一種雪蓮離體培育方法
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)一種雪蓮離體培育方法，采用雪蓮的花托外植體誘導(dǎo)培養(yǎng)，先用藍(lán)光照射再用熒光照射，二者的結(jié)合大大縮短了愈傷組織的愈傷分化時(shí)間，提高了愈傷組織的形成數(shù)量與效率。本發(fā)明經(jīng)離體培養(yǎng)得到的雪蓮幼苗，縮短培育周期，保持雪蓮基因的典型性，具有在雪蓮人工栽培領(lǐng)域的應(yīng)用前景。
【專利說(shuō)明】
_種雪蓮禹體培育方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及一種珍稀中草藥離體培育方法，具體涉及一種基于雪蓮花藥的離體培育方法。
【背景技術(shù)】
[0002]雪蓮是菊科鳳毛菊屬植物，一般是指雪蓮花，為多年生草本植物，含有蛋白質(zhì)、氨基酸、黃酮類化合物、生物堿等，具有通經(jīng)活血、散寒除濕、止血消腫、排體內(nèi)毒素等功效。藥用價(jià)值很高，可用于風(fēng)寒引起的四肢麻木，風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，小腹冷痛，婦女月經(jīng)不調(diào)，腎虛腰痛等。
[0003]雪蓮多生長(zhǎng)于天山、阿爾泰山和昆侖山脈海拔3000米以上雪線附近，生長(zhǎng)期需6?8年。20世紀(jì)末，國(guó)內(nèi)外對(duì)雪蓮花需求量與日倶增，雪蓮遭到瘋狂的采挖，造成野生雪蓮資源急劇減少;現(xiàn)在雪蓮已被列為國(guó)家三級(jí)瀕危物種，為一級(jí)重點(diǎn)保護(hù)野生植物。隨著野生雪蓮的數(shù)量的減少與保護(hù)力度的加大，雪蓮資源遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足藥用的需要，為了保證雪蓮花藥源的充分供應(yīng)，保護(hù)野生種植資源的繁衍恢復(fù)，現(xiàn)有技術(shù)開(kāi)始研究實(shí)現(xiàn)雪蓮花的人工栽培。由于雪蓮生長(zhǎng)的特殊自然條件，進(jìn)行人工栽培比較困難。
[0004]現(xiàn)有技術(shù)人工栽培雪蓮的方法有組織培養(yǎng)法和種子繁殖法兩種。組織培養(yǎng)法的繁殖系數(shù)低，不能滿足大規(guī)模生產(chǎn)的需要，而且由于培養(yǎng)環(huán)境如光照、水分、溫度、營(yíng)養(yǎng)等以及激素濃度等因素易造成雪蓮種苗發(fā)生無(wú)性變異。
[0005]而通過(guò)種子繁殖的方法也存在諸多缺陷，由于雪蓮生長(zhǎng)在極端的環(huán)境中，其種子具有活力強(qiáng)、發(fā)芽慢的特點(diǎn)，有些雪蓮的種子可以埋藏在地下三年不發(fā)芽，發(fā)芽這一環(huán)節(jié)的不可控性極大的延長(zhǎng)了雪蓮人工培養(yǎng)的周期;若采用人工活化雪蓮種子的方式，則可能發(fā)生種子生物結(jié)構(gòu)被破壞，造成雪蓮種質(zhì)資源的浪費(fèi)；由于雪蓮是異花傳粉，會(huì)導(dǎo)致其基因混雜，得到的種子繼續(xù)培育后達(dá)不到預(yù)期藥用效果。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]為克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，本發(fā)明的目的是提供一種雪蓮離體培育方法，所述方法基于雪蓮的花托外植體，經(jīng)過(guò)誘導(dǎo)培養(yǎng)得到雪蓮幼苗，既保持其基因的典型性，又能縮短培育周期，提高成功率。
