小型海洋動物塑化標本制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種小型海洋生物塑化標本的制作方法，利用此方法制作標本時，使用的儀器設(shè)備簡單，不需要真空干燥和加壓滲透處理，縮短了塑化時間，使制備過程更加簡單易行，制作過程也不使用對人體有害的試劑。利用上述塑化技術(shù)完成的菲律賓蛤仔、蝦夷扇貝、櫛孔扇貝、紅螺、寄居蟹、巴蛸、烏賊、海鯰魚等小型海洋動物塑化標本，具有保存時間長，可以直接接觸，形態(tài)真實等優(yōu)點。標本可廣泛用于教學(xué)工作、科學(xué)研究和收藏觀賞的領(lǐng)域。
【專利說明】小型海洋動物塑化標本制作方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種標本制作技術(shù)，更具體地說，涉及一種小型海洋動物塑化標本制作方法。

【背景技術(shù)】
[0002]目前制備動物塑化標本的方法主要有聚乙二醇技術(shù)和硅橡膠浸潰技術(shù)。
[0003]利用聚乙二醇制備塑化標本的方法即通過采用高分子水溶性塑料一聚乙二醇替換標本中含有的水分，制成塑化標本。聚乙二醇是一種溫和、低毒無刺激性的高分子化合物，能完全溶于水，具有較好的穩(wěn)定性。使用該塑化方法制作的標本，具有以下優(yōu)點:(1)塑化標本的顏色比浸泡標本略有加深，皺縮不明顯，易獲得良好的姿態(tài)；(2)用不同分子量的聚乙二醇逐級浸泡具有防腐固定的作用，所制標本無需防腐劑處理；(3)制成標本不易霉變和蟲蛀、無鼠咬且無味。該技術(shù)存在的問題有:(1)實驗操作復(fù)雜，處理時間較長；(2)實驗設(shè)備要求較高，；(3)實驗條件不易控制，受多因素限制。
[0004]技術(shù)出處:
1.唐安科。一種簡易塑化動物標本的制作方法[J]。生物學(xué)通報，2006，41 (9):56-57。
[0005]2.鐘思群，曾劍波，陳麗芬等。動物標本塑化保存研究[J]。廣東藥學(xué)院學(xué)報，1999，15(4):333-334。
[0006]3.董代輝，唐安科等。聚乙烯吡咯烷酮制作魚類透明骨骼標本[J]。生物學(xué)通報，2010,45(1):45o
[0007]利用硅橡膠浸潰技術(shù)制備塑化標本的基本原理是選用液態(tài)高分子多聚化合物單體作為塑化劑，替代組織細胞內(nèi)的水分，進行聚合固化，達到組織塑化的目的?；静襟E可分為固定、脫水、真空浸潰和硬化處理四步。應(yīng)用硅橡膠塑化技術(shù)制作的標本有如下優(yōu)點:
(I)標本無明顯的刺激氣味且對人體的危害較小；(2)標本易于保存及運輸；(3)標本經(jīng)久耐用，不易損壞；(4)標本可長期保存。存在的問題有:(1)設(shè)備要求高；(2)試劑成本較高，含有揮發(fā)性有害成分，對長期從事標本制作的人員健康不利；(3)實驗操作過程復(fù)雜，處理時間較長。
[0008] 技術(shù)出處:
1.魯金波，郭煒，杜立銀，等。羊心臟塑化標本的制作技術(shù)[J]。內(nèi)蒙古民族大學(xué)學(xué)報，2009,24(1):70-71。
[0009]2.張冬。豬心塑化標本的制作[J]。中國醫(yī)藥導(dǎo)報，2010，7(25):118。
[0010]3.邵旭建，張國杰，劉志才等。硅橡膠塑化標本制作技術(shù)介紹[J]。青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2005，41 (I):78-79。
[0011]4.魯金波，高志剛。狗心臟塑化標本的制作技術(shù)[J]。中國畜牧獸醫(yī)文摘，2012，28(4):200。
