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一種茶樹花粉的采集貯藏方法與流程

文檔序號:12138925閱讀:942來源:國知局

本發(fā)明涉及茶樹花粉的采集和貯藏,具體說是一種茶樹花粉的采集貯藏方法。



背景技術(shù):

茶樹雜交育種已成為資源創(chuàng)新和品種改良的主要途徑之一。茶樹雜交育種研究中經(jīng)常會遇到父母本花期不遇或外地優(yōu)異資源花粉引進(jìn)利用等問題,這就必須采集相關(guān)品種花粉后進(jìn)行保存和貯藏,延長花粉壽命,以保持花粉生活力。目前,影響花粉壽命的因素主要是遺傳因子(品種)、溫度與相對濕度,而不同品種的茶樹花粉生活力與貯藏溫度、濕度的關(guān)系卻鮮有報導(dǎo)。本發(fā)明探求一種新的茶樹花粉貯藏有效而簡便的方法,為優(yōu)異資源創(chuàng)新利用、雜交親本的選配、制定有效育種方案提供理論依據(jù)。



技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:

針對上述技術(shù)問題,本發(fā)明提供一種可延長花粉壽命的茶樹花粉的采集貯藏方法。

本發(fā)明解決上述技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案為:一種茶樹花粉的采集貯藏方法,其包括以下步驟:

(1)采集茶樹上松動的、乳白色的含苞欲放的花蕾,將其存放在干燥器內(nèi)干燥;

(2)然后取出花蕾,敲取花粉;

(3)再將花粉放入密閉容器內(nèi)密封;

(4)最后貯藏密封后的花粉。

作為優(yōu)選,將采集的所述花蕾用羊皮紙袋裝好,再存放在裝有變色硅膠的所述干燥器內(nèi)。

作為優(yōu)選,干燥溫度為室溫,時間為20-24h。

作為優(yōu)選,用鑷子夾住花蕾的花柄,再敲打振動使花粉散落在培養(yǎng)皿中,然后用羊皮紙袋包好花粉。

作為優(yōu)選,所述密閉容器采用指形管,用羊皮紙袋包好的花粉放入該指形管內(nèi)密封。

作為優(yōu)選,先在所述指形管底部放入1/3管變色硅膠,并用少量脫脂棉將其固定;然后將用羊皮紙袋包好的花粉放入指形管內(nèi),最后放入脫脂棉固定花粉。

作為優(yōu)選,用保鮮膜密封所述指形管。

作為優(yōu)選,貯藏溫度為-20℃至室溫。

從以上技術(shù)方案可知,本發(fā)明可在父本花期早于母本以及從外地引進(jìn)優(yōu)異品種花粉時,對采集的新鮮花粉進(jìn)行貯藏和保存;該方法簡便有效,能延長花粉壽命,保持花粉生活力。

具體實(shí)施方式

下面將詳細(xì)說明本發(fā)明,在此本發(fā)明的示意性實(shí)施例以及說明用來解釋本發(fā)明,但并不作為對本發(fā)明的限定。

一種茶樹花粉的采集貯藏方法,其包括以下步驟:

首先,采集茶樹上松動的、乳白色的含苞欲放的花蕾,將其存放在干燥器內(nèi)干燥;一般在秋季晴朗天,盛花期采集茶樹中上部發(fā)育良好的松動、乳白色的含苞欲放的花蕾,用羊皮紙袋裝好置于放有變色硅膠的干燥器中,在室溫下干燥20-24h。本發(fā)明中,羊皮紙袋透氣性好,可防止霉變;變色硅膠有干燥效果;將花蕾存放于干燥器20-24小時后,有利于花粉的干燥后熟,便于取粉。

然后取出花蕾,敲取花粉;具體是用鑷子夾住花柄,輕輕敲打振動,使花粉散落在培養(yǎng)皿中,然后用羊皮紙袋包好花粉;用該方法取粉,花粉易脫落,取粉量多,花粉生活力強(qiáng),發(fā)芽率高。