[0007]具體步驟如下:
[0008](I)花托外植體預(yù)處理:
[0009]選取雪蓮的花蕾，在4°C環(huán)境中冷藏3?5天后，將花蕾取出自然恢復(fù)至室溫，剝?nèi)グ托』ǎ眉儍羲疀_洗，先在0.05%的升汞水溶液中消毒5?8min，再用70%的酒精消毒20?40s，之后用無(wú)菌水沖洗3次，即得到雪蓮花托外植體。以上涉及的百分比均為體積百分比。
[0010](2)外植體接種及誘導(dǎo)培養(yǎng):
[0011 ]將雪蓮花托外植體移入到滅菌后的第一培養(yǎng)基中，將溫度設(shè)定為23 ± I °C，以藍(lán)光燈為光源，光照強(qiáng)度控制為400?800Lx，光周期控制為光14h/暗10h，每十天更換一次培養(yǎng)基，直到誘導(dǎo)出愈傷組織。
[0012]所述第一培養(yǎng)基的組成成分為:KNO3 800?1300mg/L，2-氨基-5-羧基戊酰胺800?1200mg/L，KH2P04 300?450mg/L，CaCl2.2H20 320?350mg/L，MgS04.7H20 180?240mg/L，EDTA 120?180mg/L，F(xiàn)eS04.7H20 30?50mg/L，MnS04.4H20 50?80mg/L，ZnS04.7H2015?30mg/L，H3B03 8?10mg/L，KI 5?10mg/L，Na2Mo04.2H20 I?5mg/L，CoCl2.6H2O 0.2?0.5mg/L，4-鵬苯氧乙酸0.15?0.20mg/L，肌醇30?80mg/L，甘氛酸0.5?I.0mg/L，維生素BI 0.5?0.7511^/1，維生素86 1.0?1.5mg/L，煙酸1.0?1.5mg/L，蔗糖30?50g/L，瓊脂 10?15g/L，激動(dòng)素KT 0.5?I.0mg/L，萘乙酸NAA0.3?0.4mg/L，山梨醇50?70g/L，生物素0.15?0.20mg/L，鹽酸卩比卩多醇0.5?1.0mg/L，鹽酸硫胺素0.5?I.0mg/L，甲基亞硝基脲1.5?2.0mg/L,卩引噪丁酸I.5?2.0mg/L，丙氨酸5?10mg/L，葉酸5?10mg/L，調(diào)環(huán)酸|丐1.5?2.0mg/L，秋水仙堿I.5?2.0mg/L，水解蛋白2.0?2.5g/L。
[0013](3)轉(zhuǎn)移誘導(dǎo)培養(yǎng):
[0014]將步驟(2)得到的愈傷組織轉(zhuǎn)移到第二培養(yǎng)基，溫度為27± 10C，以熒光燈為光源，光照強(qiáng)度控制為1800?2500Lx，光周期控制為光14h/暗10h，愈傷組織誘導(dǎo)出嫩芽后，將嫩芽從雪蓮花托外植體上完整地切下，轉(zhuǎn)移到第三培養(yǎng)基內(nèi)繼續(xù)以相同的條件培養(yǎng)至形成雪蓮幼苗。
[0015]所述第二培養(yǎng)基的組成成分在步驟(2)所述第一培養(yǎng)基基礎(chǔ)上添加了吲哚丁酸0.5?2.0mg/L和2,4-二氯苯氧乙酸丁酯1.5?2.0mg/L。
[0016]所述第三培養(yǎng)基的組成成分在所述第二培養(yǎng)基基礎(chǔ)上添加了6-芐氨基嘌呤1.5?
