專利名稱：生脈顆粒劑的質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種生脈顆粒劑(黨參方)的質(zhì)量控制方法，屬于對藥品進(jìn)行質(zhì)量控制的技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
生脈顆粒是一種經(jīng)典中成藥，具有益氣復(fù)脈，養(yǎng)陰生津，改善心功能，加強(qiáng)心肌收縮力，改善心肌供血，調(diào)整心肌代謝，改善微循環(huán)，調(diào)節(jié)血壓，抗心率失常等功能；臨床上主要用于各種類型的休克和心臟類疾病，其療效確切。但經(jīng)我們研究發(fā)現(xiàn)，生脈顆粒劑存在質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)簡單，產(chǎn)品質(zhì)量不易控制的缺點(diǎn)，在產(chǎn)品生產(chǎn)過程中，用該質(zhì)量控制方法不能有效控制生脈顆粒的質(zhì)量，從而將影響該制劑的臨床療效。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種生脈顆粒劑的質(zhì)量控制方法，本發(fā)明針對現(xiàn)有質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)簡單，產(chǎn)品質(zhì)量不易控制的缺點(diǎn)，根據(jù)本方中各味藥材的含量、特性及其制備工藝，研究制定了具體可行的鑒別和含量測定方法，以有效地控制生脈顆粒劑的質(zhì)量，從而確保該制劑的臨床療效。
本發(fā)明所述的生脈顆粒劑是這樣構(gòu)成的它由黨參300g、麥冬200g、五味子100g和適當(dāng)輔料制備而成。
生脈顆粒劑的制備方法為黨參、麥冬、五味子加15倍量水煎煮二次，第一次2小時(shí)，第二次1.5小時(shí)，合并煎液，濾過。濾液濃縮至相對密度為1.06(60℃)，加乙醇使含醇量達(dá)50％，攪勻，靜置24小時(shí)，濾過，濾液減壓濃縮至相對密度為1.30(60～65℃)的浸膏。加蔗糖粉適量，制成顆粒，干燥，整粒，制成1000g，分裝，即得。
本發(fā)明所述質(zhì)量控制方法主要包括性狀、檢查、鑒別、含量測定項(xiàng)目中的部分或全部；其中性狀應(yīng)符合顆粒劑項(xiàng)下的有關(guān)規(guī)定；鑒別是對五味子的薄層鑒別；檢查應(yīng)符合《中國藥典》2005年版一部附錄IC顆粒劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定；含量測定為對制劑中五味子的含量測定。
五味子的鑒別方法是以五味子醇甲對照品為對照，以正己烷∶乙酸乙酯∶甲酸＝3∶5∶1為展開劑的薄層鑒別方法。
具體的鑒別方法為取本制劑5g，研細(xì)，加甲醇50ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液蒸至近干，加硅藻土2g，拌勻，水浴蒸干，轉(zhuǎn)移至錐形瓶中，再加甲醇50ml水浴回流30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取五味子醇甲對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2000年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以正己烷∶乙酸乙酯∶甲酸＝3∶5∶1為展開劑，展開，取出，晾干，置254nm紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
本制劑中五味子的含量測定方法是以五味子醇甲對照品為對照，以甲醇∶水＝65∶35為流動(dòng)相的高效液相色譜法。
具體的含量測定方法為照《中國藥典》2005年版一部附錄VID高效液相色譜法測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以甲醇∶水＝65∶35為流動(dòng)相；檢測波長為250nm；理論板數(shù)按五味子醇甲峰計(jì)算應(yīng)不低于2000；對照品溶液的制備 精密稱取經(jīng)五氧化二磷減壓干燥過夜的五味子醇甲對照品適量，加甲醇制成每1ml含五味子醇甲30μg的溶液，即得；供試品溶液的制備 取過三號篩的本制劑粉末5g，精密稱定，置量瓶中，精密加甲醇50ml，稱定重量，在功率250W、頻率20KHZ條件下超聲處理1小時(shí)，取出，放冷后，用甲醇補(bǔ)足損失的重量，搖勻，過濾，精密吸取濾液25ml，轉(zhuǎn)移至圓底燒瓶中，回收甲醇至適量，再用甲醇定量轉(zhuǎn)移至10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用0.45μm的微孔濾膜濾過，即得；測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得；本顆粒劑每袋含五味子以五味子醇甲C24H32O7計(jì)，不得少于0.6mg。
