一種甜葉菊三倍體雜交種的配套培育方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]一種甜葉菊三倍體雜交種的配套培育方法，涉及甜葉菊三倍體育種技術(shù)，更具體的說是一種用二倍體甜葉菊與四倍體甜葉菊進行雜交培育三倍體甜葉菊雜交種的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]在農(nóng)作物中，許多作物都育成了三倍體的高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)新品種，給作物的產(chǎn)量和品質(zhì)帶來了突破性的提高。其具體做法，以西瓜為例，將純合二倍體的西瓜種子與純合的四倍體西瓜種子育成幼苗，相間種植在同一塊土地上，讓他們進行定向的雜交，所獲得的種子即是三倍體的西瓜種子。目前甜葉菊生產(chǎn)都是采用常規(guī)的品種甚至是各地的農(nóng)家品種，產(chǎn)量低而不穩(wěn)，品質(zhì)參差不齊。三倍體的植物具有生殖器官巨大性的特點，如果能夠用于甜葉菊，也會使甜葉菊的葉片更加巨大，從而獲得更高的產(chǎn)量。但是，由于甜葉菊自身遺傳生殖的特性和植物學(xué)特征，甜葉菊三倍體的育種并不能簡單地套用其它作物的方法。甜葉菊是一種嚴格的異花授粉的植物，具有自交不親和性，但是，不同植株間的花粉可以相互雜交結(jié)籽。如果將二倍體與四倍體的甜葉菊種子苗種植在同一塊地里，不但二倍體與四倍體可以相互雜交，二倍體和四倍體群體內(nèi)部也會相互授粉雜交，于是所產(chǎn)生的種子就會雜亂無章，既有三倍體的雜交種，也有四倍體和二倍體的種子，使得群體嚴重混雜，不能達到農(nóng)業(yè)生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)化要求。由于花量龐大，果實很小，每朵花所結(jié)的種子少，用人工進行雜交顯然無法大量生產(chǎn)甜葉菊種子。如何將甜葉菊的二倍體與四倍體進行雜交，生產(chǎn)出基因型和生殖特性均一致的甜葉菊三倍體雜交種，是亟待解決的一個難題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的在于針對甜葉菊三倍體育種上存在的上述難題，提出一種能夠通過甜葉菊的二倍體和四倍體雜交，生產(chǎn)出基因型和生殖特性均一致的甜葉菊三倍體雜交種的方法。
[0004]本發(fā)明是這樣實現(xiàn)的:
一種甜葉菊三倍體雜交種的配套培育方法，它包括如下步驟:
(1)誘變甜葉菊四倍體:用秋水仙素將部分甜葉菊的二倍體材料誘變加倍成為四倍體；
(2)培養(yǎng)甜葉菊制種親本株系:將二倍體和四倍體的甜葉菊單株材料進行扦插擴繁，分別繁育出大量來自單一植株的基因型和生殖特性均一致的甜葉菊制種親本株系；
(3)雜交制種:將四倍體甜葉菊制種親本株系和二倍體甜葉菊制種親本株系按行相間種植在同一塊田中，利用昆蟲進行相互雜交授粉，收獲的種子即為三倍體甜葉菊種子。
[0005]所述的誘變甜葉菊四倍體的方法為:在超凈工作臺上取出試管苗除去葉片，剪成約I Cm長含側(cè)芽莖段，水平放置于再生培養(yǎng)基表面上，輕按固定，每瓶接種5個莖段，每個處理接種10瓶，最后置于培養(yǎng)室中進行培養(yǎng)培養(yǎng)2 d后取出，在超凈工作臺上滴加
0.025%秋水仙素(過濾滅菌)，確保秋水仙素浸潤每個莖段，秋水仙素處理完畢放回培養(yǎng)室，繼續(xù)培養(yǎng)芽苗長至2.0 cm高時(約30 d )，在超凈工作臺上將芽苗剪下接種于生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)20 d，檢獲加倍成功的四倍體植株。
[0006]所述的再生培養(yǎng)基為莖段再生苗培養(yǎng)基為MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+瓊脂粉5.0 g/L+蔗糖30 g/L ;生根培養(yǎng)為生根培養(yǎng)基為MS+IBA 0.5 mg/L+瓊脂粉5.0g/L+ 鹿糖 20 g/L ο
[0007]本發(fā)明的有益效果:
本發(fā)明提出了在組織培養(yǎng)條件下，用秋水仙素將部分甜葉菊材料誘導(dǎo)加倍成四倍體，再分別通過組培的方法，大批量擴增由單一植株擴繁成功的基因型單一的二倍體和四倍體的制種親本株系。其各自群體內(nèi)個體間的基因型完全一樣，都是一個甜葉菊單株的“分身”，在生殖特性上可視為一個單株。由于甜葉菊具有自交不親和的特性，這樣的制種親本株系不但個體自交不能結(jié)實，其各自群體內(nèi)部的植株之間也不能相互授粉結(jié)實。把這樣培育出的二倍體和四倍體甜葉菊苗種植在一起，開花時，只有二倍體和四倍體的植株之間可以相互雜交結(jié)籽，于是就獲得了基因型和生殖特性均一致三倍體的甜葉菊種子。本方法有效避免了甜葉菊種子苗雜交，存在的親本群體內(nèi)的植株相互雜交，導(dǎo)致種子嚴重混雜的問題。由于三倍體植物具有器官巨大性的規(guī)律，從而使甜葉菊的產(chǎn)量得到顯著的提高。
