一種連續(xù)相變萃取油茶中抑菌物質(zhì)的方法及應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及生物化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種連續(xù)相變萃取提取油茶中抑菌物質(zhì) 的方法及應(yīng)用，還涉及一種油茶抑菌提取物。
【背景技術(shù)】
[0002] 天然產(chǎn)物原料中的活性成分的提取的研究及應(yīng)用已有多年的歷史，部分產(chǎn)品在工 業(yè)上也有大規(guī)模的應(yīng)用。當(dāng)前科研上對天然產(chǎn)物活性成分的分離還是利用各種不同極性的 溶劑，按照"相似相溶"的原理，針對目標(biāo)提取物，選用對所需抑菌活性成分溶解度大、對不 需要溶出成分溶解度小的溶劑，將目標(biāo)組分從原料內(nèi)溶解出來，然后蒸餾回收萃取溶劑，以 完成提取、分離加工過程。
[0003] 近幾年，對植物抑菌物的提取，國內(nèi)外也廣泛采用微波、超聲波輔助提取法和超臨 界二氧化碳流體萃取法。超聲波提取法，即利用超聲波的在一定功率下的"空化"作用，激 化提取溶媒在萃取物中滲透、溶解、擴(kuò)散以提取目標(biāo)物的提取工藝。超臨界二氧化碳流體萃 取法，需控制二氧化碳處于臨界溫度和臨界壓力以上，在臨界狀態(tài)下，二氧化碳處于臨界狀 態(tài)并具有液體和氣體的雙重特性，以其作為溶劑，通過分子間的相互作用和擴(kuò)散作用溶解 原料的目標(biāo)成分，形成超臨界二氧化碳負(fù)載相，然后升高載氣的溫充或降低載氣的壓力，使 超臨界二氧化碳的溶解度降低，從而獲得目標(biāo)物質(zhì)。超臨界二氧化碳萃取法具有萃取能力 強(qiáng)，提取率高，選擇性強(qiáng)，產(chǎn)品品質(zhì)好等優(yōu)勢，但是，二氧化碳必須在25MPa以上的超高壓狀 態(tài)下才能夠進(jìn)行萃取加工，極高的壓力限制了設(shè)備工業(yè)化生產(chǎn)，也制約了該技術(shù)在天然產(chǎn) 物生產(chǎn)中的工業(yè)化應(yīng)用。超聲波提取雖法對傳統(tǒng)工藝方法有較大改進(jìn)，也具有較好的經(jīng)濟(jì) 性和廣泛的適應(yīng)性，但只是一種輔助手段，需要與其它萃取技術(shù)結(jié)合才能發(fā)揮作用。
[0004] 連續(xù)相變萃取是以亞臨界狀態(tài)的流體或亞臨界流體的混合溶液為溶媒，與溶質(zhì)在 系統(tǒng)內(nèi)相繼經(jīng)過浸提、蒸發(fā)脫溶、壓縮、冷凝回收等過程，從天然產(chǎn)物中提取目標(biāo)組分的一 種新技術(shù)。當(dāng)萃取劑等以亞臨界流體狀態(tài)存在時，分子的擴(kuò)散性能增強(qiáng)，傳質(zhì)速度加快，對 天然產(chǎn)物中弱極性以及非極性物質(zhì)的滲透性和溶解能力顯著提高。亞臨界環(huán)境下萃取，不 破壞熱敏性成分，被視為綠色環(huán)保、前景廣闊的一項(xiàng)變革性技術(shù)。