[0012]5.劉起穎，程明亮，馮培勛等。生物塑化標本技術(shù)在病理實驗教學(xué)中應(yīng)用[J]。臨床與實驗病理學(xué)雜志，2013，29 (5):571-572。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0013]為了簡化小型海洋動物塑化標本制作流程，使制作過程中所使用的設(shè)備更加簡單，降低制作難度，本發(fā)明提供一種小型海洋動物塑化標本制作方法，根據(jù)動物的不同，制作的方法分為三種:
1、瓣鰓綱海洋動物標本制作方法:
(1)選取活體或新鮮的瓣鰓綱海洋動物，活體采用冷凍法處死；
(2)使標本的貝殼保持張開狀態(tài)，浸入含1%酒石酸的水溶液中浸泡3小時，然后將其放入95%~100%的乙醇中浸泡5min ；
(3)將標本置于45%乙醇中浸泡40小時,然后置于80%乙醇溶液中浸泡15小時,完成脫水、脫脂過程；
(4)將處理后的標本放入塑化用試劑B中塑化15min，取出后使用脫脂棉將表面多余塑化用試劑B除去，置于陰暗干燥處自然干燥；
(5)再將標本放入塑化用試劑A中塑化15min；
(6)用無水乙醇和1%麝香草酚擦拭標本表面，并除去表面多余塑化用試劑后，將其放入15% PVP水溶液中浸泡5min，
(7)取出后在光照充足處放置一天，再于陰暗干燥處自然晾干；
(8)將標本浸入30%聚乙烯吡咯烷酮K-30中數(shù)分鐘，直至標本濕潤，取出干燥，從步驟
(4)開始，重復(fù)三次。
[0014] 2、軟體綱海洋動物標本制作方法:
(1)選取活體或新鮮的軟體綱海洋動物，長度不超過55厘米，寬度和高度不超過10厘米，活體動物采用冷凍法處死；
(2)將標本放入95%~100%的乙醇中浸泡5min；
(3)將處理后的標本放入塑化用試劑B中塑化15min，取出后使用脫脂棉將表面多余塑化用試劑B除去，置于陰暗干燥處自然干燥；
(4)再將標本放入塑化用試劑A中塑化15min；
(5)用無水乙醇和1%麝香草酚擦拭標本表面，并除去表面多余塑化用試劑后，將其放入30% PVP水溶液中浸泡5min ；
(6)取出標本在光照充足處放置一天，再于陰暗干燥處自然晾干；
(7)將標本浸入30%聚乙烯吡咯烷酮K-30中數(shù)分鐘，直至標本濕潤，取出干燥，從步驟
(3)開始，重復(fù)三次；
(8)將標本置于45%乙醇和1%磨香草酹溶液中浸泡36小時,然后放入80%乙醇和1%麝香草酚溶液中處理18小時，之后將其放入35°C的40%分子量400的聚乙二醇溶液中浸泡5小時,置于干燥陰涼處自然晾干；
(9)而后放入15%聚乙烯吡咯烷酮K-30水溶液中浸泡5小時，再將其放入40%分子量400的聚乙二醇溶液中浸泡I小時，于光照充足處放置一天，再放入陰暗干燥處自然晾干。
[0015]3、海洋魚類標本制作方法:
(I)選取活體或新鮮的海洋魚類，長度不超過55厘米，高度不超過25厘米，寬度不超過10厘米，活體采用冷凍法處死；(2)將標本放入95%~100%的乙醇中浸泡5min；
(3)將標本置于45%乙醇中浸泡40小時,然后置于80%乙醇溶液中浸泡15小時,完成脫水、脫脂過程；
(4)將處理后的標本放入塑化用試劑B中塑化15min，取出后使用脫脂棉將表面多余塑化用試劑B除去，置于陰暗干燥處自然干燥；
(5)從標本口腔和腹部向體內(nèi)注入塑化劑用試劑A，再將標本放入塑化用試劑A中塑化15min ；
(6)用無水乙醇和1%麝香草酚擦拭標本表面，并除去表面多余塑化用試劑后，將其放入30% PVP水溶液中浸泡5min ；
(7)取出在光照充足處放置一天，再于陰暗干燥處自然晾干；
(8)浸入30%聚乙烯吡咯烷酮K-30數(shù)分鐘，直至標本濕潤，再取出干燥，從步驟(4)開始，重復(fù)三次，每次操作需將魚類脫水干癟的眼部浸滿PVP溶液，以便保持其形態(tài)。
