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提高公兔生殖功能的抗熱應(yīng)激飼料添加劑的制作方法

文檔序號:381357閱讀:473來源:國知局
專利名稱:提高公兔生殖功能的抗熱應(yīng)激飼料添加劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明屬于飼料添加劑技術(shù)領(lǐng)域,涉及一種營養(yǎng)保健飼料添加劑,具體地說是一 種具有提高公兔機(jī)體免疫力、保護(hù)生殖系統(tǒng)、保持性欲、增加射精量、提高精液品質(zhì)等功能 的抗熱應(yīng)激飼料添加劑。
背景技術(shù)
熱應(yīng)激(Heat Stress)是指處于高溫度環(huán)境中時,機(jī)體對熱環(huán)境提出的任何要求 所做的非特異性的生理反應(yīng)的總和。熱應(yīng)激對動物的影響是多方面的,首先熱應(yīng)激影響動 物對飼料的采食量和生產(chǎn)性能;其次,導(dǎo)致內(nèi)分泌活動紊亂;第三,降低動物的免疫能力, 進(jìn)而影響動物的健康狀態(tài)。熱應(yīng)激對繁殖動物的繁殖潛力的影響很大,主要表現(xiàn)在,導(dǎo)致 母畜初情期推遲,卵巢機(jī)能減退,受胎率下降,胚胎成活率低,延遲斷奶后性活動;公畜的性 欲、生精能力以及精液品質(zhì)等均明顯下降。動物的繁殖能力的降低直接影響著畜牧業(yè)的發(fā) 展。國內(nèi)外近十多年來對牲畜的抗熱應(yīng)激進(jìn)行了較多的研究,現(xiàn)摘錄如下1、宋智娟等人,熱應(yīng)激對家兔的影響及其營養(yǎng)調(diào)控。中國飼料添加劑,2006, 49(7)。該文綜述介紹了熱應(yīng)激對家兔七個方面的影響(1)熱應(yīng)激對家兔采食量的影響動物體都有自身的最適溫度,也就是“舒適區(qū)”,指不必過分借助物理調(diào)節(jié)維持正 常體溫的外界溫度范圍。家兔正常體溫為38. 3-39. 6°C,體型小,新陳代謝旺盛,體內(nèi)產(chǎn)熱量 大,但汗腺不發(fā)達(dá),所以兔很怕熱。在炎熱的夏季,當(dāng)舍內(nèi)環(huán)境溫度上升到一定程度時,家兔 的采食中樞的興奮受到抑制,維持需要的能量降低,從而導(dǎo)致采食量下降。一方面是溫度對 丘腦下部嗜食中樞的直接副作用;另一方面是消化道活動減弱,從而導(dǎo)致消化道食物的充 盈,壓迫機(jī)械感受器而抑制食欲。Amici等(1995)報道,家兔在33. 5°C時采食量比18°C時 低 13. 6%。(2)熱應(yīng)激對家兔生產(chǎn)性能的影響家兔的適宜生長溫度為15_25°C。在持續(xù)高溫期,兔的攝食中樞受抑導(dǎo)致采食量 下降。熱應(yīng)激時,機(jī)體由于加強(qiáng)散熱,抑制產(chǎn)熱過程,消化液的分泌和胃腸機(jī)能下降,物質(zhì)代 謝水平低下導(dǎo)致體增重降低。Trommel等(1996)報道,家兔在32. 2°C的體增重比23°C時 降低了 49.8%。Papp等(1990)報道,在妊娠20-29天時,高溫下的兔平均失重87g,而適 溫時的母兔卻增重298g。在高溫環(huán)境中,由于采食量減少,機(jī)體的代謝水平下降,毛的營養(yǎng) 物質(zhì)供應(yīng)降低使毛的生長緩慢,數(shù)量少,剪毛量急劇下降。高溫影響毛的質(zhì)量主要表現(xiàn)為家 兔的粗毛比例在夏季高,絨毛量少;兔毛的長度在夏季比冬季短;夏季兔毛的強(qiáng)度低、伸度 大、絨毛粗(張德英等,1990)。