專利名稱：利用CT-proET-1與NT-proBNP的組合進(jìn)行急性冠狀動(dòng)脈綜合征的診斷和風(fēng)險(xiǎn)分層的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種對(duì)急性冠狀動(dòng)脈綜合征(ACS)，特別是急性心肌梗塞(AMI)和心絞痛(AP)和/或心肌梗塞后(post-AMI(急性心肌梗塞后))的診斷和風(fēng)險(xiǎn)分層的方法，所述方法對(duì)C末端內(nèi)皮素原(CT-proET-1)或其片段及肽段，與NT-proBNP的組合進(jìn)行測(cè)定。
背景技術(shù)：
在心臟病領(lǐng)域，無(wú)論對(duì)于有癥狀患者還是無(wú)癥狀患者，風(fēng)險(xiǎn)分層的意義都越來(lái)越重要。特別是在急性冠狀動(dòng)脈綜合征(ACS)以及急性心肌梗塞(AMI)和心絞痛(AP)以及心肌梗塞后(post-AMI)領(lǐng)域非常需要一種合適的風(fēng)險(xiǎn)分層方法。
為進(jìn)行合適的治療，需要對(duì)急性冠狀動(dòng)脈綜合征患者在急診收治時(shí)就作早期診斷和區(qū)分，以便在必要時(shí)作出臨床決策。由于急性冠狀動(dòng)脈綜合征具有非特異性癥狀(胸痛)，所以除了要能將它與其他疾病進(jìn)行區(qū)分和界定，還要能夠?qū)λM(jìn)行識(shí)別。對(duì)于心肌梗塞后的情況同樣如此。
在現(xiàn)有技術(shù)中，生物化學(xué)標(biāo)志物，特別是經(jīng)典的標(biāo)志物如心肌肌鈣蛋白、肌紅蛋白和肌酸激酶同工酶(CK-MB)量已用于心肌梗塞的診斷(Katus，H.A.；Remppis，A.；Scheffold，T.；Diederich，K.W.und Kuebler，W.(1991)Intracellular compartmentation ofcardiac troponin T and its release kinetics in patients withreperfused and nonreperfused myocardial infarction，Am JCardiol 67(16)1360-1367)。在心臟病診斷中，B型鈉尿肽(BNP)包括B型鈉尿肽原(Pro-BNP)以及N末端B型鈉尿肽原(NT-ProBNP)(EP1363128B1，EP1666881A2)被證明是另外一種有效的生物化學(xué)標(biāo)志物。
在EP 1564558 B1中描述了用具有前內(nèi)皮素原(SEQ ID No.1)的氨基酸序列93-212或者168-212的C末端內(nèi)皮素原片段(CT-proET-1)間接測(cè)定內(nèi)皮素-1或者大內(nèi)皮素-1的含量的方法診斷心臟循環(huán)疾病。另外，從EP 1564558 B1中可以得知，心臟指標(biāo)諸如ANP、BNP以及proBNP可以加入到多參數(shù)診斷中以進(jìn)行心臟診斷。
發(fā)明內(nèi)容
然而，利用先前所知標(biāo)志物的已知診斷方法的不利之處在于，其未充分實(shí)現(xiàn)對(duì)危險(xiǎn)患者的早期和完全確定，因而無(wú)法充分地進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)分層。因此，本發(fā)明基于的目的是開(kāi)發(fā)出對(duì)急性冠狀動(dòng)脈綜合征以及心肌梗塞后進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)分層的方法，以便能夠改進(jìn)對(duì)危險(xiǎn)患者的確定。
另外的不利之處在于，在現(xiàn)有技術(shù)中，標(biāo)志物通常不能達(dá)到足夠的敏感性和/或特異性。
因此另一個(gè)目的是，提供一種對(duì)急性冠狀動(dòng)脈綜合征以及心肌梗塞后進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)分層的方法，所述方法在進(jìn)行體外診斷中至少有一種標(biāo)志物或一種標(biāo)志物組合具有足夠的靈敏度和特異性。
因此，本發(fā)明的目的是提供一種急性冠狀動(dòng)脈綜合征以及心肌梗塞后的診斷和/或風(fēng)險(xiǎn)分層的方法。
