛋白酶A)、Savinase(沙芬酶)和Durazyme(硬膜酶)，從Novo Nordisk Bioindustry Japan K.K.可得到；蛋白酶N″Amano″、蛋白酶S″Amano″，從Amano Pharmaceutical K.K.可得到；Bioprase(枯草桿菌產(chǎn)蛋白質(zhì)酶)，從Nagase Seikagaku Kogyo K.K可得到；以及PurifiedCollagenase(純化的膠原蛋白酶)，從Advance Biofactures，Lynbrook，N.Y.可得到，梭狀芽胞桿菌多功能蛋白酶和磷蝦蛋白酶通過(guò)本領(lǐng)域的技術(shù)人員容易制備，例如，公布于分別屬于Markert等人的美國(guó)專(zhuān)利No.6,416,626和屬于de Faire等人的5,958,406。
其它可選擇的蛋白酶是木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶、纖維蛋白溶酶原活化因子、纖維蛋白溶酶、肥大細(xì)胞蛋白酶、溶酶體水解酶、鏈激酶、胃蛋白酶、以及任何或所有真菌、細(xì)菌、植物或動(dòng)物蛋白酶。本發(fā)明的蛋白酶溶液可包括單種蛋白酶、或優(yōu)選地，多種蛋白酶。蛋白酶溶液也可包括一種或多種氨基葡聚糖降解酶，例如，但不限于，多種溶酶體水解酶，包括某些內(nèi)切糖苷酶(類(lèi)肝素酶和CTAP降解硫酸乙酰肝素和少量肝素，以及從羊或牛睪丸降解透明質(zhì)酸得到的透明質(zhì)酸酶和硫酸軟骨素)、多種糖苷外切酶(例如，β-葡萄糖醛酸苷酶(glucoronidase))、和硫酸酯酶(艾杜糖醛酸硫酸酯酶(iduronate sulfatase))，通常作用于序列以降解多種氨基葡聚糖。細(xì)菌裂解酶例如，來(lái)自黃桿菌肝素(Flavobacteriun heparinum)裂解肝素樣分子的肝素酶I、II和III、來(lái)自普通變形桿菌(Proteus vulgaris)的軟骨素酶ABC、來(lái)自白色節(jié)桿菌(Arthrobacter aurescens)或黃桿菌肝素的AC，來(lái)自黃桿菌肝素降解硫酸軟骨素的B和C。
更多的優(yōu)勢(shì)甚至是結(jié)合更多的局部的、非蛋白酶物質(zhì)，能減少不期望的副反應(yīng)。Schmitt等人在美國(guó)專(zhuān)利No.4,122,158中教導(dǎo)生物聚合物的使用，生物聚合物包括蛋白酶、抗菌劑、抗生素和抗真菌物質(zhì)，以治療和預(yù)防燒傷創(chuàng)傷的瘢痕形成和感染。甚至潛在地伴隨于從皮膚創(chuàng)傷的酶去除細(xì)胞的輕度的流血、疼痛和瘢痕形成可通過(guò)與蛋白酶溶液同時(shí)使用合適的物質(zhì)而緩解。本發(fā)明的裝置非常適于遞送包括另外與蛋白酶活性相容的活性物質(zhì)的溶液，通過(guò)包括這樣的物質(zhì)于包括清創(chuàng)溶液的貯器內(nèi)的溶液。
在本發(fā)明的進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方式，蛋白酶溶液包括至少一種局部麻醉劑、促凝劑和抗促凝劑。在另一個(gè)實(shí)施方式中，蛋白酶溶液進(jìn)一步包括有效劑量的抗生素。蛋白酶溶液可進(jìn)一步包括合適的藥物可接收載體。
如在此所用，術(shù)語(yǔ)″局部麻醉劑″指任何試劑，在禁止的區(qū)域內(nèi)(例如，非全身地)，顯著影響不可接受(nonciceptive)物質(zhì)、受體和/或神經(jīng)通路的活性的減低或抑制。通常使用的局部麻醉劑的非限定性例子是環(huán)氧合酶抑制劑(例如布洛芬、吲哚美辛和酮咯酸)、5-羥色胺受體拮抗劑(例如淀粉色胺(amytryptyline))、緩激肽(bradykinine)受體拮抗劑和組胺受體拮抗劑。
如在此所用，術(shù)語(yǔ)″促凝劑″指任何促進(jìn)血液凝固、或凝結(jié)的藥劑，它們可安全地用于皮膚病學(xué)創(chuàng)傷。這樣的促凝劑物質(zhì)的非限定性例子包括明膠、凝血酶和鈣，描述于屬于Epstein等人的美國(guó)專(zhuān)利No.6,045,570。類(lèi)似地，術(shù)語(yǔ)″抗促凝劑″指任何延緩、抑制或防止血液凝固、或凝結(jié)的藥劑，它們可安全地用于皮膚病學(xué)創(chuàng)傷，例如肝素、香豆素類(lèi)或其它有血栓溶解活性的藥劑。
如在此詳述和以下的權(quán)利要求部分所用，術(shù)語(yǔ)″藥物可接受載體″指藥物可接受物質(zhì)、組合物或運(yùn)輸工具，例如液體過(guò)濾器、稀釋劑、溶劑或膠囊材料，參與攜帶或運(yùn)輸本發(fā)明的化合物到期望它發(fā)揮功能的個(gè)體或之中。每個(gè)載體必須是″可接受″，意思是與制劑的其它成分相容，對(duì)病人無(wú)害?？勺鳛樗幬锟山邮茌d體材料的一些例子包括糖，例如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉，例如玉米淀粉和土豆淀粉；纖維素、和其衍生物，例如羧甲基纖維素鈉、乙基纖維素和醋酸纖維素；黃蓍樹(shù)膠粉末；麥芽；明膠；滑石粉；油脂，例如花生油、棉子油、紅花油、麻油、橄欖油、玉米油和大豆油；乙二醇，例如丙二醇；多元醇，例如甘油、山梨糖醇、甘露醇和聚乙二醇；酯類(lèi)，例如油酸乙酯和月桂酸乙酯；瓊脂；緩沖劑，例如氫氧化鎂和氫氧化鋁；海藻酸；果酸，無(wú)熱原的水；等滲鹽；Ringer′s溶液；乙醇；磷酸鹽緩沖液；和其它用于藥物制劑的非毒性相容物質(zhì)。
如在此所用，抗生素的″有效劑量″預(yù)期地包括抗生素的量，其足以有效防止和抑制至少50％，優(yōu)選地75％和最優(yōu)選地100％的治療個(gè)體皮膚病學(xué)創(chuàng)傷內(nèi)細(xì)菌的生長(zhǎng)，這樣的有效劑量由本領(lǐng)域的技術(shù)人員確定。
皮膚病學(xué)創(chuàng)傷表面的預(yù)處理可提供非常有效的后續(xù)蛋白酶治療。正常的表皮由死扁平細(xì)胞層組成，它提供有效的機(jī)械屏障保護(hù)下面活力的皮層。Yu等人(美國(guó)專(zhuān)利No.4,105,783和4,363,815)描述了用角質(zhì)素溶解劑(keratinolytic)、過(guò)氧化苯?；?desquamifying)劑例如低分子量羥基酸或酮酸、和其酯，從富含角質(zhì)素的角質(zhì)層移去死細(xì)胞。這種皮膚脫落也通過(guò)包括皮膚摩擦劑、潤(rùn)滑藥、去污劑、收斂劑和皮膚軟化劑的化妝品制劑來(lái)完成。因此，在本發(fā)明的進(jìn)一步實(shí)施方式中，創(chuàng)傷的表面由清潔劑、軟化劑、收斂劑、表皮脫落劑和/或皮膚摩擦劑的流進(jìn)行預(yù)治療。裝置80非常適于這樣使用，只要求提供合適的預(yù)治療溶液于第一貯器10、第二貯器34或38、第三貯器36、貯器或安瓿44、第一貯器或安瓿48、第二貯器52、第一貯器或安瓿60、和/或第二貯器或安瓿64。