本發(fā)明所述質(zhì)量控制方法包括性狀藥物為淡棕黃色的顆粒；氣香，味甜；鑒別取本制劑5g，研細(xì)，加甲醇50ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液蒸至近干，加硅藻土2g，拌勻，水浴蒸干，轉(zhuǎn)移至錐形瓶中，再加甲醇50ml水浴回流30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取五味子醇甲對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2000年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以正己烷∶乙酸乙酯∶甲酸＝3∶5∶1為展開劑，展開，取出，晾干，置254nm紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；
檢查應(yīng)符合《中國藥典》2005年版一部附錄IC顆粒劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定；含量測定照《中國藥典》2005年版一部附錄VID高效液相色譜法測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以甲醇∶水＝65∶35為流動(dòng)相；檢測波長為250nm；理論板數(shù)按五味子醇甲峰計(jì)算應(yīng)不低于2000；對照品溶液的制備 精密稱取經(jīng)五氧化二磷減壓干燥過夜的五味子醇甲對照品適量，加甲醇制成每1ml含五味子醇甲30μg的溶液，即得；供試品溶液的制備 取過三號篩的本制劑粉末5g，精密稱定，置量瓶中，精密加甲醇50ml，稱定重量，在功率250W、頻率20KHZ條件下超聲處理1小時(shí)，取出，放冷后，用甲醇補(bǔ)足損失的重量，搖勻，過濾，精密吸取濾液25ml，轉(zhuǎn)移至圓底燒瓶中，回收甲醇至適量，再用甲醇定量轉(zhuǎn)移至10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用0.45μm的微孔濾膜濾過，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得；本顆粒劑每袋含五味子以五味子醇甲C24H32O7計(jì)，不得少于0.6mg。
本申請人進(jìn)行了一系列的試驗(yàn)研究，以確定最佳的質(zhì)量控制方法，具體如下一、鑒別試劑、試藥甲醇、硅藻土、正己烷、乙酸乙酯、甲酸均為分析純；硅膠GF254熒光薄層板由青島海洋化工廠分廠提供，批號20050227；五味子醇甲(C24H32O7)對照品，由中國藥品生物制品檢定所提供(供含量測定用)；生脈顆粒(黨參方)三個(gè)批號供試品(20050401，20050402，20050403)及生脈顆粒(黨參方)空白樣品均由貴州同濟(jì)堂制藥有限公司提供。
薄層鑒別是參照各味藥在《中國藥典》記載的藥品標(biāo)準(zhǔn)中薄層鑒別方法進(jìn)行。利用對照藥材或?qū)φ掌泛捅酒吩谙嗤娜軇┫到y(tǒng)條件下展開，在薄層板上有相同斑點(diǎn)的，而通過作陰性試驗(yàn)無干擾，說明本方法具專屬性。
本發(fā)明是對方中五味子的特征鑒別。五味子為方中使藥，根據(jù)處方中所含藥味的化學(xué)性質(zhì)及劑型特點(diǎn)，研究制定了五味子的薄層色譜鑒別，以五味子醇甲為對照品鑒別處方中原藥材五味子。
取本制劑5g，研細(xì)，加甲醇50ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液加硅藻土2g，拌勻，水浴蒸干，轉(zhuǎn)移至錐形瓶中，轉(zhuǎn)移至錐形瓶中，再加甲醇50ml水浴回流30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取五味子醇甲對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照《中國藥典》2000年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，分別以正己烷-乙酸乙酯-甲酸(3∶5∶1)、30℃～660℃石油醚-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外燈(254nm)下檢視。結(jié)果以正己烷-乙酸乙酯-甲酸(3∶5∶1)為展開劑效果最好，經(jīng)反復(fù)試驗(yàn)，陰性對照無干擾，故列入本發(fā)明內(nèi)容。