(3)熱應(yīng)激對母兔繁殖性能的影響高溫對母兔繁殖性能有不利影響,主要影響母兔的受胎率和產(chǎn)仔數(shù)。高溫條件下, 母兔雌激素分泌減少,發(fā)情不規(guī)律,影響正常的性機(jī)能活動。據(jù)研究發(fā)現(xiàn),熱應(yīng)激可造成卵 細(xì)胞形態(tài)異常,如細(xì)胞質(zhì)收縮或透明膜破裂,使其不能受精。氣溫在32. 2°C以上時,家兔受胎率降低,胚囊、胚胎變小,胚胎早期死亡率升高。高溫條件下,母兔的采食量下降,造成營 養(yǎng)不足,同時母兔為增加散熱量,大量血液流向皮膚,從而減少子宮和臍帶的血流量,造成 胎兒供血不足,影響胎兒的正常發(fā)育,導(dǎo)致僵仔兔和死胎數(shù)的增加。黃良虎等(1995)報道, 高溫季節(jié)母兔的受胎率降低91 %,窩產(chǎn)仔數(shù)減少30%,當(dāng)環(huán)境溫度升至30°C時,受精卵死 亡25-45%。譚啟兆等(1990)譯文中報道,孕兔對突變的熱應(yīng)激特別敏感,若突然進(jìn)入35°C 高溫環(huán)境,可引起母兔出現(xiàn)流涎、神經(jīng)癥狀,甚至流產(chǎn)。長期高溫環(huán)境(30°C),使母兔的體 重、窩仔重下降,窩產(chǎn)仔數(shù)減少。妊娠后期10天內(nèi)溫度升高,使母兔的泌乳量比適溫(20°C ) 時降低72. 3%。(4)熱應(yīng)激對公兔的影響高溫能抑制下丘腦對促性腺激素釋放激素的合成與分泌對睪丸機(jī)能產(chǎn)生不利影 響,使兔精液品質(zhì)顯著降低。嚴(yán)忠慎等(1985)研究發(fā)現(xiàn),當(dāng)溫度升高到30°C時,公兔的精 液量、精子活力和射精量明顯降低。王志清等(1985)研究發(fā)現(xiàn),家兔在31. 5-34. 5°C環(huán)境 中,精液量、精子活力和密度與環(huán)境溫度成負(fù)相關(guān),精子畸形率顯著升高。且公兔精子的發(fā) 生過程中斷,曲細(xì)精管中空,僅有少數(shù)的初級精母細(xì)胞,其余各級生精細(xì)胞均消失。杜玉川 等(1987)報道,經(jīng)35°C高溫處理10天的公兔睪丸相對縮小25%。(5)熱應(yīng)激對家兔免疫功能的影響熱應(yīng)激刺激家兔機(jī)體,機(jī)體免疫功能受到抑制,這種免疫抑制是通過腦對免疫功 能的調(diào)控,腎上腺皮質(zhì)激素和交感神經(jīng)的免疫修飾作用來實現(xiàn)的。大腦受到應(yīng)激刺激乃至 破壞時,可導(dǎo)致機(jī)體免疫器官、組織和細(xì)胞功能抑制。淋巴因子在腦內(nèi)合成,腦內(nèi)的一些激 素也參與免疫功能的調(diào)節(jié),這是腦向免疫器官傳遞信息的體液途經(jīng),以腦垂體為中心,經(jīng)垂 體一腎上腺途經(jīng)進(jìn)行調(diào)節(jié),交感神經(jīng)系統(tǒng)也通過其對脾臟、淋巴結(jié)、胸腺及骨髓等免疫組織 器官的腎上腺能受體的作用,來直接抑制機(jī)體的免疫功能。(6)熱應(yīng)激對家兔血清中無機(jī)離子和堿儲的影響熱應(yīng)激所造成的呼吸急促可引起血中C02和H+濃度下降并導(dǎo)致酸堿不平衡,通常 稱作呼吸性堿中毒。0dan(1982)的研究表明,呼吸性堿中毒在熱應(yīng)激后30分鐘內(nèi)即可發(fā) 生。熱應(yīng)激時,家兔機(jī)體代謝活動加強(qiáng),產(chǎn)熱增加,呼吸頻率加快,發(fā)生熱喘息,使C02排出 量增加,血液中C02貯量下降,H+和HCCV度減小,從而導(dǎo)致血液呈呼吸性堿中毒。