[0016]其中，塑化用試劑A配方為31g分子量10000的聚乙二醇，400mL分子量600的聚乙二醇和10mL水，將上述材料混合，常溫常壓下，加熱至完全溶解即可。此溶液45°C左右完全融化，38°C左右對標本可進行常壓塑化；
塑化用試劑B配方為12g分子量10000的聚乙二醇，178g分子量1000的聚乙二醇和1mL水，將上述材料混合，常溫常壓下，加熱至完全溶解即可。此溶液45°C左右完全融化，38 °C左右對標本可進行常壓塑化。
[0017]本發(fā)明的有益效果是:
(I)研制了不同目的適宜的塑化用試劑配比，此塑化用試劑具有高效滲透和重復(fù)利用等優(yōu)點，并且在低溫下就可以對標本進行塑化；聚乙二醇具有使蛋白質(zhì)變性并穩(wěn)定蛋白質(zhì)的作用，防止標本腐敗并可保持形態(tài)，聚乙烯吡咯烷酮用于標本表面處理可形成致密隔絕層，將標本與空氣隔絕，二者的結(jié)合使得塑化標本的效果更加真實；采用了塑化用試劑A對需要填充部位進行填充，使其形態(tài)更加逼真；脫水過程中使用了酒石酸進行前期處理，使標本不僅容易吸收試劑，而且能使標本在處理過程中變得柔軟，不僵硬；
(2)塑化標本制作更加簡單易行，制作過程不受時間、設(shè)備等因素的限制，一般在5天內(nèi)即可完成標本的制作，標本表面油亮有光澤，沒有明顯的皺縮，保存過程中不易褪色，不易沾染灰塵，常規(guī)條件下即可長時間保存；
(3)在收藏展示和科研教學(xué)中，使人們能夠直接與標本生物接觸，經(jīng)久耐用，不易霉變和蟲蛀、不遭鼠咬且無味，有效地控制了標本室內(nèi)的空氣污染。

【具體實施方式】
[0018]利用上述塑化技術(shù)完成的菲律賓蛤仔、蝦夷扇貝、櫛孔扇貝、紅螺、寄居蟹、巴蛸、烏賊、海鯰魚等小型海洋動物的塑化標本，具有保存時間長，可以直接接觸，形態(tài)較為真實等有點。標本制作過程如下:
1、瓣鰓綱海洋動物標本制作方法:
(1)選取活體或新鮮的瓣鰓綱海洋動物，活體采用冷凍法處死；
(2)使標本的貝殼保持張開狀態(tài)，浸入含1%酒石酸的水溶液中浸泡3小時，然后將其放入95%~100%的乙醇中浸泡5min ；(3)將標本置于45%乙醇中浸泡40小時,然后置于80%乙醇溶液中浸泡15小時,完成脫水、脫脂過程；
(4)將處理后的標本放入塑化用試劑B中塑化15min，取出后使用脫脂棉將表面多余塑化用試劑B除去，置于陰暗干燥處自然干燥；
(5)再將標本放入塑化用試劑A中塑化15min，需暴露其器官形態(tài)；
(6)用無水乙醇和1%麝香草酚擦拭標本表面，并除去表面多余塑化用試劑后，將其放入15% PVP水溶液中浸泡5min，
(7)取出后在光照充足處放置一天，再于陰暗干燥處自然晾干；
(8)將標本浸入30%聚乙烯吡咯烷酮K-30 中數(shù)分鐘，直至標本濕潤，取出干燥，從步驟
(4)開始，重復(fù)三次。
[0019]2、軟體綱海洋動物標本制作方法:
(1)選取活體或新鮮的軟體綱海洋動物，長度不超過55厘米，寬度和高度不超過10厘米，活體動物采用冷凍法處死；
(2)將標本放入95%~100%的乙醇中浸泡5min，取出時，注意將其外面包裹的白色膜狀物小心擦除；
(3)將處理后的標本放入塑化用試劑B中塑化15min，取出后使用脫脂棉將表面多余塑化用試劑B除去，置于陰暗干燥處自然干燥；
(4)再將標本放入塑化用試劑A中塑化15min；
(5)用無水乙醇和1%麝香草酚擦拭標本表面，并除去表面多余塑化用試劑后，將其放入30% PVP水溶液中浸泡5min ；
(6)取出標本在光照充足處放置一天，再于陰暗干燥處自然晾干；
(7)將標本浸入30%聚乙烯吡咯烷酮K-30中數(shù)分鐘，直至標本濕潤，取出干燥，從步驟