可以理解在本發(fā)明的內(nèi)容，蛋白酶的催化活性的制劑的自我分解和功能性酶濃度的損失，構(gòu)成酶的局部、注射和/或其它組合物治療給藥的顯著不利。蛋白酶活性的貯存期限是有限的，給藥點(diǎn)精確控制酶活性實(shí)際上是達(dá)不到的，當(dāng)注射或局部使用完成時(shí)。一些發(fā)明已提議包括酶的生物活性物質(zhì)儲(chǔ)存在接觸限制其天然活性的物質(zhì)或在限制其天然活性的條件下，有效鈍化和穩(wěn)定，直到接觸基本足夠量的活性物質(zhì)，或在足夠恢復(fù)生物活性的條件下。例如，Edens等人(美國(guó)專(zhuān)利No.6,117,433)教導(dǎo)穩(wěn)定生物活性物質(zhì)的方法，例如維生素、酶和抗生素在高濃度，通過(guò)在水活性減弱劑例如鹽、多元醇、多價(jià)螯合劑例如EDTA、赤蘚醇(phyate)或葡萄糖酸，或抗氧化劑例如亞硫酸酯、谷胱甘肽、半胱氨酸或抗壞血酸中制備。生物活性物質(zhì)的晶體組合物，典型地比含水制劑穩(wěn)定，與粘化劑混合以阻止沉淀和保證生物活性組合物的均一性。本公開(kāi)進(jìn)一步描述這種穩(wěn)定制劑的分散系統(tǒng)，通過(guò)與含水組合物的稀釋而活化生物活性物質(zhì)。Nakagawa等人在美國(guó)專(zhuān)利No.5,409,546中描述穩(wěn)定絲氨酸蛋白酶的方法，絲氨酸蛋白酶來(lái)自屬于桿菌的細(xì)菌，通過(guò)添加多元醇用以接觸鏡片清潔劑組合物，以及詳述溫度的限定范圍(室溫到大約58℃)，在此溫度范圍酶保留催化活性。Rowan等人在美國(guó)專(zhuān)利No.5,106,621教導(dǎo)恢復(fù)用于燒傷創(chuàng)傷治療的植物半胱氨酸蛋白酶的催化活性的方法，通過(guò)添加半胱氨酸以再生巰基。然而，上述例子沒(méi)有一個(gè)關(guān)于活細(xì)胞治療使用的蛋白酶的給藥，也沒(méi)有在使用的位點(diǎn)提供進(jìn)行的、精確的對(duì)活化催化活性的控制。
因此，本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式中，提供治療皮膚創(chuàng)傷的方法，蛋白酶先短暫地活化，然后沖流包括有效量至少一種蛋白酶的溶液于治療皮膚部分之上并接觸。所述方法其中的蛋白酶被活化可能實(shí)現(xiàn)于(a)保持蛋白酶于第一溫度，在此溫度蛋白酶基本是催化非活性的，以及加熱和/或冷卻所述的至少一種蛋白酶到第二溫度，在此溫度所述蛋白酶是催化活性的；和/或(b)以粉末形式提供蛋白酶，以及和一種溶液混合，在其中蛋白酶是催化活性的；和/或(c)提供蛋白酶于第一溶液中，在其中蛋白酶基本是催化非活性的，以及混合第一溶液和第二溶液，以至得到混合溶液，在其中蛋白酶是催化活性的。所述第二溶液與所述第一溶液可以有不同的pH、離子濃度、游離金屬濃度、親水性和疏水性。例如，圖3描述酶手術(shù)裝置80與溫度調(diào)節(jié)儀14流體連通，以用蛋白酶溶液填充第一貯器10，蛋白酶溶液在亞優(yōu)選的穩(wěn)定化溫度，只在創(chuàng)傷點(diǎn)使用的短時(shí)間前通過(guò)升高蛋白酶溶液的溫度而恢復(fù)催化活性。典型地，酶在10℃以下優(yōu)選地4℃以下基本是非活性的。酶催化活性的活化可通過(guò)加熱和/或冷卻蛋白酶溶液到優(yōu)選的溫度，典型的在30-40℃范圍內(nèi)，優(yōu)選地在37℃。
如在此所用，術(shù)語(yǔ)″親水性″指溶液或化合物的極性，顯示被有顯著偶極矩的其它溶液或化合物吸引的趨勢(shì)。類(lèi)似的，術(shù)語(yǔ)″疏水性″指溶液或化合物的非極性，顯示被有顯著偶極矩的溶液或化合物排斥、不相容的趨勢(shì)。
如在此所用，術(shù)語(yǔ)″鈍化″指催化活性可逆或不可逆地抑制或喪失，例如，使蛋白水解酶不能催化肽鍵水解的鈍化。
在本發(fā)明的內(nèi)容中，可以理解許多酶指定為酸性、中性或堿性，根據(jù)它們適于的生理環(huán)境，例如，消化酶胃蛋白酶和胰凝乳蛋白酶，在酸性的胃環(huán)境中是催化活性的，顯示優(yōu)選低pH(pH3-5)。在真皮環(huán)境中活性的酶典型地優(yōu)選pH接近皮膚弱酸性外膜(pH5.5-6.5)。因此，本發(fā)明的蛋白酶的自我分解可通過(guò)在使用前維持蛋白酶在非優(yōu)選的pH而抑制，在給藥治療創(chuàng)傷臨用前與活性溶液混合以有效達(dá)到優(yōu)選的pH。因此，在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式，描述于圖5和8，非活性的穩(wěn)定蛋白酶溶液放于第二貯器34和/或第一貯器或安瓿48，配制在非優(yōu)選的pH中，第三貯器36和/或第二貯器或安瓿52的活性溶液以在給藥治療臨用前混合而恢復(fù)催化活性的優(yōu)選的pH。最優(yōu)選地，催化活性的優(yōu)選pH選擇接近哺乳動(dòng)物皮膚弱酸正常pH。相似地，蛋白酶溶液也可被鈍化和穩(wěn)定，通過(guò)用例如EDTA螯合催化臨界金屬離子例如Ca++或Mg++。活化可通過(guò)提供臨界金屬離子而獲得，混合后在活性溶液足夠獲得有效和/或優(yōu)選的金屬離子濃度?？蛇x擇的，或更多的，蛋白酶可以穩(wěn)定或鈍化于減少水可獲得性的溶液，例如高鹽或高多元醇濃度。催化活性的恢復(fù)，在蛋白酶溶液沖流治療位點(diǎn)臨用前，通過(guò)用活性溶液足夠的水性稀釋而獲得。在本發(fā)明的內(nèi)容，應(yīng)注意到，從不同物種(即，海產(chǎn)的、嗜熱的、適鹽的、適溫的、哺乳動(dòng)物、嗜冷的等)提取的酶通常顯示大的可變和物種特異性?xún)?yōu)選pH、溫度、金屬輔基基團(tuán)和離子濃度、以及極性相互作用(疏水性/親水性)。
在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式，蛋白酶是以非液體、粉末的形式提供的，在臨用前與活性溶液混合以獲得催化活性。干酶制劑的活性在本領(lǐng)域是已知的，許多超級(jí)純的蛋白酶商業(yè)上是可得到其冷凍脫水形式的，例如Proteinase K(蛋白酶K)(Sigma-Aldrich，Israel)、Clostridopeptidase A(芽孢梭菌素蛋白酶A)(Sigma-Aldrich)和Elastase(彈性蛋白酶)(Fluka ChemicalCompany Inc.)。然而，粉末、冷凍脫水或顆粒的酶制劑通常難在稀釋溶液中均勻分散。因此，在本發(fā)明一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式，描述于圖6，粉末或冷凍脫水的蛋白酶制劑放于第一貯器10，與從第二貯器38來(lái)的活性溶液在臨遞送到治療點(diǎn)之前在混合儀12接觸和混合均勻。以上詳述和描述于圖9的另一個(gè)實(shí)施方式，粉末或冷凍脫水的非活性蛋白酶是由單獨(dú)的貯器或安瓿60提供的，通過(guò)混合機(jī)構(gòu)56在臨遞送到治療點(diǎn)之前與貯器或安瓿64提供的活性溶液接觸和分散其中。因此，本發(fā)明的方法聯(lián)合了穩(wěn)定的、不含水的粉末或冷凍脫水的蛋白酶制劑的優(yōu)點(diǎn)，并避免了在溶劑中分散差和酶活性遞送不精確控制的缺點(diǎn)。