范石軍等 (1996)報道,在熱期和炎熱期,血清鈣、鉀、鈉和堿儲均顯著降低。Dridi(1993)還觀察了熱 應(yīng)激環(huán)境對家兔血漿中鈣、磷、鉀、鈉、氯水平的影響,結(jié)果表明,除磷之外,血漿中鈉、鉀、氯 整個試驗中受熱應(yīng)激影響而顯著下降。(7)熱應(yīng)激對家兔血液生化指標(biāo)的影響EI-Masry等(1994)研究表明,由于甲狀腺活動下降,影響蛋白質(zhì)的合成,使熱應(yīng) 激時血液總蛋白、白蛋白水平都明顯下降。血清中的肌酸磷酸激酶(CPK)濃度上升,轉(zhuǎn)氨酶 的活性增強(qiáng),而其他酶如谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)和乳酸脫氫酶(CDH)呈下降的趨勢。Marai等 (1999)報道,兔在高溫環(huán)境下,血液總蛋白、白蛋白、球蛋白及白蛋白與蛋白的比例都明顯 低于冬季。張德福等(1992)報道,兔在31°C時,血糖濃度和血脂濃度分別比20°C下降40% 和 33. 3%。2、中國專利CN 101229152A,申請?zhí)?00810056588. 7,一種促進(jìn)公畜性器官發(fā)育
和精子發(fā)育的方法。該發(fā)明方法是從公畜幼年起飼喂維生素E。根據(jù)不同牲畜選擇適當(dāng)?shù)膭┝?。飼喂時通常從公畜斷奶起即可飼喂維生素E,隨著公畜的成長,可以適當(dāng)增加劑量,至 公畜性成熟時即可停止飼喂。飼喂時可將維生素E粉添加到幼齡公畜日糧的精料中,充分 拌勻,分早晚飼喂。對于公羔而言,維生素E的飼喂量以每天每只80-880IU為宜,優(yōu)選為每 只每天320IU。試驗表明,公畜從幼齡開始飼喂維生素E,能夠增加附辜的重量,曲細(xì)精管的 密度,增加附辜直徑、生精細(xì)胞數(shù)量,提早利用公畜,提高種公畜的繁殖能力和利用年限。3、中國專利CN 101313731A,申請?zhí)?00810116768. X,一種抗應(yīng)激飼料添加劑。該 發(fā)明的技術(shù)方案是其組成成分及重量百分比為黃芪多糖15-30%、黃芩甙15-30%、薄荷 油包裹物10-20%、金銀花提取物10-20%、維生素CO. 5-5%、維生素E 0. 5_5%、吡啶甲酸 鉻0. 001-0. 02%、氧化鋅0. 05-0. 3%、精氨酸0. 1_1 %、色氨酸、谷氨酰氨、硫酸 鈉1_5%、碘酸鈣1-3%、亞硒酸鈉1-3%、磷酸二氫鉀1_3%,余量為藥學(xué)上可接受的輔料。 該配方采用中草藥、氨基酸、礦物質(zhì)和維生素的綜合配伍組合,在抗應(yīng)激條件下,能綜合促 進(jìn)機(jī)體內(nèi)激素代謝、免疫功能、營養(yǎng)生理及營養(yǎng)需求的動力學(xué)變化,從而改善動物機(jī)體的抗 應(yīng)激效果,是廣譜禽畜飼料添加劑。4、中國專利CN 101301402A,申請?zhí)?00810140469. X,強(qiáng)化公豬生殖性能的營養(yǎng) 保健補充劑。該發(fā)明所采取的技術(shù)方案是總量以20份計是由下列重量組分的原料構(gòu)成 糖萜素1_2份、納米氧化鋅1_3份、吡啶甲酸鉻0. 006-0. 01份、精氨酸5-7份、0 -胡蘿