(3)開始，重復(fù)三次；
(8)將標本置于45%乙醇和1%磨香草酹溶液中浸泡36小時,然后放入80%乙醇和1%麝香草酚溶液中處理18小時，之后將其放入35°C的40%分子量400的聚乙二醇溶液中浸泡5小時,置于干燥陰涼處自然晾干；
(9)而后放入15%聚乙烯吡咯烷酮K-30水溶液中浸泡5小時，再將其放入40%分子量400的聚乙二醇溶液中浸泡I小時，于光照充足處放置一天，再放入陰暗干燥處自然晾干；
分子量400的聚乙二醇可對軟體動物的外表面和近表處內(nèi)部進行塑化固定，保持其外形，并可使標本塑化、脫水，因此低濃度聚乙二醇短時間內(nèi)可實現(xiàn)標本內(nèi)部塑化，較高濃度短時間內(nèi)可對標本表面塑化。
[0020]3、海洋魚類標本制作方法:
(1)選取活體或新鮮的海洋魚類，長度不超過55厘米，高度不超過25厘米，寬度不超過10厘米，活體采用冷凍法處死；
(2)將標本放入95%~100%的乙醇中浸泡5min，將魚類的腹鰭、胸鰭、背鰭、尾鰭盡最大可能的展開與溶液充分接觸，取出時，注意將其外面包裹的白色膜狀物小心擦除；
(3)將標本置于45%乙醇中浸泡40小時,然后置于80%乙醇溶液中浸泡15小時,完成脫水、脫脂過程；
(4)將處理后的標本放入塑化用試劑B中塑化15min，取出后使用脫脂棉將表面多余塑化用試劑B除去，置于陰暗干燥處自然干燥；
(5)從標本口腔和腹部向體內(nèi)注入塑化劑用試劑A，再將標本放入塑化用試劑A中塑化15min ；
(6)用無水乙醇和1%麝香草酚擦拭標本表面，并除去表面多余塑化用試劑后，將其放入30% PVP水溶液中浸泡5min ；
(7)取出在光照充足處放置一天，再于陰暗干燥處自然晾干；
(8)浸入30%聚乙烯吡咯烷酮K-30數(shù)分鐘，直至標本濕潤，再取出干燥，從步驟(4)開始，重復(fù)三次，每次操作需將魚類脫水干癟的眼部浸滿PVP溶液，以便保持其形態(tài)；
所述塑化用試劑A的配方:31g分子量10000的聚乙二醇，400mL分子量600的聚乙二醇，10mL水；此溶液45°C左右完全融化，38°C左右對標本可進行常壓塑化；
所述塑化用試劑B的配方:12g分子量10000的聚乙二醇，178g分子量1000的聚乙二醇，1mL水；此溶液45°C左右完全融化，38°C左右對標本可進行常壓塑化。
[0021] 以上所述，僅為本發(fā)明較佳的【具體實施方式】，但本發(fā)明的保護范圍并不局限于此，任何熟悉本【技術(shù)領(lǐng)域】的技術(shù)人員在本發(fā)明披露的技術(shù)范圍內(nèi)，根據(jù)本發(fā)明的技術(shù)方案及其發(fā)明構(gòu)思加以等同替換或改變，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.小型海洋動物塑化標本制作技術(shù)，其特征在于，所述海洋動物為瓣鰓綱海洋動物，標本制作步驟如下: (1)選取活體或新鮮的瓣鰓綱海洋動物； (2)使動物貝殼保持張開狀態(tài)，浸入含1%酒石酸的水溶液中，浸泡3小時，然后將其放入95%~100%的乙醇中浸泡5min ； (3)將標本置于45%乙醇中浸泡40小時,然后置于80%乙醇溶液中浸泡15小時,完成脫水、脫脂過程； (4)將脫水脫脂處理后的標本放入塑化用試劑B中塑化15min，取出后使用脫脂棉將表面多余塑化用試劑B除去，置于陰暗干燥處自然干燥； (5)再將標本放入塑化用試劑A中塑化15min； (6)用無水乙醇和1%麝香草酚擦拭標本表面，除去多余塑化用試劑，將其放入15%PVP水溶液中浸泡5min ； (7)取出后在光照充足處放置一天，再于陰暗干燥處自然晾干； (8)浸入30%聚乙烯吡咯烷酮K-30中數(shù)分鐘，直至標本濕潤，取出干燥，從步驟(4)開始，重復(fù)三次； 所述塑化用試劑A是由31g分子量10000的聚乙二醇，400mL分子量600的聚乙二醇和10mL水混合，在常溫常壓下，加熱至完全溶解制得； 所述塑化用試劑B是由12g分子量10000的聚乙二醇，178g分子量1000的聚乙二醇和1mL水混合，在常溫常壓下，加熱至完全溶解制得。