可以理解，在本發(fā)明的內(nèi)容中，酶的催化活性可通過(guò)活化劑和抑制劑調(diào)整。一種這樣的酶活性的調(diào)節(jié)模式是可逆抑制，通過(guò)底物類(lèi)似物或調(diào)節(jié)分子的相互作用而作用，其造成底物結(jié)合和/或酶動(dòng)力學(xué)的改變，有效降低催化活性，例如，描述于″Enzymes″，chapter 3，Molecular Cell Biology(1986)Darnell，J，Lodish，H and Baltimore，D，eds.，Scientific AmericanBooks，Inc.。因?yàn)檫@樣的酶活性的可逆抑制是濃度依賴(lài)的，催化活性的恢復(fù)通過(guò)受抑制的酶制劑與適量體積的沒(méi)有抑制劑的稀釋劑接觸而獲得。因此，在本發(fā)明的進(jìn)一步實(shí)施方式中，蛋白酶溶液的穩(wěn)定通過(guò)包括有效劑量的可逆的酶抑制劑而作用。穩(wěn)定的蛋白酶制劑的活化通過(guò)用足夠體積的沒(méi)有抑制劑和/或抑制劑活性的活性溶液稀釋而作用。
類(lèi)似地，本發(fā)明的裝置和方法提供精確和準(zhǔn)確控制治療位點(diǎn)和收集的細(xì)胞的酶活性的終止。通過(guò)操作上述的任何方法(pH、離子濃度、游離金屬濃度、親水性/疏水性、水可獲得性和可逆抑制)而作用的蛋白酶活性的鈍化，可受影響于蛋白酶流之后使用有效劑量的無(wú)-蛋白酶溶液，無(wú)-蛋白酶溶液包括例如，金屬螯合劑、非優(yōu)選pH緩沖液和可逆蛋白酶抑制劑。
在本發(fā)明的內(nèi)容中，可以理解許多皮膚病學(xué)的創(chuàng)傷包括異常的皮膚細(xì)胞和胞內(nèi)基質(zhì)。例如，牛皮癬斑由于上皮細(xì)胞更新的異常造成，瘢痕瘤的膠原和肥厚性瘢痕的特點(diǎn)是異常的交聯(lián)，疣是乳多空病毒感染表皮細(xì)胞的結(jié)果，并且許多經(jīng)常是色素沉著過(guò)度的、增生的細(xì)胞包括多種痣(胎塊)、角化物和著色斑。蛋白水解瓦解胞內(nèi)基質(zhì)伴隨隨后非活性組織的再吸收是以前酶方法的目的，本發(fā)明中，皮膚病學(xué)的創(chuàng)傷的異常細(xì)胞被移去，對(duì)這些皮膚情況的優(yōu)良治療有影響。
可以理解聯(lián)合機(jī)械″剝離″和蛋白酶溶液流的酶作用于皮膚表面，適于為美容的目的移去皮膚細(xì)胞和殘骸。因此，在本發(fā)明的進(jìn)一步實(shí)施方式中，受控的蛋白酶溶液流可用于化妝地治療美容不期望的皮膚表面部分。
本發(fā)明的方法和裝置也可用于從病人組織、或臨時(shí)在手術(shù)過(guò)程中暴露的內(nèi)部組織表面治療和/或除去細(xì)胞。Markert等人(美國(guó)專(zhuān)利No.6,146,626)描述收集細(xì)胞用于細(xì)胞培養(yǎng)，從內(nèi)部器官包括肝、脾、心臟和骨骼肌、結(jié)締和神經(jīng)組織、腺組織、內(nèi)皮和其它受梭狀芽孢桿菌膠原蛋白酶和彈性蛋白酶酶消化作用的組織。De Faire等人(美國(guó)專(zhuān)利No.5,958,406)描述治療和預(yù)防內(nèi)部器官和機(jī)體腔感染，通過(guò)注射或使用包括磷蝦多功能蛋白酶活性的制劑。
根據(jù)本發(fā)明的進(jìn)一步方面，提供從活組織表面除去和收集細(xì)胞的方法，所述方法通過(guò)包括有效劑量的至少一種蛋白酶溶液流與表面接觸并在其上而作用，從而從活組織表面除去細(xì)胞并收集細(xì)胞。在本發(fā)明這個(gè)方面的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，蛋白酶溶液流通過(guò)開(kāi)口的手術(shù)切口用于組織的表面。
在另一個(gè)更優(yōu)選的實(shí)施方式中，使用本發(fā)明的裝置和方法提供蛋白酶沖洗，為組織表面或多個(gè)表面，通過(guò)上述的″推拉″套管以封閉、光纖維引導(dǎo)的手術(shù)方法，除去和/或活組織檢查取樣。這些方法的非限定性例子是關(guān)節(jié)內(nèi)窺鏡、膀胱鏡檢查、內(nèi)窺鏡檢查、膽囊鏡檢查、腹腔鏡檢查、結(jié)腸鏡檢查和鼓膜鏡檢查。
如在此所用，術(shù)語(yǔ)″治療″包括消除或減輕與治療的疾病相關(guān)或由疾病引起的至少一個(gè)癥狀。例如，治療可以是消除疾病的幾個(gè)癥狀或徹底消除疾病。
如上所述，本發(fā)明的敷料器和裝置可包括適于收集從封塞的創(chuàng)傷引流液體和細(xì)胞殘骸的桶。收集從皮膚病學(xué)創(chuàng)傷移去的細(xì)胞的重要性是很大的。沒(méi)有確定準(zhǔn)確診斷的治療會(huì)引起創(chuàng)傷不必要的除去，通常招致不必要的瘢痕形成，并且耗資。特別重要的是確定包括痣和角化物細(xì)胞的種類(lèi)，因?yàn)檫@些創(chuàng)傷廣泛地存在于成人，以及它們惡性轉(zhuǎn)化的可能(Sosis，A.，Benign Tumors of the Skin，in Skin DiseasesDiagnosis and Management inClinical Practice(1982)，Binnick，S.A.ed，Addison-Wesley Publishing Co.，USA.166-230)。如上所述，以前皮膚創(chuàng)傷非手術(shù)的治療的方法，例如激光手術(shù)、電手術(shù)和化學(xué)或酶切除，沒(méi)有提供從創(chuàng)傷獲得細(xì)胞的方法，必須使用傳統(tǒng)的手術(shù)活組織檢查技術(shù)來(lái)準(zhǔn)確診斷。
在本發(fā)明的內(nèi)容中，可以理解限制酶活性，蛋白酶溶液流指向到創(chuàng)傷表面，而不是局部使用藥膏或皮內(nèi)注射，提供機(jī)會(huì)保留從治療創(chuàng)傷移去的細(xì)胞。因此，本發(fā)明提供從有皮膚病學(xué)的創(chuàng)傷個(gè)體的皮膚部分移去和收集細(xì)胞的方法，所述方法通過(guò)沖流包括有效劑量的至少一種蛋白酶的溶液在皮膚上并與皮膚部分接觸而作用，因此從皮膚部分移去細(xì)胞，并收集細(xì)胞。在治療位點(diǎn)，蛋白酶消化的產(chǎn)物通過(guò)至少一個(gè)引出導(dǎo)管除去并傳輸?shù)郊?xì)胞收集器，后者與敷料器流體連通。敷料器24蛋白酶溶液流出物中束縛液體和細(xì)胞成分的分離，如上所述，可通過(guò)過(guò)濾，或在另一個(gè)實(shí)施方式，通過(guò)恒流離心而實(shí)現(xiàn)。小體積恒流離心，通常用于分離血液組成(例如，theOrthoPATSystem，Haemonetics Corporation，Braintree，Mass.)，商業(yè)上可獲得并且適于與本發(fā)明裝置流體連通，如描述于圖4?？蛇x擇的，細(xì)胞收集可通過(guò)存留在能吸收細(xì)胞的柱子作用，通過(guò)蛋白質(zhì)性質(zhì)的、多聚和/或寡聚多糖或其它細(xì)胞表面組分的相互作用。
已知的細(xì)胞分離包括多種技術(shù)，其中一些基于特異性的親和。其它細(xì)胞分離技術(shù)更多依賴(lài)偶然發(fā)現(xiàn)的機(jī)制例如支持多種器官和結(jié)構(gòu)地捕獲目標(biāo)細(xì)胞。參見(jiàn)例如Wigzell and Anderson，J.Exp.Med.12923-36，1969；Rutishauser等人.Proc.Natl.Acad.Sci.70，1973；Wysocki and Sato，Proc.Natl.Acad.Sci.752844-2848，1978；Antoine等人.Immunochem.15，1987。也參見(jiàn)屬于Datar的美國(guó)專(zhuān)利No.6,008,040。親和分離的基本過(guò)程必須建立要被分離的細(xì)胞混合物與支持基質(zhì)的接觸，以使靶細(xì)胞優(yōu)選地粘附、結(jié)合或被限制到支持物或其內(nèi)，然后洗去不期望的細(xì)胞，或反過(guò)來(lái)。特異性親和技術(shù)使用單克隆抗體識(shí)別細(xì)胞膜上的特異標(biāo)記，并且“吸引”靶細(xì)胞結(jié)合到單克隆抗體。特異性親和“吸引”靶細(xì)胞也可通過(guò)疏水或親水相互作用，金屬-親和，離子交換，以及類(lèi)似的作用而發(fā)生。因此，在本發(fā)明的進(jìn)一步實(shí)施方式中，細(xì)胞收集通過(guò)流出物流流經(jīng)敷料器24、細(xì)胞收集器30并且與一種裝置接觸而作用，所述裝置例如細(xì)胞-結(jié)合柱子，能從流出物流保留細(xì)胞和其分離物。