卜素0. 2-0. 3份、維生素E 0. 1-0. 2份、維生素A 0. 1-0. 2份、維生素C 0. 3-0. 6份、維生 素 B12 0. 00003-0. 00005 份、葉酸 0. 004-0. 006 份、生物素0. 0003-0. 0006 份、左旋肉堿 0. 3-1份、余量為葡萄糖。該配方對提高種公豬的采精量和精液品質(zhì)、維護(hù)種公豬健康有良 好作用,并且同時具有提高公豬機(jī)體免疫力、殺菌消炎功能,保護(hù)生殖系統(tǒng)免受侵害等有功 效。但是,添加的原料成分較多,成本較高。從已有技術(shù)可知公兔的精子發(fā)生受下丘腦-垂體-性腺軸的控制,而且必須經(jīng) 過附睪的孵育才能成為成熟精子,適宜的溫度對精子發(fā)生來說是必不可少的,但公兔的睪 丸對熱十分敏感,溫度升高數(shù)度即可造成睪丸損傷。夏季高溫高濕直接會導(dǎo)致公兔體溫升 高,引起陰囊皮溫和睪丸溫度升高,造成睪丸變性,使精子的成熟和貯存受到影響。高溫?zé)?應(yīng)激會使精子活力和密度降低,精子畸形率增加。睪酮是由睪丸間質(zhì)細(xì)胞分泌的性激素,對 精子的生成與發(fā)生具有重要作用。在熱應(yīng)激狀態(tài)下,下丘腦_垂體_性腺軸的調(diào)控受到抑 制,促皮質(zhì)素釋放激素(CRH)分泌增加。隨著CRH的增多能直接抑制下丘腦促黃體素釋放 激素(LHRH)的分泌,造成促黃體素分泌減少,引起睪酮的分泌降低。甲狀腺激素幾乎作用 于機(jī)體所有的器官和組織,對生長、發(fā)育、代謝和組織分化等各方面均有影響。熱應(yīng)激狀態(tài) 下,公兔體內(nèi)產(chǎn)熱較多,引起垂體分泌的垂體前葉促甲狀腺素(TSH)合成減少,最終導(dǎo)致甲 狀腺素(T4)和三碘甲腺原氨酸(T3)的分泌下降,進(jìn)而引起機(jī)體一系列的生理生化的變化。 在熱應(yīng)激條件下,高溫刺激下丘腦分泌促皮質(zhì)素釋放激素(CRH),CRH引起垂體釋放促腎上 腺皮質(zhì)激素(ACTH)增加,ACTH促進(jìn)腎上腺皮質(zhì)軸分泌皮質(zhì)醇,因此急性熱應(yīng)激條件下造成 皮質(zhì)醇水平升高。但如果刺激強(qiáng)度過大或作用時間過長,機(jī)體就會逐漸失去應(yīng)付能力,表現(xiàn) 出衰竭現(xiàn)象,出現(xiàn)病理狀態(tài),因此造成下丘腦一垂體一腎上腺皮質(zhì)軸失調(diào),從而使皮質(zhì)醇的 分泌降低,這就是生產(chǎn)中常見的慢性熱應(yīng)激造成皮質(zhì)醇水平下降的現(xiàn)象。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供一種具有提高公兔機(jī)體免疫力、保護(hù)生殖系統(tǒng)、保持性欲、增 加射精量和提高精液品質(zhì)等功能的抗熱應(yīng)激飼料添加劑。本發(fā)明是這樣實現(xiàn)的提高公兔生殖功能的抗熱應(yīng)激飼料添加劑,在推薦NRC(1977)成年兔維持需要量 配制基礎(chǔ)飼糧飼料中,添加抗熱應(yīng)激添加劑,混合均勻,重量噸飼料添加抗熱應(yīng)激添加劑組 份和重量為硫辛酸100-800g、維生素E為100-600g、維生素C為100-600g和糖萜素為 0-600go以上所述的添加抗熱應(yīng)激添加劑組份III和重量為硫辛酸為600g、維生素E為 300g和維生素C為300g。公兔的飼養(yǎng)方法在夏天高溫飼養(yǎng)公兔,需對周邊環(huán)境、兔舍、飼養(yǎng)工具等進(jìn)行消 毒處理,公兔在同一室內(nèi)單籠飼養(yǎng),由專人飼喂,每天早晚各喂添加抗熱應(yīng)激添加劑的飼料 1次,自由飲水,每天補充充足的青草。在本發(fā)明的添加抗熱應(yīng)激添加劑各組份原料中硫辛酸硫辛酸是一種能消除加速老化與致病的自由基、類似維他命的物質(zhì),硫辛 酸是一種存在于線粒體的酵素,硫辛酸在體內(nèi)經(jīng)腸道吸收后進(jìn)入細(xì)胞,兼具脂溶性與水溶 性的特性,因此可以在全身通行無阻,到達(dá)任何一個細(xì)胞部位,提供公兔全面效能,是唯一 兼具脂溶性與水溶性的萬能抗氧化劑。