二、檢查按《中國藥典》2000年版一部附錄IC顆粒劑項(xiàng)下的規(guī)定，對本制劑三批樣品的水分，裝量差異，粒度，溶化性及微生物限度進(jìn)行檢查，結(jié)果符合《中國藥典》規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)。(以上項(xiàng)目測定數(shù)據(jù)及重金屬、砷鹽檢查略)。
檢查指標(biāo)、方法及結(jié)果如下(1)水分檢查照《中國藥典》(2000年版一部附錄IX H)水分測定法第一法測定，不得超過5.0％。
(2)裝量差異照《中國藥典》2000年版一部附錄ID顆粒劑項(xiàng)下規(guī)定的方法檢測。
本制劑包裝為10克/袋，裝量差異限度為±5％。
(3)粒度取單劑量分裝的顆粒劑5袋(瓶)或多劑量分裝顆粒劑1包(瓶)，稱定重量，置藥篩內(nèi)過篩。過篩時(shí)，將篩保持水平狀態(tài)，左右往返輕輕篩動(dòng)3分鐘。不能通過一號篩和能通過五號篩的顆粒和粉末總和，不得過15％。
(4)溶化性取供試品10g，加熱水20倍，攪拌5分鐘，立刻觀察?？扇苄灶w粒劑應(yīng)全部溶化，允許有輕微渾濁。顆粒劑不得有焦屑等異物。
(5)砷鹽具體方法如下取本制劑1g，加氫氧化鈣0.5g，混勻，加水少量攪勻，干燥后，先用小火燒灼使炭化，再用500～600℃熾灼至完全炭化，加鹽酸4ml，加水15ml，按《中國藥典》2000年版一部附錄IX F檢查，結(jié)果均低于2ppm，故未列入本發(fā)明內(nèi)容。
(6)微生物限度按《中國藥典》2000年版一部附錄XIII C的檢查方法及顆粒劑(不含原藥材粉)微生物限度標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢查。
表1 生脈顆粒(黨參方)檢查項(xiàng)目研究結(jié)果
由表中結(jié)果可知，生脈顆粒(黨參方)樣品的檢查項(xiàng)目都符合《中國藥典》2000年版一部及生脈顆粒(黨參方)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定。
三、含量測定按照《中國藥典》2000年版一部附錄VI D制定。
(一)含量測定化學(xué)成份的確定本方主藥黨參、麥冬兩味藥有效成分多為皂苷，多糖等親水性成份。五味子藥材主具收斂固澀，益氣生精，補(bǔ)腎寧心的功效。主要含總木脂素，其含量達(dá)18.1-19.2％。如五味子素(schisandrin)、五味子醇(Schisadrol)、去氧五味子素(Deoxyschisandrin)、γ-五味子素(γ-Schisandrin)、偽-γ-五味子素(Pseudo-γ-Schisandrin)、五味子丙素(WuweizisuC)、五味子酯甲(SchisantherinA)及五味子酯乙、丙、丁、戊(SchsantherinB、C、D、E)等。1979年I等報(bào)導(dǎo)從五味子果實(shí)中分離到5種新的二苯并環(huán)辛二烯類木脂素戈米辛A、B、C、F、G(GomisinA、B、C、F、G)等新的木脂素成分。還含揮發(fā)油2％，油中主要為α-、β-花柏烯(α、β-Chamigrene)。此外，本方五味子藥材尚含蘋果酸(Malic acid)11％，枸櫞酸(Citric acid)8％，酒石酸(Tartaric acid)0.8％，原兒茶酸，維生素C(VitamineC)0.035％-0.085％。五味子醇甲是本制劑的有效成分之一，且含量較高，亦具有一定專屬性，故選用其做含量測定的指標(biāo)性成分。本申請人在《中國藥典》五味子含量測定方法等參考文獻(xiàn)資料基礎(chǔ)上，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究，建立了樣品前處理簡單、穩(wěn)定、專屬性強(qiáng)及靈敏度高、結(jié)果可靠的高效液相色譜法。
(二)提取分離方法的考察我們比較了甲醇作為提取溶劑在不同提取時(shí)間(0.5h、1.0h、1.5h)的提取效果。具體方法如下取本制劑粉末(過篩)約5g，共3份，精密稱定，置量瓶中，精密加甲醇50ml。稱定重量。分別超聲處理(功率250W，頻率20KHZ)0.5小時(shí)、1.0小時(shí)和1.5小時(shí)。取出，放冷后，用溶劑補(bǔ)足損失的重量，搖勻，過濾，精密吸取濾液25ml。轉(zhuǎn)移至圓底燒瓶中，回收溶劑至適量，再用甲醇定量轉(zhuǎn)移至10ml容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，用0.45μm的微孔濾膜濾過，即得。測試結(jié)果見表1。
