一種促進水稻秧苗根系生長的微生物肥料及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種促進水稻秧苗根系生長的微生物肥料及其制備方法。本發(fā)明首先通過肺炎克雷伯氏菌、地衣芽孢桿菌、解淀粉芽孢桿菌植物亞種、鶴羽田戴爾福特菌和多粘類芽胞桿菌菌種分別發(fā)酵制得菌液，然后將其混合制得混合發(fā)酵菌液；最后在有機物料中加入混合肥料、混合發(fā)酵菌液和無菌水，發(fā)酵，發(fā)酵結(jié)束后，將發(fā)酵后肥料與腐殖酸、草炭混勻，經(jīng)對輥擠壓式造粒機制備微生物肥料。本發(fā)明的微生物肥料能顯著促進水稻秧苗根系的生長發(fā)育，增強抵抗不良環(huán)境對水稻根系生長的影響，讓水稻秧苗達到壯根、壯秧的目的。
【專利說明】一種促進水稻秧苗根系生長的微生物肥料及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及農(nóng)業(yè)肥料領(lǐng)域，尤其涉及的是一種促進水稻秧苗根系生長的微生物肥料及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]水稻生產(chǎn)屬于勞動密集型產(chǎn)業(yè)，隨著中國勞動力成本不斷增加，水稻機械化生產(chǎn)，特別是機械化插秧，將是以后產(chǎn)業(yè)發(fā)展的一個主要趨勢。為了適合機械插秧，水稻在育秧時要求根系要多且成毯狀，這樣才有利于運輸和插秧。然而在水稻育秧過程中有時候受到基質(zhì)、溫度等因素影響時，根系生長很差，給機械插秧帶來一定問題。
[0003]水稻在育 秧時特別是早稻容易出現(xiàn)秧苗抗寒力弱，秧苗纖弱，下部一到三葉葉尖常呈焦枯狀，病害較多，爛秧爛種等，因此需要一種水稻育秧的專用肥料，既能促進秧苗生長，又能減輕病害的發(fā)生，又有利于機械化插秧的開展。目前，盡管生產(chǎn)上關(guān)于微生物有機肥料的產(chǎn)品很多，但針對于水稻育秧的的專用微生物肥料較少，特別是在促根、壯根方面。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供了一種促進水稻秧苗根系生長的微生物肥料及其制備方法。
[0005]本發(fā)明的技術(shù)方案如下:
[0006]一種促進水稻秧苗根系生長的微生物肥料的制備方法，其步驟如下:
[0007](I)肺炎克雷伯氏菌的發(fā)酵
[0008]將在LB固體培養(yǎng)基上活化的肺炎克雷伯氏菌菌株單菌落在超凈工作臺上轉(zhuǎn)接到裝有IOmL牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基的容積為50mL的三角瓶中，于30°C、180rpm條件下振蕩培養(yǎng)20h ;然后將其接種于裝有400mL牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的容積為1000mL的三角瓶中，180rpm、30°C條件下振蕩培養(yǎng)20h，之后將其接種于裝有20L發(fā)酵培養(yǎng)基的機械攪拌式發(fā)酵罐中，發(fā)酵條件設(shè)定為:溶氧100%，攪拌速度350rpm，發(fā)酵溫度30°C，發(fā)酵時間48h，pH6.8-7.2 ;發(fā)酵到達終點后，取樣檢測活芽孢濃度，確?；钛挎邼舛取?.0X108cfu/mL ；
[0009](2)地衣芽孢桿菌、解淀粉芽孢桿菌植物亞種、鶴羽田戴爾福特菌和多粘類芽胞桿菌的發(fā)酵
