專利名稱：：一種促進(jìn)大花黃牡丹種子萌發(fā)的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種促進(jìn)大花黃牡丹種子萌發(fā)的方法。
背景技術(shù)：
：大花黃牡丹(尸aeo"i3Jwo7ow'i)是西藏特有的毛茛科(Ranunculacea)芍藥屬叢生灌木，僅分布于林芝八一鎮(zhèn)至米林一帶。大花黃牡丹株型高大，花大、黃色，具有很高的觀賞價(jià)值，是重要的遺傳育種資源；同時(shí)，根中含有丹皮酚，是傳統(tǒng)藏藥資源；因此，大花黃牡丹不僅具有很高的研究和保護(hù)價(jià)值，更是重要的經(jīng)濟(jì)植物資源。由于環(huán)境變遷和人為采掘，大花黃牡丹分布區(qū)域日益縮小，種群數(shù)量持續(xù)減少，處于瀕危狀態(tài)，被《中國物種紅色名錄》列為極危種。目前，由于大花黃牡丹種子獲取難度較大，一般繁殖方法需要2年以上方可出苗，且出苗率非常低，多數(shù)種子在長時(shí)間的播種和貯藏過程中失去活力，種子損失嚴(yán)重。關(guān)于大花黃牡丹種子休眠解除和育苗還沒有一個(gè)快速、高質(zhì)量的萌發(fā)方法。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種促進(jìn)大花黃牡丹種子萌發(fā)的方法。本發(fā)明所提供的促進(jìn)大花黃牡丹種子萌發(fā)的方法，包括如下步驟將大花黃牡丹種子先在15'C條件下進(jìn)行層積，至其胚根長度大于6cm后，再將其置于5'C條件下層積60-80天，得到萌發(fā)的種子。其中，所述層積的方法可以為將所述大花黃牡丹種子與層積基質(zhì)混合，置于透氣保濕裝置中；所述大花黃牡丹種子與所述層積基質(zhì)的質(zhì)量配比可以為大花黃牡丹種子層積基質(zhì)=1:1。所述層積基質(zhì)可以為含水量為200%-400%的苔蘚、含水量為40%—50%的珍珠巖和含水量為50%—70%的砂子中的至少一種；所述百分含量為質(zhì)量百分含量。所述透氣保濕裝置可以為聚乙烯塑料編織袋。所述苔蘚經(jīng)過滅菌處理。在所述方法中，在所述15'C層積前還包括如下步驟將所述大花黃牡丹種子置于4(TC水中浸種24小時(shí)，再將所述大花黃牡丹種子用10%的次氯酸鈉消毒10分鐘;所述百分含量為質(zhì)量百分含量。所述大花黃牡丹種子為當(dāng)年大花黃牡丹莢果將要開裂或半開裂、種子顏色由黃變褐或黑時(shí)的成熟種子。所述種子在采集后、所述層積處理之前常溫保持濕潤。所述方法還包括胚芽萌發(fā)的步驟；所述胚芽萌發(fā)的溫度可為10-25°C。所述胚芽萌發(fā)的溫度可為15-20°C。上述任一所述方法在培育大花黃牡丹中的應(yīng)用也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。本發(fā)明方法通過控制采種時(shí)間保證了種子的成熟程度；應(yīng)用清水浮選法選種保證了種子質(zhì)量和活力；溫水浸種，使種子充分吸漲；次氯酸鈉消毒，防止種子霉變;15t:和5。C一定時(shí)間段的變溫層積，有效地解除了大花黃牡丹種子上胚軸休眠，所用的層積基質(zhì)，具有易消毒、不易霉變、持水量大，適于保溫的特點(diǎn)，用雙層聚乙烯塑料編織袋包裝種子進(jìn)行層積，能有效減少水分喪失，并保證良好的透氣性。本發(fā)明方法能使種子出苗率上升到69.7%以上，出苗時(shí)間縮短l年，具有繁殖速度快、周期短、出苗率高的優(yōu)點(diǎn)。本發(fā)明方法克服了大花黃牡丹萌發(fā)時(shí)間長、萌發(fā)率低、出苗不整齊的問題，可有效地提高出苗整齊度和實(shí)生苗質(zhì)量，縮短苗木生產(chǎn)周期，將對(duì)保護(hù)高原野生瀕危物種、可持續(xù)開發(fā)優(yōu)良野生植物種質(zhì)資源、為醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)提供安全、穩(wěn)定的植物材料奠定技術(shù)基礎(chǔ)。圖1為不同低溫層積時(shí)間對(duì)種子萌發(fā)的影響。圖2為不同溫度對(duì)大花黃牡丹胚芽萌發(fā)的影響。圖3為不同暖層積溫度對(duì)胚根萌發(fā)長度的影響。圖4為大花黃牡丹上胚軸萌發(fā)狀況與溫度。圖5為2007年本發(fā)明方法處理大花黃牡丹種子得到幼苗與正常播種的容器。