本發(fā)明更多的目標(biāo)、優(yōu)勢(shì)和新穎性，在體驗(yàn)了以下實(shí)施例后，對(duì)本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員會(huì)是顯而易見(jiàn)的，所述實(shí)施例不預(yù)期是限制。另外，本發(fā)明的每個(gè)不同的實(shí)施方式和方面，描述于如上所述和在以下權(quán)利要求中聲明的，都在以下的實(shí)施例中找到實(shí)驗(yàn)支持。
實(shí)施例實(shí)施例1.使用本發(fā)明的裝置和方法的酶清創(chuàng)術(shù)材料和方法沖流系統(tǒng)由加液貯器、連接引入/引出導(dǎo)管、蠕動(dòng)泵(MP4 Minipulse 3，Gilson，F(xiàn)rance)、用完即可丟棄的設(shè)計(jì)成引流到治療點(diǎn)的敷料器和收集導(dǎo)管組成。
動(dòng)物和組織樣品研究是在6只4-8周大的[30-40g體重]雄性和雌性小白鼠組、6只成年(2-3月大，200-250g體重)Charles-River雄性大鼠組、成年雄性新西蘭白(NZW)兔(3kg體重)和豬皮樣品上進(jìn)行的。小鼠和大鼠用三溴乙醇(0.1ml，1.25％三溴乙醇鹽/10g體重；Sigma，USA)麻醉，白兔用氯胺酮甲苯噻嗪鎮(zhèn)定，用硫噴妥鈉(Abbott Laboratories，Italy)麻醉。治療區(qū)域的皮膚被去毛，動(dòng)物被放在倒鏈上并懸掛直到敷料器固定于每個(gè)動(dòng)物后背的后側(cè)面的表面。新鮮的豬皮膚樣品是從白色雄性豬(大白與當(dāng)?shù)仄贩N的雜交；34kg體重)上移去的，包埋在塑料O-環(huán)上并固定于敷料器。
酶所有測(cè)試的酶都是冷凍脫水的粉末(Sigma-Aldrich Chemicals，USA)。酶接收后不進(jìn)一步純化就可使用。以下的酶被使用菠蘿蛋白酶(B4882，溶解于0.01M Tris，pH7.5)；膠原蛋白酶(C01300，溶解于0.1M Tris，pH 7.6)；木瓜蛋白酶(P4762，溶解于0.01M磷酸鹽緩沖液，pH6.5，包括5mML-半胱氨酸和2mM乙二胺四乙酸(EDTA))；胃蛋白酶(P7012，溶解于10mMHCl pH2.9)；X型蛋白酶(嗜熱菌蛋白酶，P1512溶解于10mM醋酸鈉(TA948368，Merck)和5mM醋酸鈣(C1000，Sigma)和胰蛋白酶(T1005，溶解于0.01M Tris pH8.6)。
整體皮膚治療新鮮制備的溶液連續(xù)地沖流到麻醉小鼠、大鼠、兔子或豬皮膚樣品上限定的刮過(guò)的皮膚表面區(qū)域，流速為5-6ml/小時(shí)，室溫3小時(shí)，之后，動(dòng)物被處死，組織學(xué)檢查的樣品被從治療區(qū)域移去。
組織學(xué)3小時(shí)治療后，小鼠和大鼠用過(guò)量的水合氯醛(Fluka chemicals，Switzerland)處死，兔子用過(guò)量的硫噴妥鈉處死。全厚度皮膚樣品(4×15mm)從限定區(qū)域的邊緣移去作組織分析，以允許比較同側(cè)治療和非治療區(qū)域。組織樣品立即固定于4％磷酸鹽緩沖甲醛溶液48小時(shí)，用通用的組織學(xué)程序處理，包埋入石蠟。垂直于皮膚表面的連續(xù)切片被切成8μ厚度。獲得的切片用蘇木精和伊紅染色用以觀察。
實(shí)驗(yàn)創(chuàng)傷模型熱燒傷，1-1.5mm厚度，通過(guò)用標(biāo)準(zhǔn)的焊接設(shè)備的尖端直接接觸麻醉小鼠和大鼠的后背的后側(cè)面刮過(guò)的皮膚表面30秒[10]而誘導(dǎo)。新鮮配制的蛋白酶溶液，或其聯(lián)合，用于連續(xù)沖流到創(chuàng)傷上，在受傷后1小時(shí)內(nèi)如上所述以同一個(gè)流速?zèng)_流2-3小時(shí)。全厚度線性新鮮切口通過(guò)用手術(shù)刀切割動(dòng)物后背的后側(cè)面，并且立即用酶連續(xù)沖流3小時(shí)。在治療后立即、7天和20天對(duì)治療的區(qū)域照相，以評(píng)價(jià)痊愈的過(guò)程。
沖流的酶活性的監(jiān)控由于自身消化，蛋白水解酶溶液可能丟失其蛋白水解活性，酶的殘留活性常規(guī)地通過(guò)體外生物化學(xué)分析而監(jiān)控，由供應(yīng)廠商建議，如下1.膠原蛋白酶活性的分析，通過(guò)加入0.2ml酶溶液(1mg/ml)進(jìn)入3ml0.25mM Na-苯甲酰-L-精氨酸乙酯(B4500，Sigma)和0.32ml的10mM二硫赤蘚糖醇(D8255，Sigma)于pH7.5、包括4mM CaCl2(102382，Merck)的10mM Tris緩沖液，以及在室溫下測(cè)量OD2535分鐘。
2.胰蛋白酶活性的分析，通過(guò)加入50μl酶溶液[1mg/ml]進(jìn)入溶于0.5ml二甲基亞砜(DMSO，102931，Merck)的1ml底物溶液(5mg Na-苯甲酰-DL-精氨酸對(duì)位硝基苯胺(BAPNA，B4875，Sigma)并且加入25ml、pH7.5、包括4mM CaCl2的10mM Tris，以及在室溫下測(cè)量OD4055分鐘。
3.木瓜蛋白酶活性的分析，通過(guò)加入100μl酶溶液(1mg/ml)進(jìn)入1mlBAPNA溶液(通過(guò)溶解5mg BAPNA于0.5ml DMSO和加入進(jìn)25ml、50mM、pH6.2、包括5mM半胱氨酸和2mM EDTA的磷酸緩沖液而制備)，以及在室溫下測(cè)量OD4055分鐘。
4.菠蘿蛋白酶活性的分析，通過(guò)加入50μl酶溶液(1mg/ml)進(jìn)入溶于50mM、pH8.5Tris的5ml 1％酪蛋白溶液(44016，BDH)于測(cè)試管，平衡到37℃。在pH8-8.5、37℃孵育10分鐘后，5ml、10％三氯乙酸(TCA，33731，Riedel-de Haen)被加入，混合物在37℃再孵育5分鐘。所得混合物在7,000rpm離心10分鐘，測(cè)量上清液的OD280。
5.嗜熱菌蛋白酶(X型蛋白酶)活性的測(cè)量同所述菠蘿蛋白酶的。
6.胃蛋白酶活性的分析在37℃1ml胃蛋白酶溶液(0.01-0.05mg/ml于10mM HCl)被加入進(jìn)溶于10mM HCl的5ml 2％血紅蛋白溶液(H2625，Sigma)。孵育10分鐘后，加入10ml 5％TCA，混合物于37℃再孵育5分鐘。所得混合物在7,000rpm離心10分鐘，測(cè)量上清液的OD280。