[0010]將在LB固體培養(yǎng)基上分別活化的地衣芽孢桿菌菌株單菌落，解淀粉芽孢桿菌植物亞種、鶴羽田戴爾福特菌或多粘類芽胞桿菌，在超凈工作臺上轉(zhuǎn)接到裝有IOmLLB液體培養(yǎng)基的容積為50mL的三角瓶中，于30°C、180rpm條件下振蕩培養(yǎng)20h ;然后將其接種于裝有400mL牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的容積為1000mL的三角瓶中，180rpm、30°C條件下振蕩培養(yǎng)20h，之后將其接種于裝有20L發(fā)酵培養(yǎng)基的機械攪拌式發(fā)酵罐中，發(fā)酵條件設(shè)定為:溶氧100%，攪拌速度350rpm，發(fā)酵溫度30°C，發(fā)酵時間48h，pH6.8-7.2 ;發(fā)酵到達終點后，取樣檢測活芽孢濃度，確?；钛挎邼舛?gt; 1.0X108cfu/mL ；
[0011](3)混合發(fā)酵菌液的制備[0012]將⑴和⑵中發(fā)酵得到的肺炎克雷伯氏菌、地衣芽孢桿菌、解淀粉芽孢桿菌植物亞種、鶴羽田戴爾福特菌、多粘類芽胞桿菌按照體積比1.5:1:1:1:0.5混合，混合均勻，制得混合發(fā)酵菌液；
[0013](4)微生物肥料的制備
[0014]將菜籽餅、大豆餅按照重量1:1混勻作為有機物料，添加氮磷鉀肥按照純氮(尿素):純磷(過磷酸鈣):純鉀(硫酸鉀)=3:1:1 (重量比)混勻作為混合肥料，將有機物料和混合肥料混合，混勻后添加混合發(fā)酵菌液，同時添加無菌水，在發(fā)酵罐中發(fā)酵I周；發(fā)酵結(jié)束后，將發(fā)酵后肥料與腐殖酸、草炭混勻，經(jīng)對輥擠壓式造粒機制備微生物肥料，并檢測微生物肥料的活芽孢、有機質(zhì)和水分含量，使活芽孢含量> 1.0X108cfU/g，有機質(zhì)含量^ 60%，水分含量控制在8-10%之間，檢驗合格后包裝。
[0015]所述的發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為:大豆粉5g/L，玉米粉5g/L，酵母提取物5g/L，紅糖50g/L,碳酸鈣 lg/L, MnS045mg/L, pH7.0-7.2,用無菌蒸懼水配制。
[0016]所述的制備方法，步驟(4)中，每kg有機物料加12_15g混合肥料；每1^有機肥料加Iml混合發(fā)酵菌液；每kg有機物料添加200ml的無菌水。
[0017]所述的制備方法，步驟⑷中，發(fā)酵后肥料與腐殖酸、草炭的重量比為10:1:2。
[0018]所述的制備方法制得的促進水稻秧苗根系生長的微生物肥料。 [0019]本發(fā)明的微生物肥料能顯著促進水稻秧苗根系的生長發(fā)育，增強抵抗不良環(huán)境對水稻根系生長的影響， 讓水稻秧苗達到壯根、壯秧的目的。
【具體實施方式】
[0020]以下結(jié)合具體實施例，對本發(fā)明進行詳細說明。
[0021]實施例中用到的微生物菌種購自中國工業(yè)微生物菌種保藏中心和中國農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏中心。
[0022]實施例1
[0023]1、微生物菌種發(fā)酵
[0024](I)肺炎克雷伯氏菌的發(fā)酵
[0025]將在LB固體培養(yǎng)基上活化的肺炎克雷伯氏菌菌株單菌落在超凈工作臺上轉(zhuǎn)接到裝有IOmL牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基的容積為50mL的三角瓶中，于30°C、180rpm條件下振蕩培養(yǎng)20h。然后將其接種于裝有400mL牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的容積為1000mL的三角瓶中，180rpm、30°C條件下振蕩培養(yǎng)20h，之后將其接種于裝有20L發(fā)酵培養(yǎng)基的機械攪拌式發(fā)酵罐中，發(fā)酵條件設(shè)定為:溶氧100%，攪拌速度350rpm，發(fā)酵溫度30°C，發(fā)酵時間48h，pH6.8-7.2。其中所述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為:大豆粉5g/L，玉米粉5g/L，酵母提取物5g/L，紅糖50g/L，碳酸鈣lg/L，MnS045mg/L，pH7.0-7.2，用無菌蒸餾水配制。發(fā)酵到達終點后，取樣檢測活芽孢濃度，確?；钛挎邼舛?gt; 1.0X 108cfu/mL。
