一種dl-高半胱氨酸可視識別的新方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及使用一類鉗型有機鋅金屬絡(luò)合物在DL-高半胱氨酸的同時存在下，通過選擇性金屬水凝膠再形成實現(xiàn)了對DL-高半胱氨酸的裸眼可視識別的新方法。該鉗型有機鋅金屬絡(luò)合物1，表達式為NNN-Zn-Cl2,NNN表示與鋅配位的三連吡啶配體。鉗型有機鋅金屬絡(luò)合物1與兩倍摩爾當(dāng)量的DL-高半胱氨酸合用時，經(jīng)過一系列的實驗操作，能夠重新形成金屬水凝膠；鉗型有機鋅金屬絡(luò)合物1與兩倍摩爾當(dāng)量的L-半胱氨酸或谷胱甘肽合用時，經(jīng)過一系列的實驗操作，只有白色沉淀生成，并沒有金屬水凝膠形成。本發(fā)明利用鉗型有機鋅金屬絡(luò)合物1及兩倍摩爾當(dāng)量的DL-高半胱氨酸同時存在時，經(jīng)過上述一系列的制膠實驗操作，通過選擇性金屬水凝膠再形成實現(xiàn)了對DL-高半胱氨酸與L-半胱氨酸或谷胱甘肽的快速、簡便、裸眼可視識別。
【專利說明】—種DL-高半胱氨酸可視識別的新方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于生物小分子可視識別應(yīng)用【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及使用一類鉗型有機鋅金屬絡(luò)合物在DL-高半胱氨酸的同時存在下，通過選擇性金屬水凝膠再形成實現(xiàn)了對DL-高半胱氨酸的裸眼可視識別的新方法。
技術(shù)背景
[0002]DL-高半胱氨酸和L-半胱氨酸是生物體內(nèi)僅有的兩種含有巰基的氨基酸，它們都具有非常重要的生理功能。例如，DL-高半胱氨酸在生物體內(nèi)的總濃度是疾病的重要標志，在臨床上，高半胱氨酸已被公認作為心血管疾病，特別是冠狀動脈粥樣硬化和心肌梗塞的危險指標，它的濃度升高程度與疾病的危險性成正比。而L-半胱氨酸，作為一種主要的抗氧化劑，參與生物體內(nèi)細胞的還原過程，具有抗衰老，調(diào)節(jié)肝臟內(nèi)磷脂的代謝和保護肝臟細胞免受毒物損害等生理功能。L-半胱氨酸在生物體濃度的過低則會引起兒童生長緩慢，脫發(fā)，消瘦，肝損害等綜合癥。除此之外，作為由L-半胱氨酸和其他氨基酸結(jié)合形成的一種含有巰基的三肽，谷胱甘肽廣泛也存在于生物體內(nèi)，具有抗氧化，抗癌，整合解毒等作用，提高生物體的免疫能力?；谝陨希覀兛梢园l(fā)現(xiàn)，這些巰基生物小分子各自在生物體內(nèi)的濃度要求是不一樣的，因而，分別檢測識別這些含巰基生物小分子，特別是DL-高半胱氨酸，具有非常重要的臨床和理論研究意義。然而，由于DL-高半胱氨酸和L-半胱氨酸，谷胱甘肽具有類似的結(jié)構(gòu)式(圖1)，如何快速、簡單的從這三種結(jié)構(gòu)類似的化合物中識別出DL-高半胱氨酸，則是一項非常具有挑戰(zhàn)性的工作。目前用于檢測識別DL-高半胱氨酸的方法主要有紫外-可見吸收光譜，熒光光譜，色譜分離，質(zhì)譜，毛細管電泳，免疫分析等方法。然而，這些方法都需要使用精密的大型儀器及繁瑣的檢測步驟。除此之外，還沒有簡單、直接、快速、有效地識別DL-高半胱氨酸的方法，特別是裸眼可視識別的相關(guān)報道。所以如何快速簡便識別DL-高半胱氨酸有著非常重要的理論和實際應(yīng)用意義。就目前現(xiàn)狀而言，對于生物小分子化合物進行快速簡便的裸眼可視識別仍是分析化學(xué)，生物化學(xué)的難題之一。
[0003]
【權(quán)利要求】
1.DL-高半胱氨酸可視識別的新方法，其特征在于具體步驟如下: (1)在一個5mL白色樣品瓶中，依次加入10 mg鉗型有機鋅金屬絡(luò)合物、兩倍摩爾當(dāng)量的單一種類的L-半胱氨酸，DL-高半胱氨酸或谷胱甘肽，以及2.5 mL水，樣品瓶用聚氟乙烯的蓋子蓋好密封后用熱風(fēng)槍加熱；當(dāng)里面的溶液變得透明，即鉗型有機鋅金屬絡(luò)合物完全溶解時停止加熱；將樣品瓶冷卻靜置一段時間至溶液凝聚形成穩(wěn)定的水凝膠； (2)再向樣品瓶里加入0.5摩爾當(dāng)量的乙二胺四二酸二鈉，蓋好聚氟乙烯的蓋子后用熱風(fēng)槍加熱至膠體變?yōu)橥该魅芤簳r停止加熱，將樣品瓶冷卻靜置一段時間后，經(jīng)樣品瓶倒置實驗發(fā)現(xiàn)樣品瓶里凝膠塌陷生成了清亮的溶液； (3)再次向樣品瓶中加入與0.5摩爾當(dāng)量的無水氯化鋅，再次用聚氟乙烯的蓋子蓋好樣品瓶后，用熱風(fēng)槍加熱樣品瓶；當(dāng)里面的溶液變得透明時停止加熱，冷卻靜置一段時間后，將樣品瓶倒置，觀察樣品瓶里是否有金屬水凝膠再次形成； (4)鉗型有機鋅金屬絡(luò)合物與兩倍摩爾當(dāng)量的DL-高半胱氨酸同時存在時，經(jīng)過上述一系列的實驗操作，能夠重新形成穩(wěn)定的金屬水凝膠；而與兩倍摩爾當(dāng)量的L-半胱氨酸或谷胱甘肽同時存在時，經(jīng)過上述一系列的實驗操作，只有能夠生成白色沉淀，并沒有觀察到金屬水凝膠形成； 其中，所述的鉗型有機鋅金屬絡(luò)合物為結(jié)構(gòu)式如下:
【文檔編號】G01N33/68GK103901211SQ201410090374
【公開日】2014年7月2日 申請日期:2014年3月13日 優(yōu)先權(quán)日:2014年3月13日
【發(fā)明者】涂濤, 房微魏, 劉叢, 朱海波, 陸正未 申請人:復(fù)旦大學(xué)