【具體實施方式】
[0008]培育甜葉菊三倍體雜交種的步驟:
(1)誘變甜葉菊四倍體:用秋水仙素將部分甜葉菊的二倍體材料誘變加倍成為四倍體；
(2)培養(yǎng)甜葉菊制種親本株系:將二倍體和四倍體的甜葉菊單株材料進行扦插擴繁，分別繁育出大量來自單一植株的基因型和生殖特性均一致的甜葉菊制種親本株系；
(3)雜交制種:將四倍體甜葉菊制種親本株系和二倍體甜葉菊制種親本株系按行相間種植在同一塊田中，利用昆蟲進行相互雜交授粉，收獲的種子即為三倍體甜葉菊種子。
[0009]誘變甜葉菊四倍體的方法為:在超凈工作臺上取出試管苗除去葉片，剪成約I cm長含側(cè)芽莖段，水平放置于再生培養(yǎng)基表面上，輕按固定，每瓶接種5個莖段，每個處理接種10瓶，最后置于培養(yǎng)室中進行培養(yǎng)培養(yǎng)2 d后取出，在超凈工作臺上滴加0.025%秋水仙素(過濾滅菌)，確保秋水仙素浸潤每個莖段，秋水仙素處理完畢放回培養(yǎng)室，繼續(xù)培養(yǎng)芽苗長至2.0 cm高時(約30 d )，在超凈工作臺上將芽苗剪下接種于生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)20d，檢獲加倍成功的四倍體植株。
[0010]再生培養(yǎng)基為莖段再生苗培養(yǎng)基為MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+瓊脂粉5.0 g/L+蔗糖30 g/L ;生根培養(yǎng)為生根培養(yǎng)基為MS+IBA 0.5 mg/L+瓊脂粉5.0 g/L+鹿糖20 g/L。
【主權(quán)項】
1.一種甜葉菊三倍體雜交種的配套培育方法，其特征在于，它包括如下步驟: (1)誘變甜葉菊四倍體:用秋水仙素將部分甜葉菊的二倍體材料誘變加倍成為四倍體； (2)培養(yǎng)甜葉菊制種親本株系:將二倍體和四倍體的甜葉菊單株材料進行扦插擴繁，分別繁育出大量來自單一植株的基因型和生殖特性均一致的甜葉菊制種親本株系； (3)雜交制種:將四倍體甜葉菊制種親本株系和二倍體甜葉菊制種親本株系按行相間種植在同一塊田中，利用昆蟲進行相互雜交授粉，收獲的種子即為三倍體甜葉菊種子。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種甜葉菊三倍體雜交種的配套培育方法，其特征在于，所述的誘變甜葉菊四倍體的方法為:在超凈工作臺上取出試管苗除去葉片，剪成約I cm長含側(cè)芽莖段，水平放置于再生培養(yǎng)基表面上，輕按固定，每瓶接種5個莖段，每個處理接種10瓶，最后置于培養(yǎng)室中進行培養(yǎng)培養(yǎng)2 d后取出，在超凈工作臺上滴加0.025%秋水仙素(過濾滅菌)，確保秋水仙素浸潤每個莖段，秋水仙素處理完畢放回培養(yǎng)室，繼續(xù)培養(yǎng)芽苗長至2.0 cm高時(約30 d )，在超凈工作臺上將芽苗剪下接種于生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)20 d，檢獲加倍成功的四倍體植株。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種甜葉菊三倍體雜交種的配套培育方法，其特征在于，所述的再生培養(yǎng)基為莖段再生苗培養(yǎng)基為MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+瓊脂粉5.0g/L+蔗糖30 g/L ;生根培養(yǎng)為生根培養(yǎng)基為MS+IBA 0.5 mg/L+瓊脂粉5.0 g/L+蔗糖.20 g/L.
【專利摘要】本發(fā)明公布了一種甜葉菊三倍體雜交種的配套培育方法，先將甜葉菊的二倍體材料進行染色體加倍，然后將要配對雜交的四倍體和二倍體的甜葉菊單株材料分別進行扦插擴繁，分別獲得大量基因型和生殖特性均一致的四倍體和二倍體甜葉菊的制種親本株系，將上述兩種制種親本株系按行相間種植在同一塊田中，進行雜交制種，由于甜葉菊具有自交不親和的特性，天然雜交后即得甜葉菊三倍體雜交種。根據(jù)植物三倍體器官的巨大性，這一措施能顯著提高甜葉菊的葉片產(chǎn)量。
【IPC分類】A01H4/00, A01H1/02
【公開號】CN105010150
【申請?zhí)枴緾N201510517749
【發(fā)明人】林平, 何克勤, 胡能兵
【申請人】林平
【公開日】2015年11月4日
【申請日】2015年8月23日