表2 不同超聲提取時(shí)間所得五味子醇甲含量

經(jīng)綜合比較，提取條件確定用50ml甲醇超聲(功率250W，頻率20KHz)提取1.0h，較為適宜。
(三)含量測定方法的考察1、儀器、試劑、試藥 Agilent1100高效液相色譜儀(在線脫氣機(jī)、二元泵、二極管陣列檢測器、自動(dòng)進(jìn)樣器、智能恒溫柱溫箱、Agilent化學(xué)工作站)；CX-250型超聲波清洗器(功率250W，頻率20KHZ，北京市醫(yī)療設(shè)備二廠)；FC-104天平(上海精密科學(xué)儀器有限公司天平儀器廠)；十萬級天平(日本進(jìn)口)；甲醇為色譜純和分析純；純凈水。五味子醇甲(C24H32O7)對照品，由中國藥品生物制品檢定所提供(110749-200309供含量測定用)；生脈顆粒(黨參方)三個(gè)批號供試品(20050401，20050402，20050403)由貴州同濟(jì)堂制藥有限公司提供。
2、檢測波長的確定 五味子醇甲于190nm～400nm波長下掃描，最大吸收波長為250nm。在250 nm波長處五味子醇甲吸收峰靈敏度較高，其它色譜峰干擾較小，五味子醇甲色譜峰的分離最為理想，故選用250nm±1nm作為檢測波長。
3、系統(tǒng)適用性試驗(yàn)選擇了三種色譜柱(1)Hypersil ODS(5um，4.0×250mm，Agilent)色譜柱，(2)Hypersil ODS2(5um，5×200mm，大連依利特)色譜柱，(3)DiamonsilTM(鉆石)HPLC C18(5um，4.6×250mm，迪馬公司)色譜柱；及四個(gè)流動(dòng)相(1)甲醇-水(65∶35)(2)甲醇-0.1％磷酸溶液(65∶35)(3)乙腈-水(65∶35)(4)乙腈-0.1％磷酸溶液(60∶40)進(jìn)行系統(tǒng)適用性試驗(yàn)。試驗(yàn)結(jié)果表明在以下色譜條件下用Hypersil ODS2(5um，5×200mm，大連依利特)色譜柱，甲醇-水(65∶35)為流動(dòng)相，流速1.0ml/min，柱溫40℃，檢測波長250nm，供試品中五味子甲素得到較好分離，理論板數(shù)達(dá)到4000，分離度2.5以上。故理論板數(shù)以五味子甲素峰計(jì)算擬定為不低于2000；分離度不低于1.5。
4.空白試驗(yàn)根據(jù)本制劑處方和工藝，制備缺五味子藥材的空白試驗(yàn)樣品，按質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的提取條件制備供試品溶液，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。測定結(jié)果表明空白試驗(yàn)對五味子醇甲色譜分析無干擾。
5.線性關(guān)系的考察稱取五味子醇甲對照品適量，用甲醇溶解制成每1ml中含0.121mg的對照品儲(chǔ)備液，再分別吸取0.5ml、1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml的對照品儲(chǔ)備液至10ml容量瓶中，加甲醇溶液稀釋至刻度，分別制成每1ml含五味子醇甲0.00605mg、0.01210mg、0.02420mg、0.03630mg、0.04840mg、0.06050mg的對照品溶液，吸取對照品溶液10μl依次進(jìn)樣，記錄色譜圖。以五味子醇甲的進(jìn)樣量(μg)為縱坐標(biāo)，峰面積(mAu·s)為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得一基本過原點(diǎn)的直線Y＝0.000484282X-0.00109(r＝0.99993)。
回歸方程擬合為過原點(diǎn)的方程Y＝0.000483062X將一樣品峰面積帶入以上兩方程中，經(jīng)計(jì)算比較，所得誤差在2％以下。五味子甲素進(jìn)樣量的線性范圍為0.0605μg～0.605μg，線性關(guān)系良好，可以用外標(biāo)一點(diǎn)法計(jì)算其含量。(見表3)表3 標(biāo)準(zhǔn)曲線 (n＝5)

