專利名稱：食用菌制備防治植物病毒的農(nóng)藥及工藝的制作方法
食用菌制備防治植物病毒的農(nóng)藥是一種用食用菌發(fā)酵物提取殺生劑，用于防治植物病毒，特別是TMV病毒的防治，其工藝是將食用菌的固體發(fā)酵培養(yǎng)物及長過子實(shí)體的固體培養(yǎng)物經(jīng)溫水浸提濃縮的工藝。
食用菌生物學(xué)基礎(chǔ)一書(楊慶堯編，上?？萍汲霭嫔?983年版)第196～198頁記載的內(nèi)容，說明了食用菌的固體培養(yǎng)物的水浸液對植物病毒有阻抑效果。其工藝是將食用菌的固體培養(yǎng)物在熱水浸泡(120℃20分鐘)，而制得浸提液。而這只是從機(jī)理上做的試驗(yàn)，證明浸泡液能抑制煙草花葉病毒浸染的自然現(xiàn)象，并沒有說明是否能防治植物病毒，其記載的試驗(yàn)工藝不能用于生產(chǎn)，生產(chǎn)出的農(nóng)藥活性成份含量低，大部分的活性成份活化酶都轉(zhuǎn)化損失，而且部分對植物生長的營養(yǎng)物質(zhì)及生物激素也被損失。使用時(shí)需要用濃度較高的浸提液，對植物生長無促進(jìn)作用。所形成的浸提液并不能形成廣泛應(yīng)用的農(nóng)藥。
本發(fā)明的目的在于提供一種能有效防治植物病毒、促進(jìn)植物生長的食用菌生物農(nóng)藥，提供一種有效活性成份損失少的食用菌制備農(nóng)藥的工藝。
本發(fā)明的制備工藝是將已經(jīng)發(fā)酵好的食用菌固體培養(yǎng)物或長過子實(shí)體的廢固體培養(yǎng)物裝入水中浸泡。其特點(diǎn)是放入50～60℃的水中浸泡，浸泡后分離出浸液，再將浸液進(jìn)行真空減壓蒸發(fā)濃縮，取得的濃縮液就是制備出防治植物病毒的農(nóng)藥。水浸泡的溫度比較適合食用菌固體培養(yǎng)物中活性成份的存活，特別是蘑菇RNA及活性酶的提取存活和植物生產(chǎn)營養(yǎng)物的存活，有利于獲取這些有效成份含量較高的提取液。在濃縮過程不是采用常壓加熱蒸發(fā)，而是采用真空減壓蒸發(fā)提取液的水份。由于蒸發(fā)溫度低，更有利于提取液中有效成份的存活。特別是當(dāng)真空減壓蒸發(fā)濃縮溫度控制在55℃以下的真空蒸發(fā)，更有利于蘑菇RNA(也就是葡萄糖、半乳糖、甘露糖、吡喃木糖和十五種氨基酸)及活性酶的存活，也有利于提取液中的營養(yǎng)物的存活。當(dāng)然真空蒸發(fā)濃縮能在50℃以下更低的溫度進(jìn)行更好，但真空蒸發(fā)濃縮溫度越低，真空度越難達(dá)到，并不易控制。所以一般最好是掌握在48～50℃的條件下進(jìn)行真空蒸發(fā)濃縮。在55℃以下溫度真空蒸發(fā)濃縮，所獲得的濃縮液農(nóng)藥有效成份含量較高。同用120℃熱水浸泡，并用高于100℃的常壓蒸發(fā)的濃縮液相比，本發(fā)明的濃縮液農(nóng)藥有效成份及活性酶提高了60%左右。
食用菌固體培養(yǎng)物在溫水浸泡前最好是破碎，而且是破碎的粒度最小最好，以便增大對固體培養(yǎng)物的浸泡面積，增加有效成份及活性酶溶解于水速度，減少浸泡的時(shí)間。固體培養(yǎng)物與浸泡溫水重量比例一般為1∶1至1∶5。浸泡的溫水過少，不易溶解固體培養(yǎng)物的有效成份和活性酶，不能充分浸泡固體培養(yǎng)物。浸泡的溫水過多已對增加溶解有效成份和活性酶作用不大，而浸泡液的水份過量，增加了真空蒸發(fā)濃縮的時(shí)間及耗用的能量。在浸泡過程最好加有攪拌，可隔一段時(shí)間一攪拌，以加速浸泡的溶解，增加浸泡液中有效成份和活性酶。同樣為了使溶于水的有效成份和活性酶盡量隨浸泡液分離出來，浸泡后的分離采用離心機(jī)進(jìn)行離心分離。在真空蒸發(fā)時(shí)不斷地對被濃縮液進(jìn)行加熱。加熱可以采用各種加熱，但不能用高溫?zé)嵩催M(jìn)行加熱，以防止局部溫度過高，破壞被濃縮液中的有效成份和活性酶。