所述目的通過(guò)對(duì)急性冠狀動(dòng)脈綜合征以及心肌梗塞后的診斷和/或風(fēng)險(xiǎn)分層方法得以實(shí)現(xiàn)，其中對(duì)具有游離片段(SEQ ID No.2和/或SEQ ID No.3)的CT-proET-1(簡(jiǎn)稱CT-proET-1)或其片段及肽段與NT-proBNP(SEQ ID No.4)的組合進(jìn)行測(cè)定(以下稱為根據(jù)本發(fā)明的方法)。
在對(duì)急性冠狀動(dòng)脈綜合征以及心肌梗塞后的診斷中，CT-proET-1或其片段及肽段聯(lián)合NT-proBNP以令人意外的方式顯示了高度的敏感性及特異性(見(jiàn)實(shí)施例及附圖)。
術(shù)語(yǔ)“急性冠狀動(dòng)脈綜合征”包括對(duì)生命有直接威脅的冠心病的不同階段。尤其涉及到急診醫(yī)學(xué)，更確切的說(shuō)是急性心臟梗塞和/或心絞痛以及心性猝死。除了根據(jù)WHO標(biāo)準(zhǔn)所定義的急性心臟梗塞(WHO(1979)Nomenclature and criteria for diagnosis of ischemicheart disease.Report of the Joint International Society andFederation of Cardiology/World Health Organization task forceon standardization of clinical nomenclature，Circulation 59(3)607-609)即伴隨有ST段上移和/或心肌酶升高、急性的、持續(xù)超過(guò)20分鐘的胸痛之外，在本發(fā)明的范圍內(nèi)“急性冠狀動(dòng)脈綜合征”也包括不穩(wěn)定型心絞痛(AP)(Hamm CWLeitlinienAkutesKoronarsyndrom(ACS)-Teil 1ACS ohne persistieende ST-Hebung.Z Kardiol(2004)9372-90；還參見(jiàn)Pschyrembel，De Gruyter，Berlin 2004)。在本發(fā)明的范圍之內(nèi)，“處于心肌梗塞后的患者的不利的(負(fù)面的)結(jié)果”特別是指進(jìn)一步的(后續(xù))心肌梗塞、心衰竭或者死亡，或者指患者預(yù)后的其他惡化情況。
在本發(fā)明的范圍內(nèi)，“心肌梗塞”(心梗，AMI(急性心肌梗塞))是指急性的和威脅生命的心臟疾病，其中部分心臟肌肉(心肌)由于供血受阻(缺血)長(zhǎng)達(dá)20分鐘以上(通常情況)而出現(xiàn)壞死或組織壞死(梗死)。心肌梗塞的主要癥狀表現(xiàn)為在胸部突然發(fā)生疼痛(胸痛)，且通常為持續(xù)20分鐘以上的劇烈疼痛，這種疼痛可能會(huì)向肩部、臂部、下頜及上腹部放射，同時(shí)可能伴隨有出汗、惡心以及可能的嘔吐。心肌梗塞的后果可能是心臟衰竭。
術(shù)語(yǔ)“心肌梗塞后”是指，患者過(guò)去罹患過(guò)心肌梗塞，即，例如患者遭受過(guò)超過(guò)1小時(shí)，特別是20小時(shí)，尤其是1-5天或者3-5天的心肌梗塞之苦，而現(xiàn)在處于預(yù)后(之后)階段且無(wú)直接的致命的后果，但是可以間接和直接預(yù)期進(jìn)一步的不利事件。
此外，上述所有適應(yīng)癥都在例如Pschyrembel，De Gruyter，Berlin2004中描述。
根據(jù)本發(fā)明，術(shù)語(yǔ)“風(fēng)險(xiǎn)分層”包括發(fā)現(xiàn)預(yù)后較差的患者，尤其是急救患者和危險(xiǎn)患者，以便對(duì)急性冠狀動(dòng)脈綜合征，特別是心肌梗塞、心絞痛和/或心肌梗塞后進(jìn)行更強(qiáng)化的診斷和/或治療/療法，從而使得可能獲得最有利的治療進(jìn)展。根據(jù)本發(fā)明所述的風(fēng)險(xiǎn)分層能夠帶來(lái)有效的治療方法，如對(duì)急性冠狀動(dòng)脈綜合征使用經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入治療以及新的藥物。
由此本發(fā)明同樣涉及對(duì)在急性冠狀動(dòng)脈綜合征，特別是心肌梗塞、心絞痛和/或心肌梗塞后方面的高危和/或預(yù)后不良的患者的識(shí)別，且在有癥狀的和/或無(wú)癥狀的患者，特別是急救患者的情形下。