糖萜素糖萜素是植物提取物,能明顯提高公兔機(jī)體神經(jīng)及內(nèi)分泌系統(tǒng)的免疫功 能和抗應(yīng)激作用,促進(jìn)腎上腺皮質(zhì)激素的分泌,提高免疫球蛋白G(lgG)的含量;消除機(jī)體 有害自由基,提高機(jī)體組織細(xì)胞抗氧化能力;促進(jìn)蛋白質(zhì)合成和消化酶活性的生理功能; 對沙門氏菌、大腸桿菌、柔嫩艾美耳球蟲和法囊炎均有良好的抑制作用;可通過提高動物的 整體免疫和內(nèi)分泌系統(tǒng),來改善動物的健康水平和生產(chǎn)性能,能提高公兔射精量和精液品質(zhì)。維生素E 維生素E用作公兔細(xì)胞內(nèi)抗氧化劑,能抗自由基引起的脂質(zhì)過氧化作 用,維護(hù)細(xì)胞膜系統(tǒng)的功能,減少應(yīng)激時肌肉細(xì)胞肌酸激酶的釋放,從而防止過多的鈣內(nèi)流 而造成對正常細(xì)胞代謝的干擾。同時,維生素E也可緩解公兔由于高溫時腎上腺皮質(zhì)激素 釋放而引起的免疫抑制,能促進(jìn)免疫球蛋白的合成,從而提高機(jī)體的抗病能力。維生素E還 能降低公兔血清皮質(zhì)醇的含量,從而降低機(jī)體對熱應(yīng)激的不良反應(yīng)。公兔的血液睪酮、精子 密度、精液轉(zhuǎn)氨酶活性明顯上升,提高種公兔的繁殖力。維生素C:在活細(xì)胞內(nèi)的各種氧化還原反應(yīng)中起重要作用,參與腎上腺皮質(zhì)內(nèi)固 醇的合成,有助于緩解應(yīng)激,并消除高溫對精液質(zhì)量的不利影響,降低精于的凝集力。公兔 增喂維生素C后,精子質(zhì)量有所提高。熱應(yīng)激時,會使維生素C的合成能力降低,而損耗增 加,明顯地提高公兔對于維生素C的需求量。本發(fā)明所能達(dá)到的有益效果是1、本發(fā)明的抗熱應(yīng)激添加劑具有提高公兔機(jī)體免疫力、殺菌消炎功能,保護(hù)生殖 系統(tǒng)免受侵害,也可用于辜九炎、副性腺炎、尿生殖道炎、血精、精液污濁、精子凝聚等疾病 的輔助性治療和預(yù)防。2、本發(fā)明的抗熱應(yīng)激添加劑能夠調(diào)節(jié)內(nèi)分泌,具有生精、提高公兔性欲、提高精液 品質(zhì)功能,詞喂后的公兔產(chǎn)精量高,精子密度高、活力強(qiáng)、畸形率低。
3、本法明的抗熱應(yīng)激添加劑能夠抗各種應(yīng)激。在夏季使用,能夠有效地避免射精 量減少和精液品質(zhì)不良的程度。4、本發(fā)明的抗熱應(yīng)激添加劑具有保健功能,代替抗生素,避免由于藥物殘留和病 原微生物抗藥性逐漸加大而造成嚴(yán)重不良后果。5、本發(fā)明的抗熱應(yīng)激添加劑經(jīng)過飼喂對比試驗,證明安全可靠,效果顯著。
具體實施例方式以下基于實施例來對本發(fā)明作進(jìn)一步的說明,但不對本發(fā)明構(gòu)成任何限制。實施例選用廣西大學(xué)牧試站提供的體況良好、體重相當(dāng),7月齡的新西蘭公兔24只,分為 4組,每組6個重復(fù),試驗公兔養(yǎng)于31 士 2°C的熱應(yīng)激環(huán)境中飼養(yǎng),基礎(chǔ)日糧組為對照組,其 他3組為試驗組,分別在基礎(chǔ)日糧的基礎(chǔ)加入添加維生素E和維生素C稱為試驗1組,添加 維生素E和糖萜素稱為試驗2組,添加維生素E、維生素C和硫辛酸稱為試驗3組?;A(chǔ)飼糧參照推薦NRC(1977)成年兔維持需要量配制,基礎(chǔ)飼糧配方及營養(yǎng)水平 見表1。試驗1組重量噸飼料添加抗熱應(yīng)激添加劑組份和重量為維生素E為600g和維生素 C為600g ;試驗2組重量噸飼料添加抗熱應(yīng)激添加劑組份和重量為維生素E為300g和糖萜 素為500g ;試驗3組重量噸飼料添加抗熱應(yīng)激添加劑組份和重量為維生素E為300g、維生 素C為300g和硫辛酸為600g。表1基礎(chǔ)飼糧配方及營養(yǎng)水平
