豬苓菌與蜜環(huán)菌屬的種的共生方法及使用該方法的豬苓菌的栽培方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明設(shè)及一種豬等菌與蜜環(huán)菌的共生方法、及使用該方法的豬等菌的栽培方 法。
【背景技術(shù)】
[0002] 豬等菌（Polyporusumbella化S)為屬于多孔菌科的菌類，其菌核（豬等：子3k 斗）自古W來被用作中藥，配制成五等湯、豬等湯等中醫(yī)處方。
[0003] 據(jù)報(bào)道，從自然界中采集的豬等在大部分的情況下都與蜜環(huán)菌共存（非專利文獻(xiàn) 1)，認(rèn)為豬等菌通過與蜜環(huán)菌共生而從自然界中穩(wěn)定地得到營養(yǎng)源。因此認(rèn)為，就豬等的栽 培而言，豬等菌與蜜環(huán)菌的共生成為關(guān)鍵。在中國等進(jìn)行的豬等的農(nóng)場栽培中，已經(jīng)進(jìn)行了 利用該共生關(guān)系的豬等的栽培（非專利文獻(xiàn)2)。中國的農(nóng)場栽培法為將接種有蜜環(huán)菌的 大葉棟（十號）木材的段木（巧C木）埋設(shè)于地下，在進(jìn)行培養(yǎng)后接種作為種的豬等菌的 菌核，使其與蜜環(huán)菌共生之后，使其肥大并收獲的方法。該方法共計(jì)要花費(fèi)近4年的較長時(shí) 間，其中，從在段木上接種蜜環(huán)菌到使其蔓延花費(fèi)半年~1年、從豬等菌的菌核接種到豬等 菌與蜜環(huán)菌共生花費(fèi)半年~1年、共生后豬等菌的菌核的肥大花費(fèi)2年~3年。
[0004] 在專利文獻(xiàn)1中公開了一種豬等菌的農(nóng)場栽培方法，其為了使豬等菌的菌核在短 時(shí)間內(nèi)有效地增殖，使豬等菌與植物病原性低的蜜環(huán)菌共生并進(jìn)行培養(yǎng)。
[0005] 但是，在±壤中使蜜環(huán)菌和豬等菌共生時(shí)的共生率為40%~50%，其為豬等的單 位面積的收獲量降低的一個(gè)原因。
[0006] 現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)
[0007] 專利文獻(xiàn)
[0008] 專利文獻(xiàn)1 :日本特開2007-319104號公報(bào)
[0009] 非專利文獻(xiàn)
[0010] 非專利文獻(xiàn) 1:KikuchiG.andYamajiH. (2010)IdentificationofArmillaria speciesassociatedwithPolyporusumbellatususingITSsequencesofnuclear ribosomalDM.Mycoscience51 巧）：366-372
[0011] 非專利文獻(xiàn) 2 :Kyung-DaQioi，Kyung-TaeLee,Jae0址Shim,化un-SuLee, Tae-SooLee，SangSunLee，Shun-XingGuoandMinWoongLee(2003)ANewMethodfor CultivationofSclerotiumofGrifolaumbellateMycobiology31(2) :105-112

【發(fā)明內(nèi)容】

[001引發(fā)明要解決的課題
[0013] 本發(fā)明的課題在于，提高蜜環(huán)菌與豬等菌的共生率，縮短豬等菌的栽培時(shí)間，同時(shí) 提高單位面積的收獲量。
[0014] 用于解決課題的手段
[0015] 本發(fā)明人為了解決所述課題，針對豬等菌與蜜環(huán)菌的共生工序進(jìn)行了潛屯、研究， 結(jié)果發(fā)現(xiàn)，通過在蜜環(huán)菌的根狀菌索的形成后，在上部接種豬等菌，在其上部覆蓋來自闊葉 樹的木材粉碎物并進(jìn)行培養(yǎng)，與現(xiàn)有方法相比大幅度提高共生率，而且可W通過在冬季使 其共生而縮短栽培時(shí)間，直至完成本發(fā)明。
[0016] 旨P，本發(fā)明的要點(diǎn)如下所述。