2.0mg/Lο
[0017](4)幼苗的馴化與煉苗:
[0018]將雪蓮幼苗移栽到煉苗基質(zhì)中，并逐步轉(zhuǎn)移到外部環(huán)境中，在幼苗適應(yīng)外部環(huán)境正常生長(zhǎng)后，再移栽至普通土壤中正常培養(yǎng)。
[0019]所述逐步轉(zhuǎn)移到外部環(huán)境中的方法為:將雪蓮幼苗移栽到煉苗基質(zhì)后，從誘導(dǎo)環(huán)境中逐天降低溫度并逐天增加光照強(qiáng)度，至與外部環(huán)境相同時(shí)，再培養(yǎng)2?3天即可移栽至普通土壤中，轉(zhuǎn)移過(guò)程的周期根據(jù)室外環(huán)境不同而調(diào)節(jié)，轉(zhuǎn)移過(guò)程的周期持續(xù)10?15天。
[0020]所述煉苗基質(zhì)的組成成分為:珍珠巖、蛭石、鋸末、松樹(shù)皮、水苔、花泥、泥炭土以及鈣鎂磷鉀肥，質(zhì)量比為1:0.5?1.5:0.2?0.8:0.2?0.8:0.1?0.5:0.05?0.15:0.05?0.15:0.005?0.015，優(yōu)選質(zhì)量比為1:1:0.5:0.5:0.3:0.1:0.1:0.01。
[0021]本發(fā)明涉及的一種雪蓮離體培育方法，采用雪蓮的花托外植體誘導(dǎo)培養(yǎng)，先采用藍(lán)光照射再采用熒光照射，二者的結(jié)合大大縮短了愈傷組織的愈傷分化時(shí)間，提高了愈傷組織的形成數(shù)量與效率。經(jīng)離體培養(yǎng)得到的雪蓮幼苗，既避免了種子繁殖時(shí)發(fā)芽時(shí)間的不確定性，縮短培育周期，又避免組織培養(yǎng)過(guò)程中發(fā)生的無(wú)性變異，保持雪蓮基因的典型性，具有在雪蓮人工栽培領(lǐng)域的應(yīng)用前景。
【具體實(shí)施方式】
[0022]下面通過(guò)具體實(shí)施例，進(jìn)一步對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行具體說(shuō)明。應(yīng)該理解，下面的實(shí)施例只是作為具體說(shuō)明，而不限制本發(fā)明的范圍，同時(shí)本領(lǐng)域的技術(shù)人員根據(jù)本發(fā)明所做的顯而易見(jiàn)的改變和修飾也包含在本發(fā)明范圍之內(nèi)。
[0023]實(shí)施例1
[0024]—種雪蓮離體培育方法，具體步驟如下:
[0025](I)花托外植體預(yù)處理:
[0026]選取雪蓮的花蕾，在4°C環(huán)境中冷藏3天后，將花蕾取出自然恢復(fù)至室溫，剝?nèi)グ托』?，用純凈水沖洗，先在0.05 %的升萊水溶液中消毒5min，再用70 %的酒精消毒30s，之后用無(wú)菌水沖洗3次，即得到雪蓮花托外植體;以上涉及的百分比均為體積百分比。
[0027](2)外植體接種及誘導(dǎo)培養(yǎng):
[0028]將雪蓮花托外植體移入到滅菌后的第一培養(yǎng)基中，將溫度設(shè)定為23± TC，以藍(lán)光燈為光源，光照強(qiáng)度控制為600Lx，光周期控制為光14h/暗10h，每十天更換一次培養(yǎng)基，直到誘導(dǎo)出愈傷組織。
[0029]所述第一培養(yǎng)基的組成成分為:KNO3 900mg/L，2-氨基-5-羧基戊酰胺1000mg/L，KH2PO4 360mg/L,CaCl2.2H20 340mg/L,MgSO4.7H20 190mg/L，EDTA 150mg/L,FeSO4.7H2040mg/L,MnSO4.4H20 60mg/L,ZnSO4.7H20 20mg/L,H3BO3 9mg/L，KI 8mg/L,Na2MoO4.2H203mg/L，CoCl2.6H2O 0.3mg/L，4_碘苯氧乙酸0.18mg/L，肌醇50mg/L，甘氨酸0.8mg/L，維生素BI 0.65mg/L，維生素B6 I.3mg/L，煙酸I.lmg/L，鹿糖40g/L，瓊脂 12g/L，激動(dòng)素KT 0.8mg/L，萘乙酸NAA0.35mg/L，山梨醇60g/L，生物素0.18mg/L，鹽酸卩比卩多醇0.8mg/L，鹽酸硫胺素0.8mg/L，甲基亞硝基脲1.6mg/L，卩引噪丁酸1.6mg/L，丙氨8mg/L，葉酸8mg/L，調(diào)環(huán)酸I丐1.7mg/L，秋水仙堿1.8mg/L，水解蛋白2.2g/L。
[0030](3)轉(zhuǎn)移誘導(dǎo)培養(yǎng):
[0031 ]將步驟(2)得到的愈傷組織轉(zhuǎn)移到第二培養(yǎng)基，溫度為27 ± 10C，以熒光燈為光源，光照強(qiáng)度控制為1800?2500Lx，光周期控制為光14h/暗10h，愈傷組織誘導(dǎo)出嫩芽后，將嫩芽從雪蓮花托外植體上完整地切下，轉(zhuǎn)移到第三培養(yǎng)基內(nèi)繼續(xù)以相同的條件培養(yǎng)至形成雪蓮幼苗；
[0032]所述第二培養(yǎng)基的組成成分在步驟(2)所述第一培養(yǎng)基基礎(chǔ)上添加了吲哚丁酸0.5?2.0mg/L和2，4_二氯苯氧乙酸丁酯1.5?2.0mg/L。
[0033]所述第三培養(yǎng)基的組成成分在所述第二培養(yǎng)基基礎(chǔ)上添加了6-芐氨基嘌呤1.5?
