專利名稱：一種栽培迷迭香的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及ー種栽培迷迭香的方法。
背景技術(shù)：
迷迭香(Rosmarinusofficinalis L.)是唇形科多年生常綠亞灌木,原產(chǎn)于地中海地區(qū)，主要分布于法國(guó)、西班牙、土耳其和意大利等地。1981年由中國(guó)科學(xué)院植物研究所北京植物園引種至我國(guó)，現(xiàn)在作為原材料和園林觀賞植物廣泛引種于全國(guó)各個(gè)省份，其中貴州、云南、廣西、海南等地氣候適宜，栽培面積較大，初具生產(chǎn)規(guī)模。迷迭香精油的主要成分為單萜及其衍生物，包括α -菔烯，1，8-桉葉素，樟腦，莰 烯和龍腦等(Pintore et al.，2002)。根據(jù)ISO標(biāo)準(zhǔn)，迷迭香精油的化學(xué)型有兩種，即突尼斯-摩洛哥型(Tunisian and Moroccan type)和西班牙型(Spanish type)。前者以 1，8_按葉素為主要成分，占38%_55% ;后者α -菔烯、1，8_桉葉素、樟腦三種成分的含量相仿，在12. 5%-26%之間(Bruneton，1999)。除此之外還存在一些不常見(jiàn)的香型，例如土耳其迷迭香精油 p-cymene/linalool/ y -terpinen 香型、葡萄牙的 myrcene/ a -pinene/1, 8-cineole香型和古巴的 camphor/1, 8-cineole/borneol 香型(Ozcan and Chalchat, 2008, Serranoet al. , 2002) 0根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，我國(guó)貴州、福建、云南、新疆、廣西等地產(chǎn)迷迭香精油的香型均為西班牙型。迷迭香精油化學(xué)組成多祥，受到多種因素的影響，包括品種、株齡、生長(zhǎng)階段等內(nèi)在因素和栽培條件(溫、光、水、肥)、種植地區(qū)、提取方法、取材部位等外在因素。目前關(guān)于迷迭香在北方地區(qū)越冬防寒的栽培方法還沒(méi)有系統(tǒng)研究，因此，探求保護(hù)地栽培方法和莖葉分開(kāi)的采收方式，對(duì)于高效、可持續(xù)利用迷迭香資源具有重要意義。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的ー個(gè)目的是提供ー種栽培迷迭香的方法。本發(fā)明提供的方法，包括如下步驟I)在北緯39” 26，至41” 03’，東經(jīng)115” 25，至117” 30，處，10月底至11月初灌
溉迷迭香，同時(shí)架設(shè)塑料棚，并在所述塑料棚的外表面覆蓋覆蓋物；2)在次年二月底，去除經(jīng)過(guò)步驟I)處理的所述覆蓋物；3)在次年三月底，去除將經(jīng)步驟2)處理后的所述塑料棚，同時(shí)進(jìn)行灌溉。上述方法中，步驟I)中，所述10月底至11月初為10月25日-11月10日，此期間5厘米耕層土壤內(nèi)平均地溫5 °C，夜間氣溫低于O攝氏度(-5 °C -(TC )，表土夜凍日消，水分能從土壤里滲下去；步驟2)中，所述二月底為2月20日-2月28日，步驟3)中，所述三月底為3月20日-3月31日。上述方法中，步驟I)中，所述北緯39，，26，至41”03’，東經(jīng)115”25’至117”30’處為中國(guó)北京；