圖6為2007年本發(fā)明方法處理大花黃牡丹種子得到的幼苗與正常播種的種子。具體實(shí)施例方式下述實(shí)施例中所使用的實(shí)驗(yàn)方法如無特殊說明均為常規(guī)方法。實(shí)施例1、大花黃牡丹種子萌發(fā)一、選種本實(shí)施例中選取當(dāng)年的種子進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。當(dāng)大花黃牡丹莢果將要開裂或半開裂、種子已成熟、種子顏色由黃變褐或黑時(shí)，將種子取出，然后用清水浮選法去除雜質(zhì)和癟粒，選取健康成熟種子，種子凈度為100%，采用TTC法(氯化三苯基四氮唑)測(cè)定種子活力95y。以上，常溫保持種子濕潤。二、浸種消毒將經(jīng)步驟一選取的種子放置在40'C恒溫水浴箱中浸種24小時(shí)，濾干種子表面水分，浸泡在濃度為10%的次氯酸鈉(NaC10)溶液中消毒10分鐘，無菌水沖洗3-4次，陰干種子表面水分后備用。三、變溫層積將經(jīng)過12(TC高溫干燥消毒的苔蘚作為層積基質(zhì)，冷卻至室溫，加無菌水，使含水量保持在400%，將苔蘚與步驟二獲得的種子按l:l的質(zhì)量配比充分混合，裝入雙層聚乙烯塑料編織袋，按照下列步驟進(jìn)行變溫處理第一步胚根萌發(fā)分別進(jìn)行以下7種處理，每個(gè)處理重復(fù)三次，每個(gè)重復(fù)處理25粒種子。I:5。C恒溫處理；II:l(TC恒溫處理，III:15。C恒溫處理，IV:20。C恒溫處理，V:25X:恒溫處理，VI:5TV15。C晝夜變溫培養(yǎng)4周，之后在15'C條件下繼續(xù)恒溫處理，VII:5XVl5r晝夜變溫培養(yǎng)8周，之后在15。C條件下繼續(xù)恒溫處理。實(shí)驗(yàn)結(jié)果取三次重復(fù)的平均值。結(jié)果表明，15°0恒溫條件下暖層積30天胚根開始萌發(fā)，15'C層積處理90天后胚根萌發(fā)率可達(dá)85%(以胚根露出種皮2mm為萌發(fā)標(biāo)準(zhǔn))，其它各種處理需要的時(shí)間長且萌發(fā)率低于40%(表l)。胚根萌發(fā)率的計(jì)算公式為胚根萌發(fā)率=生出胚根的種子數(shù)目/進(jìn)行暖層積處理的種子總數(shù)。比較不同溫度和時(shí)間條件下胚根生長狀況。結(jié)果表明，10。C恒溫和15。C恒溫條件下層積60天胚根長度大于6cm的種子不足10%;15。C恒溫條件下層積90天后，胚根長度大于6cm的種子可達(dá)到58.5%;10'C恒溫條件下層積90天，胚根長度大于6cm的種子僅為12%(表2和圖3)。將15"C恒溫條件下，當(dāng)胚根長度大于6cm的種子達(dá)58.5。/。時(shí)，將胚根長度大于6cm的種子進(jìn)行下一步的破除胚芽休眠處理。表l、不同處理下種子胚根萌發(fā)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>*W:為變溫處理周數(shù)；A、B、C、D、E代表差異顯著性。字母不同，則差異顯著;字母相同，則差異不顯著。表2、不同處理下胚根萌發(fā)率及胚根長度變化<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>第二步破除胚芽休眠將按照步第一步所述方法所得到的種子(即15。C恒溫條件下暖層積90天、胚根長度大于6cm的種子)分別進(jìn)行5"C恒溫條件下低溫層積20、40、60、80天的不同處理，每個(gè)處理重復(fù)三次，每次重復(fù)處理25粒種子；層積結(jié)束后，將不同處理的種子取出，均在15。C、相對(duì)濕度為47%-50%的環(huán)境中培養(yǎng)12天，比較5。C低溫層積處理不同時(shí)間的胚芽萌發(fā)率。胚芽萌發(fā)率=胚芽萌發(fā)的種子數(shù)目/用于處理的種子總數(shù)。結(jié)果表明5'C低溫層積40天以內(nèi)的種子，其胚芽萌發(fā)率不足50%;低溫層積60-80天的種子，可以被完全解除上胚軸休眠，其胚芽萌發(fā)率達(dá)到最大值82%(圖1)。四、胚芽萌發(fā)最適溫度的選擇將上述經(jīng)過15'C恒溫暖層積90天和5'C低溫層積60天的種子，分別進(jìn)行5、10、15、20、25'C恒溫培養(yǎng)，培養(yǎng)環(huán)境的相對(duì)濕度為47%-50°%;培養(yǎng)12天后，統(tǒng)計(jì)各培養(yǎng)溫度下的胚芽萌發(fā)率，實(shí)驗(yàn)設(shè)三次重復(fù)，每次重復(fù)處理25粒種子。