6、穩(wěn)定性試驗(yàn) 取生脈顆粒(黨參方)粉末(過三號篩)約5g，精密稱定，按含量測定項(xiàng)下的方法制備供試液，精密吸取10μl，進(jìn)樣5次，時(shí)間間隔為0、2、4、6、8小時(shí)，記錄色譜圖，供試品中五味子醇甲峰面積平均值為587.712902mAu·S，RSD＝0.816％，結(jié)果表明本試驗(yàn)方法穩(wěn)定，測定時(shí)間可在8小時(shí)內(nèi)。
(見表4)表4 穩(wěn)定性試驗(yàn)測定結(jié)果 n＝5

7.儀器精密度試驗(yàn) 精密吸取對照品溶液10μl，連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄色譜圖，供試品中五味子醇甲峰面積平均值為632.369955mAu·S，RSD＝0.538％，結(jié)果表明精密度良好。(見表5)表5 儀器精密度試驗(yàn)測定結(jié)果 n＝5

8、重復(fù)性試驗(yàn) 取生脈顆粒(黨參方)粉末(過三號篩)約5g，精密稱定，共6份，每份樣品按含量測定項(xiàng)下的方法制備供試液，吸取10μl注入色譜儀，記錄色譜圖，供試品中五味子醇甲含量平均值為0.112564mg/g，RSD＝0.507％，結(jié)果說明重復(fù)性良好。(見表6)表6 重復(fù)性試驗(yàn)測定結(jié)果 n＝5

9、加樣回收率試驗(yàn) 取生脈顆粒(黨參方)粉末(過三號篩)約2.5g，精密稱定，共取5份，于每份中加入對照品溶液(C＝0.262mg/ml)1ml，按本發(fā)明含量測定項(xiàng)制備供試液，進(jìn)樣，記錄色譜圖，計(jì)算五味子醇甲回收率，平均回收率為99.737％，RSD＝0.479％，表明回收良好。(見表7)表7 加樣回收試驗(yàn)測定結(jié)果(樣品五味子醇甲含量0.112564mg/g) n＝5

RSD＝0.479％
根據(jù)以上試驗(yàn)結(jié)果，本制劑含量測定方法的條件確定為用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水(65∶35)為流動(dòng)相；檢測波長為250nm。理論板數(shù)按五味子甲素峰計(jì)算應(yīng)不低于2000。
供試品溶液制備方法確定為取本制劑粉末(過三號篩)約5g，精密稱定，置量瓶中，精密加甲醇50ml。稱定重量。超聲處理(功率250W，頻率20KHZ)30分鐘。取出，放冷后，用甲醇補(bǔ)足損失的重量，過濾，精密吸取該提取液25ml。轉(zhuǎn)移至圓底燒瓶中，回收甲醇至適量，再用甲醇定量轉(zhuǎn)移至10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用0.45μm的微孔濾膜濾過，即得。
(四)含量測定計(jì)算方法(1)供試品溶液濃度計(jì)算CX=CRAXAR]]>式中CR為對照品溶液濃度(mg.ml-1)。
AX為供試品溶液峰面積值(mAu*s)。
AR為對照品溶液的峰面積值(mAu*s)。
(2)制劑含量計(jì)算 式中Cx供試品溶液濃度(mg.ml-1)V為樣品的稱樣量(g)。
V為樣品的體積(ml)。
(五)含量測定限度的確定根據(jù)10批樣品測定結(jié)果(見表8)，本制劑每袋含五味子醇甲平均值為1.0208mg。依據(jù)此結(jié)果制定本顆粒劑含五味子以五味子醇甲C24H32O7計(jì)，每袋不得少于0.6mg。
表8 10批生脈顆粒(黨參方)中五味子醇甲的含量

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明質(zhì)量控制方法精密度高，穩(wěn)定性好，重現(xiàn)性好，回收率高，測量結(jié)果準(zhǔn)確，提高了生脈顆粒劑的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，可有效控制生脈顆粒劑的質(zhì)量，從而確保了該制劑的臨床療效。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明的實(shí)施例1性狀藥物為淡棕黃色的顆粒；氣香，味甜；鑒別取本制劑5g，研細(xì)，加甲醇50ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液蒸至近干，加硅藻土2g，拌勻，水浴蒸干，轉(zhuǎn)移至錐形瓶中，再加甲醇50ml水浴回流30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取五味子醇甲對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2000年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以正己烷∶乙酸乙酯∶甲酸＝3∶5∶1為展開劑，展開，取