再將花粉放入密閉容器內(nèi)密封;所述密閉容器采用指形管,用羊皮紙袋包好的花粉放入該指形管內(nèi)密封;具體來說,先在所述指形管底部放入1/3管變色硅膠,并用少量脫脂棉將其固定;然后將用羊皮紙袋包好的花粉放入指形管內(nèi),最后放入脫脂棉固定花粉,并用保鮮膜密封所述指形管;指形管方便易貯藏,放入硅膠后放入脫脂棉是用于固定管中的硅膠,最后放入脫脂棉和用保鮮膜封口都是為了更好的密閉,防吸水。

最后貯藏密封后的花粉,貯藏溫度為-20℃至室溫。由于花粉生活力的喪失是一個連續(xù)的過程,并沒有一個明顯的界限標(biāo)識,也就是說,在研究花粉生活力的時候,需要確定一個闕值來表示試驗(yàn)結(jié)果。一般以花粉存活時間為衡量標(biāo)準(zhǔn),即將花粉萌發(fā)率大于50%時定義為花粉存活時間,而通過本發(fā)明的方法可使花粉在室溫、4℃、-20℃條件下分別保存7天、20-30天、30-40天,花粉萌發(fā)率最高仍可達(dá)60%以上,具有較強(qiáng)的生活力。

本發(fā)明的參試品種為湖南省茶研所實(shí)驗(yàn)茶場種質(zhì)資源圃中的保靖黃金茶1號、藪北種、福鼎大白茶、佛香3號四個品種。保靖黃金茶1號是湖南省省級良種,灌木型,中葉類,特早生種;福鼎大白茶屬國家級良種,小喬木型,中葉類,早生種;藪北種是日本選育的茶樹良種,灌木型,中小葉類,中生種;佛香3號是云南省省級良種,小喬木型,大葉類,早生種。

花粉生活力的測定采用離體萌發(fā)測定法,即根據(jù)花粉離體后不同時間及不同貯藏條件的萌發(fā)率判斷生活力。培養(yǎng)基配置:1%瓊脂+300mg/LCa(NO3)2+200mg/L MgSO4+100mg/L KNO3+10%蔗糖+100mg/L H3BO3。操作方法:用解剖針將花粉均勻撒播在滴有該培養(yǎng)基的載玻片上,然后將載玻片置于鋪有濕潤濾紙的培養(yǎng)皿中,于25℃的恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)6h后觀察花粉萌發(fā)情況。每個處理3次重復(fù),每個載玻片上取3個視野,以花粉管長度大于花粉直徑時記為萌發(fā),記錄每個視野的發(fā)芽率(萌發(fā)的花粉數(shù)/總的花粉數(shù)×100%),取其平均值作為該處理的花粉萌發(fā)率。數(shù)據(jù)采用SPSS20軟件進(jìn)行處理,計量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,對不同時間、不同茶樹品種花粉萌發(fā)率的比較采用重復(fù)測量資料的方差分析。

實(shí)施例1

在10月中旬晴朗天,分別采摘保靖黃金茶1號、藪北種、福鼎大白茶、佛香3號四種含苞欲放的花蕾,分別用羊皮紙袋裝好置于放有變色硅膠的干燥器中,在室溫下干燥20h;再用鑷子夾住花柄,輕輕敲打振動,使花粉分別散落在培養(yǎng)皿中,然后分別用羊皮紙袋包好花粉;接著在四個指形管底部分別放入1/3管變色硅膠,并用少量脫脂棉將其固定;然后將用羊皮紙袋包好的四種花粉分別放入指形管內(nèi),接著放入脫脂棉固定花粉,并用保鮮膜密封;最后室溫貯藏密封后的四種花粉,測定結(jié)果如表1:

表1 室溫貯藏條件下不同茶樹品種的花粉萌發(fā)率(%)