結(jié)果酶沖流對(duì)完整皮膚的影響受控的酶流可容易和方便地用于一系列連續(xù)的治療，同時(shí)使用多通道泵，如圖13A顯示的治療6只麻醉的大鼠或治療大動(dòng)物的6個(gè)不同位點(diǎn)(圖13B)。通過(guò)沖流稀釋的酶緩沖液3hrs容易獲得有效的不同皮膚層的消化。作用于小鼠上的2mg/ml木瓜蛋白酶的受控制流影響外角質(zhì)化層的消化和去除(圖3A和3B)。表皮從真皮的脫離受胰蛋白酶(4mg/ml)和菠蘿蛋白酶(5mg/ml)混合物(圖14C)的影響。8mg/ml胰蛋白酶溶液的受控制流引起表皮層完全的消化(圖14D)。3mg/ml胃蛋白酶的沖流引起更深的穿透和膠原纖維的消化(圖14E)。3mg/ml膠原蛋白酶和1.5mg/ml嗜熱菌蛋白酶的混合沖流引起與圖14D相似的消化。沖流同樣的溶液于大鼠、兔子和豬皮得到相似的結(jié)果。
活性酶溶液沖流對(duì)得到這些結(jié)果是必要的沖流無(wú)酶的緩沖液流是無(wú)效的。而且，沖流酶溶液幾分鐘以充滿(mǎn)系統(tǒng)然后停止沖流沒(méi)有效果和沒(méi)有可見(jiàn)的變化。
在使用的3小時(shí)，所有沖流的酶溶液的特異活性保持穩(wěn)定(＞85％)。少量輸入活性的丟失最可能由自身消化造成。
酶沖流對(duì)實(shí)驗(yàn)創(chuàng)傷的影響有效的新鮮血塊的去除通過(guò)沖流胰蛋白酶和膠原蛋白酶混合物(每個(gè)3mg/ml)3hrs于無(wú)論其形狀的有光滑表面清除的新切傷而易于實(shí)現(xiàn)(圖15A-B)。
對(duì)燒傷創(chuàng)傷清創(chuàng)術(shù)的受控酶沖流可通過(guò)沖流幾種蛋白酶混合物2hr而易于獲得膠原蛋白酶/嗜熱菌蛋白酶混合物(分別3mg/ml和1.5mg/ml；圖14B)、胰蛋白酶/木瓜蛋白酶混合物(4mg/ml和2mg/ml)或胰蛋白酶/膠原蛋白酶混合物(每個(gè)3mg/ml)。
帶有沖流酶例如木瓜蛋白酶或胃蛋白酶(分別2mg/ml和3mg/ml，2小時(shí))的清創(chuàng)術(shù)引起光滑的痊愈(比較圖15A和圖15B；燒傷誘導(dǎo)后20天拍的照)。
實(shí)施例2.表皮的酶去除使用包括描述于圖12的敷料器24的裝置，包括溶于0.1M pH7.5的PBS緩沖液的膠原蛋白酶(1mg/ml，Sigma Cat.No.C0130)和嗜熱菌蛋白酶(0.5mg/ml，Sigma x型，Cat No.P1512)的酶溶液，使用從成年雌性大白豬(1歲大，90kg)新鮮移去的皮膚樣品，包埋在平的容器，并且用70％(v/v)乙醇水溶液預(yù)清理，以流速3-4ml/小時(shí)，室溫沖流3小時(shí)。
治療和移去裝置后，肉眼觀察從治療區(qū)域完全去除毛發(fā)，伴隨平滑、潰瘍龕樣皮膚體積移去物的形成。皮膚樣品立即固定于甲醛(4％v/v)中性緩沖液48小時(shí)。皮膚然后用蒸餾水沖洗，在乙醇中脫水，并包埋于石蠟。準(zhǔn)備平行于表皮-真皮方向的系列組織切片(厚0.8μm)染色，裝上載玻片，用蘇木精-伊紅染色，用光學(xué)顯微鏡檢查。檢查治療區(qū)域的邊緣，其清楚地顯示與非治療皮膚比較，從治療區(qū)域的酶表皮去除。
上述特定實(shí)施方式的描述會(huì)完全揭示本發(fā)明的一般特征，通過(guò)運(yùn)用現(xiàn)有的知識(shí)，因此其他人可易于對(duì)這種特定實(shí)施方式的各種應(yīng)用修飾和/或適應(yīng)，不用過(guò)多的實(shí)驗(yàn)，不偏離一般概念，從而這些適應(yīng)和修飾應(yīng)被理解為包括在所描述實(shí)施方式等價(jià)物的意義和范圍之內(nèi)。應(yīng)該理解，這里所用的片語(yǔ)和術(shù)語(yǔ)是為描述的目的而非限制。執(zhí)行不同所述功能的工具、材料、和步驟可采用不同形式，但不偏離本發(fā)明。
權(quán)利要求
1.用以治療皮膚創(chuàng)傷的敷料器，所述敷料器包括(a)屏蔽罩單元，其具有至少一個(gè)形成在其內(nèi)的孔和第一縱軸；和(b)工具，以固定所述敷料器于皮膚創(chuàng)傷周?chē)钠つw；其中所述屏蔽罩單元包括(i)多個(gè)引入導(dǎo)管，每個(gè)所述多個(gè)引入導(dǎo)管具有第一縱軸，并且構(gòu)造成通過(guò)所述至少一個(gè)孔沿著其縱軸可調(diào)；和(ii)至少一個(gè)引出導(dǎo)管，其具有第二縱軸。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的敷料器，其中所述屏蔽罩單元包括多個(gè)孔，并且每個(gè)所述多個(gè)引入導(dǎo)管和所述至少一個(gè)引出導(dǎo)管伸展通過(guò)所述多個(gè)孔的相應(yīng)的一個(gè)孔。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的敷料器，其中每個(gè)所述多個(gè)引入導(dǎo)管相對(duì)所述屏蔽罩單元的位置和角度是可調(diào)節(jié)的。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的敷料器，其中每個(gè)所述多個(gè)引入導(dǎo)管有一近端和一遠(yuǎn)端，所述遠(yuǎn)端構(gòu)造成面對(duì)所述皮膚創(chuàng)傷并且其中所述遠(yuǎn)端順滑地彎曲成不造成外傷的頂端。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的敷料器，其中所述至少一個(gè)引入導(dǎo)管的所述遠(yuǎn)端的開(kāi)口相對(duì)所述引入導(dǎo)管的中軸成一個(gè)角度。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的敷料器，其中所述多個(gè)引入導(dǎo)管的至少一個(gè)的遠(yuǎn)端包括多個(gè)開(kāi)口。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的敷料器，其中每個(gè)所述多個(gè)引入導(dǎo)管是由柔韌的彈性體構(gòu)建的。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的敷料器，其中所述柔韌的彈性體包括選自聚硅氧烷、聚氨基甲酸酯、天然橡膠、氯丁橡膠和乙烯基乙酸乙酯組成的組的材料。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的敷料器，其中每個(gè)所述多個(gè)引入導(dǎo)管沿其縱軸是可伸長(zhǎng)的或可縮短的。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的敷料器，其進(jìn)一步包括與每個(gè)所述引入導(dǎo)管連通的可調(diào)節(jié)的螺釘機(jī)構(gòu)，從而將每個(gè)引入導(dǎo)管沿其縱軸伸長(zhǎng)或縮短。
11.根據(jù)權(quán)利要求1所述的敷料器，其進(jìn)一步包括至少一個(gè)與所述多個(gè)引入導(dǎo)管流體連通的貯器，所述至少一個(gè)貯器適于儲(chǔ)藏流體。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的敷料器，其中所述至少一個(gè)貯器適于儲(chǔ)藏治療溶液，所述治療溶液包括有效量的至少一種催化活性蛋白酶。
