專利名稱：具有抑菌活性的茶樹菇子實(shí)體乙醚提取物及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及具有抑菌活性的茶樹菇子實(shí)體乙醚提取物及其應(yīng)用。屬生物工程技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
茶樹菇屬擔(dān)子菌綱，糞銹傘科，田菇屬，又名茶菇、油茶菇、神菇。是近年來發(fā)展起來的一種食用菌新品種。茶樹菇營養(yǎng)豐富，蛋白質(zhì)含量高，含有人體必需的氨基酸，并且有豐富的B族維生素和鉀、鈉、鈣、鎂、鐵、鋅等礦質(zhì)元素。中醫(yī)認(rèn)為該菇性平、甘溫、無毒，具有較高的藥用價值，有清熱、平肝、明目、健脾的功效。有文獻(xiàn)表明其子實(shí)體水提液有良好的抑菌活性。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供具有抑菌活性的茶樹菇子實(shí)體乙醚提取物及其應(yīng)用。本發(fā)明的技術(shù)方案為將茶樹菇子實(shí)體通過粉碎，過篩，用乙醚進(jìn)行索氏提取，減壓濃縮后得到。將提取物進(jìn)行抑菌活性實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明該提取物對常見致病菌有一定抑制作用。本發(fā)明發(fā)明的茶樹菇子實(shí)體乙醚提取物的制備方法，提取率為1. 73%茶樹菇粉末干重，溶劑揮干后，經(jīng)初步的研究確認(rèn)，基本無毒，對致病菌有一定的抑制作用，可以應(yīng)用于食品保鮮防腐領(lǐng)域。具體來說，首先，我們用粉碎機(jī)將市售干燥的茶樹菇子實(shí)體粉碎，過80目篩， 然后粉末用濾紙包裹住，置于索氏提取器中連續(xù)回流萃取，乙醚為萃取溶劑，料液比為 1 10(g mL)，35°C條件下提取10h。萃取液濾紙過濾，濾液低溫減壓濃縮至恒重，置具塞試管中低溫保存?zhèn)溆谩Ｗ詈髮⒃撎崛∥镞M(jìn)行抑菌活性實(shí)驗(yàn)。
具體實(shí)施例方式下面的實(shí)例將具體說明本發(fā)明的操作方法，但不能作為對本發(fā)明的限定。實(shí)例一將茶樹菇子實(shí)體用粉碎機(jī)粉碎后過80目篩，稱取IOOg粉末加入濾紙筒，用濾紙包好后放入索氏提取器中，按照料液比l/10(g/mL)的比例加入乙醚在35°C的條件下提取10h，萃取液濾紙過濾后40°C減壓濃縮至恒重，得茶樹菇子實(shí)體乙醚提取物，其產(chǎn)率為 1.73%茶樹菇粉末干重。實(shí)例二將制備得到的茶樹菇子實(shí)體乙醚提取物進(jìn)行抑菌實(shí)驗(yàn)。1.供試菌株的準(zhǔn)備在無菌室中將供試菌種接入相對應(yīng)的試管斜面培養(yǎng)基置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度和時間分別為細(xì)菌35 37°C，18 Mh、霉菌25 ，44 48h、酵母菌 30°C，44 48h。
2.培養(yǎng)基平板制備配制好的各種菌株的培養(yǎng)基，121°C濕熱滅菌30min后，冷卻至50 60°C，無菌操作傾注于干熱滅菌的培養(yǎng)皿內(nèi)，每皿15 20mL。3.供試菌株懸浮液的制備及平板接種用接種環(huán)挑取少許菌體于裝有9mL無菌水的試管內(nèi)，制成菌懸液。霉菌、酵母菌用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，細(xì)菌用比濁法計(jì)數(shù)。調(diào)整菌懸液的濃度至含孢子或菌體為106 107/mL，向平板上加100 μ L菌懸液，用涂布棒涂布均勻。4.濾紙法抑菌實(shí)驗(yàn)用打孔器將新華1號定性濾紙打成直徑6mm的小圓片，于培養(yǎng)皿中121°C濕熱滅菌30min。將滅菌濾紙片浸入茶樹菇子實(shí)體乙醚提取液中，浸泡Mh。 將浸好的濾紙片貼在制備好的接種平板上，分別用空白濾紙片和乙醚浸泡的濾紙片作為對照，平板置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，到達(dá)培養(yǎng)時間后用游標(biāo)卡尺測量抑菌圈直徑(見表1)。表1乙醚提取物抑菌效果比較
權(quán)利要求
1.一種具有抑菌活性的茶樹菇子實(shí)體乙醚提取物，其特征在于外觀為黃色或淡黃色油狀液體，是茶樹菇子實(shí)體通過粉碎，過篩，用乙醚經(jīng)索氏提取器提取，提取液減壓濃縮至干， 得到提取物，然后通過濾紙片法進(jìn)行抑菌活性實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明乙醚提取物對常見致病菌有一定抑制作用。
2.如權(quán)利要求1所述的茶樹菇子實(shí)體乙醚提取物制備方法，其特征在于所述的粉碎和過篩是將茶樹菇子實(shí)體用粉碎機(jī)粉碎后過80目篩。
3.如權(quán)利要求1所述的茶樹菇子實(shí)體乙醚提取物制備方法，其特征在于所述的用乙醚經(jīng)索氏提取器提取是將茶樹菇粉末加入濾紙筒，包好后放入索氏提取器中，按照料液比 1 10 (g mL)的比例在35°C提取10h，得到萃取液。
4.如權(quán)利要求1所述的茶樹菇子實(shí)體乙醚提取物制備方法，其特征在于所述的減壓濃縮是指萃取液用濾紙過濾后用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀在40°C減壓濃縮至恒重。
5.如權(quán)利要求1所述的抑菌實(shí)驗(yàn)所用濾紙片的制備方法，其特征在于用打孔器將新華 1號定性濾紙打成直徑6mm的小圓片，于培養(yǎng)皿中121°C濕熱滅菌30min，將滅菌濾紙片浸入茶樹菇乙醚提取液中，浸泡24h后取出，揮干表面溶劑。
6.如權(quán)利要求1所述的抑菌實(shí)驗(yàn)菌種包括金黃色葡萄球菌、變形桿菌、枯草芽胞桿菌、 傷寒桿菌、啤酒酵母、黑根霉、總狀毛霉。
全文摘要
本發(fā)明屬生物工程技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及具有抑菌活性的茶樹菇子實(shí)體乙醚提取物及其應(yīng)用。該茶樹菇子實(shí)體乙醚提取物為黃色或淡黃色油狀液體，是茶樹菇子實(shí)體通過粉碎，過篩，用乙醚進(jìn)行回流萃取，減壓濃縮后得到。將提取物進(jìn)行抑菌活性實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明該提取物對常見致病菌有一定抑制作用。
文檔編號A01P3/00GK102524308SQ201110419928
公開日2012年7月4日 申請日期2011年12月15日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月15日
發(fā)明者滕麗萍, 程詠梅, 鄧超, 陳敬華 申請人:江南大學(xué)