出，晾干，置254nm紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；檢查應(yīng)符合《中國藥典》2005年版一部附錄IC顆粒劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定；含量測定照《中國藥典》2005年版一部附錄VID高效液相色譜法測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以甲醇∶水＝65∶35為流動(dòng)相；檢測波長為250nm；理論板數(shù)按五味子醇甲峰計(jì)算應(yīng)不低于2000；對照品溶液的制備精密稱取經(jīng)五氧化二磷減壓干燥過夜的五味子醇甲對照品適量，加甲醇制成每1ml含五味子醇甲30μg的溶液，即得；供試品溶液的制備取過三號篩的本制劑粉末5g，精密稱定，置量瓶中，精密加甲醇50ml，稱定重量，在功率250W、頻率20KHZ條件下超聲處理1小時(shí)，取出，放冷后，用甲醇補(bǔ)足損失的重量，搖勻，過濾，精密吸取濾液25ml，轉(zhuǎn)移至圓底燒瓶中，回收甲醇至適量，再用甲醇定量轉(zhuǎn)移至10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用0.45μm的微孔濾膜濾過，即得；測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得；本顆粒劑每袋含五味子以五味子醇甲C24H32O7計(jì)，不得少于0.6mg。
本發(fā)明的實(shí)施例2性狀藥物為淡棕黃色的顆粒；氣香，味甜；鑒別取本制劑5g，研細(xì)，加甲醇50ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液蒸至近干，加硅藻土2g，拌勻，水浴蒸干，轉(zhuǎn)移至錐形瓶中，再加甲醇50ml水浴回流30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取五味子醇甲對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2000年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以正己烷∶乙酸乙酯∶甲酸＝3∶5∶1為展開劑，展開，取出，晾干，置254nm紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；檢查應(yīng)符合《中國藥典》2005年版一部附錄IC顆粒劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定。
本發(fā)明的實(shí)施例3性狀藥物為淡棕黃色的顆粒；氣香，味甜；檢查應(yīng)符合《中國藥典》2005年版一部附錄IC顆粒劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定；含量測定照《中國藥典》2005年版一部附錄VID高效液相色譜法測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以甲醇∶水＝65∶35為流動(dòng)相；檢測波長為250nm；理論板數(shù)按五味子醇甲峰計(jì)算應(yīng)不低于2000；對照品溶液的制備精密稱取經(jīng)五氧化二磷減壓干燥過夜的五味子醇甲對照品適量，加甲醇制成每1ml含五味子醇甲30μg的溶液，即得；供試品溶液的制備 取過三號篩的本制劑粉末5g，精密稱定，置量瓶中，精密加甲醇50ml，稱定重量，在功率250W、頻率20KHZ條件下超聲處理1小時(shí)，取出，放冷后，用甲醇補(bǔ)足損失的重量，搖勻，過濾，精密吸取濾液25ml，轉(zhuǎn)移至圓底燒瓶中，回收甲醇至適量，再用甲醇定量轉(zhuǎn)移至10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用0.45μm的微孔濾膜濾過，即得；
測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得；本顆粒劑每袋含五味子以五味子醇甲C24H32O7計(jì)，不得少于0.6mg。