特別有利的是，尤其是在急診和/或重癥監(jiān)護(hù)醫(yī)學(xué)的情況下，借助于根據(jù)本發(fā)明的方法可以實(shí)現(xiàn)可靠的分層。因此，根據(jù)本發(fā)明的方法使得能夠帶來(lái)快速的療效以及避免死亡的臨床決策成為可能。這類臨床決策同樣包括借助用于急性冠狀動(dòng)脈綜合征，特別是心肌梗塞(AMI)和心絞痛(AP)和/或心肌梗塞后的治療或療法的藥物的后續(xù)治療。
由此，本發(fā)明同樣涉及一種對(duì)患有急性冠狀動(dòng)脈綜合征和/或心肌梗塞后的患者進(jìn)行診斷和風(fēng)險(xiǎn)分層以進(jìn)行臨床決策的方法，如利用藥物的后續(xù)治療和療法，特別是在時(shí)間緊迫的重癥監(jiān)護(hù)醫(yī)學(xué)和急診醫(yī)學(xué)，包括決定患者住院。
根據(jù)本發(fā)明的方法的另一種優(yōu)選實(shí)施方式是對(duì)急性冠狀動(dòng)脈綜合征，特別是心肌梗塞(AMI)和心絞痛(AP)以及心肌梗塞后的治療指導(dǎo)(Therapiesteuerung)。
在根據(jù)本發(fā)明所述方法的進(jìn)一步優(yōu)選實(shí)施方式中，進(jìn)行診斷和/或風(fēng)險(xiǎn)分層，用于預(yù)后(預(yù)測(cè))、鑒別診斷性早期識(shí)別和識(shí)別、嚴(yán)重程度的評(píng)價(jià)以及心功能不全伴隨治療的進(jìn)程評(píng)估。
根據(jù)本發(fā)明所述方法的另外一種優(yōu)選實(shí)施方式是對(duì)急性冠狀動(dòng)脈綜合征或者心肌梗塞或心絞痛和/或心肌梗塞后進(jìn)行體外診斷用于早期診斷或鑒別診斷或預(yù)后，其中，對(duì)受試患者進(jìn)行標(biāo)志物CT-proET-1或其片段及肽段與NT-proBNP的組合的測(cè)定。
此外本發(fā)明涉及一種對(duì)急性冠狀動(dòng)脈綜合征進(jìn)行診斷和風(fēng)險(xiǎn)分層的方法，或者涉及對(duì)急性冠狀動(dòng)脈綜合征，特別是心肌梗塞或心絞痛和/或心肌梗塞后按照上述實(shí)施方式之一進(jìn)行早期診斷或鑒別診斷或預(yù)后的方法，其中在癥狀出現(xiàn)以后CT-proET-1或其片段及肽段與NT-proBNP組合對(duì)所述實(shí)施方式中的診斷和/或風(fēng)險(xiǎn)分層的表現(xiàn)出最大敏感性和特征性的甄別閾(閾值)是CT-proET-1為80-150pmol/L，特別是90-130pmol/L，尤其是為109.5pmol/L以及NT-proBNP為750-1100pmol/L，特別是800-950pmol/L，尤其是827.2pmol/L(見(jiàn)圖3和圖4)。
在此基礎(chǔ)上根據(jù)本發(fā)明所述的方法具有敏感性和特異性上的優(yōu)勢(shì)。
在本發(fā)明方法的一個(gè)實(shí)施方式中，從受試患者采集體液，特別是血液，任選全血或血清，并且在體外/離體(即在人體或動(dòng)物體外)進(jìn)行診斷。根據(jù)對(duì)標(biāo)志物CT-proET-1或其片段及肽段與NT-proBNP組合的測(cè)定可獲得對(duì)急性冠狀動(dòng)脈綜合征、心肌梗塞和心絞痛和/或心肌梗塞后的高度敏感性和特異性，并可以根據(jù)在至少一個(gè)患者樣本中的存在量進(jìn)行診斷和風(fēng)險(xiǎn)分層。
在本發(fā)明的范圍，“CT-proET-1”是一種人類蛋白質(zhì)或多肽，它們可以從前內(nèi)皮素原獲得，在前內(nèi)皮素原(SEQ ID No.1)的范圍內(nèi)包括含有氨基酸93-212(129AS，SEQ ID No.2ALENLLPT KATDRENRCQCASQKDKKCW NFCQAGKELR AEDIMEKDWN NHKKGKDCSK LGKKCIYQQLVRGRKIRRSS EEHLRQTRSE TMRNSVKSSF HDPKLKGKPS RERYVTHNRA HW)或含有氨基酸168-212(44AS，SEQ ID No.3RSS EEHLRQTRSETMRNSVKSSF HDPKLKGKPS RERYVTHNRA HW，見(jiàn)圖1)的游離片段以及從中可分別獲得的片段和肽段。此外，根據(jù)本發(fā)明的這些多肽可以具有翻譯后修飾，例如乙二醇化、脂質(zhì)化(類脂化)或者衍生化。