實(shí)施例2

在10月中旬晴朗天,分別采摘保靖黃金茶1號、藪北種、福鼎大白茶、佛香3號四種含苞欲放的花蕾,分別用羊皮紙袋裝好置于放有變色硅膠的干燥器中,在室溫下干燥22h;再用鑷子夾住花柄,輕輕敲打振動,使花粉分別散落在培養(yǎng)皿中,然后分別用羊皮紙袋包好花粉;接著在四個指形管底部分別放入1/3管變色硅膠,并用少量脫脂棉將其固定;然后將用羊皮紙袋包好的四種花粉分別放入指形管內(nèi),接著放入脫脂棉固定花粉,并用保鮮膜密封;最后4℃貯藏密封后的四種花粉,測定結(jié)果如表2:

表2 4℃貯藏條件下不同茶樹品種的花粉萌發(fā)率(%)

實(shí)施例3

在10月中旬晴朗天,分別采摘保靖黃金茶1號、藪北種、福鼎大白茶、佛香3號四種含苞欲放的花蕾,分別用羊皮紙袋裝好置于放有變色硅膠的干燥器中,在室溫下干燥24h;再用鑷子夾住花柄,輕輕敲打振動,使花粉分別散落在培養(yǎng)皿中,然后分別用羊皮紙袋包好花粉;接著在四個指形管底部分別放入1/3管變色硅膠,并用少量脫脂棉將其固定;然后將用羊皮紙袋包好的四種花粉分別放入指形管內(nèi),接著放入脫脂棉固定花粉,并用保鮮膜密封;最后-20℃貯藏密封后的四種花粉,測定結(jié)果如表3:

表3 -20℃貯藏條件下不同茶樹品種的花粉萌發(fā)率(%)

由上可知,(1)參試品種無論是大葉種還是中小葉種,新鮮花粉生活力都很強(qiáng),萌發(fā)率在90%以上,說明本發(fā)明采用的采摘“含苞欲放”的花蕾,在干燥器中存放20-24小時后取粉的方法是一種高效、可靠的方法。(2)采集的新鮮花粉,在當(dāng)天或第二天使用為宜,如需短時間保存,必須將采集備用的花粉用燒杯或培養(yǎng)皿盛放在干燥器內(nèi),在室溫條件下保存不超過7天。這是茶樹雜交育種中必要的、常用的、簡便有效的花粉貯藏方法。(3)雜交授粉花期不遇時,將開花較早的父本花粉采集后,用羊皮紙包好,放入加有干燥劑的密封容器內(nèi),采用本發(fā)明的方法貯藏,并根據(jù)貯藏時間要求,置于室溫(保存7天)、4℃冷藏(保存20-30天)或-20℃冷凍(保存30-40天)條件下保存,花粉萌發(fā)率最高仍可達(dá)60%以上。(4)從外地引進(jìn)優(yōu)異品種資源花粉時,最佳貯運(yùn)方法是采集后用羊皮紙包好,放入加有干燥劑(變色硅膠等)的密封容器(如指形試管)內(nèi),采用本發(fā)明的方法貯藏,并根據(jù)條件采用常溫(保存7天)或4℃冷藏(保存20-30天),也可采用-20℃冷凍(保存30-40天),花粉萌發(fā)率最高仍可達(dá)60%以上,具有較強(qiáng)的生活力。由此可見,本發(fā)明解決了茶樹雜交育種中常出現(xiàn)父母本花期不遇,遠(yuǎn)距離雜交中優(yōu)異資源花粉采集等技術(shù)問題,同時對種質(zhì)資源保存與利用也有重要意義。

以上對本發(fā)明實(shí)施例所提供的技術(shù)方案進(jìn)行了詳細(xì)介紹,本文中應(yīng)用了具體個例對本發(fā)明實(shí)施例的原理以及實(shí)施方式進(jìn)行了闡述,以上實(shí)施例的說明只適用于幫助理解本發(fā)明實(shí)施例的原理;同時,對于本領(lǐng)域的一般技術(shù)人員,依據(jù)本發(fā)明實(shí)施例,在具體實(shí)施方式以及應(yīng)用范圍上均會有改變之處,綜上所述,本說明書內(nèi)容不應(yīng)理解為對本發(fā)明的限制。

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