結(jié)果表明，12天后，除5'C條件下胚芽不萌發(fā)外，其余溫度(10'C、15°C、20°C、25°C)胚芽萌發(fā)率均為80%左右；15°C、20。C時(shí)，萌發(fā)勢(shì)高于其它溫度(圖2和圖4)。五、播種選經(jīng)過暖層積和低溫層積處理的25粒種子進(jìn)行盆播，盆播的方法為選擇排水良好、土質(zhì)疏松的栽培基質(zhì)，盆播覆土深度約1-1.5cm，在20。C、相對(duì)濕度為47%-50%的條件下進(jìn)行培養(yǎng)。同時(shí)以未經(jīng)變溫層積處理的種子作為對(duì)照。實(shí)驗(yàn)設(shè)三次重復(fù)，結(jié)果取其平均數(shù)。結(jié)果表明，15天后，經(jīng)變溫層積處理過的種子的成苗率為70%(圖5和圖6)。成苗率的計(jì)算公式為成苗率=成苗的種子數(shù)目/播種的種子總數(shù)。權(quán)利要求1、一種促進(jìn)大花黃牡丹種子萌發(fā)的方法，包括如下步驟將大花黃牡丹種子先在15℃條件下進(jìn)行層積，至其胚根長度大于6cm后，再將其置于5℃條件下層積60-80天，得到萌發(fā)的種子。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述層積的方法為將所述大花黃牡丹種子與層積基質(zhì)混合，置于透氣保濕容器中；所述大花黃牡丹種子與所述層積基質(zhì)的質(zhì)量配比為大花黃牡丹種子層積基質(zhì)=1:1。3、根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于所述層積基質(zhì)為含水量為200%-400%的苔蘚、含水量為40%—50%的珍珠巖和含水量為50%—70%的砂子中的至少一種；所述百分含量為質(zhì)量百分含量。4、根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的方法，其特征在于所述透氣保濕裝置為聚乙烯塑料編織袋。5、根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一所述的方法，其特征在于所述方法中，在所述15t:層積前還包括如下步驟將所述大花黃牡丹種子置于4(TC水中浸種24小時(shí)，再將所述大花黃牡丹種子用10%的次氯酸鈉消毒10分鐘；所述百分含量為質(zhì)量百分6、根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一所述的方法，其特征在于所述大花黃牡丹種子為當(dāng)年大花黃牡丹莢果將要開裂或半開裂、種子顏色由黃變褐或黑時(shí)的成熟種子。7、根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于所述種子在采集后、所述層積處理之前常溫保持濕潤。8、根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于所述方法還包括胚芽萌發(fā)的步驟；所述胚芽萌發(fā)的溫度為10-25°C。9、根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于所述胚芽萌發(fā)的溫度為15-20°C。10、權(quán)利要求1-9中任一所述方法在培育大花黃牡丹中的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明公開了一種促進(jìn)大花黃牡丹種子萌發(fā)的方法。本發(fā)明所提供的促進(jìn)大花黃牡丹種子萌發(fā)的方法包括如下步驟將大花黃牡丹種子先在15℃條件下進(jìn)行層積，至其胚根長度大于6cm后，再將其置于5℃條件下層積60-80天，得到萌發(fā)的種子。本發(fā)明方法克服了大花黃牡丹萌發(fā)時(shí)間長、萌發(fā)率低、出苗不整齊的問題。本發(fā)明方法能使種子出苗率上升到70％以上，出苗時(shí)間縮短1年，具有繁殖速度快、周期短、出苗率高的優(yōu)點(diǎn)。文檔編號(hào)A01C1/02GK101288360SQ200810114440公開日2008年10月22日申請(qǐng)日期2008年6月5日優(yōu)先權(quán)日2008年6月5日發(fā)明者志何,唐宇丹,涓姚,普布次仁,雷石申請(qǐng)人:中國科學(xué)院植物研究所