2.0mg/Lο
[0034](4)幼苗的馴化與煉苗:
[0035]將雪蓮幼苗移栽到煉苗基質(zhì)后，從誘導(dǎo)環(huán)境中每天降低溫度1°C，光照強(qiáng)度每天增加300Lx，至與外部環(huán)境相同時(shí)，再培養(yǎng)2?3天即可移栽至普通土壤中。
[0036]所述煉苗基質(zhì)的組成成分為:珍珠巖、蛭石、鋸末、松樹(shù)皮、水苔、花泥、泥炭土以及鈣鎂磷鉀肥，其質(zhì)量比為1:1:0.5:0.5:0.3:0.1:0.1:0.01。
[0037]實(shí)施例2
[0038]—種雪蓮脫毒幼苗的培育方法，具體步驟如下:
[0039](I)花托外植體預(yù)處理:選取雪蓮的花蕾，在4 °C環(huán)境中冷藏3天后，將花蕾取出自然恢復(fù)至室溫，剝?nèi)グ托』?，用純凈水沖洗，先在0.05%的升汞水溶液中消毒5min，再用70%的酒精消毒20s，之后用無(wú)菌水沖洗3次，即得到雪蓮花托外植體，以上涉及的百分比均為體積百分比。
[0040](2)外植體接種及誘導(dǎo)培養(yǎng):將雪蓮花托外植體移入到滅菌后的第一培養(yǎng)基中，將溫度設(shè)定為23 ± TC，以藍(lán)光燈為光源，光照強(qiáng)度控制為400Lx，光周期控制為光14h/暗1h，每十天更換一次培養(yǎng)基，直到誘導(dǎo)出愈傷組織。
[0041 ] 所述第一培養(yǎng)基的組成成分為:KNO3 800mg/L，2-氨基-5-羧基戊酰胺800mg/L，KH2PO4 300mg/L,CaCl2.2H20 320mg/L,MgSO4.7H20 180mg/L，EDTA 120mg/L,FeS04.7H2030mg/L，MnS04.4H2O 50mg/L，ZnS04.7H2O 15mg/L，H3B03 8mg/L，KI 5mg/L，Na2Mo04.2H2Olmg/L，CoCl2.6H2O 0.2mg/L，4-碘苯氧乙酸0.15mg/L，肌醇30mg/L，甘氨酸0.5mg/L，維生素BI 0.511^凡，維生素136 1.011^凡，煙酸1.011^凡，鹿糖3(^凡，瓊脂1(^凡，激動(dòng)素0 0.5mg/L，萘乙酸NAA0.3mg/L，山梨醇50g/L，生物素0.15mg/L，鹽酸卩比卩多醇0.5mg/L，鹽酸硫胺素
0.5mg/L，甲基亞硝基脲1.5mg/L，卩引噪丁酸1.5mg/L，丙氨酸5mg/L，葉酸5mg/L，調(diào)環(huán)酸I丐1.5mg/L，秋水仙堿1.5mg/L，水解蛋白2.0g/L。
[0042](3)轉(zhuǎn)移誘導(dǎo)培養(yǎng):將步驟(2)得到的愈傷組織轉(zhuǎn)移到第二培養(yǎng)基，溫度為27 土 I°C，以熒光燈為光源，光照強(qiáng)度控制為1800Lx，光周期控制為光14h/暗10h，愈傷組織誘導(dǎo)出嫩芽后，將嫩芽從雪蓮花托外植體上完整地切下，轉(zhuǎn)移到第三培養(yǎng)基內(nèi)繼續(xù)以相同的條件培養(yǎng)至形成雪蓮幼苗。
[0043]所述第二培養(yǎng)基的組成成分在步驟(2)所述第一培養(yǎng)基基礎(chǔ)上添加了吲哚丁酸
0.5mg/L和2，4_二氯苯氧乙酸丁酯1.5mg/L。所述第三培養(yǎng)基的組成成分在所述第二培養(yǎng)基基礎(chǔ)上添加了 6-芐氨基嘌呤1.5mg/L。
[0044](4)幼苗的馴化與煉苗:
[0045]將雪蓮幼苗移栽到煉苗基質(zhì)中，并逐步轉(zhuǎn)移到外部環(huán)境中，在幼苗適應(yīng)外部環(huán)境正常生長(zhǎng)后，再移栽至普通土壤中正常培養(yǎng)。
[0046]所述逐步轉(zhuǎn)移到外部環(huán)境中的方法為:將雪蓮幼苗移栽到煉苗基質(zhì)后，從誘導(dǎo)環(huán)境中每天降低溫度1.5°C，光照強(qiáng)度每天增加400Lx，至與外部環(huán)境相同時(shí)，再培養(yǎng)2天即可移栽至普通土壤中。
[0047]所述煉苗基質(zhì)的組成成分為:珍珠巖、蛭石、鋸末、松樹(shù)皮、水苔、花泥、泥炭土以及鈣鎂磷鉀肥，質(zhì)量比為1: 0.5:0.2:0.2:0.1:0.05:0.05:0.005 ο
[0048]實(shí)施例3
[0049]—種雪蓮脫毒幼苗的培育方法，具體步驟如下:
[0050](I)花托外植體預(yù)處理:
[0051]選取雪蓮的花蕾，在4°C環(huán)境中冷藏5天后，將花蕾取出自然恢復(fù)至室溫，剝?nèi)グ托』?，用純凈水沖洗，先在0.05 %的升萊水溶液中消毒8min，再用70 %的酒精消毒40s，之后用無(wú)菌水沖洗3次，即得到雪蓮花托外植體。
[0052]以上涉及的百分比均為體積百分比。
[0053](2)外植體接種及誘導(dǎo)培養(yǎng):
[0054]將雪蓮花托外植體移入到滅菌后的第一培養(yǎng)基中，將溫度設(shè)定為23± TC，以藍(lán)光燈為光源，光照強(qiáng)度控制為800Lx，光周期控制為光14h/暗10h，每十天更換一次培養(yǎng)基，直到誘導(dǎo)出愈傷組織。
[0055]所述第一培養(yǎng)基的組成成分為:KNO3 1300mg/L，2-氨基-5-羧基戊酰胺1200mg/L，KH2PO4 450mg/L,CaCl2.2H20 350mg/L,MgSO4.7H20 240mg/L，EDTA 180mg/L,FeSO4.7H2050mg/L，MnS04.4H2O 80mg/L，ZnS04.7H2O 30mg/L，H3B03 I Omg/L,KI 10mg/L，Na2Mo04.2H2O 5mg/L，CoCl2.6H2O 0.5mg/L，4_碘苯氧乙酸0.20mg/L，肌醇80mg/L，甘氨酸1.0mg/L，維生素BI 0.75mg/L，維生素B6 I.5mg/L，煙酸I.5mg/L，蔗糖50g/L，瓊脂15g/L，激動(dòng)素KT
1.0mg/L，萘乙酸NAA 0.4mg/L，山梨醇70g/L，生物素0.20mg/L，鹽酸卩比卩多醇1.0mg/L，鹽酸硫胺素I.0mg/L，甲基亞硝基脲2.0mg/L，卩引噪丁酸2.0mg/L，丙氨酸10mg/L，葉酸10mg/L，調(diào)環(huán)酸鈣2.0mg/L，秋水仙堿2.0mg/L，水解蛋白2.5g/L。
[0056](3)轉(zhuǎn)移誘導(dǎo)培養(yǎng):
[0057]將步驟(2)得到的愈傷組織轉(zhuǎn)移到第二培養(yǎng)基，溫度為27± 10C，以熒光燈為光源，光照強(qiáng)度控制為2500Lx，光周期控制為光14h/暗1h，愈傷組織誘導(dǎo)出嫩芽后，將嫩芽從雪蓮花托外植體上完整地切下，轉(zhuǎn)移到第三培養(yǎng)基內(nèi)繼續(xù)以相同的條件培養(yǎng)至形成雪蓮幼苗；
[0058]所述第二培養(yǎng)基的組成成分在步驟(2)所述第一培養(yǎng)基基礎(chǔ)上添加了吲哚丁酸
2.0mg/L和2,4-二氯苯氧乙酸丁酯2.0mg/L。
