川烏飲片中含量的一測多評方法
【技術(shù)領(lǐng)域】：
[0001]本發(fā)明涉及化學(xué)檢驗領(lǐng)域和藥物分析技術(shù)領(lǐng)域，特別是川烏飲片中含量的一測多 評方法。
【背景技術(shù)】：
[0002] 川烏飲片中含有三種主要成份:新烏頭堿、次烏頭堿和新烏頭堿。目前的檢測方法 需要新烏頭堿、次烏頭堿和新烏頭堿這三種對照品，由于新烏頭堿、次烏頭堿和新烏頭堿這 三種對照品均為劇毒對照品，國家嚴(yán)格管控，單價高，且市場常出現(xiàn)缺貨情況，給川烏飲片 檢測帶來困惑。

【發(fā)明內(nèi)容】
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[0003] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于針對現(xiàn)有川烏飲片的含量測定方法所存在的問 題而提供一種川烏飲片中含量的一測多評方法，該方法的特點是采用高效液相色譜法，根 據(jù)新烏頭堿、次烏頭堿、烏頭堿三者對照品之間的相關(guān)性，只通過測定次烏頭堿對照品，來 評價檢測川烏飲片中新烏頭堿、次烏頭堿、烏頭堿的含量，以降低對照品使用成本。
[0004] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題可以通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn)：
[0005] -種川烏飲片中含量的一測多評方法，包括如下步驟：
[0006] (1)色譜條件建立與系統(tǒng)適應(yīng)性步驟：
[0007] 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以質(zhì)量比為25:15生物乙腈一四氫呋喃溶液 為流動相A，以0. lmol/L醋酸銨溶液為流動相B，按表1中的規(guī)定進(jìn)行梯度洗脫;檢測波長為 235nm，理論板數(shù)按新烏頭堿峰計算應(yīng)不低于2000;
[0008] 表 1
[0011] (2)對照品溶液制備步驟
[0012] 精密稱取次烏頭堿對照品15mg、置100ml量瓶中，加質(zhì)量比為1:1的異丙醇-三氯甲 烷混合液至刻度，搖勻，制成每lml含次烏頭堿0.15mg的對照品溶液；
[0013] (3)供試品溶液制備步驟
[0014] 將川烏飲片粉碎后過三號篩制成取川烏飲片粉末，精密稱定川烏飲片粉末2g，置 具塞錐形瓶中，加氨試液3ml，加入質(zhì)量比為1:1的異丙醇-三氯甲烷混合液50ml，稱定重量， 超聲處理30分鐘后放冷，再稱定重量，用質(zhì)量比為1:1的異丙醇-三氯甲烷混合液補足減失 的重量，搖勻，濾過;精密量取續(xù)濾液25ml，40°C以下減壓回收溶劑至干，殘渣精密加入質(zhì)量 比為1:1的異丙醇-三氯甲烷混合液3ml溶解，密塞，搖勻，用0.45μπι濾膜濾過，得供試品溶 液；
[0015] ⑷測定步驟
[0016]分別精密吸取步驟(2)制備的對照品溶液與步驟(3)制備的供試品溶液各10μ1注 入液相色譜儀，測定；以次烏頭堿對照品為參照，以其相應(yīng)的峰為S峰，計算新烏頭堿、烏頭 堿的相對保留時間，其相對保留時間應(yīng)在規(guī)定值的±5%范圍之內(nèi)；以次烏頭堿的峰面積為 對照，分別乘以表2中的校正因子，計算新烏頭堿、次烏頭堿、烏頭堿的含量，具體計算公式 如下
[0021] 川烏飲片相對保留時間及校正因子見如下表2
[0022] 表 2
[0024] 。
[0025] 在本發(fā)明的一個優(yōu)選實施例中，所述步驟（3)中的超聲處理的條件為超聲功率 300W，頻率40kHz，水溫25 °C以下。
[0026] 本發(fā)明是在同一色譜條件下實現(xiàn)了一測多評的定量分析，即節(jié)約了成本、時間、物 力，實現(xiàn)了方法操作簡便、快捷，檢驗儀器簡單常見，又提高了安全性，降低了安全隱患，并 且結(jié)果準(zhǔn)確、可靠、穩(wěn)定性良好。
[0027] 本發(fā)明根據(jù)"一測多評"原則對原藥典方法進(jìn)行研究并改進(jìn)。新方法有效的控制了 物料質(zhì)量，減少了管理成本和對人員危害，降低檢驗成本。
【附圖說明】
[0028] 圖1為次烏頭堿對照品溶液色譜圖。
[0029] 圖2為原色譜條件對照品溶液色譜圖。
[0030] 圖3-1至圖3-3為供試品溶液色譜圖。
【具體實施方式】
[0031] 本發(fā)明川烏飲片含量測定方法的實施例，對其中的次烏頭堿對照品含量進(jìn)行檢 測，通過新烏頭堿、次烏頭堿、烏頭堿三者之間的相關(guān)系數(shù)，得出含量結(jié)果，并將結(jié)果與原方 法進(jìn)行比對：
[0032] 實施例1
[0033]按照《中國藥典》2010版一部附錄VD高效液相色譜法測定。
[0034]實驗方法與過程：
[0035] 1.儀器與試劑
[0036]色譜儀:1100型高效液相色譜儀(廠家:安捷倫）
[0037]分析天平:XS105型（廠家:梅特勒）
[0038] 2.色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性
[0039] 色譜條件建立與系統(tǒng)適應(yīng)性步驟：