13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的敷料器，其中所述至少一種催化活性蛋白酶選自木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶、纖維蛋白溶酶原活化因子、纖維蛋白溶酶、肥大細(xì)胞蛋白酶、溶酶體水解酶、鏈激酶、胃蛋白酶、弧菌溶血素、磷蝦蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶、膠原蛋白酶、彈性蛋白酶、分散酶、蛋白酶K、梭狀芽孢桿菌多功能蛋白酶和枯草桿菌蛋白酶組成的組。
14.根據(jù)權(quán)利要求11所述的敷料器，其進(jìn)一步包括接頭，所述接頭與所述多個(gè)引入導(dǎo)管的至少一個(gè)引入導(dǎo)管和所述至少一個(gè)貯器流體連通，因此打開(kāi)和關(guān)閉所述至少一個(gè)引入導(dǎo)管和所述至少一個(gè)貯器之間的流體連通。
15.根據(jù)權(quán)利要求14所述的敷料器，其中所述接頭包括至少一個(gè)元件，其選自路厄氏鎖和閥工具組成的組。
16.根據(jù)權(quán)利要求11所述的敷料器，其進(jìn)一步包括分離器，所述分離器與所述多個(gè)引入導(dǎo)管的至少一個(gè)引入導(dǎo)管和所述至少一個(gè)貯器流體連通，因此，從所述至少一個(gè)貯器可逆地?cái)嚅_(kāi)和重連接所述至少一個(gè)引入導(dǎo)管。
17.根據(jù)權(quán)利要求11所述的敷料器，其進(jìn)一步包括控制儀，所述控制儀與所述多個(gè)引入導(dǎo)管的至少一個(gè)引入導(dǎo)管和所述至少一個(gè)貯器流體連通，因此控制流體從所述至少一個(gè)貯器經(jīng)過(guò)所述至少一個(gè)引入導(dǎo)管的流速。
18.根據(jù)權(quán)利要求17所述的敷料器，其中所述控制儀選自蠕動(dòng)泵和滴注計(jì)數(shù)器組成的組。
19.根據(jù)權(quán)利要求11所述的敷料器，其進(jìn)一步包括溫度調(diào)節(jié)儀，所述溫度調(diào)節(jié)儀與所述至少一個(gè)貯器連通，因此影響所述至少一個(gè)貯器內(nèi)流體的溫度。
20.根據(jù)權(quán)利要求11所述的敷料器，其進(jìn)一步包括至少一個(gè)過(guò)濾器，其位于所述多個(gè)引入導(dǎo)管的至少一個(gè)引入導(dǎo)管內(nèi)，以過(guò)濾流經(jīng)所述至少一個(gè)引入導(dǎo)管的流體。
21.根據(jù)權(quán)利要求1所述的敷料器，其進(jìn)一步包括收集貯器，所述收集貯器與所述至少一個(gè)引出導(dǎo)管流體連通，并構(gòu)造成收集從所述至少一個(gè)引出導(dǎo)管排出的流體。
22.根據(jù)權(quán)利要求1所述的敷料器，其進(jìn)一步包括真空源，所述真空源與所述至少一個(gè)引出導(dǎo)管流體連通，適于在封塞的皮膚創(chuàng)傷產(chǎn)生負(fù)壓。
23.根據(jù)權(quán)利要求1所述的敷料器，其進(jìn)一步包括多個(gè)貯器，其中所述多個(gè)貯器的第一貯器適于儲(chǔ)藏第一溶液，所述第一溶液包括至少一種催化非活性蛋白酶，且其中所述多個(gè)貯器的第二貯器適于儲(chǔ)藏第二溶液，所述第二溶液包括能活化所述至少一種催化非活性蛋白酶的試劑，所述第一貯器和所述第二貯器相互流體連通，并且所述第一貯器和所述第二貯器中的至少一個(gè)進(jìn)一步與所述多個(gè)引入導(dǎo)管的至少一個(gè)引入導(dǎo)管流體連通。
24.根據(jù)權(quán)利要求23所述的敷料器，其進(jìn)一步包括混合腔，所述混合腔與所述第一貯器和所述第二貯器以及所述至少一個(gè)引入導(dǎo)管流體連通，因此儲(chǔ)藏包括所述第一和第二溶液的催化活性蛋白水解混合物。
25.根據(jù)權(quán)利要求23所述的敷料器，其中所述混合腔進(jìn)一步包括混合工具。
26.根據(jù)權(quán)利要求2所述的敷料器，其進(jìn)一步包括多個(gè)加封單元，每個(gè)所述加封單元構(gòu)造成防止所述引入導(dǎo)管外徑和其相應(yīng)的孔之間流體流過(guò)。
27.根據(jù)權(quán)利要求2所述的敷料器，其進(jìn)一步包括加封單元，所述加封單元構(gòu)造成防止所述引出導(dǎo)管外徑和其相應(yīng)的孔之間流體流過(guò)。
28.根據(jù)權(quán)利要求27所述的敷料器，其中所述至少一個(gè)引出導(dǎo)管構(gòu)造成通過(guò)其相應(yīng)的孔是可調(diào)節(jié)的。
29.根據(jù)權(quán)利要求1所述的敷料器，其中所述固定所述敷料器于皮膚的工具包括粘附到所述屏蔽罩的第一平面和構(gòu)造為圍繞并粘附到創(chuàng)傷的第二平面。
30.根據(jù)權(quán)利要求29所述的敷料器，其中所述粘附工具是生物相容的。
31.根據(jù)權(quán)利要求29所述的敷料器，其中所述第二平面由保護(hù)性的可拆卸的膜覆蓋。
32.根據(jù)權(quán)利要求1所述的敷料器，其中所述多個(gè)引入導(dǎo)管的至少一個(gè)包括一可彎曲的線，其沿所述至少一個(gè)引入導(dǎo)管的第一縱軸延伸并操作地連接于其上。
33.根據(jù)權(quán)利要求32所述的敷料器，其中所述可彎曲的線延伸不超過(guò)所述至少一個(gè)引入導(dǎo)管的所述遠(yuǎn)端。
34.根據(jù)權(quán)利要求32所述的敷料器，其中所述可彎曲的線包括柔韌的和有彈性的剛性材料。
35.根據(jù)權(quán)利要求32所述的敷料器，其中所述可彎曲的線包括選自銀、鉑、不銹鋼和聚合物組成的組的材料。
36.根據(jù)權(quán)利要求32所述的敷料器，其中所述至少一個(gè)引入導(dǎo)管包括儲(chǔ)藏流體的第一腔和構(gòu)造為儲(chǔ)藏可彎曲的線在其中的第二腔。
37.一種治療皮膚創(chuàng)傷的裝置，所述裝置包括(a)間隔物，以封閉包括皮膚創(chuàng)傷的區(qū)域，所述間隔物有面對(duì)皮膚的底面，和面對(duì)屏蔽罩的頂面，其中所述底面包括固定所述間隔物于所述皮膚創(chuàng)傷周?chē)つw的粘附工具；和(b)敷料器，其包括屏蔽罩單元，所述屏蔽罩單元有至少一個(gè)形成在其中的孔和第一縱軸，所述屏蔽罩單元包括(i)多個(gè)引入導(dǎo)管，每個(gè)所述多個(gè)引入導(dǎo)管有第一縱軸，并且構(gòu)造成沿其縱軸通過(guò)所述至少一個(gè)孔是可調(diào)節(jié)的；(ii)至少一個(gè)引出導(dǎo)管，其具有第二縱軸；以及(iii)工具，以固定所述敷料器于所述間隔物頂面。
38.根據(jù)權(quán)利要求37所述的裝置，其中所述間隔物包括有彈力的不能滲透液體的材料。
39.根據(jù)權(quán)利要求37所述的裝置，其中所述間隔物包括彈性體。
40.根據(jù)權(quán)利要求39所述的裝置，其中所述彈性體是泡沫樣材料。
41.根據(jù)權(quán)利要求37所述的裝置，其中所述間隔物包括選自聚硅氧烷、聚硅氧烷泡沫、聚氨基甲酸酯、天然橡膠、氯丁橡膠和乙烯基乙酸乙酯泡沫組成的組的物質(zhì)。
42.根據(jù)權(quán)利要求37所述的裝置，其中所述粘附工具包括選自熱塑性樹(shù)脂、壓力敏感粘合劑、水膠體粘合劑和橡膠組成的組的材料。