在本發(fā)明的范圍內(nèi)，“NT-proBNP”是B型鈉尿肽的N末端激素原，一種具有氨基酸序列SEQ ID No.4(76 ASHPLG SPGSASDLETSGLQEQRHNL QGKLSELQVE QTSLEPLQES PRPTGVWKSR EVATEGIRGHRKMVLYTLRA PR)的人類蛋白質(zhì)或者多肽。
在另一種實(shí)施方式中，對(duì)CT-proET-1或其片段及肽段與NT-proBNP組合的測(cè)定可以與額外的其他標(biāo)志物一起進(jìn)行，更確切的說(shuō)是能夠指示急性冠狀動(dòng)脈綜合征，特別是心肌梗塞或心絞痛以及心肌梗塞后的這種標(biāo)志物。
由此，本發(fā)明涉及根據(jù)本發(fā)明方法的這樣的實(shí)施方式，其中除本發(fā)明的組合以外對(duì)受試患者進(jìn)行額外測(cè)定至少一個(gè)選自下列的其它標(biāo)志物炎癥標(biāo)志物、心血管標(biāo)志物、神經(jīng)激素標(biāo)志物或缺血性標(biāo)志物。根據(jù)本發(fā)明，炎癥標(biāo)志物可以選自下列至少一種標(biāo)志物C-反應(yīng)蛋白(CRP)，細(xì)胞因子(如TNF-α)，白細(xì)胞介素(如IL-6)，降鈣素原(1-116，3-116)和粘附分子(如VCAM(血管細(xì)胞粘附分子)或者ICAM(細(xì)胞間粘附分子))；且心血管標(biāo)志物，特別是指示心肌組織壞死的標(biāo)志物和影響血壓的標(biāo)志物，選自下列至少一種標(biāo)志物肌酸激酶，肌紅蛋白，髓過(guò)氧化物酶，其他鈉尿蛋白，特別是ANP(或ANF)、proANP、NT-proANP、BNP、proBNP或者其它們的序列段，心肌肌鈣蛋白，CRP。此外，還可以是調(diào)節(jié)循環(huán)的激素(原)，特別是如胃泌素釋放肽原(proGRP)、瘦蛋白原、神經(jīng)肽Y原、生長(zhǎng)抑素原、神經(jīng)肽YY原、阿黑皮素原或腎上腺髓質(zhì)素原(proADM)或它們的序列段。
缺血性標(biāo)志物可以選自下列至少一種標(biāo)志物肌鈣蛋白I和T、CK-MB。此外，神經(jīng)激素標(biāo)志物可以是至少一種其它的鈉尿蛋白，特別是ANP(或ANF)、proANP、NT-proANP、BNP、proBNP或者它們的序列段。
在本發(fā)明的進(jìn)一步實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的方法可以借助平行或同時(shí)測(cè)定標(biāo)志物而進(jìn)行(例如，用96孔或更多孔的多孔滴定板)，其中該測(cè)定對(duì)至少一個(gè)患者樣本進(jìn)行。
此外，本發(fā)明所述的方法及其測(cè)定可以借助自動(dòng)分析儀，特別是借助Kryptor(http://www.kryptor.net/)進(jìn)行。
在另一實(shí)施方式中，本發(fā)明所述的方法及其測(cè)定可以通過(guò)一種無(wú)論是單參數(shù)還是多參數(shù)測(cè)定的快速檢驗(yàn)進(jìn)行(例如側(cè)流檢驗(yàn)(lateral-flow Test)或床旁檢驗(yàn)(Point-of Care))。另一種尤其優(yōu)選的實(shí)施方式是自測(cè)或者適合于急救診斷的儀器。
此外本發(fā)明涉及CT-proET-1或其片段及肽段與NT-proBNP組合用于急性冠狀動(dòng)脈綜合征、心肌梗塞或者心絞痛和/或心肌梗塞后的風(fēng)險(xiǎn)分層，和/或用于體外診斷以對(duì)急性冠狀動(dòng)脈綜合征、心肌梗塞或者心絞痛和/或心肌梗塞后早期診斷或鑒別診斷或預(yù)后的用途。
另一目的是提供相應(yīng)的診斷設(shè)備或應(yīng)用所述設(shè)備實(shí)施本發(fā)明所述的方法。
在本發(fā)明的范圍內(nèi)，這種診斷設(shè)備，特別是陣列設(shè)備或檢驗(yàn)設(shè)備(例如免疫分析、ELISA等)，廣義上理解為用于實(shí)施根據(jù)本發(fā)明方法的設(shè)備。
