專利名稱：四倍體魚的培育方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及魚類的繁殖，具體涉及多倍體魚的培育。
用鯽魚和鯉魚作親本彼此互交的研究早有報導。日本學者認為鯽鯉雜交一代的雄性是完全不育，蘇聯(lián)學者也持同樣的看法。劉筠等在研究紅鯽與湘江野鯉的雜交育種實驗中，獲得了具有明顯雜種優(yōu)勢的雜交一代(湘鯽)，同時，發(fā)現(xiàn)湘鯽雄性不是完全不育，而是部分可育，可育率為4.67％，從而修正了國內(nèi)外普遍認為鯉鯽雜交雄性不育的觀點。運用細胞工程，生產(chǎn)出多倍體魚，然后用于三倍體魚的生產(chǎn)，是國內(nèi)外尚未解決的問題。
本發(fā)明旨在通過細胞工程技術(shù)，培育出能自然繁殖且遺傳性狀穩(wěn)定的魚類四倍體種群。
實現(xiàn)上述發(fā)明目的的主要技術(shù)方案如下在以紅鯽為母本，湘江野鯉為父本，經(jīng)人工授精獲得雜交一代F1的基礎(chǔ)上，選擇雄性可育的F1精子與雌性F1卵子交配，經(jīng)人工授精制得F2代，在F2代中，選擇具有2N染色體的大頭精子與經(jīng)大頭精子誘導F2雌核倍加為二倍體的卵子，用人工授精方法生產(chǎn)四倍體的F3代。
下面進一步詳述本發(fā)明。
本發(fā)明作母本的紅鯽魚(Carassius auratus L.)屬于典型的多次產(chǎn)卵類型，每年3月下旬至4月下旬，在大約35～45天內(nèi)，紅鯽可以連續(xù)產(chǎn)卵2～3次，每次產(chǎn)卵間隔時間為12～15天。作為父本的湘江野鯉(Cyprinus carpio L.)系湘江河中的野生鯉魚，其適應性強，但尚未有人對其的各種生物學特征進行過研究。
將紅鯽與湘江野鯉用人工授精方法獲得雜交一代F1，在F1代中選擇4.67％能育、即精液、精子數(shù)量相對較多的個體作父本，將其精子與雌性個體的卵子，經(jīng)人工授精方法，獲得F2代；在F2代中，選擇大頭精子(2N)數(shù)量較多的雄性個體作父本，由于大頭精子的誘導，使F2雌性個體正在進行減數(shù)分裂的卵子不排出第二極體，于是獲得二倍體卵子，然后采用人工授精方法，使二倍體精子與二倍體卵子結(jié)合，獲得異源四倍體魚。
經(jīng)上述方法獲得的四倍體魚，單倍體雌核的倍加是自然倍加，不添加外來的化學和物理因素，重組基因完全來自魚類本身，因此表達自然，而且絕對安全；正因為如此，獲得的四倍體魚，是一個純系的四倍體，沒有嵌合體的現(xiàn)象，經(jīng)各代隨機取材抽查，染色體都是4N＝200，不僅倍性穩(wěn)定，形態(tài)特征、生殖細胞的生長發(fā)育、受精率等都是正常發(fā)育的，所以是一種遺傳性狀穩(wěn)定，能自然繁殖，在魚類人工養(yǎng)殖中，實現(xiàn)由生物技術(shù)方法獲得四倍體魚的種群。
權(quán)利要求
1.一種異源四倍體魚的培育方法，其特征在于以紅色鯽魚為母本，湘江野鯉為父本，用人工授精方法獲得雜交一代F1，選擇4.67％可育的F1代雄性個體的精子，用人工授精的方法，與F1代的卵子結(jié)合，獲得F2代，在F2代的雄性個體中，選擇二倍體的大頭精子，以及經(jīng)二倍體精子誘導雌核倍加的卵子，用人工授精的方法，使二倍體的精子與二倍體的卵子結(jié)合，從而獲得異源四倍體魚。
全文摘要
四倍體魚的培育方法涉及多倍體魚的培育。本發(fā)明以紅色鯽魚為母本,湘江野鯉為父本,經(jīng)人工授精獲得F1代,選擇雄性可育的F1代與F1代自交,獲得F2代,在F2代中選擇具有二倍染色體的大頭精子與經(jīng)大頭精子誘導雌核倍加的卵子結(jié)合,產(chǎn)生異源四倍體魚。用本發(fā)明獲得的四倍體魚遺傳性狀穩(wěn)定且能自然繁殖,是魚類養(yǎng)殖中運用細胞工程和有性雜交相結(jié)合的技術(shù)獲得的特有的種質(zhì)資源。
文檔編號A01K67/027GK1263704SQ9911526
公開日2000年8月23日 申請日期1999年2月15日 優(yōu)先權(quán)日1999年2月15日
發(fā)明者劉筠, 周工健, 劉少軍, 張軒杰, 朱桂華, 楊輝 申請人:湖南師范大學, 湘陰縣東湖漁場