43.根據(jù)權(quán)利要求37所述的裝置，其中所述敷料器的所述至少一個(gè)孔包括多個(gè)孔，其中所述多個(gè)引入導(dǎo)管的每一個(gè)和至少一個(gè)引出導(dǎo)管延伸通過(guò)所述多個(gè)孔的相應(yīng)的每一個(gè)孔。
44.根據(jù)權(quán)利要求37所述的裝置，其中每個(gè)所述多個(gè)引入導(dǎo)管相對(duì)所述屏蔽罩單元的位置和角度是可調(diào)節(jié)的。
45.根據(jù)權(quán)利要求37所述的裝置，其中每個(gè)所述多個(gè)引入導(dǎo)管有一近端和一遠(yuǎn)端，所述遠(yuǎn)端構(gòu)造成面對(duì)所述皮膚創(chuàng)傷，以及其中所述遠(yuǎn)端順滑地彎曲成不造成外傷的頂端。
46.根據(jù)權(quán)利要求45所述的裝置，其中所述至少一個(gè)引入導(dǎo)管的所述遠(yuǎn)端的開(kāi)口相對(duì)所述引入導(dǎo)管的中軸成一個(gè)角度。
47.根據(jù)權(quán)利要求37所述的裝置，其中每個(gè)所述多個(gè)引入導(dǎo)管沿其縱軸是可伸長(zhǎng)的或可縮短的。
48.根據(jù)權(quán)利要求37所述的裝置，其進(jìn)一步包括與每個(gè)所述引入導(dǎo)管連通的可調(diào)節(jié)的螺釘機(jī)構(gòu)，因此將每個(gè)引入導(dǎo)管沿其縱軸伸長(zhǎng)或縮短。
49.根據(jù)權(quán)利要求37所述的裝置，其進(jìn)一步包括至少一個(gè)貯器，所述貯器與所述多個(gè)引入導(dǎo)管流體連通，所述至少一個(gè)貯器適于儲(chǔ)藏流體。
50.根據(jù)權(quán)利要求49所述的裝置，其中所述至少一個(gè)貯器適于儲(chǔ)藏治療溶液，所述治療溶液包括有效量的至少一種催化活性蛋白酶。
51.根據(jù)權(quán)利要求50所述的裝置，其中所述至少一種催化活性蛋白酶選自木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶、纖維蛋白溶酶原活化因子、纖維蛋白溶酶、肥大細(xì)胞蛋白酶、溶酶體水解酶、鏈激酶、胃蛋白酶、弧菌溶血素、磷蝦蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶、膠原蛋白酶、彈性蛋白酶、分散酶、蛋白酶K、梭狀芽孢桿菌多功能蛋白酶和枯草桿菌蛋白酶組成的組。
52.根據(jù)權(quán)利要求49所述的裝置，其進(jìn)一步包括接頭，所述接頭與所述多個(gè)引入導(dǎo)管的至少一個(gè)引入導(dǎo)管以及所述至少一個(gè)貯器流體連通，因此打開(kāi)和關(guān)閉所述至少一個(gè)引入導(dǎo)管和所述至少一個(gè)貯器之間的流體連通。
53.根據(jù)權(quán)利要求52所述的裝置，其中所述接頭包括至少一個(gè)選自路厄氏鎖和閥工具組成的組的元件。
54.根據(jù)權(quán)利要求49所述的裝置，其進(jìn)一步包括分離器，所述分離器與所述多個(gè)引入導(dǎo)管的至少一個(gè)引入導(dǎo)管以及所述至少一個(gè)貯器流體連通，因此從所述至少一個(gè)貯器可逆地?cái)嚅_(kāi)和重連接所述至少一個(gè)引入導(dǎo)管。
55.根據(jù)權(quán)利要求49所述的裝置，其進(jìn)一步包括控制儀，所述控制儀與所述多個(gè)引入導(dǎo)管的至少一個(gè)引入導(dǎo)管和所述至少一個(gè)貯器流體連通，因此控制流體從所述至少一個(gè)貯器經(jīng)過(guò)所述至少一個(gè)引入導(dǎo)管的流速。
56.根據(jù)權(quán)利要求55所述的裝置，其中所述控制儀選自蠕動(dòng)泵和滴注計(jì)數(shù)器組成的組。
57.根據(jù)權(quán)利要求49所述的裝置，其進(jìn)一步包括溫度調(diào)節(jié)儀，所述溫度調(diào)節(jié)儀與所述至少一個(gè)貯器連通，因此影響所述至少一個(gè)貯器內(nèi)所保持的流體的溫度。
58.根據(jù)權(quán)利要求49所述的裝置，其進(jìn)一步包括至少一個(gè)過(guò)濾器，其位于所述多個(gè)引入導(dǎo)管的至少一個(gè)引入導(dǎo)管內(nèi)，以過(guò)濾流經(jīng)所述至少一個(gè)引入導(dǎo)管的流體。
59.根據(jù)權(quán)利要求37所述的裝置，其進(jìn)一步包括收集貯器，所述收集貯器與所述至少一個(gè)引出導(dǎo)管流體連通，并構(gòu)造成收集從所述至少一個(gè)引出導(dǎo)管排出的流體。
60.根據(jù)權(quán)利要求37所述的裝置，其進(jìn)一步包括多個(gè)貯器，其中所述多個(gè)貯器的第一貯器適于儲(chǔ)藏第一溶液，所述第一溶液包括至少一種催化非活性蛋白酶，且其中所述多個(gè)貯器的第二貯器適于儲(chǔ)藏第二溶液，所述第二溶液包括能活化所述至少一種催化非活性蛋白酶的試劑，所述第一貯器和所述第二貯器相互流體連通，并且所述第一貯器和所述第二貯器中的至少一個(gè)進(jìn)一步與所述多個(gè)引入導(dǎo)管的至少一個(gè)引入導(dǎo)管流體連通。
61.根據(jù)權(quán)利要求60所述的裝置，其進(jìn)一步包括混合腔，所述混合腔與所述第一貯器和所述第二貯器以及所述至少一個(gè)引入導(dǎo)管流體連通，因此儲(chǔ)藏包括所述第一和第二溶液的催化活性蛋白水解混合物。
62.根據(jù)權(quán)利要求61所述的裝置，其中所述混合腔進(jìn)一步包括混合工具。
63.根據(jù)權(quán)利要求37所述的裝置，其中所述至少一個(gè)引出導(dǎo)管構(gòu)造成通過(guò)其相應(yīng)的孔是可調(diào)節(jié)的。
64.根據(jù)權(quán)利要求37所述的裝置，其進(jìn)一步包括橡皮膏，所述橡皮膏與所述屏蔽罩連通并延伸出所述屏蔽罩的第一縱軸，所述橡皮膏有面對(duì)所述敷料器的頂面和面對(duì)創(chuàng)傷的底面，其中所述底面包括粘附工具。
65.根據(jù)權(quán)利要求64所述的裝置，其中所述粘附工具是生物相容的。
66.根據(jù)權(quán)利要求64所述的裝置，其中所述橡皮膏的所述底面由保護(hù)性的可拆卸的膜覆蓋。
67.根據(jù)權(quán)利要求37所述的裝置，其中所述多個(gè)引入導(dǎo)管的至少一個(gè)包括一可彎曲的線，所述可彎曲的線沿所述至少一個(gè)引入導(dǎo)管的第一縱軸伸展并操作地連接于其上。
68.根據(jù)權(quán)利要求67所述的裝置，其中所述可彎曲的線延伸不超過(guò)所述至少一個(gè)引入導(dǎo)管的所述遠(yuǎn)端。
69.根據(jù)權(quán)利要求67所述的裝置，其中所述可彎曲的線包括柔韌的和有彈性的剛性材料。
70.根據(jù)權(quán)利要求67所述的裝置，其中所述可彎曲的線包括選自銀、鉑、不銹鋼和聚合物組成的組的材料。
71.根據(jù)權(quán)利要求67所述的裝置，其中所述至少一個(gè)引入導(dǎo)管包括縱向管腔，所述縱向管腔構(gòu)造成儲(chǔ)藏所述可彎曲的線。