本發(fā)明的實(shí)施例4性狀藥物為淡棕黃色的顆粒；氣香，味甜；鑒別取本制劑5g，研細(xì)，加甲醇50ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液蒸至近干，加硅藻土2g，拌勻，水浴蒸干，轉(zhuǎn)移至錐形瓶中，再加甲醇50ml水浴回流30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取五味子醇甲對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2000年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以正己烷∶乙酸乙酯∶甲酸＝3∶5∶1為展開劑，展開，取出，晾干，置254nm紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；含量測定照《中國藥典》2005年版一部附錄VID高效液相色譜法測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以甲醇∶水＝65∶35為流動(dòng)相；檢測波長為250nm；理論板數(shù)按五味子醇甲峰計(jì)算應(yīng)不低于2000；對照品溶液的制備精密稱取經(jīng)五氧化二磷減壓干燥過夜的五味子醇甲對照品適量，加甲醇制成每1ml含五味子醇甲30μg的溶液，即得；供試品溶液的制備取過三號篩的本制劑粉末5g，精密稱定，置量瓶中，精密加甲醇50ml，稱定重量，在功率250W、頻率20KHZ條件下超聲處理1小時(shí)，取出，放冷后，用甲醇補(bǔ)足損失的重量，搖勻，過濾，精密吸取濾液25ml，轉(zhuǎn)移至圓底燒瓶中，回收甲醇至適量，再用甲醇定量轉(zhuǎn)移至10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用0.45μm的微孔濾膜濾過，即得；測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得；本顆粒劑每袋含五味子以五味子醇甲C24H32O7計(jì)，不得少于0.6mg。
權(quán)利要求
1.一種生脈顆粒劑的質(zhì)量控制方法，所述質(zhì)量控制方法主要包括性狀、檢查、鑒別、含量測定項(xiàng)目中的部分或全部；其特征在于性狀應(yīng)符合顆粒劑項(xiàng)下的有關(guān)規(guī)定；鑒別是對五味子的薄層鑒別；檢查應(yīng)符合中國藥典2005年版一部附錄IC顆粒劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定；含量測定為對制劑中五味子的含量測定。
2.按照權(quán)利要求1所述生脈顆粒劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于五味子的鑒別方法是以五味子醇甲對照品為對照，以正己烷∶乙酸乙酯∶甲酸＝3∶5∶1為展開劑的薄層鑒別方法。
3.按照權(quán)利要求1或2所述生脈顆粒劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于具體的鑒別方法為取本制劑5g，研細(xì)，加甲醇50ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液蒸至近干，加硅藻土2g，拌勻，水浴蒸干，轉(zhuǎn)移至錐形瓶中，再加甲醇50ml水浴回流30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取五味子醇甲對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2000年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以正己烷∶乙酸乙酯∶甲酸＝3∶5∶1為展開劑，展開，取出，晾干，置254nm紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
4.按照權(quán)利要求1所述生脈顆粒劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于本制劑中五味子的含量測定方法是以五味子醇甲對照品為對照，以甲醇∶水＝65∶35為流動(dòng)相的高效液相色譜法。