[0026](2)地衣芽孢桿菌、解淀粉芽孢桿菌植物亞種、鶴羽田戴爾福特菌和多粘類芽胞桿菌的發(fā)酵
[0027]將在LB固體培養(yǎng)基上分別活化的地衣芽孢桿菌菌株單菌落，解淀粉芽孢桿菌植物亞種、鶴羽田戴爾福特菌或多粘類芽胞桿菌，在超凈工作臺上轉(zhuǎn)接到裝有IOmLLB液體培養(yǎng)基的容積為50mL的三角瓶中，于30°C、180rpm條件下振蕩培養(yǎng)20h。然后將其接種于裝有400mL牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的容積為1000mL的三角瓶中，180rpm、30°C條件下振蕩培養(yǎng)20h，之后將其接種于裝有20L發(fā)酵培養(yǎng)基(同I中發(fā)酵培養(yǎng)基)的機械攪拌式發(fā)酵罐中，發(fā)酵條件設(shè)定為:溶氧100%，攪拌速度350rpm，發(fā)酵溫度30°C，發(fā)酵時間48h，pH6.8-7.2。發(fā)酵到達終點后，取樣檢測活芽孢濃度，確保活芽孢濃度> 1.0X108cfu/mL。
[0028]將所述發(fā)酵得到的肺炎克雷伯氏菌、地衣芽孢桿菌、解淀粉芽孢桿菌植物亞種、鶴羽田戴爾福特菌、多粘類芽胞桿菌按照體積比1.5:1:1:1:0.5混合，混合均勻，制得混合發(fā)酵菌液。
[0029]2、微生物肥料的制備
[0030]將菜籽餅、大豆餅按照重量1:1混勻作為有機物料，添加氮磷鉀肥按照純氮(尿素):純磷(過磷酸鈣):純鉀(硫酸鉀)=3:1:1 (重量比)混勻作為混合肥料，每kg有機物料加Hg混合肥料，混勻后添加混合發(fā)酵菌液，每kg有機肥料加Iml混合發(fā)酵菌液，同時每kg有機物料添加200ml的無菌水，在發(fā)酵罐中發(fā)酵I周。發(fā)酵結(jié)束后，將發(fā)酵后肥料與腐殖酸、草炭按照重量比10:1:2混勻，經(jīng)對輥擠壓式造粒機制備微生物肥料，并檢測微生物肥料的活芽孢、有機質(zhì)和水分含量，使活芽孢含量> 1.0X 108cfu/g，有機質(zhì)含量> 60%,水分含量控制在8-10%之間，檢驗合格后包裝。
[0031]實施例2
[0032]在中國水稻研究所浙江省富陽基地溫室進行水稻對比試驗，試驗設(shè)3個處理，CK:化肥對照，即為微生物肥料中的混合肥料；A:施用有機物料一菜籽餅、大豆餅按照重量比I: I混勻的混合物；B:施用實施例1制備的微生物肥料。微生物肥料用量:水稻育秧時按普通秧盤(60X25)每盤添加500g，常規(guī)管理。20天之后觀察水稻秧苗生長情況，確認促生菌株是否有促進水稻根系生長的效果。經(jīng)觀察發(fā)現(xiàn)，隨著水稻秧苗生長時間的延長，施用實施例I制備的微生物肥料處理(B)，其長勢遠好于施用化肥(CK)和有機物料(A)的水稻秧苗(表 I)。
[0033]表1施用實施例1制備的微生物肥料對水稻根系及地上部生長的影響
[0034]
【權(quán)利要求】
