專利名稱:四倍體魚的培育方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及魚類的繁殖,具體涉及多倍體魚的培育。
用鯽魚和鯉魚作親本彼此互交的研究早有報導。日本學者認為鯽鯉雜交一代的雄性是完全不育,蘇聯(lián)學者也持同樣的看法。劉筠等在研究紅鯽與湘江野鯉的雜交育種實驗中,獲得了具有明顯雜種優(yōu)勢的雜交一代(湘鯽),同時,發(fā)現(xiàn)湘鯽雄性不是完全不育,而是部分可育,可育率為4.67%,從而修正了國內(nèi)外普遍認為鯉鯽雜交雄性不育的觀點。運用細胞工程,生產(chǎn)出多倍體魚,然后用于三倍體魚的生產(chǎn),是國內(nèi)外尚未解決的問題。
本發(fā)明旨在通過細胞工程技術(shù),培育出能自然繁殖且遺傳性狀穩(wěn)定的魚類四倍體種群。
實現(xiàn)上述發(fā)明目的的主要技術(shù)方案如下在以紅鯽為母本,湘江野鯉為父本,經(jīng)人工授精獲得雜交一代F1的基礎(chǔ)上,選擇雄性可育的F1精子與雌性F1卵子交配,經(jīng)人工授精制得F2代,在F2代中,選擇具有2N染色體的大頭精子與經(jīng)大頭精子誘導F2雌核倍加為二倍體的卵子,用人工授精方法生產(chǎn)四倍體的F3代。
下面進一步詳述本發(fā)明。
本發(fā)明作母本的紅鯽魚(Carassius auratus L.)屬于典型的多次產(chǎn)卵類型,每年3月下旬至4月下旬,在大約35~45天內(nèi),紅鯽可以連續(xù)產(chǎn)卵2~3次,每次產(chǎn)卵間隔時間為12~15天。作為父本的湘江野鯉(Cyprinus carpio L.)系湘江河中的野生鯉魚,其適應性強,但尚未有人對其的各種生物學特征進行過研究。
將紅鯽與湘江野鯉用人工授精方法獲得雜交一代F1,在F1代中選擇4.67%能育、即精液、精子數(shù)量相對較多的個體作父本,將其精子與雌性個體的卵子,經(jīng)人工授精方法,獲得F2代;在F2代中,選擇大頭精子(2N)數(shù)量較多的雄性個體作父本,由于大頭精子的誘導,使F2雌性個體正在進行減數(shù)分裂的卵子不排出第二極體,于是獲得二倍體卵子,然后采用人工授精方法,使二倍體精子與二倍體卵子結(jié)合,獲得異源四倍體魚。
經(jīng)上述方法獲得的四倍體魚,單倍體雌核的倍加是自然倍加,不添加外來的化學和物理因素,重組基因完全來自魚類本身,因此表達自然,而且絕對安全;正因為如此,獲得的四倍體魚,是一個純系的四倍體,沒有嵌合體的現(xiàn)象,經(jīng)各代隨機取材抽查,染色體都是4N=200,不僅倍性穩(wěn)定,形態(tài)特征、生殖細胞的生長發(fā)育、受精率等都是正常發(fā)育的,所以是一種遺傳性狀穩(wěn)定,能自然繁殖,在魚類人工養(yǎng)殖中,實現(xiàn)由生物技術(shù)方法獲得四倍體魚的種群。
權(quán)利要求
1.一種異源四倍體魚的培育方法,其特征在于以紅色鯽魚為母本,湘江野鯉為父本,用人工授精方法獲得雜交一代F1,選擇4.67%可育的F1代雄性個體的精子,用人工授精的方法,與F1代的卵子結(jié)合,獲得F2代,在F2代的雄性個體中,選擇二倍體的大頭精子,以及經(jīng)二倍體精子誘導雌核倍加的卵子,用人工授精的方法,使二倍體的精子與二倍體的卵子結(jié)合,從而獲得異源四倍體魚。
全文摘要
四倍體魚的培育方法涉及多倍體魚的培育。本發(fā)明以紅色鯽魚為母本,湘江野鯉為父本,經(jīng)人工授精獲得F1代,選擇雄性可育的F1代與F1代自交,獲得F2代,在F2代中選擇具有二倍染色體的大頭精子與經(jīng)大頭精子誘導雌核倍加的卵子結(jié)合,產(chǎn)生異源四倍體魚。用本發(fā)明獲得的四倍體魚遺傳性狀穩(wěn)定且能自然繁殖,是魚類養(yǎng)殖中運用細胞工程和有性雜交相結(jié)合的技術(shù)獲得的特有的種質(zhì)資源。
文檔編號A01K67/027GK1263704SQ9911526
公開日2000年8月23日 申請日期1999年2月15日 優(yōu)先權(quán)日1999年2月15日
發(fā)明者劉筠, 周工健, 劉少軍, 張軒杰, 朱桂華, 楊輝 申請人:湖南師范大學, 湘陰縣東湖漁場