5.按照權(quán)利要求1或4所述生脈顆粒劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于具體的含量測定方法為照中國藥典2005年版一部附錄VID高效液相色譜法測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以甲醇∶水＝65∶35為流動(dòng)相；檢測波長為250nm；理論板數(shù)按五味子醇甲峰計(jì)算應(yīng)不低于2000；對照品溶液的制備 精密稱取經(jīng)五氧化二磷減壓干燥過夜的五味子醇甲對照品適量，加甲醇制成每1ml含五味子醇甲30μg的溶液，即得；供試品溶液的制備 取過三號篩的本制劑粉末5g，精密稱定，置量瓶中，精密加甲醇50ml，稱定重量，在功率250W、頻率20KHZ條件下超聲處理1小時(shí)，取出，放冷后，用甲醇補(bǔ)足損失的重量，搖勻，過濾，精密吸取濾液25ml，轉(zhuǎn)移至圓底燒瓶中，回收甲醇至適量，再用甲醇定量轉(zhuǎn)移至10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用0.45μm的微孔濾膜濾過，即得；測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得；本顆粒劑每袋含五味子以五味子醇甲C24H3207計(jì)，不得少于0.6mg。
6.按照權(quán)利要求1所述生脈顆粒劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于所述質(zhì)量控制方法包括性狀藥物為淡棕黃色的顆粒；氣香，味甜；鑒別取本制劑5g，研細(xì)，加甲醇50ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液蒸至近干，加硅藻土2g，拌勻，水浴蒸干，轉(zhuǎn)移至錐形瓶中，再加甲醇50ml水浴回流30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取五味子醇甲對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2000年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以正己烷∶乙酸乙酯∶甲酸＝3∶5∶1為展開劑，展開，取出，晾干，置254nm紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；檢查應(yīng)符合中國藥典2005年版一部附錄IC顆粒劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定；含量測定照中國藥典2005年版一部附錄VID高效液相色譜法測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以甲醇∶水＝65∶35為流動(dòng)相；檢測波長為250nm；理論板數(shù)按五味子醇甲峰計(jì)算應(yīng)不低于2000；對照品溶液的制備 精密稱取經(jīng)五氧化二磷減壓干燥過夜的五味子醇甲對照品適量，加甲醇制成每1ml含五味子醇甲30μg的溶液，即得；供試品溶液的制備 取過三號篩的本制劑粉末5g，精密稱定，置量瓶中，精密加甲醇50ml，稱定重量，在功率250W、頻率20KHZ條件下超聲處理1小時(shí)，取出，放冷后，用甲醇補(bǔ)足損失的重量，搖勻，過濾，精密吸取濾液25ml，轉(zhuǎn)移至圓底燒瓶中，回收甲醇至適量，再用甲醇定量轉(zhuǎn)移至10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用0.45μm的微孔濾膜濾過，即得；測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得；本顆粒劑每袋含五味子以五味子醇甲C24H32O7計(jì)，不得少于0.6mg。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種生脈顆粒劑的質(zhì)量控制方法，所述質(zhì)量控制方法主要包括性狀、檢查、鑒別、含量測定項(xiàng)目中的部分或全部；其中性狀應(yīng)符合顆粒劑項(xiàng)下的有關(guān)規(guī)定；鑒別是對五味子的薄層鑒別；檢查應(yīng)符合《中國藥典》2005年版一部附錄IC顆粒劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定；含量測定為對制劑中五味子的含量測定；與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明質(zhì)量控制方法精密度高，穩(wěn)定性好，重現(xiàn)性好，回收率高，測量結(jié)果準(zhǔn)確，提高了生脈顆粒劑的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，可有效控制生脈顆粒劑的質(zhì)量，從而確保了該制劑的臨床療效。
文檔編號G01N30/02GK1840078SQ20061020005
公開日2006年10月4日 申請日期2006年1月20日 優(yōu)先權(quán)日2006年1月20日
發(fā)明者王曉春 申請人:貴州同濟(jì)堂制藥有限公司