2.小型海洋動物塑化標本制作技術(shù)，其特征在于,所述海洋動物為軟體綱海洋動物,標本制作步驟如下: (1)選取活體或新鮮的軟體綱海洋動物，長度不超過55厘米，寬度和高度不超過10厘米，活體動物采用冷凍法處死； (2)將標本放入95%~100%的乙醇中浸泡5min； (3)處理后的標本放入塑化用試劑B中塑化15min，取出后使用脫脂棉將表面多余塑化用試劑B除去，置于陰暗干燥處自然干燥； (4)再將海洋動物放入塑化用試劑A中塑化15min； (5)用無水乙醇和1%麝香草酚擦拭標本表面，并除去表面多余塑化用試劑，放入30%PVP水溶液中浸泡5min ； (6)取出標本在光照充足處放置一天，再于陰暗干燥處自然晾干； (7)浸入30%聚乙烯吡咯烷酮K-30中數(shù)分鐘，直至標本濕潤，取出干燥，從步驟(3)開始，重復(fù)三次； (8)將標本置于45%乙醇和1%磨香草酹溶液中浸泡36小時,然后放入80%乙醇和1%麝香草酚溶液中處理18小時，之后將其放入35°C的40%分子量400的聚乙二醇溶液中浸泡5小時,置于干燥陰涼處自然晾干； (9)放入15%聚乙烯吡咯烷酮K-30水溶液中浸泡5小時，再將其放入40%分子量400的聚乙二醇溶液中浸泡I小時，于光照充足處放置一天，再放入陰暗干燥處自然晾干； 所述塑化用試劑A是由31g分子量10000的聚乙二醇，400mL分子量600的聚乙二醇和10mL水混合，在常溫常壓下，加熱至完全溶解制得；所述塑化用試劑B是由12g分子量10000的聚乙二醇，178g分子量1000的聚乙二醇和1mL水混合，在常溫常壓下，加熱至完全溶解制得。
3.小型海洋動物塑化標本制作技術(shù)，其特征在于，所述海洋動物為海洋魚類，標本制作步驟如下: (1)選取活體或新鮮的海洋魚類，長度不超過55厘米，高度不超過25厘米，寬度不超過10厘米，活體采用冷凍法處死； (2)將標本放入95%~100%的乙醇中浸泡5min； (3)將標本置于45%乙醇中浸泡40小時,然后置于80%乙醇溶液中浸泡15小時,完成脫水、脫脂過程； (4)將脫水脫脂處理后的標本放入塑化用試劑B中塑化15min，取出后使用脫脂棉將表面多余塑化用試劑B除去，置于陰暗干燥處自然干燥； (5)從口腔和腹部向體內(nèi)注入塑化劑用試劑A，再將標本放入塑化用試劑A中塑化15min ； (6)用無水乙醇和1%麝香草酚擦拭標本表面，并除去表面多余塑化用試劑，放入30%PVP水溶液中浸泡5min ； (7)取出標本在光照充足處放置一天，再于陰暗干燥處自然晾干； (8)將標本浸入30%聚乙烯吡咯烷酮K-30數(shù)分鐘，直至標本濕潤，取出干燥，從步驟(4)開始,重復(fù)三次,每次操作將魚類脫水干癟的眼部浸滿PVP溶液； 所述塑化用試劑A是由31g分子量10000的聚乙二醇，400mL分子量600的聚乙二醇和10mL水混合，在常溫常壓下，加熱至完全溶解制得； 所述塑化用試劑B是由12g分子量10000的聚乙二醇，178g分子量1000的聚乙二醇和1mL水混合，在常溫常壓下，加熱至完全溶解制得。
【文檔編號】A01N1/00GK104041483SQ201410178931
【公開日】2014年9月17日 申請日期:2014年4月30日 優(yōu)先權(quán)日:2014年4月30日
【發(fā)明者】曹陽, 趙捷, 付爽, 楊超, 霍晉彥 申請人:大連大學(xué)