[0017] (1) 一種豬等菌與蜜環(huán)菌的共生方法，所述方法包括：在含有來自闊葉樹的木材 粉碎物的菌床上接種蜜環(huán)菌，在蜜環(huán)菌形成根狀菌索之后，在該根狀菌索形成部位的上部 接種豬等菌，在其上部覆蓋來自闊葉樹的木材粉碎物并進(jìn)行培養(yǎng)。
[0018] (2) -種豬等菌與蜜環(huán)菌的共生方法，所述方法包括：在含有來自闊葉樹的木材 粉碎物的菌床上接種蜜環(huán)菌，在蜜環(huán)菌形成根狀菌索之后，在該根狀菌索形成部位的上部 接種與來自闊葉樹的木材粉碎物混合的豬等菌并進(jìn)行培養(yǎng)。
[0019] (3)如上述（1)所述的方法，其中，在含有來自闊葉樹的木材粉碎物的菌床上接種 蜜環(huán)菌，在蜜環(huán)菌形成根狀菌索之后，在該根狀菌索形成部位的上部接種豬等菌，在其上部 覆蓋來自闊葉樹的木材粉碎物，在7~17Γ下進(jìn)行培養(yǎng)。
[0020] (4)如上述（2)所述的方法，其中，在含有來自闊葉樹的木材粉碎物的菌床上接種 蜜環(huán)菌，在蜜環(huán)菌形成根狀菌索之后，在該根狀菌索形成部位的上部接種與來自闊葉樹的 木材粉碎物混合的豬等菌，在7~17°C下進(jìn)行培養(yǎng)。
[002。 妨一種豬等菌的栽培方法，所述方法包括：將通過所述（1)~（4)中任一項(xiàng)所述 的方法共生的豬等菌和蜜環(huán)菌與闊葉樹原木粘附，一同埋設(shè)于±壤中并進(jìn)行栽培。
[00過發(fā)明的效果
[0023] 根據(jù)本發(fā)明，可W縮短豬等菌與蜜環(huán)菌的共生時(shí)間，還可縮短豬等菌的栽培時(shí)間。 另外，通過提高豬等菌與蜜環(huán)菌的共生率，還可W提高單位面積的收獲量。
【附圖說明】
[0024] 圖1表示蜜環(huán)菌的根狀菌索的銀末占有率與豬等菌和蜜環(huán)菌的共生的關(guān)系的示 意圖。
[00巧]圖2是表示豬等菌與蜜環(huán)菌的共生部分的狀態(tài)的光學(xué)顯微鏡照片。
[0026] 圖3是表示菌床上部的蜜環(huán)菌的根狀菌索形成部位的照片。
【具體實(shí)施方式】
[0027] 下面，對本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說明。
[0028] 豬等菌在±壤中形成黑褐色的不規(guī)則塊狀的菌核，由菌核產(chǎn)生子實(shí)體，但本發(fā)明 中，將該菌核用于培養(yǎng)。對用于本發(fā)明的豬等菌的菌核的大小、重量、產(chǎn)地等沒有特別限定， 但優(yōu)選直徑2~10cm左右的豬等菌的菌核，可W將比其大的菌核分割成幾個(gè)使用。
[0029] 作為用于本發(fā)明的蜜環(huán)菌，只要是屬于傘菌目（/、號《個(gè)目）口磨科（豐シ^ク 科）蜜環(huán)菌屬（十號《個(gè)屬）的蜜環(huán)菌，就沒有特別限制；在與豬等菌的共生率及菌核的增 殖率方面，優(yōu)選植物病原性低的蜜環(huán)菌。本說明書中，"植物病原性"是指：蜜環(huán)菌的菌絲寄 生于健全生長的樹木，使其枯死或衰弱。已知在蜜環(huán)菌屬的菌中存在許多性質(zhì)不同的種類， W所述的意思存在植物病原性高的蜜環(huán)菌和植物病原性低的蜜環(huán)菌。作為運(yùn)種植物病原性 低的蜜環(huán)菌，具體可列舉：芥黃蜜環(huán)菌（Armillariasinapina)、高盧蜜環(huán)菌（Armillaria gallica)、蜜環(huán)菌屬真菌?化t:。ステ^乂ス）（Armillariacepistipes)、六 瓜S號y六?力瓜ッ化シス（Armillariacalvescens)等。
[0030] 在本發(fā)明中，在"含有來自闊葉樹的木材粉碎物的菌床"上接種蜜環(huán)菌。
[0031] 作為所述闊葉樹，沒有特別限制，可列舉例如：山毛樣、袍棟、楓樹、昨木、樓花樹、 柯樹類、柳樹類、愉樹類等。另外，也可W添加紅松等來自針葉樹的木材粉碎物。來自針葉 樹的木材粉碎物優(yōu)選為低于木材粉碎物整體的30%、優(yōu)選低于10%。