所述灌溉量為40-50m3水/畝；步驟3)中，所述灌溉量為30-35m3水/畝。上述方法中，在步驟I)和步驟2)之間，還包括如下步驟經(jīng)過(guò)步驟I)處理后的所述塑料棚內(nèi)的溫度在白天為25V -30°C，將所述覆蓋物揭開(kāi)通風(fēng)，并在夜間繼續(xù)覆蓋所述覆蓋物；所述覆蓋物為草簾。由上述方法得到的迷迭香在制備具有抑菌活性的迷迭香水提取物中的應(yīng)用也是本發(fā)明保護(hù)的范圍；上述應(yīng)用中，所述菌進(jìn)ー步具體為大腸桿菌(Esch erichia coli)、金黃葡萄球菌(Staphylococcus aureus subsp. aureus)、枯草芽抱桿菌(Bacillus subtilis)和 / 或變形桿菌(Proteus vulgaris)。本發(fā)明的另ー個(gè)目的是提供ー種制備迷迭香水提取物的方法。本發(fā)明提供的方法，包括如下步驟先采收由上述方法得到的迷迭香，再將所述迷迭香的組織浸沒(méi)在水中，蒸餾，收集揮發(fā)油，即得到迷迭香水提取物。上述方法中，上述的迷迭香的組織和所述水的配比為Ig =IOml ；所述蒸餾為180°C恒溫加熱至得到第一滴揮發(fā)油，沸騰2 h后，結(jié)束蒸餾。上述方法中，在所述蒸餾前，還包括將上述的迷迭香組織干燥、粉碎的步驟；在所述蒸餾后和所述收集揮發(fā)油前，還包括將所述蒸餾的產(chǎn)物靜置15_20min的步驟；在所述收集揮發(fā)油后，還包括將所述揮發(fā)油脫水，得到迷迭香水提取物的步驟；所述迷迭香的組織為莖或葉。由上述方法制備的迷迭香水提取物也是本發(fā)明保護(hù)的范圍；所述迷迭香水提取物具體具有抑菌活性；或所述的迷迭香水提取物在制備具有抑菌活性產(chǎn)品中應(yīng)用；所述菌進(jìn)一步具體為大腸桿菌(Escherichia coli)、金黃葡萄球菌(Staphylococcusaureus subsp. aureus)、枯草芽抱桿菌(Bacillus subtilis)和/或變形桿菌(Proteusvulgaris)。本發(fā)明的實(shí)驗(yàn)證明，本發(fā)明方法為在北京進(jìn)行防寒栽培，可以使迷迭香在北京越冬并正常生長(zhǎng)，而目前還沒(méi)有針對(duì)迷迭香在北方地區(qū)進(jìn)行防寒栽培，若不進(jìn)行防寒栽培則迷迭香會(huì)在北京冬天死亡，無(wú)法越冬，該方法避免了在北方地區(qū)栽種困難。且栽培得到的迷迭香水提取物(精油)抑菌活性較高，對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌和變形桿菌都有抑制效果。
具體實(shí)施例方式
下述實(shí)施例中所使用的實(shí)驗(yàn)方法如無(wú)特殊說(shuō)明，均為常規(guī)方法。下述實(shí)施例中所用的材料、試劑等，如無(wú)特殊說(shuō)明，均可從商業(yè)途徑得到。下述實(shí)施例中的實(shí)驗(yàn)均為重復(fù)三次，結(jié)果取平均值。實(shí)施例I、迷迭香防寒栽培方法1、2010 在北京地區(qū)(北緯 39” 26，至 41” 03’，東經(jīng) 115” 25，至 117” 30，)，11 月 I
日(5厘米耕層土壤內(nèi)平均地溫5°C，夜間氣溫低于O攝氏度，具體為_(kāi)5°C，表土夜凍日消，水分能從土壤里滲下去，時(shí)間為立冬之前，即在10月底至11月初；)在迷迭香種質(zhì)圃一次性灌足水(50m3水/畝)，隨即架設(shè)塑料棚，在塑料棚的外表面鋪蓋草簾(天津薊縣草制品倉(cāng)儲(chǔ)公司，CL1001)，同時(shí)保證人工看護(hù)，冬季如遇白天氣溫回升(棚內(nèi)溫度達(dá)25攝氏度)或陽(yáng)光充足時(shí)及時(shí)揭簾通風(fēng)，夜間放簾；2、次年二月底(具體為2011年2月25日)去除草簾，同時(shí)人工根據(jù)天氣狀況進(jìn)行通風(fēng)；3、次年三月底(具體為2011年3月25日)去除塑料棚，并及時(shí)灌溉(灌溉量為30m3/畝水)。結(jié)果為可以使迷迭香在北京越冬并正常生長(zhǎng)，而目前還沒(méi)有針對(duì)迷迭香在北方地區(qū)進(jìn)行防寒栽培，若不進(jìn)行防寒栽培則迷迭香會(huì)在北京冬天死亡，無(wú)法越冬。