此外本發(fā)明還涉及用于急性冠狀動(dòng)脈綜合征、心肌梗塞和/或心絞痛和/或心肌梗塞后的診斷和風(fēng)險(xiǎn)分層的、包含測(cè)定CT-proET-1或其片段及肽段與NT-proBNP的組合以及任選地上述其它標(biāo)志物的檢測(cè)試劑的試劑盒。這種檢測(cè)試劑包括例如抗體等。
下面結(jié)合下列實(shí)施例和附圖對(duì)本發(fā)明進(jìn)行更詳細(xì)的解釋，但本發(fā)明不限于這些實(shí)施例和附圖。
具體實(shí)施例方式 實(shí)施例1 983名由于出現(xiàn)與心肌梗塞有關(guān)的胸痛主要癥狀而被醫(yī)院的急診部門(mén)收治的患者被采集血樣。
對(duì)這些患者進(jìn)行中位數(shù)超過(guò)342天的觀察，其中10.3％的患者死亡，5.0％的患者由于出現(xiàn)心功能不全而重新入院。
患有心肌梗塞的患者中CT-proET-1的血漿濃度相對(duì)于正常范圍(中位數(shù)44.3pmol/L，范圍10.5-77.4pmol/L)升高，其中位數(shù)為71pmol/L，范圍是4.6-671pmol/L。與無(wú)后期事件的患者相比，事后死亡或者由于心功能不全而重新入院的患者的CT-proET-1的濃度更高(中位數(shù)[范圍]pmol/L，123.5；[14-671]vs.74；[4.6-530]；p＜0.0001)。相對(duì)無(wú)后期事件的患者來(lái)說(shuō)，有后期事件的患者的NT-proBNP濃度也同樣升高了(p＜0.0001)。表1和表2中列出了更多的細(xì)節(jié)。
用于預(yù)測(cè)死亡/心功能不全的Cox比例風(fēng)險(xiǎn)模型確定CT-proET-1和NT-proBNP作為獨(dú)立預(yù)測(cè)因子(log CT-proET-1(HR 6.82)，logNT-BNP(HR 2.66))。針對(duì)CT-proET-1的接收器運(yùn)行曲線(receiver-operating curve)的曲線下面積(AUC)是0.77(95％CI0.71-0.83，p＜0.001)；針對(duì)NT-proBNP來(lái)說(shuō)AUC同樣是0.77(95％CI0.71-0.83，p＞0.001)；在對(duì)數(shù)模型中這兩種標(biāo)志物的組合的AUC為0.82(95％CI0.77-0.87，p＜0.001)，也就是說(shuō)大于這兩種標(biāo)志物分別作為單獨(dú)標(biāo)志物的AUC(圖2)。
相對(duì)于CT-proET-1和NT-proBNP這兩個(gè)單獨(dú)的標(biāo)志物來(lái)說(shuō)，其組合的附加益處同樣在圖3和4中說(shuō)明，其中以60天后的事件發(fā)生率為基礎(chǔ)。根據(jù)甄別閾對(duì)患者進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)分層并且展示由此而獲得的子組的事件發(fā)生率。在圖3中作為甄別閾的那些濃度通過(guò)ROC-分析而得出，在這些濃度范圍內(nèi)對(duì)事件預(yù)測(cè)的敏感性和特異性的乘積是最大的。在圖4中整個(gè)患者群的中位數(shù)被作為甄別閾。
表1患者的特征，以CT-proET-1的四分位數(shù)分。數(shù)值用中位數(shù)(標(biāo)準(zhǔn)差)或者數(shù)字(％)表示。
表2對(duì)急性心肌梗塞患者不同子組的CT-proET-1和NT-proBNP的濃度比較。
圖1CT-proET SEQ ID No.3的診斷可用性以及其利用探針(抗體)指示的示意圖。
圖2利用NT-proBNP或者CT-proET-1或者由對(duì)數(shù)回歸模型推導(dǎo)出的這兩個(gè)參數(shù)的組合用于死亡/心功能不全的預(yù)測(cè)的ROC曲線。
圖3根據(jù)給定CT-proET-1和NT-proBNP(都用pmol/L表示)的甄別閾而分組的心肌梗塞患者的各子組的事件(死亡、心功能不全)發(fā)生率。甄別濃度分別確定為通過(guò)ROC-分析而得出的那些濃度，其中對(duì)事件進(jìn)行預(yù)測(cè)的敏感性和特異性的乘積是最大的。
圖4根據(jù)CT-proET-1和NT-proBNP的測(cè)量值位置與其各自的中位數(shù)而分組的心肌梗塞患者的各子組的后期事件(死亡、心功能不全)發(fā)生率。CT-proET-1中位數(shù)為77pmol/L，NT-proBNP的中位數(shù)為914pmol/L。