飼料原料配比(%)營養(yǎng)成分含量(Kcal/kg, %)玉米33. 00CP17.17豆粕15. 00DE2578麥麩18. 00CF12.33柱花草32. 00Ca0.87食鹽0. 50TP0.54磷酸氫鈣0. 50復(fù)合預(yù)混料1. 00合計100. 00飼養(yǎng)方法是在實驗前對周邊環(huán)境、兔舍、飼養(yǎng)工具等進(jìn)行消毒處理。經(jīng)一周預(yù)試 后,進(jìn)入正試期。公兔在同一室內(nèi)單籠飼養(yǎng),由專人飼喂,每天早晚各喂1次,自由飲水,每 天補充充足的青草。飼養(yǎng)兩個月后,進(jìn)行人工采精。每三天采一次精,共采5次精。飼養(yǎng)結(jié)果是不同添加劑對采精量、精子活力、密度、畸形率的影響情況見表2。表2不同添加劑對采精量、精子活力、密度、畸形率的影響
權(quán)利要求
一種提高公兔生殖功能的抗熱應(yīng)激飼料添加劑,其特征在于在推薦NRC(1977)成年兔維持需要量配制基礎(chǔ)飼糧飼料中,添加抗熱應(yīng)激添加劑,混合均勻,重量噸飼料添加抗熱應(yīng)激添加劑組份和重量為硫辛酸為100 800g、維生素E為100 600g、維生素C為100 600g和糖萜素為0 600g。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗熱應(yīng)激飼料添加劑,其特征在于所述的添加抗熱應(yīng)激添 加劑組份III和重量為硫辛酸為600g、維生素E為300g和維生素C為300g。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗熱應(yīng)激飼料添加劑,其特征在于公兔的飼養(yǎng)方法是在夏 天高溫飼養(yǎng)公兔,需對周邊環(huán)境、兔舍、飼養(yǎng)工具進(jìn)行消毒處理,公兔放在同一室內(nèi)單籠飼 養(yǎng),由專人飼喂,每天早晚各喂添加抗熱應(yīng)激添加劑的飼料1次,自由飲水,每天補充充足 的青草。
全文摘要
本發(fā)明公開了提高公兔生殖功能的抗熱應(yīng)激飼料添加劑,在推薦NRC(1977)成年兔維持需要量配制基礎(chǔ)飼糧飼料中,添加抗熱應(yīng)激添加劑,混合均勻,重量噸飼料添加抗熱應(yīng)激添加劑組份和重量為硫辛酸為100-800g、維生素E為100-600g、維生素C為100-600g和糖萜素為0-600g,結(jié)果表明該添加劑均能顯著提高精子活力、密度和降低畸形率(P<0.05),其中抗應(yīng)激試驗3在提高精子活力方面具有優(yōu)勢,抗應(yīng)激試驗2在提高精子密度方面也具有優(yōu)勢;三種添加劑均能提高顯著熱應(yīng)激公兔血清睪酮含量(P<0.05),而提高T3、皮質(zhì)醇含量方面差異不顯著(P>0.05)。
文檔編號A23K1/18GK101990994SQ201010543739
公開日2011年3月30日 申請日期2010年11月15日 優(yōu)先權(quán)日2010年11月15日
發(fā)明者卜澤明, 梁明振, 羅玉琴, 黃桂花 申請人:廣西大學(xué)
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