實(shí)施例2、迷迭香水提取物的制備及抑菌活性檢測(cè)一、迷迭香水提取物的制備在2011年6月25日分別采收迷迭香莖葉，陰干得到干莖和干葉，采用水蒸氣蒸餾法分別提取精油，具體如下采用Clevenger型提取裝置，通過(guò)水蒸氣蒸餾法提取迷迭香精油，具體如下將采摘的迷迭香的莖、葉陰干、粉碎，分別稱取IOOg迷迭香干葉和IOOg迷迭香干莖，置于2000ml的圓底燒瓶中，分別加入IOOOml蒸餾水淹沒(méi)植物材料，180°C恒溫加熱，在第一滴精油滴出后開(kāi)始計(jì)時(shí)，沸騰2h后，結(jié)束蒸餾。停止加熱后，靜置20min，待油水分離后，取油水分離器中上層液體即為粗油，用無(wú)水硫酸鈉脫水，得迷迭香莖水提取物(精油)和迷迭香葉水提取物(精油)。ニ、迷迭香水提取物的抑菌活性檢測(cè)抑菌活性測(cè)定方法紙片擴(kuò)散法，將待測(cè)菌種(大腸桿菌Escherichia coliATCC25922 (CGMCC 1.2385)、金黃葡萄球菌 Staphylococcus aureus subsp. AureusATCC25923 (CGMCC I. 2386)、枯草芽孢桿菌 Bacillus subtilis ATCC6633 (CGMCC1. 2428)、變形桿菌Proteus vulgaris ATCC49132CCGMCC I. 491))用牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基培養(yǎng)，使用前用比濁儀將各菌液稀釋到IxlO8CFU · mじ1。滅菌的牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基傾注于直徑9cm的培養(yǎng)皿中，培養(yǎng)基凝固后，用移液槍吸取各菌液100 μ I均勻涂布于平板上，然后用鑷子取干熱滅菌后的直徑6_濾紙片平貼于平板中央。待測(cè)精油過(guò)O. 45 μ m微孔濾膜，移液槍吸取4 μ I滴加在濾紙片上，每ー個(gè)處理三個(gè)重復(fù)。設(shè)置蒸餾水作空白對(duì)照，抗生素(青霉素、鏈霉素和頭孢他啶，Img ^mL-I)作陽(yáng)性對(duì)照。待精油被充分吸收后，37°C倒置培養(yǎng)24小時(shí)，測(cè)定抑菌圈直徑。上述待測(cè)精油分別為迷迭香莖水提取物(精油)和迷迭香葉水提取物(精油)。結(jié)果如表I所示表I為迷迭香水提取物的抑菌活性
權(quán)利要求
1.ー種栽培迷迭香的方法，包括如下步驟 1)在北緯39”26’至41” 03’，東經(jīng)115” 25’至117” 30’處，10月底至11月初灌溉迷迭香，同時(shí)架設(shè)塑料棚，并在所述塑料棚的外表面覆蓋覆蓋物； 2)在次年二月底，去除經(jīng)過(guò)步驟I)處理的所述覆蓋物； 3)在次年三月底，去除將經(jīng)步驟2)處理后的所述塑料棚，同時(shí)進(jìn)行灌溉。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的方法，其特征在于 步驟I)中，所述10月底至11月初為10月25日-11月10日， 步驟2)中，所述二月底為2月20日-2月28日， 步驟3)中，所述三月底為3月20日-3月31日。