序列表
<110>BRAHMS Aktiengesellschaft
<120>利用CT-proET-1與NT-proBNP的組合進(jìn)行
急性冠狀動(dòng)脈綜合癥的診斷和風(fēng)險(xiǎn)分層
<130>BRAHMS33WO
<140>PCT/DE2007/
<141>2007-12-22
<150>DE 10 2006 060 835.6
<151>2006-12-22
<160>4
<170>PatentIn version 3.3
<210>1
<211>212
<212>PRT
<213>智人
<400>1
Met Asp Tyr Leu Leu Met Ile Phe Ser Leu Leu Phe Val Ala Cys Gln
1 5 10 15
Gly Ala Pro Glu Thr Ala Val Leu Gly Ala Glu Leu Ser Ala Val Gly
20 25 30
Glu Asn Gly Gly Glu Lys Pro Thr Pro Ser Pro Pro Trp Arg Leu Arg
35 40 45
Arg Ser Lys Arg Cys Ser Cys Ser Ser Leu Met Asp Lys Glu Cys Val
50 55 60
Tyr Phe Cys His Leu Asp Ile Ile Trp Val Asn Thr Pro Glu His Val
65 70 75 80
Val Pro Tyr Gly Leu Gly Ser Pro Arg Ser Lys Arg Ala Leu Glu Asn
85 90 95
Leu Leu Pro Thr Lys Ala Thr Asp Arg Glu Asn Arg Cys Gln Cys Ala
100 105 110
Ser Gln Lys Asp Lys Lys Cys Trp Asn Phe Cys Gln Ala Gly Lys Glu
115 120 125
Leu Arg Ala Glu Asp Ile Met Glu Lys Asp Trp Asn Asn His Lys Lys
130 135 140
Gly Lys Asp Cys Ser Lys Leu Gly Lys Lys Cys Ile Tyr Gln Gln Leu
145 150 155 160
Val Arg Gly Arg Lys Ile Arg Arg Ser Ser Glu Glu His Leu Arg Gln
165 170 175
Thr Arg Ser Glu Thr Met Arg Asn Ser Val Lys Ser Ser Phe His Asp
180 185 190
Pro Lys Leu Lys Gly Lys Pro Ser Arg Glu Arg Tyr Val Thr His Asn
195 200 205
Arg Ala His Trp
210
<210>2
<211>120
<212>PRT
<213>智人
<400>2
Ala Leu Glu Asn Leu Leu Pro Thr Lys Ala Thr Asp Arg Glu Asn Ara
1 5 10 15
Cys Gln Cys Ala Ser Gln Lys Asp Lys Lys Cys Trp Asn Phe Cys Gln
20 25 30
Ala Gly Lys Glu Leu Arg Ala Glu Asp Ile Met Glu Lys Asp Trp Asn
35 40 45
Asn His Lys Lys Gly Lys Asp Cys Ser Lys Leu Gly Lys Lys Cys Ile
50 55 60
Tyr Gln Gln Leu Val Arg Gly Arg Lys Ile Arg Arg Ser Ser Glu Glu
65 70 75 80
His Leu Arg Gln Thr Arg Ser Glu Thr Met Arg Asn Ser Val Lys Ser
85 90 95
Ser Phe His Asp Pro Lys Leu Lys Gly Lys Pro Ser Arg Glu Arg Tyr
100 105 110
Val Thr His Asn Arg Ala His Trp
115 120
<210>3
<211>45
<212>PRT
<213>智人
<400>3
Arg Ser Ser Glu Glu His Leu Arg Gln Thr Arg Ser Glu Thr Met Arg