[0040] 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈一四氫呋喃（25:15)為流動相A，以 0. lmol/L醋酸銨溶液(每1000ml加冰醋酸0.5ml)為流動相B，按下表3中的規(guī)定進(jìn)行梯度洗 脫;檢測波長為235nm，理論板數(shù)按新烏頭堿峰計算應(yīng)不低于2000。
[0041] 表 3
[0043] 3.對照品溶液制備
[0044] 精密稱取次烏頭堿對照品15mg、置100ml量瓶中，加異丙醇-三氯甲烷（1:1)混合液 至刻度，搖勻，制成每lml含次烏頭堿0.18mg的對照品溶液。
[0045] 4.供試品溶液制備：
[0046]取本品粉末(過三號篩）約2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加氨試液3ml，精密加入 異丙醇-乙酸乙酯（1:1)混合溶液50ml，稱定重量，超聲處理（功率300W，頻率40kHz ;水溫25 °C以下）30分鐘，放冷，再稱定重量，用異丙醇-乙酸乙酯（1:1)混合溶液補足減失的重量，搖 勻，濾過。精密量取續(xù)濾液25ml，40°C以下減壓回收溶劑至干，殘渣精密加入異丙醇-三氯甲 烷(1:1)混合液3ml溶解，密塞，搖勻，用濾膜(0.45μπι)濾過，得供試品溶液。
[0047] 5.測定法：
[0048]分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μ1，注入液相色譜儀，測定，所得到。 以次烏頭堿對照品為參照，以其相應(yīng)的峰為S峰，計算新烏頭堿、烏頭堿的相對保留時間，其 相對保留時間應(yīng)在規(guī)定值的±5%范圍之內(nèi)。
[0049]以次烏頭堿的峰面積為對照，分別乘以表4中的校正因子，計算新烏頭堿、次烏頭 堿、烏頭堿的含量，結(jié)果見表5,具體計算公式如下
[0058]結(jié)果表明，根據(jù)川烏飲片相對保留時間及校正因子計算出川烏飲片含量結(jié)果與原 藥典方法相對平均偏差在±5%范圍內(nèi)，滿足"一測多評"相關(guān)性要求，證明用新方法測定含 量數(shù)據(jù)準(zhǔn)確、可靠。
[0059]當(dāng)然，上述說明并非對發(fā)明的限制，本發(fā)明也并不限于上述舉例，本技術(shù)領(lǐng)域的普 通技術(shù)人員，在本發(fā)明的實質(zhì)范圍內(nèi)作出的變化、改型、添加或替換，也應(yīng)屬于本發(fā)明的保 護(hù)范圍。
【主權(quán)項】
1. 一種川烏飲片中含量的一測多評方法，其特征在于，包括如下步驟： (1)色譜條件建立與系統(tǒng)適應(yīng)性步驟 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以質(zhì)量比為25:15生物乙腈一四氫呋喃溶液為流 動相A，以O(shè).lmol/L醋酸銨溶液為流動相B，按表1中的規(guī)定進(jìn)行梯度洗脫；檢測波長為 235nm，理論板數(shù)按新烏頭堿峰計算應(yīng)不低于2000; 豐1精密稱取次烏頭堿對照品15mg、置100ml量瓶中，加質(zhì)量比為1:1的異丙醇-三氯甲烷混 合液至刻度，搖勻，制成每lml含次烏頭堿0.15mg的對照品溶液； (3) 供試品溶液制備步驟 將川烏飲片粉碎后過三號篩制成取川烏飲片粉末，精密稱定川烏飲片粉末2g，置具塞 錐形瓶中，加氨試液3ml，加入質(zhì)量比為1:1的異丙醇-三氯甲烷混合液50ml，稱定重量，超聲 處理30分鐘后放冷，再稱定重量，用質(zhì)量比為1:1的異丙醇-三氯甲烷混合液補足減失的重 量，搖勻，濾過;精密量取續(xù)濾液25ml，40°C以下減壓回收溶劑至干，殘渣精密加入質(zhì)量比為 1:1的異丙醇-三氯甲烷混合液3ml溶解，密塞，搖勻，用0.45μπι濾膜濾過，得供試品溶液； (4) 測定步驟 分別精密吸取步驟(2)制備的對照品溶液與步驟(3)制備的供試品溶液各10μ1注入液 相色譜儀，測定；以次烏頭堿對照品為參照，以其相應(yīng)的峰為S峰，計算新烏頭堿、烏頭堿的 相對保留時間，其相對保留時間應(yīng)在規(guī)定值的±5%范圍之內(nèi)；以次烏頭堿的峰面積為對 照，分別乘以表2中的校正因子，計算新烏頭堿、次烏頭堿、烏頭堿的含量，具體計算公式如 下 |片鞏帕-\ ' - ^ r 川烏飲片相對保留時間及校正因子見如下表2 表2ο2.如權(quán)利要求1所述的一種川烏飲片中含量的一測多評方法，其特征在于，所述步驟 (3)中的超聲處理的條件為超聲功率300W，頻率40kHz，水溫25°C以下。
【專利摘要】本發(fā)明公開的一種川烏飲片中含量的一測多評方法，其包括如下步驟：(1)色譜條件建立與系統(tǒng)適應(yīng)性步驟；(2)對照品溶液制備步驟；(3)供試品溶液制備步驟；(4)測定步驟。本發(fā)明是在同一色譜條件下實現(xiàn)了一測多評的定量分析，即節(jié)約了成本、時間、物力，實現(xiàn)了方法操作簡便、快捷，檢驗儀器簡單常見，又提高了安全性，降低了安全隱患，并且結(jié)果準(zhǔn)確、可靠、穩(wěn)定性良好。
【IPC分類】G01N30/02
【公開號】CN105606725
【申請?zhí)枴緾N201510979758
【發(fā)明人】葉湘武, 蔡京, 薛亮, 錢正祥
【申請人】上海景峰制藥有限公司
【公開日】2016年5月25日
【申請日】2015年12月22日