一種復(fù)合促生菌劑及其在蔬菜生防中的應(yīng)用
【專利摘要】本發(fā)明公開一種復(fù)合促生菌劑及其在蔬菜生防中的應(yīng)用，將含有芽孢桿菌20?40份，灰色鏈霉菌20?50份，多脂鱗傘5?15份，高山被孢霉5?15份，柱狀黃桿菌5?15份,斯氏假單胞菌5?15份,沼澤紅假單胞菌20?40份和唐菖蒲伯克霍爾德氏菌40?60份制備復(fù)合促生菌，吸附于載體種植蔬菜根莖基質(zhì)粉碎物，輔料為尿素和過磷酸鈣，其中尿素與過磷酸鈣的重量比為1:3；載體和輔料的重量比為1:2；將蔬菜根莖基質(zhì)粉碎成段狀，加水至含水量40?70%，然后按體積比每立方米加入復(fù)合菌液100?300g，混合均勻在20?40℃下密封堆制固體發(fā)酵制備獲得。通過在作物、蔬菜中應(yīng)用具有顯著突出的促生作用。CGMCC No. 649220120903
【專利說明】
一種復(fù)合促生菌劑及其在蔬菜生防中的應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及農(nóng)業(yè)微生物應(yīng)用技術(shù)領(lǐng)域，具體說，本發(fā)明涉及一種復(fù)合促生菌劑及其在對蔬菜促生協(xié)同作用中的應(yīng)用技術(shù)領(lǐng)域。【背景技術(shù)】
[0002]內(nèi)生菌普遍存在于植物體內(nèi)，與宿主形成和諧的共生體，產(chǎn)生大量次生代謝活性物質(zhì)。據(jù)報道，內(nèi)生菌可增強宿主的抗病性、提高植物的生產(chǎn)力、抗逆抗蟲、具有除草劑活性等特性。因此，內(nèi)生菌可作為生物促生中有潛力的因子，在生態(tài)農(nóng)業(yè)和生物農(nóng)藥研制方面具有重要的用途。植物內(nèi)生細菌(jSflc/OjOAjtic Aactefla)可通過不同途徑促進其宿主植物生長，其作用與植物根圍細菌相似(PGP R )，植物根圍促生細菌(朽a/31 gro r tA -joroff1 t i/3貧 rAizo/?acteria，簡稱PGPR)，生存于植物根際、根表，能夠直接或間接地促進或調(diào)節(jié)植物以及作物生長。植物內(nèi)生細菌能固定大氣中的氮供給其宿主植物利用;合成鐵載體能夠溶解并吸收土壤中鐵供給其宿主植物利用;合成植物激素促進植物不同生長階段的生長，具有溶解礦物質(zhì)如磷的機制，使其更有利于植物利用；作用于生長有關(guān)的酶使其調(diào)節(jié)植物的生長發(fā)育。
[0003]人們對植物根際促生菌的應(yīng)用已有數(shù)百年的歷史，為豆科植物接種根瘤菌劑其實就是對根際促生菌的應(yīng)用，這項技術(shù)在一百多年前就已經(jīng)為人們所應(yīng)用，并在世界范圍內(nèi)對農(nóng)作物產(chǎn)量產(chǎn)生了重大影響。20世紀30年代以來，許多學(xué)者都發(fā)現(xiàn)在植物根際范圍內(nèi)生存著許多細菌，它們在生長代謝過程中，會通過某種途徑促進植物生長，例如，東歐地區(qū)曾大規(guī)模的在田間聯(lián)合接種非共生細菌，如固氮菌和芽孢桿菌，開啟了人們深入研究促生菌的歷史。近些年來，隨著人們對根際促生菌研究的深入和重視，越來越多的促生菌被篩選和應(yīng)用到科研和生產(chǎn)中，并逐步深入到對促生菌作用機制、生理效應(yīng)、制劑產(chǎn)品的研究。人們對應(yīng)用微生物來代替化肥和農(nóng)藥寄予了很大的希望。
【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]針對現(xiàn)有技術(shù)中復(fù)合菌劑及其在蔬菜促生中的應(yīng)用研究現(xiàn)狀，本發(fā)明旨在提供一種復(fù)合促生菌劑及其在蔬菜生防中的應(yīng)用，通過采用本發(fā)明提供的復(fù)合促生菌劑，通過對黃瓜、番茄、辣椒和茄子等蔬菜驗證試驗可知具有突出的促生作用，獲得良好的技術(shù)效果， 作為防治蔬菜拮抗菌具有廣泛而適用的價值。
[0005]本發(fā)明采用主要的技術(shù)方案:通過選用以芽孢桿菌為主的多種促生菌，通過將選用的不同促生菌優(yōu)化組合制備復(fù)合促生菌劑，通過對黃瓜、番茄、辣椒和茄子等蔬菜具有突出的促生作用，獲得顯著突出的技術(shù)效果，作為防治蔬菜拮抗菌具有廣泛的應(yīng)用價值。
[0006] 本發(fā)明具體提供一種復(fù)合促生菌劑，含有芽孢桿菌印.)20-40份灰色鏈霉菌(5^1"印to野ces griset/s)20-50份，多脂鱗傘(/%o_/1ta ac/ijDosa)5-15份，高山被抱霉(i/brtiere_/_/a a_/j〇i/3a)5-15份，柱狀黃桿菌(/^/araAacteri?備are)5_15份，斯氏假單胞菌(Z^et/c/o/moas stt/tzeri) 5-15份，沼澤紅假單胞菌(7?Aoc/osec/oset/c/o_ffl〇t/as j〇ac/t/st_ris) 20-40份和唐菖蒲伯克霍爾德氏菌(5t/i姑o_/c/e_ria g_/ac/1_/i)CGMCC N0.6492 的40-60份，分別制備的菌液混合獲得復(fù)合促生菌劑。