1.一種促進水稻秧苗根系生長的微生物肥料的制備方法，其特征是，其步驟如下: (1)肺炎克雷伯氏菌的發(fā)酵 將在LB固體培養(yǎng)基上活化的肺炎克雷伯氏菌菌株單菌落在超凈工作臺上轉(zhuǎn)接到裝有IOmL牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基的容積為50mL的三角瓶中，于30°C、180rpm條件下振蕩培養(yǎng)20h ;然后將其接種于裝有400mL牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的容積為1000mL的三角瓶中，180rpm、30°C條件下振蕩培養(yǎng)20h，之后將其接種于裝有20L發(fā)酵培養(yǎng)基的機械攪拌式發(fā)酵罐中，發(fā)酵條件設(shè)定為:溶氧100%，攪拌速度350rpm，發(fā)酵溫度30°C，發(fā)酵時間48h，pH6.8-7.2 ;發(fā)酵到達終點后，取樣檢測活芽孢濃度，確保活芽孢濃度> 1.0X108cfu/mL ； (2)地衣芽孢桿菌、解淀粉芽孢桿菌植物亞種、鶴羽田戴爾福特菌和多粘類芽胞桿菌的發(fā)酵 將在LB固體培養(yǎng)基上分別活化的地衣芽孢桿菌菌株單菌落，解淀粉芽孢桿菌植物亞種、鶴羽田戴爾福特菌或多粘類芽胞桿菌，在超凈工作臺上轉(zhuǎn)接到裝有IOmLLB液體培養(yǎng)基的容積為50mL的三角瓶中，于30°C、180rpm條件下振蕩培養(yǎng)20h ;然后將其接種于裝有400mL牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的容積為1000mL的三角瓶中，180rpm、30°C條件下振蕩培養(yǎng)20h，之后將其接種于裝有20L發(fā)酵培養(yǎng)基的機械攪拌式發(fā)酵罐中，發(fā)酵條件設(shè)定為:溶氧100%，攪拌速度350rpm，發(fā)酵溫度30°C，發(fā)酵時間48h，pH6.8-7.2 ;發(fā)酵到達終點后，取樣檢測活芽孢濃度，確?；钛挎邼舛取?1.0X108cfu/mL ； (3)混合發(fā)酵菌液的制備 將(I)和(2)中發(fā)酵得到的肺炎克雷伯氏菌、地衣芽孢桿菌、解淀粉芽孢桿菌植物亞種、鶴羽田戴爾福特菌、多粘類芽胞桿菌按照體積比1.5:1:1:1:0.5混合，混合均勻，制得混合發(fā)酵菌液； (4)微生物肥料的制備 將菜籽餅、大豆餅按照重量1:1混勻作為有機物料，添加氮磷鉀肥按照純氮:純磷:純鉀的重量比為3:1:1混勻作為混合肥料，將有機物料和混合肥料混合，混勻后添加混合發(fā)酵菌液，同時添加無菌水，在發(fā)酵罐中發(fā)酵I周；發(fā)酵結(jié)束后，將發(fā)酵后肥料與腐殖酸、草炭混勻，經(jīng)對輥擠壓式造粒機制備微生物肥料，并檢測微生物肥料的活芽孢、有機質(zhì)和水分含量，使活芽孢含量> 1.0X 108cfu/g,有機質(zhì)含量> 60%,水分含量控制在8-10%之間，檢驗合格后包裝。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征是，所述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為:大豆粉5g/L，玉米粉5g/L，酵母提取物5g/L，紅糖50g/L，碳酸鈣lg/L，MnS045mg/L，pH7.0-7.2，用無菌蒸餾水配制。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征是，步驟⑷中，每kg有機物料加12-15g混合肥料；每kg有機肥料加Iml混合發(fā)酵菌液；每kg有機物料添加200ml的無菌水。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征是，步驟(4)中，發(fā)酵后肥料與腐殖酸、草炭的重量比為10:1:2。
5.根據(jù)權(quán)利要求1~4所述的制備方法制得的促進水稻秧苗根系生長的微生物肥料。
【文檔編號】C05G1/00GK103980026SQ201410214678
【公開日】2014年8月13日 申請日期:2014年5月19日 優(yōu)先權(quán)日:2014年5月19日
【發(fā)明者】張義凱, 朱德峰 申請人:中國水稻研究所