香莓源抗氧化劑的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種香莓源抗氧化劑的制備方法，包括如下步驟：1)將香莓地上部分制備成香莓粉末；2)在香莓粉末中加入50％-70％的乙醇溶液進行回流提取，提取液減壓真空濃縮，得乙醇浸膏；3)采用液-液分配法對香莓的乙醇浸膏進行萃取分離；4)取步驟3)所得的乙酸乙酯浸膏，溶于純甲醇中，拌于100-200目硅膠H，烘干、研磨得到吸附樣品的硅膠粉末；5)采用干法上樣，將硅膠粉末鋪于硅膠柱上，以二氯甲烷-甲醇為流動相以100:0-100:4的體積比進行梯度洗脫，合并相似組分后濃縮，從而分別獲得組分F1-F19；將組分F3-16合并后真空干燥，得抗氧化活性強的香莓源抗氧化劑。
【專利說明】香菅源抗氧化劑的制備方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于天然抗氧化活性物質(zhì)的制備方法，特別涉及一種香霉源抗氧化物質(zhì)的 制備方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 生物體的內(nèi)環(huán)境無時無刻不在生成自由基，自由基在生物體內(nèi)很容易與蛋白質(zhì)、 不飽和脂肪酸反應，引發(fā)氧化修飾作用，成為機體衰老及與衰老相關(guān)疾病的主要誘因。同 時，隨著年齡的增長，機體的抗氧化防御能力卻在逐漸減弱，與衰老相關(guān)的疾病如腫瘤、也 血管疾病、糖尿病、白內(nèi)障、老年性癡呆等發(fā)病機會大大的增加。所W，自由基與衰老相關(guān)疾 病發(fā)生的分子機制之間的關(guān)系，成為了研究的新熱點。為了最大限度地降低自由基對機體 的損害，人們開始尋求抗氧化劑，但人工合成的抗氧化劑具有致癌性等很大的毒副作用。植 物體富含黃麗類化合物等活性成分，具有很強的抗氧化活性，是天然、安全的抗氧化劑來源 物。為此，植物抗氧化劑的開發(fā)與應用成為人們關(guān)注的研究領(lǐng)域。
[0003] 香霉（Rubus pungens var. 〇1化amii)作為息鉤子屬植物中的一類，該屬植物含有 多種化學成分，包括黃麗、揮發(fā)油、聰類、稼質(zhì)、酷類等多種成分，具有抗氧化、抑菌、抗炎、抗 腫瘤等多種藥理活性，藥用價值很高。而香霉同樣含有一些活性成分，如《香霉植物提取物 及其制備方法和其用于食品保鮮》（專利201410029388. 8)發(fā)現(xiàn)香霉植物提取物具有一定 的抗氧化效果和防腐保鮮作用，因此香霉必然有很大的利用價值，是植物源抗氧化劑的良 好來源。
[0004] 尋找活性高的植物源抗氧化活性成分是植物源抗氧化劑研發(fā)的重要內(nèi)容之一。香 霉資源分布廣、蘊藏量大、利用率低。從香霉中提取分離抗氧化成分并開發(fā)成香霉源的源抗 氧化劑，不僅拓寬了天然植物源食品防腐劑的來源；還能夠有效開發(fā)利用香霉該一野生植 物資源，為今后的深入研究與應用提供理論依據(jù)，也將進一步帶動食品產(chǎn)業(yè)與種植產(chǎn)業(yè)，促 進經(jīng)濟的可持續(xù)性發(fā)展。但是目前還未見生產(chǎn)香霉抗氧化劑的報道。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種香霉源抗氧化劑的制備方法，用香霉作原 料，W DPPH(二苯基苦基苯脫）自由基清除率為指標，制備抗氧化活性強的香霉源抗氧化 齊U，該方法工藝簡單，成本低，對環(huán)境污染小，適合大規(guī)模生產(chǎn)。
[0006] 為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供一種香霉源抗氧化劑的制備方法，包括如下 步驟：
[0007] 1)、采集香霉地上部分（莖、葉），除雜洗凈，干燥至含水率《5%，粉碎，得到香霉 粉末；
[0008] 備注說明；一般粉碎至過60目；干燥例如可采用風干的方式；
[0009] 2)、在香霉粉末中加入體積濃度為50% -70%的己醇溶液進行回流提取，提取料 液比lg:10-20ml，提取時間1-化，提取溫度70-9(TC，提取次數(shù)為2-3次；所得的提取液減 壓合并后真空濃縮，得到己醇浸膏；