[0032] 作為所述木材粉碎物，沒有特別限制，可列舉例如：銀末、木屑、木片碎屑、切割屑、 樹皮的切碎物、樹皮的切割屑等。
[0033] 所述木材粉碎物的粒度通常長徑為約0. 1mm~100mm，優(yōu)選為約1mm~5mm。
[0034] 用于本發(fā)明的蜜環(huán)菌既可W使用直接從自然界中采集的蜜環(huán)菌，也可W使用作為 生產(chǎn)磨茹用的加川椎茸（株）等出售的蜜環(huán)菌種菌。進(jìn)而，可W將運(yùn)些蜜環(huán)菌在PDA培養(yǎng) 基等上預(yù)先培養(yǎng)而使用。在所述木材粉碎物上接種蜜環(huán)菌的方法可W按照常規(guī)方法進(jìn)行， 例如，在由所述木材粉碎物構(gòu)成的菌床上接種預(yù)先在培養(yǎng)基中進(jìn)行了培養(yǎng)的蜜環(huán)菌，將其 培養(yǎng)一定時(shí)間（例如在室溫下3~4個(gè)月、陰暗條件），由此，蜜環(huán)菌在菌床上形成茶褐色的 針狀的根狀菌索（圖3)。
[0035] 在含有所述木材粉碎物的菌床上接種蜜環(huán)菌時(shí)，作為用于菌床的木材粉碎物，優(yōu) 選銀末、木屑，所述菌床除木材粉碎物之外，可W根據(jù)需要含有各種營養(yǎng)源，例如作為碳源 和氮源的小麥教、薦糖、米慷等。菌床的水分含量調(diào)整為通常50~80重量％、優(yōu)選55~65 重量％。
[0036] 就所述菌床而言，在所述木材粉碎物中放入各種營養(yǎng)源，加水混合，可W制作例如 直徑15畑1、高度12cm左右大小的菌床塊用于使用（日本特公平8-13225號公報(bào)）。優(yōu)選在 該菌床塊上開設(shè)接種孔。
[0037] 由于蜜環(huán)菌可W無菌培養(yǎng)，因此，從防止雜菌的繁殖方面考慮，優(yōu)選對在此使用的 菌床進(jìn)行滅菌處理。
[0038] 在含有來自闊葉樹的木材粉碎物的菌床上接種蜜環(huán)菌之后，在通常5~32°C、優(yōu) 選20~25°C下培養(yǎng)通常70~110天、優(yōu)選約3~4個(gè)月，由此，蜜環(huán)菌形成根狀菌索。
[0039] 在本發(fā)明中，如上述那樣在蜜環(huán)菌形成根狀菌索之后，在該根狀菌索形成部位的 上部，（i)接種豬等菌，在其上部覆蓋來自闊葉樹的木材粉碎物并進(jìn)行培養(yǎng)，或（ii)接種與 來自闊葉樹的木材粉碎物混合的豬等菌并進(jìn)行培養(yǎng)。
[0040] 在此，蜜環(huán)菌形成根狀菌索的狀態(tài)是指：白色、茶褐色或暗褐色的金屬絲狀的根狀 菌索W針盤狀在菌床上部立起的狀態(tài)，在立起的根狀菌索的上部接種豬等菌。
[0041] 作為在此使用的來自闊葉樹的木材粉碎物，可W使用與上述相同的木材粉碎物， 但水分含量調(diào)整為通常50~80重量％、優(yōu)選55~65重量％。在此使用的木材粉碎物可 W根據(jù)需要作為與所述各種營養(yǎng)源混合的菌床使用，但為了提高豬等菌與蜜環(huán)菌的共生比 例，優(yōu)選為不含有各種營養(yǎng)源的木材粉碎物。由于將在此使用的木材粉碎物進(jìn)行滅菌，設(shè)為 無菌狀態(tài)時(shí)，附著于豬等菌菌核的特定雜菌增殖，有可能對豬等菌的生長產(chǎn)生不良影響，因 此，在抑制阻礙豬等菌生長的雜菌的繁殖方面，優(yōu)選不進(jìn)行滅菌處理。
[0042] 上述（ii)中的與來自闊葉樹的木材粉碎物混合的豬等菌可W為，在來自闊葉樹 的木材粉碎物上接種豬等菌之后進(jìn)行培養(yǎng)、在木材粉碎物中形成豬等菌的菌核的豬等菌。
[0043] 使豬等菌與蜜環(huán)菌共生時(shí)的溫度因栽培法而不同，在含有來自闊葉樹的木材粉碎 物的菌床上接種蜜環(huán)菌的室內(nèi)栽培中，優(yōu)選為7~17°C，進(jìn)一步優(yōu)選為10~16°C。
[0044] 需要說明的是，在本發(fā)明中，豬等菌與蜜環(huán)菌共生是指：蜜環(huán)菌的菌絲進(jìn)入豬等菌 的菌核內(nèi)，舉起蜜環(huán)菌的根狀菌