[0005]目前還未有采用連續(xù)相變萃取方法提取油茶中抑菌物質(zhì)的報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供了一種連續(xù)相變萃取提取油茶中抑菌物質(zhì)的方 法及應(yīng)用，還提供了一種油茶抑菌提取物。
[0007] 第一方面，本發(fā)明提供了一種連續(xù)相變萃取提取油茶中抑菌物質(zhì)的方法，包括如 下步驟：
[0008] (1)原料處理：將油茶的茶葉或茶梗、根、花、籽柏粉碎得到茶粉原料；
[0009] (2)連續(xù)相變萃?。簩⒉襟E（1)所得茶粉原料裝入萃取釜中，在始終低于萃取劑 的臨界壓力和臨界溫度的條件下，將萃取劑壓縮為液體，在萃取溫度50-90°C，萃取壓力 0. 3-0. 7MPa的條件下，流經(jīng)萃取釜，連續(xù)萃取l-5h，所得萃取物流經(jīng)解析釜，獲得油茶中的 抑菌物質(zhì)。
[0010] 優(yōu)選地，所述步驟（2)中，將油茶的茶葉或茶梗、根、花、籽柏粉碎至20-80目，得到 所述的茶粉原料。
[0011] 優(yōu)選地，所述步驟（2)中，所述萃取劑包括但不限于乙醇、甲醇、丙酮、石油醚、苯、 氯仿、乙醚、乙酸乙酯、二氯乙烷，丙烷、丁烷中的一種或多種。
[0012] 優(yōu)選地，所述步驟（2)中，所述萃取劑的濃度為50-90%。
[0013] 優(yōu)選地，所述步驟（2)中，所述萃取劑為70-90 %的乙醇水溶液，萃取溫度優(yōu)選為 70-90°C，萃取壓力優(yōu)選為0· 4-0. 6MPa，連續(xù)萃取l-3h。
[0014] 優(yōu)選地，所述步驟（2)中，所述流經(jīng)萃取釜的流速為80-150L/h。
[0015] 優(yōu)選地，所述步驟（2)中，所述流經(jīng)解析釜中解析并收集萃取物的條件為：解析溫 度為80-90°C，解析壓力為0· 05-0. 2MPa。
[0016] 進(jìn)一步優(yōu)選地，所述步驟（2)中，解析溫度為90°C，解析壓力為0· 2MPa。
[0017] 優(yōu)選地，所述步驟（2)中，所述萃取劑為70%的乙醇水溶液，萃取條件為：萃取溫 度70°C，萃取壓力0· 4MPa，連續(xù)萃取lh。
[0018] 優(yōu)選地，所述步驟（2)中，所述萃取劑為70%的乙醇水溶液，萃取條件為：萃取溫 度80°C，萃取壓力0· 5MPa，連續(xù)萃取2h。
[0019] 優(yōu)選地，所述步驟（2)中，所述萃取劑為70%的乙醇水溶液，萃取條件為：萃取溫 度90°C，萃取壓力0· 6MPa，連續(xù)萃取3h。
[0020] 優(yōu)選地，所述步驟（2)中，所述萃取劑為80%的乙醇水溶液，萃取條件為：萃取溫 度90°C，萃取壓力0· 5MPa，連續(xù)萃取lh。
[0021] 優(yōu)選地，所述步驟（2)中，所述萃取劑為80%的乙醇水溶液，萃取條件為：萃取溫 度70°C，萃取壓力0· 6MPa，連續(xù)萃取2h。
[0022] 優(yōu)選地，所述步驟（2)中，所述萃取劑為80%的乙醇水溶液，萃取條件為：萃取溫 度80°C，萃取壓力0· 4MPa，連續(xù)萃取3h。
[0023] 優(yōu)選地，所述步驟（2)中，所述萃取劑為90%的乙醇水溶液，萃取條件為：萃取溫 度80°C，萃取壓力0· 6MPa，連續(xù)萃取lh。