1 5 10 15
Asn Ser Val Lys Ser Ser Phe His Asp Pro Lys Leu Lys Gly Lys Pro
20 25 30
Ser Arg Glu Arg Tyr Val Thr His Asn Arg Ala His Trp
35 40 45
<210>4
<211>76
<212>PRT
<213>智人
<400>4
His Pro Leu Gly Ser Pro Gly Ser Ala Ser Asp Leu Glu Thr Ser Gly
1 5 10 15
Leu Gln Glu Gln Arg Asn His Leu Gln Gly Lys Leu Ser Glu Leu Gln
20 25 30
Val Glu Gln Thr Ser Leu Glu Pro Leu Gln Glu Ser Pro Arg Pro Thr
35 40 45
Gly Val Trp Lys Ser Arg Glu Val Ala Thr Glu Gly Ile Arg Gly His
50 55 60
Arg Lys Met Val Leu Tyr Thr Leu Arg Ala Pro Arg
65 70 7權(quán)利要求
1.用于對(duì)急性冠狀動(dòng)脈綜合征和/或心肌梗塞后進(jìn)行體外診斷和/或風(fēng)險(xiǎn)分層的方法，其特征在于，對(duì)受試患者測(cè)定具有游離片段(SEQ IDNo.2和/或SEQ ID No.3)的CT-proET-1或其片段及肽段與NT-proBNP(SEQ ID No.4)的組合。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的對(duì)急性冠狀動(dòng)脈綜合征和/或心肌梗塞后進(jìn)行診斷和/或風(fēng)險(xiǎn)分層的方法，用于確定具有急性冠狀動(dòng)脈綜合征尤其是具有心肌梗塞、心絞痛和/或心肌梗塞后的高危和/或預(yù)后不良的患者。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的用于對(duì)急性冠狀動(dòng)脈綜合征和/或心肌梗塞后進(jìn)行診斷和/或風(fēng)險(xiǎn)分層的方法，所述患者為有癥狀的和/或無(wú)癥狀的患者，尤其是急救患者。
4.根據(jù)權(quán)利要求1至3任一所述的用于對(duì)急性冠狀動(dòng)脈綜合征和/或心肌梗塞后進(jìn)行診斷和/或風(fēng)險(xiǎn)分層的方法，用于對(duì)急性冠狀動(dòng)脈綜合征，特別是心肌梗塞(AMI)和心絞痛(AP)和/或心肌梗塞后進(jìn)行治療指導(dǎo)，特別是在重癥監(jiān)護(hù)醫(yī)學(xué)或急診醫(yī)學(xué)中。
5.根據(jù)權(quán)利要求1至4任一所述的用于對(duì)急性冠狀動(dòng)脈綜合征和/或心肌梗塞后進(jìn)行診斷和/或風(fēng)險(xiǎn)分層的方法，用于進(jìn)行臨床決策，尤其是借助于藥物的進(jìn)一步治療和療法，尤其是在重癥監(jiān)護(hù)醫(yī)學(xué)或急診醫(yī)學(xué)中，包括決定患者的住院。
6.根據(jù)權(quán)利要求1至4任一所述的用于對(duì)急性冠狀動(dòng)脈綜合征和/或心肌梗塞后進(jìn)行診斷和/或風(fēng)險(xiǎn)分層的方法，用于預(yù)后、鑒別診斷性早期識(shí)別和識(shí)別、嚴(yán)重程度的評(píng)價(jià)以及伴隨治療的進(jìn)程評(píng)估。
7.根據(jù)前述任一權(quán)利要求所述的方法，其特征在于，CT-proET-1的甄別閾為80-150pmol/L，特別是90-130pmol/L，尤其是109.5pmol/L，而NT-proBNP的甄別閾為750-1100pmol/L，特別是800-950pmol/L，尤其是827.2pmol/L。
8.根據(jù)前述任一權(quán)利要求所述的方法，其特征在于，額外測(cè)定至少一種選自下列的其他標(biāo)志物炎癥標(biāo)志物、心血管標(biāo)志物、神經(jīng)激素標(biāo)志物或缺血性標(biāo)志物。
9.根據(jù)前述任一權(quán)利要求所述的方法，其特征在于，所述炎癥標(biāo)志物選自下列至少一種標(biāo)志物C-反應(yīng)蛋白(CRP)，細(xì)胞因子如TNF-α，白細(xì)胞介素如IL-6，降鈣素原(1-116，3-116)，和粘附分子如VCAM或ICAM。