用發(fā)酵好的食用菌固體培養(yǎng)物或長過子實(shí)體的食用菌固體培養(yǎng)物經(jīng)溫水浸泡，分離的浸泡液經(jīng)真空減壓蒸發(fā)濃縮而得到的濃縮液就為本發(fā)明防治植物病毒的農(nóng)藥。濃縮液的農(nóng)藥便于貯存運(yùn)輸。使用時(shí)只要根據(jù)需要稀釋不同的倍數(shù)即可。為了使農(nóng)藥更便于貯存，防止有效成份及活性酶的變質(zhì)，增加使用效果，最好是在濃縮液內(nèi)加有0.5～0.8%(重量)的苯甲酸鈉和2±0.5%(重量)的吐溫80。濃縮液和苯甲酸鈉及吐溫80配成液體防治植物病毒的農(nóng)藥。這種濃藥能確保有效性和促進(jìn)植物生長的作用。
本發(fā)明與已有技術(shù)相比，所采用的原料不但是發(fā)酵好的食用菌固體培養(yǎng)物，而且還可用長過子實(shí)體的廢固體培養(yǎng)物，充分利用了廢料，降低了成本。本發(fā)明的制備工藝及生產(chǎn)出的農(nóng)藥有效地保持了食用菌代謝產(chǎn)物的有效成份和生物活性，增加了有效成份和活性酶的提取率和農(nóng)藥的含量。提高了對植物病毒的防治能力和使用效果。使得可以用于工業(yè)生產(chǎn)，并能生產(chǎn)出可以實(shí)用的農(nóng)藥。本發(fā)明的農(nóng)藥對農(nóng)作物防治病毒的同時(shí)，含有的天然營養(yǎng)物還能對植物生長發(fā)育起促進(jìn)作用，可提高產(chǎn)量15～20%。用本發(fā)明的濃縮液農(nóng)藥稀釋300倍，對番茄、辣椒、黃瓜等植物作TMV的感染抑制率試驗(yàn)，感染抑制率競達(dá)96.7%以上，其中對辣椒的TMV感染抑制率達(dá)100%。
下面結(jié)合實(shí)例進(jìn)一步說明本發(fā)明。
實(shí)例1將食用菌香菇菌種接種于闊葉木屑與麥麩4∶1，含水55%的混合培養(yǎng)物中，并在20～22℃條件下培養(yǎng)發(fā)酵。當(dāng)菌絲長滿并初步形成樹皮狀組織，達(dá)到充分發(fā)酵時(shí)，停止發(fā)酵培養(yǎng)。將發(fā)酵培養(yǎng)好的香菇固體培養(yǎng)物粉碎，按1∶2的重量加入55℃～60℃的溫水浸泡5小時(shí)，其間每隔1小時(shí)進(jìn)行一次攪拌，使培養(yǎng)物中的有效成分充分溶于溫水中。用高速離心機(jī)將浸泡后的液體分離出來，并將分離液沉淀。取上清液放入蒸發(fā)濃縮罐中，對罐內(nèi)進(jìn)行減壓形成真空，并同時(shí)對罐中液體進(jìn)行加熱。將液體保持在55℃以下條件下進(jìn)行真空減壓蒸發(fā)。連續(xù)蒸發(fā)，使其體積蒸發(fā)到20%時(shí)，停止加熱真空減壓蒸發(fā)。這樣蒸發(fā)到20%的濃縮液就可作為防治植物病毒的農(nóng)藥。如果存放時(shí)間超過48小時(shí)，而要長期存放或運(yùn)輸再使用的，可在濃縮液中加入重量0.5%的苯甲酸鈉。為了增加濃縮液的農(nóng)藥對植物的作用時(shí)間，還可在濃縮液中加入2±0.5%的吐溫80，以增加藥液對植物及種子的附著，增加藥液的藥性作用時(shí)間，從而增加藥效。用該藥液稀釋300～500倍對植物噴撒二次，在田間進(jìn)行小區(qū)對比試驗(yàn)和大面積示范，對TMV和CMV植物病毒進(jìn)行防治，其防治效果如下蕃茄為65.3～78.7%;青椒62.4～75.7%;菜豆74.6～85.1%;大白菜62.5～65.8%;花生74.1～80.0%;煙草63.6～86.7%;而同時(shí)促進(jìn)植株生長茁壯，早熟，平均增產(chǎn)10～15%。