[0024] 優(yōu)選地，所述步驟（2)中，所述萃取劑為90%的乙醇水溶液，萃取條件為：萃取溫 度90°C，萃取壓力0· 4MPa，連續(xù)萃取2h。
[0025] 優(yōu)選地，所述步驟（2)中，所述萃取劑為90%的乙醇水溶液，萃取條件為：萃取溫 度70°C，萃取壓力0· 5MPa，連續(xù)萃取3h。
[0026] 優(yōu)選地，所述步驟（2)中，所述萃取劑為80%的乙醇水溶液，萃取條件為：萃取溫 度70°C，萃取壓力0· 5MPa，連續(xù)萃取lh。
[0027] 優(yōu)選地，所述步驟（2)中，所述萃取劑為80%的乙醇水溶液，萃取條件為：萃取溫 度80°C，萃取壓力0· 4MPa，連續(xù)萃取3h。
[0028] 優(yōu)選地，所述步驟（2)中，所述萃取劑為80%的乙醇水溶液，萃取條件為：萃取溫 度80°C，萃取壓力0· 4MPa，連續(xù)萃取lh。
[0029] 可以理解的是，本領(lǐng)域技術(shù)人員為了后續(xù)純化，可進(jìn)一步采用有機(jī)溶劑對步驟（2) 獲得的油茶中抑菌物質(zhì)進(jìn)一步萃取提純。
[0030] 所述有機(jī)溶劑包括但不限于石油醚、正丁醇、乙酸乙酯、乙醚、苯、氯仿、二氯乙烷、 丙烷、丁烷中的一種或多種。
[0031] 優(yōu)選地，本發(fā)明第一方面提供的方法還包括采用有機(jī)溶劑對步驟（2)獲得的油茶 中抑菌物質(zhì)進(jìn)一步萃取提純的步驟包括：
[0032] 將步驟（2)所得抑菌物質(zhì)加入蒸餾水溶解后，加入石油醚，充分振搖萃取，靜置， 待溶液完全分層后，放出上層的乙酸乙酯萃取液，減壓濃縮得石油醚萃取物。
[0033] 進(jìn)一步優(yōu)選地，采用有機(jī)溶劑對所得石油醚萃取物進(jìn)一步萃取提純的步驟包括：
[0034] 將所得石油醚萃取物加入蒸餾水溶解后，加入乙酸乙酯，充分振搖萃取，靜置，待 溶液完全分層后，放出上層的乙酸乙酯萃取液，減壓濃縮得乙酸乙酯萃取物。
[0035] 更進(jìn)一步優(yōu)選地，采用有機(jī)溶劑對所得乙酸乙酯萃取物進(jìn)一步萃取提純的步驟包 括：
[0036] 將所得乙酸乙酯萃取物加入蒸餾水溶解后，加入正丁醇，充分振搖萃取，靜置，待 溶液完全分層后，放出上層的正丁醇萃取液，直至正丁醇層澄清無色。將萃取液合并，減壓 濃縮得正丁醇萃取物。
[0037] 可以理解的是，本領(lǐng)域技術(shù)人員可采用本領(lǐng)域常規(guī)純化方法純化本發(fā)明步驟（2) 獲得的油茶中抑菌物質(zhì)或其后續(xù)經(jīng)有機(jī)溶劑進(jìn)一步萃取的萃取物，以獲得純度更高的抑菌 物質(zhì)。包括但不限于采用高速逆流色譜對萃取物進(jìn)行分離純化。
[0038] 優(yōu)選地，本發(fā)明第一方面提供的方法還包括采用高速逆流色譜對油茶中抑菌物質(zhì) 或其后續(xù)經(jīng)有機(jī)溶劑進(jìn)一步萃取所得的萃取物進(jìn)行分離純化，所述高速逆流色譜（HSCCC) 的溶劑系統(tǒng)為乙酸乙酯-正丁醇-水（含1-10%乙酸，優(yōu)選含3%乙酸）體系。
[0039] 進(jìn)一步優(yōu)選地，所述乙酸乙酯-正丁醇-水（含1-10%乙酸，優(yōu)選含3%乙酸）體 系中乙酸乙酯、正丁醇、水的體積比為1 :4 :4、1