[0010] 3)采用液-液分配法對香霉的己醇浸膏進行萃取分離：
[0011] 將步驟2)所得的己醇浸膏用水息浮后依次用石油離、氯仿、己酸己醋和正下醇該 4種溶劑萃取，并分別減壓濃縮回收各自對應的溶劑，從而分別得石油離浸膏、氯仿浸膏、己 酸己醋浸膏和正下醇浸膏；
[001引所述己醇浸膏與水的重量比為1 :80-120(較佳1 ;100);
[0013] 4)、取己酸己醋浸膏，溶于純甲醇中，拌于100-200目娃膠H，烘干（于40-5(TC烘 干至恒重）、研磨（至能過200目的篩）得到吸附樣品的娃膠粉末；
[0014] 己酸己醋浸膏：純甲醇：100-200目娃膠H的用量比為Ig ;0. 8-1. 2ml ; 1.8-2. 2g(較佳為 Ig=Iml ;2g);
[0015] 5)、采用干法上樣，將步驟4)所得的娃膠粉末鋪于娃膠柱（所用娃膠為200-300 目）上，W二氯甲焼-甲醇為流動相W 100:0-100:4的體積比進行梯度洗脫，用薄層色譜 (所用娃膠板為GF254)檢測洗脫進程，合并相似組分后濃縮，從而分別獲得組分F1-F19 ;
[0016] 將組分F3-16 (為經(jīng)抗氧化活性檢測所得的具有抗氧化活性的組分）合并后真空 干燥，得香霉源抗氧化劑。
[0017] 備注說明：一般Ikg香霉地上部分，配用的娃膠柱為柱體積為8X80cm，內(nèi)裝 200-300目的娃膠550g。
[0018] 作為本發(fā)明的香霉源抗氧化劑的制備方法的改進：
[0019] 步驟5)的梯度洗脫為：
[0020]

【權(quán)利要求】
1. 香莓源抗氧化劑的制備方法，其特征是包括如下步驟： 1) 、采集香莓地上部分，除雜洗凈，干燥至含水率< 5%，粉碎，得到香莓粉末； 2) 、在香莓粉末中加入體積濃度為50% -70%的乙醇溶液進行回流提取，提取料液比 lg: 10-20ml，提取時間l-2h，提取溫度70-90°C，提取次數(shù)為2-3次；所得的提取液合并后減 壓真空濃縮，得到乙醇浸膏； 3) 、采用液-液分配法對香莓的乙醇浸膏進行萃取分離： 將步驟2)所得的乙醇浸膏用水懸浮后依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇這4種 溶劑萃取，并分別減壓濃縮回收各自對應的溶劑，從而分別得石油醚浸膏、氯仿浸膏、乙酸 乙酯浸膏和正丁醇浸膏； 所述乙醇浸膏與水的重量比為I :80-120 ; 4) 、取乙酸乙酯浸膏，溶于純甲醇中，拌于100-200目硅膠H，烘干、研磨得到吸附樣品 的硅膠粉末； 乙酸乙酯浸膏：純甲醇：100-200目硅膠H的用量比為Ig :0. 8-1. 2ml :1. 8-2. 2g ; 5) 、采用干法上樣，將步驟4)所得的硅膠粉末鋪于硅膠柱上，以二氯甲烷-甲醇為流動 相以100:0-100:4的體積比進行梯度洗脫，用薄層色譜檢測洗脫進程，合并相似組分后濃 縮，從而分別獲得組分F1-F19 ; 將組分F3-16合并后真空干燥，得香莓源抗氧化劑。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的香莓源抗氧化劑的制備方法，其特征是： 所述步驟5)的梯度洗脫為:_
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3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的香莓源抗氧化劑的制備方法，其特征是： 所述步驟5)的真空干燥為：于40-50°C真空干燥至恒重。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的香莓源抗氧化劑的制備方法，其特征是： 所述步驟3)中，石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇的萃取次數(shù)均分別為4次。
【文檔編號】C09K15/34GK104357060SQ201410572373
【公開日】2015年2月18日 申請日期:2014年10月23日 優(yōu)先權(quán)日:2014年10月23日
【發(fā)明者】徐麗珊, 沈佳鑫, 曹晶晶, 陳文榮 申請人:浙江師范大學