實(shí)例2用長過CrO2子實(shí)體蘑菇后的廢固體培養(yǎng)物，經(jīng)破碎后按1∶4比例放入50～55℃的溫水池內(nèi)浸泡。浸泡4個(gè)小時(shí)后，用離心機(jī)將浸液分離出來。分離出的浸液可經(jīng)過濾清除殘?jiān)?。過濾的液體加入到真空蒸發(fā)器內(nèi)，進(jìn)行真空減壓蒸濃縮。加熱溫度保持在48～50℃，在48～50℃溫度下進(jìn)行抽真空蒸發(fā)濃縮。濃縮到原液的15%后就停止加熱真空蒸發(fā)濃縮。在濃縮液里加入0.8%苯鉀酸鈉，組成本發(fā)明的防治植物病毒的農(nóng)藥。這種農(nóng)藥裝入瓶子內(nèi)密封存裝，可在常溫下保存一年內(nèi)有效。用這種農(nóng)藥稀釋300倍對蔬菜生長期噴3～4次。對于春季大棚里生長的蕃茄，本農(nóng)藥噴撒區(qū)無TMV及CMV病毒的病株發(fā)生，而在同等條件下用其他抗毒劑的則發(fā)病株率為7～10%。本農(nóng)藥同時(shí)還能促進(jìn)蕃茄提早成熟。對于露天種植的黃瓜，大田防治率達(dá)76.8%。對于露天種植的蕃茄，大田防治率達(dá)94.1%。對于露天種植的甜椒，大田防治率達(dá)80.9%。對于露天種植的菜豆，大田防治率達(dá)99.5%。對于露天種植的大白菜，大田防治率達(dá)98.1%。在大白菜上還可明顯抑制軟腐病和霜霉病的發(fā)生。對菜豆有明顯的提早開花、結(jié)莢和增產(chǎn)的效果。
權(quán)利要求
1.一種食用菌制備防治植物病毒農(nóng)藥的工藝，是將已經(jīng)發(fā)酵好的食用菌固體培養(yǎng)物或長過子實(shí)體的廢固體培養(yǎng)物放入水中浸泡，其特征在于水的溫度為50℃～60℃，浸泡后分離出浸液，再將浸液進(jìn)行真空減壓蒸發(fā)濃縮。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所說的工藝，其特征在于真空減壓濃縮是在低于或等于55℃下真空蒸發(fā)濃縮。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的工藝，其特征在于真空減壓濃縮是在48～50℃的真空減壓濃縮。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所述的工藝，其特征在于放入水中浸泡過程加有攪拌。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所述的工藝，其特征在于浸泡后分離采用離心機(jī)進(jìn)行分離。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所說的工藝，其特征在于浸液為分離后的沉淀上清浸液。
7.一種食用菌制備防治植物病毒的農(nóng)藥，其特征在于用發(fā)酵好的食用菌固體培養(yǎng)物或長過子實(shí)體的食用菌固體培養(yǎng)物浸液真空減壓蒸發(fā)而得到的濃縮液。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的農(nóng)藥，其特征在于濃縮液配有0.5～0.8%苯甲酸鈉和2±0.5%的吐溫80。
全文摘要
食用菌制備防治植物病毒的農(nóng)藥及工藝是一種將已經(jīng)發(fā)酵好的食用菌固體培養(yǎng)物或長過子實(shí)體的廢固體培養(yǎng)物破碎裝入50～60℃的溫水中浸泡，浸泡后分離液經(jīng)真空減壓蒸發(fā)濃縮的工藝，從而制得生物農(nóng)藥，用于防治TMV、CMV等植物病毒。
文檔編號A01N63/02GK1078094SQ93102828
公開日1993年11月10日 申請日期1993年3月20日 優(yōu)先權(quán)日1993年3月20日
發(fā)明者蘭著碧, 王先彬 申請人:遼寧省出口食用菌研究所, 北京市農(nóng)林科學(xué)院植物保護(hù)環(huán)境保護(hù)研究所