3.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的方法，其特征在于 步驟O中，所述北緯39，，26，至41”03’，東經(jīng)115”25’至117，，30，處為中國(guó)北京； 所述灌溉量為40-50m3水/畝； 步驟3)中，所述灌溉量為30-35m3水/畝。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一所述的方法，其特征在于 在步驟I)和步驟2)之間，還包括如下步驟經(jīng)過(guò)步驟I)處理后的所述塑料棚內(nèi)的溫度在白天為25°C -30°C，將所述覆蓋物揭開(kāi)通風(fēng)，并在夜間繼續(xù)覆蓋所述覆蓋物；所述覆蓋物為草簾。
5.由權(quán)利要求1-4所述方法得到的迷迭香在制備具有抑菌活性的迷迭香水提取物中的應(yīng)用。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于所述菌為大腸桿菌(Escherichiacoli)、金黃葡萄球菌(Staphylococcus aureussubsp. aureus)、枯草芽抱桿菌(Bacillussubtilis)和 / 或變形桿菌(Proteus vulgaris)。
7.ー種制備迷迭香水提取物的方法，包括如下步驟 先采收由權(quán)利要求1-4所述方法得到的迷迭香，再將所述迷迭香的組織浸沒(méi)在水中，蒸餾，收集揮發(fā)油，即得到迷迭香水提取物。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于 所述迷迭香的組織和所述水的配比為Ig =IOml ； 所述蒸餾為180°C恒溫加熱至得到第一滴揮發(fā)油，沸騰2h后，結(jié)束蒸餾。
9.根據(jù)權(quán)利要求7或8所述的方法，其特征在于 在所述蒸餾前，還包括將所述迷迭香的組織干燥、粉碎的步驟； 在所述蒸餾后和所述收集揮發(fā)油前，還包括將所述蒸餾的產(chǎn)物靜置15-20min的步驟； 在所述收集揮發(fā)油后，還包括將所述揮發(fā)油脫水，得到迷迭香水提取物的步驟； 所述迷迭香的組織為莖或葉。
10.由權(quán)利要求7-9中任一所述方法制備的迷迭香水提取物；所述迷迭香水提取物具體具有抑菌活性；或所述的迷迭香水提取物在制備具有抑菌活性產(chǎn)品中應(yīng)用；所述菌進(jìn)一步具體為大腸桿菌(Escherichia coli)、金黃葡萄球菌(Staphylococcus aureussubsp.aureus)、枯草芽抱桿菌(Bacillus subtilis)和/或變形桿菌(Proteus vulgaris)。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種栽培迷迭香的方法。本發(fā)明提供的方法，包括如下步驟1)在北方地區(qū)，10月底至11月初灌溉迷迭香，同時(shí)架設(shè)塑料棚，并在所述塑料棚的外表面覆蓋覆蓋物；2)在次年二月底，去除經(jīng)過(guò)步驟1)處理的所述覆蓋物；3)在次年三月底，去除將經(jīng)步驟2)處理后的所述塑料棚，同時(shí)進(jìn)行灌溉。本發(fā)明的實(shí)驗(yàn)證明，本發(fā)明方法為在北京進(jìn)行防寒栽培，避免了在北方地區(qū)栽種困難，栽培得到的迷迭香提取的精油抑菌活性還為較高，對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌和變形桿菌都有抑制效果。
文檔編號(hào)A01G1/00GK102687634SQ20121015899
公開(kāi)日2012年9月26日 申請(qǐng)日期2012年5月21日 優(yōu)先權(quán)日2012年5月21日
發(fā)明者李慧, 潘巖, 白紅彤, 石雷 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院植物研究所