10.根據(jù)前述任一權(quán)利要求所述的方法，其特征在于，所述心血管標(biāo)志物選自下列至少一種標(biāo)志物肌酸激酶，肌紅蛋白，髓過(guò)氧化物酶，鈉尿蛋白，特別是ANP(或ANF)、proANP、NT-proANP、BNP、proBNP或者它們的序列段，心肌肌鈣蛋白，CRP，以及調(diào)節(jié)循環(huán)的激素(原)，如胃泌素釋放肽原(proGRP)、內(nèi)皮素1原、瘦蛋白原、神經(jīng)肽Y原、生長(zhǎng)抑素原、神經(jīng)肽YY原、阿黑皮素原或腎上腺髓質(zhì)素原(proADM)或它們的序列段。
11.根據(jù)前述任一權(quán)利要求所述的方法，其特征在于，所述缺血性標(biāo)志物選自下列至少一種標(biāo)志物肌鈣蛋白I和T、CK-MB。
12.根據(jù)前述任一權(quán)利要求所述的方法，其特征在于，所述神經(jīng)激素標(biāo)志物是至少一種鈉尿蛋白，特別是ANP(或ANF)、proANP、NT-proANP、BNP、proBNP或者它們的序列段。
13.根據(jù)前述任一權(quán)利要求所述的方法，其特征在于，對(duì)標(biāo)志物的測(cè)定是平行或者同時(shí)進(jìn)行的。
14.根據(jù)前述任一權(quán)利要求所述的方法，其特征在于，對(duì)至少一個(gè)患者樣本進(jìn)行標(biāo)志物的測(cè)定。
15.根據(jù)前述任一權(quán)利要求所述的方法，其特征在于，所述測(cè)定可以在自動(dòng)分析儀上，特別是借助Kryptor進(jìn)行。
16.根據(jù)前述任一權(quán)利要求所述的方法，其特征在于，所述測(cè)定借助于快速檢驗(yàn)進(jìn)行，特別是以單參數(shù)或多參數(shù)測(cè)定。
17.具有游離片段(SEQ ID No.2和/或SEQ ID No.3)的CT-proET-1或其片段及肽段與NT-proBNP(SEQ ID No.4)的組合應(yīng)用，用于對(duì)急性冠狀動(dòng)脈綜合征、心肌梗塞、心絞痛和/或心肌梗塞后進(jìn)行診斷和/或風(fēng)險(xiǎn)分層，以及任選地根據(jù)權(quán)利要求8至12之一所述的其他標(biāo)志物。
18.用于對(duì)急性冠狀動(dòng)脈綜合征、心肌梗塞、心絞痛和/或心肌梗塞后進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)分層的試劑盒，其包含用于測(cè)定具有游離片段(SEQ IDNo.2和/或SEQ ID No.3)的CT-proET-1或其片段及肽段與NT-proBNP(SEQ ID No.4)的組合以及任選地如權(quán)利要求8至12之一所述的其它標(biāo)志物的檢測(cè)試劑和助劑。
19.用于實(shí)施根據(jù)權(quán)利要求1至16之一所述的方法的診斷設(shè)備。
20.用于對(duì)急性冠狀動(dòng)脈綜合征、心肌梗塞和/或心絞痛進(jìn)行診斷的試劑盒，其包含用于測(cè)定具有游離片段(SEQ ID No.2和/或SEQ ID No.3)的CT-proET-1或片段及肽段與NT-proBNP(SEQ ID No.4)的組合以及任選地如權(quán)利要求8至12之一所述的其它標(biāo)志物的檢測(cè)試劑和助劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種用于對(duì)急性冠狀動(dòng)脈綜合征(ACS)，特別是急性心肌梗塞(AMI)和心絞痛(CAP)和/或心肌梗塞后的診斷和風(fēng)險(xiǎn)分層的方法，所述方法對(duì)C末端內(nèi)皮素原(CT-proET-1)或其片段及肽段與N末端B型鈉尿肽原(NT-proBNP)組合進(jìn)行測(cè)定。
文檔編號(hào)G01N33/68GK101646945SQ200780050549
公開(kāi)日2010年2月10日 申請(qǐng)日期2007年12月22日 優(yōu)先權(quán)日2006年12月22日
發(fā)明者A·博格曼, N·莫根塔勒, J·帕帕索提里奧, J·斯塔克, L·L·恩格 申請(qǐng)人:布拉姆斯股份公司