[0059]所述第三培養(yǎng)基的組成成分在所述第二培養(yǎng)基基礎(chǔ)上添加了6-芐氨基嘌呤2.0mg/Lο
[0060](4)幼苗的馴化與煉苗:
[0061]將雪蓮幼苗移栽到煉苗基質(zhì)中，并逐步轉(zhuǎn)移到外部環(huán)境中，在幼苗適應(yīng)外部環(huán)境正常生長(zhǎng)后，再移栽至普通土壤中正常培養(yǎng)。
[0062]所述逐步轉(zhuǎn)移到外部環(huán)境中的方法為:將雪蓮幼苗移栽到煉苗基質(zhì)后，從誘導(dǎo)環(huán)境中逐天降低溫度并逐天增加光照強(qiáng)度，至與外部環(huán)境相同時(shí)，再培養(yǎng)3天即可移栽至普通土壤中，轉(zhuǎn)移過(guò)程的周期根據(jù)室外環(huán)境不同而調(diào)節(jié)，轉(zhuǎn)移過(guò)程的周期持續(xù)15天。
[0063]所述煉苗基質(zhì)的組成成分為:珍珠巖100g、輕石150g、鋸末80g、松樹(shù)皮80g、水笞50g、花泥15g、泥炭土 15g以及鈣鎂磷鉀肥1.5g。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種雪蓮離體培育方法，其特征在于:具體步驟如下: (1)花托外植體預(yù)處理: 選取雪蓮的花蕾，在4°C環(huán)境中冷藏3?5天后，將花蕾取出自然恢復(fù)至室溫，剝?nèi)グ托』ǎ眉儍羲疀_洗，先在0.05%的升萊水溶液中消毒5?8min，再用70%的酒精消毒20?40s，之后用無(wú)菌水沖洗3次，即得到雪蓮花托外植體；以上涉及的百分比均為體積百分比； (2)外植體接種及誘導(dǎo)培養(yǎng): 將雪蓮花托外植體移入到滅菌后的第一培養(yǎng)基中，將溫度設(shè)定為23± 1°C，以藍(lán)光燈為光源，光照強(qiáng)度控制為400?800Lx，光周期控制為光14h/暗10h，每十天更換一次培養(yǎng)基，直到誘導(dǎo)出愈傷組織； (3)轉(zhuǎn)移誘導(dǎo)培養(yǎng): 將步驟(2)得到的愈傷組織轉(zhuǎn)移到第二培養(yǎng)基，溫度為27 ± TC，以熒光燈為光源，光照強(qiáng)度控制為1800?2500Lx，光周期控制為光14h/暗10h，愈傷組織誘導(dǎo)出嫩芽后，將嫩芽從雪蓮花托外植體上完整地切下，轉(zhuǎn)移到第三培養(yǎng)基內(nèi)繼續(xù)以相同的條件培養(yǎng)至形成雪蓮幼苗； (4)幼苗的馴化與煉苗: 將雪蓮幼苗移栽到煉苗基質(zhì)中，并逐步轉(zhuǎn)移到外部環(huán)境中，在幼苗適應(yīng)外部環(huán)境正常生長(zhǎng)后，再移栽至普通土壤中正常培養(yǎng)。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種雪蓮離體培育方法，其特征在于:步驟(2)所述第一培養(yǎng)基的組成成分為:KNO3 800?1300mg/L，2-氨基-5-羧基戊酰胺800?1200mg/L，KH2PO4 300?450mg/L，CaCl2.2H20 320?350mg/L，MgS04.7H20 180?240mg/L，EDTA 120?180mg/L，F(xiàn)eSO4.7H20 30?50mg/L，MnS04.4H20 50?80mg/L，ZnS04.7H20 15?30mg/L，H3B03 8?.10mg/L，KI 