72.一種治療皮膚創(chuàng)傷的方法，所述方法包括(a)提供敷料器，所述敷料器包括有至少一個(gè)孔形成于其中的屏蔽罩單元，以及固定所述敷料器于皮膚創(chuàng)傷周?chē)つw的工具，其中所述屏蔽罩單元包括(i)多個(gè)引入導(dǎo)管，每個(gè)所述多個(gè)引入導(dǎo)管有第一縱軸，并且構(gòu)造成沿其縱軸通過(guò)所述至少一個(gè)孔是可調(diào)節(jié)的；(ii)至少一個(gè)引出導(dǎo)管，其具有第二縱軸；(b)將所述工具放置于所述皮膚創(chuàng)傷周?chē)つw上，于是固定所述裝置于所述皮膚創(chuàng)傷周?chē)つw以獲得封塞的創(chuàng)傷；(c)通過(guò)流體連通連接所述多個(gè)引入導(dǎo)管于至少一個(gè)貯器，其中所述至少一個(gè)貯器包括清創(chuàng)溶液，所述清創(chuàng)溶液包括至少一種催化活性蛋白酶；(d)起始清創(chuàng)溶液流，從所述至少一個(gè)貯器通過(guò)所述多個(gè)引入導(dǎo)管的至少一個(gè)引入導(dǎo)管到封塞的創(chuàng)傷；以及(e)從所述封塞的創(chuàng)傷通過(guò)所述至少一個(gè)引出導(dǎo)管排出所述溶液。
73.根據(jù)權(quán)利要求72所述的方法，其進(jìn)一步包括(a)提供包括敷料器的裝置，所述敷料器包括有至少一個(gè)孔形成于其中的屏蔽罩單元，以及固定所述敷料器的工具，其中所述屏蔽罩單元包括(i)多個(gè)引入導(dǎo)管，每個(gè)所述多個(gè)引入導(dǎo)管有第一縱軸，并且構(gòu)造成沿其縱軸通過(guò)所述至少一個(gè)孔是可調(diào)節(jié)的；和(ii)至少一個(gè)引出導(dǎo)管，其具有第二縱軸；(b)提供封塞皮膚創(chuàng)傷的間隔物，所述間隔物有面對(duì)皮膚的底面，和面對(duì)所述敷料器屏蔽罩的頂面，其中所述底面包括固定所述間隔物于所述皮膚創(chuàng)傷周?chē)つw的粘附工具；(c)固定所述間隔物的所述底面于所述皮膚創(chuàng)傷周?chē)つw；(d)固定所述敷料器于所述間隔物的所述頂面，由此獲得封塞的創(chuàng)傷；(e)通過(guò)流體連通連接所述多個(gè)引入導(dǎo)管于至少一個(gè)貯器，其中所述至少一個(gè)貯器包括清創(chuàng)溶液，所述清創(chuàng)溶液包括至少一種催化活性蛋白酶；(f)起始清創(chuàng)溶液流，從所述至少一個(gè)貯器通過(guò)所述多個(gè)引入導(dǎo)管的至少一個(gè)引入導(dǎo)管到封塞的創(chuàng)傷；以及(g)從所述封塞的創(chuàng)傷通過(guò)所述至少一個(gè)引出導(dǎo)管排出所述溶液。
74.根據(jù)權(quán)利要求73所述的方法，其中步驟(c)進(jìn)一步包括將加封介質(zhì)分散于接觸封塞的創(chuàng)傷周?chē)乃鲩g隔物的周邊。
75.根據(jù)權(quán)利要求72至73任一所述的方法，其進(jìn)一步包括調(diào)節(jié)每個(gè)所述多個(gè)引入導(dǎo)管相對(duì)所述屏蔽罩單元的位置和角度。
76.根據(jù)權(quán)利要求72至73任一所述的方法，其中通過(guò)流體連通連接所述多個(gè)引入導(dǎo)管到所述至少一個(gè)貯器，在封塞的創(chuàng)傷周?chē)峁┎荒軡B透液體的加封。
77.根據(jù)權(quán)利要求75所述的方法，其中所述的在封塞的創(chuàng)傷周?chē)荒軡B透液體的加封是真空封閉的。
78.根據(jù)權(quán)利要求72至73任一所述的方法，其進(jìn)一步包括提供控制儀，所述控制儀與所述多個(gè)引入導(dǎo)管的至少一個(gè)引入導(dǎo)管和所述至少一個(gè)貯器流體連通，因此起始流體從所述至少一個(gè)貯器經(jīng)過(guò)所述至少一個(gè)引入導(dǎo)管的受控制的流。
79.根據(jù)權(quán)利要求78所述的方法，其中所述的流具有在1ml/小時(shí)到10ml/小時(shí)范圍內(nèi)的流速。
80.根據(jù)權(quán)利要求72至73任一所述的方法，其進(jìn)一步包括放置所述至少一個(gè)貯器于高于創(chuàng)傷水平的位置，從而通過(guò)重力起始清創(chuàng)溶液流，從所述至少一個(gè)貯器經(jīng)過(guò)所述多個(gè)引入導(dǎo)管至創(chuàng)傷。
81.根據(jù)權(quán)利要求72至73任一所述的方法，其進(jìn)一步包括提供多個(gè)控制儀，每個(gè)控制儀與所述多個(gè)引入導(dǎo)管的相應(yīng)的引入導(dǎo)管和所述至少一個(gè)貯器流體連通，因此通過(guò)單獨(dú)的控制儀獨(dú)立地控制每個(gè)引入導(dǎo)管內(nèi)的流速。
82.根據(jù)權(quán)利要求81所述的方法，其中每個(gè)引入導(dǎo)管內(nèi)的所述流速在1ml/小時(shí)到10ml/小時(shí)范圍內(nèi)。
83.根據(jù)權(quán)利要求72至73任一所述的方法，其進(jìn)一步包括提供至少一個(gè)元件，所述元件與所述至少一個(gè)貯器和所述多個(gè)引入導(dǎo)管的至少一個(gè)引入導(dǎo)管流體連通，所述元件選自以下組成的組適于控制從所述至少一個(gè)貯器到所述至少一個(gè)引入導(dǎo)管的流速的控制儀；適于打開(kāi)和關(guān)閉所述至少一個(gè)貯器和所述至少一個(gè)引入導(dǎo)管之間的流體連通的接頭；用于過(guò)濾在所述至少一個(gè)引入導(dǎo)管內(nèi)流動(dòng)的溶液的過(guò)濾器；用于混合所述至少一個(gè)貯器內(nèi)的溶液的混合工具；用于影響所述至少一個(gè)貯器內(nèi)溶液溫度的溫度調(diào)節(jié)儀；用于影響所述至少一個(gè)引入導(dǎo)管內(nèi)流動(dòng)溶液的溫度的溫度調(diào)節(jié)儀；與所述多個(gè)引入導(dǎo)管的至少一個(gè)引入導(dǎo)管以及所述至少一個(gè)貯器流體連通的分離器，由此從所述至少一個(gè)貯器可逆地?cái)嚅_(kāi)和重連接所述至少一個(gè)引入導(dǎo)管；與所述至少一個(gè)引出導(dǎo)管流體連通的真空源，適于在封塞的皮膚創(chuàng)傷產(chǎn)生負(fù)壓；與所述至少一個(gè)引出導(dǎo)管流體連通的收集貯器，從而構(gòu)造成收集從所述至少一個(gè)引出導(dǎo)管的近端排出的流體。
全文摘要
本發(fā)明涉及用于在皮膚創(chuàng)傷中失活組織清創(chuàng)術(shù)的裝置，包括多個(gè)高度和角度可調(diào)節(jié)的引入導(dǎo)管(204)和至少一個(gè)引出導(dǎo)管(206)、以及圍繞皮膚創(chuàng)傷形成封塞的縫合的工具(230)。所述多個(gè)引入導(dǎo)管適合引導(dǎo)酶溶液恒流，以到達(dá)創(chuàng)傷的表面和進(jìn)入創(chuàng)傷的創(chuàng)床的整個(gè)體積，并且所述至少一個(gè)引出導(dǎo)管適于移去創(chuàng)傷排出的酶溶液、流體和從封塞的皮膚創(chuàng)傷帶來(lái)的組織殘骸。
文檔編號(hào)C12N5/071GK1929883SQ200580008053
公開(kāi)日2007年3月14日 申請(qǐng)日期2005年1月27日 優(yōu)先權(quán)日2004年1月27日
發(fā)明者亞米?！じダ锫? 伊然·希爾朔維奇, 米歇爾·比埃里－萊普曼 申請(qǐng)人:雷蒙特亞特特拉維夫大學(xué)有限公司, 恩塞瑟吉有限公司