5?10mg/L，Na2Mo04.2H2O I?5mg/L，CoCl2.6H2O 0.2?0.5mg/L，4_鵬苯氧乙酸0.15?0.20mg/L，肌醇30?80mg/L，甘氛酸0.5?1.0mg/L，維生素BI 0.5?0.75mg/L，維生素B6 I.0?I.5mg/L，煙酸I.0?I.5mg/L，蔗糖30?50g/L，瓊脂10?15g/L，激動(dòng)素KT 0.5?I.0mg/L，萘乙酸NAA0.3?0.4mg/L，山梨醇50?70g/L，生物素0.15?0.20mg/L，鹽酸卩比口多醇0.5?1.0mg/L，鹽酸硫胺素0.5?1.0mg/L,甲基亞硝基脲1.5?2.0mg/L，卩引噪丁酸1.5?.2.0mg/L，丙氨酸5?10mg/L，葉酸5?10mg/L，調(diào)環(huán)酸|丐1.5?2.0mg/L，秋水仙堿1.5?.2.0mg/L，水解蛋白 2.0?2.5g/L。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種雪蓮離體培育方法，其特征在于:所述第二培養(yǎng)基的組成成分在步驟(2)所述第一培養(yǎng)基基礎(chǔ)上添加了吲哚丁酸0.5?2.0mg/L和2，4-二氯苯氧乙酸丁酯1.5?2.0mg/L; 所述第三培養(yǎng)基的組成成分在所述第二培養(yǎng)基基礎(chǔ)上添加了 6-芐氨基嘌呤1.5?.2.0mg/L.4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種雪蓮離體培育方法，其特征在于:步驟(4)所述逐步轉(zhuǎn)移到外部環(huán)境中的方法為:將雪蓮幼苗移栽到煉苗基質(zhì)后，從誘導(dǎo)環(huán)境中逐天降低溫度并逐天增加光照強(qiáng)度，至與外部環(huán)境相同時(shí)，再培養(yǎng)2?3天即可移栽至普通土壤中，轉(zhuǎn)移過(guò)程的周期根據(jù)室外環(huán)境不同而調(diào)節(jié)，轉(zhuǎn)移過(guò)程的周期持續(xù)10?15天。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種雪蓮離體培育方法，其特征在于:步驟(4)所述煉苗基質(zhì)的組成成分為:珍珠巖、蛭石、鋸末、松樹(shù)皮、水苔、花泥、泥炭土以及鈣鎂磷鉀肥。6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種雪蓮離體培育方法，其特征在于:所述煉苗基質(zhì)中，珍珠巖、蛭石、鋸末、松樹(shù)皮、水苔、花泥、泥炭土、鈣鎂磷鉀肥的質(zhì)量比為1: 0.5?1.5:0.2?0.8:.0.2?0.8:0.1?0.5:0.05?0.15:0.05?0.15:0.005?0.015。7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種雪蓮離體培育方法，其特征在于:所述煉苗基質(zhì)中，珍珠巖、蛭石、鋸末、松樹(shù)皮、水苔、花泥、泥炭土、鈣鎂磷鉀肥的質(zhì)量比為1:1:0.5:0.5:0.3:0.1:.0.1:0.01.
【文檔編號(hào)】A01H4/00GK106069766SQ201610493766
【公開(kāi)日】2016年11月9日
【申請(qǐng)日】2016年6月29日
【發(fā)明人】許建中, 孟劍華, 安劍石
【申請(qǐng)人】無(wú)錫南理工科技發(fā)展有限公司