[0007]同時，本發(fā)明提供利用上述提供的復(fù)合促生菌劑制備的微生物肥料。配伍后的復(fù)合菌液充分吸附于載體;載體為種植蔬菜根莖基質(zhì)粉碎物，顆粒大小為l_30mm;輔料為尿素和過磷酸鈣，其中尿素與過磷酸鈣的重量比為1:3;載體和輔料的重量比為1:2;將蔬菜根莖基質(zhì)粉碎成l_30mm的段狀，加水至含水量40-70%，然后按體積比每立方米加入復(fù)合菌液 100-300g，并混合均勻，在空氣溫度20-40°C下密封堆制固體發(fā)酵制備獲得。
[0008]本發(fā)明通過提供將制備的一種復(fù)合促生菌劑在蔬菜促生中的應(yīng)用，對黃瓜、番茄、 辣椒和茄子等蔬菜具有突出的促生作用，獲得良好的技術(shù)效果。
[0009]進一步，本發(fā)明利用復(fù)合促生菌劑制備的微生物肥料在蔬菜促生中的應(yīng)用，對黃瓜、番茄、辣椒和茄子等蔬菜中應(yīng)用具有顯著突出的促生作用，獲得良好的技術(shù)效果。
[0010]本發(fā)明中，所選用的芽孢桿菌(5aciDus S/7.)、灰色鏈霉菌(?St1-ejDtoffijces griset/s)、多脂鱗傘(/%o_/1ta ac/ijDosa)、高山被抱霉(i/b_rtie_re_/_/a a_/j〇i/3a)、柱狀黃桿菌 (/^/araAacteri? co_/t?zmare)、斯氏假單胞菌(Pset/c/off1flas stt/tzeri)、沼澤紅假單胞菌 (7?Aoc/osec/oset/c/c_t/as jOac/ustris)都為常見的菌種，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員可以通過公眾渠道獲得。
[0011]本發(fā)明采用的唐菖蒲伯克霍爾德氏菌(^/rMWc/eria Wac/iWi)，菌株編號為 LJ20。該菌株已于申請日前保藏于布達佩斯條約微生物國際保藏單位:中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC)。地址:北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號，中國科學(xué)院微生物研究所，郵編:1〇〇1〇1。保藏日期是2012年9月3日，保藏號是CGMCC N0.6492。經(jīng)微生物學(xué)鑒定為唐菖蒲伯克霍爾德氏菌(j9t/rlAo2c/eria g^ac/1ii)。該菌株最適生長條件為:溫度35°C，培養(yǎng)基采用固體LB培養(yǎng)基，培養(yǎng)條件:pH 7.0,時間16h;菌落中等大小、扁平，表面干燥、有褶皺，邊緣整齊，不透明；顯微觀察其菌體呈短桿狀，芽孢中生，不膨大;依照第九版《伯杰氏系統(tǒng)細菌學(xué)鑒定手冊》jWkoua』〇/ 5>ste?atic fecter1-如燈》)和《常用細菌系統(tǒng)鑒定手冊》對LJ20菌株進行形態(tài)學(xué)測定，生理生化檢測確定LJ20菌株為克霍爾德氏菌屬(及/r處o^c/eria)中的成員。通過BLAST同源比對，菌株LJ20的16S rDNA 序列在NCBI數(shù)據(jù)庫中進行BLAST分析后，構(gòu)建系統(tǒng)進化樹，該菌株LJ20與Wac/iWi AY268167處于最小分支，是其近似種;進而將該菌株LJ20確定為唐菖蒲伯克霍爾德氏菌(Burkholderia glad1li)。[〇〇12]本發(fā)明進一步提供了菌種唐菖蒲伯克霍爾德氏菌Wac/iWi) CGMCC N0.6492的保存條件，采用LB培養(yǎng)基成分:蛋白胨1%(W/V)，酵母膏0.5%(W/V)，氯化鈉1% (W/V)，瓊脂2%(W/V)，pH 7.0，121°(:滅菌30分鐘。1^培養(yǎng)基培養(yǎng)條件:在其1^培養(yǎng)基斜面上35° C條件下，培養(yǎng)16小時，后采用無菌的脫脂牛奶為保護劑，真空冷凍干燥后低溫保存;平時使用保存在LB培養(yǎng)基的斜面上，4° C冰箱保存?zhèn)溆谩?br>[0013]本發(fā)明采用的上述菌種發(fā)酵液的制備方法及其在制備過程中選用的培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件都為本領(lǐng)域常見和熟知。
[0014]通過實施本發(fā)明具體的
【發(fā)明內(nèi)容】
，可以達到以下有益效果:本發(fā)明具體提供一種復(fù)合促生菌劑，含有芽孢桿菌印.)20-40份灰色鏈霉菌(?StrejDtoffijces griset/s)20-50份，多脂鱗傘(/%o_/1ta ac/ijDosa)5-15份，高山被抱霉 (i/b_rtie_re_/_/a a_/j〇i/3a)5-15份，柱狀黃桿菌(/^/araAacte1-1? co_/t/備a_re)5_15份，斯氏假單胞菌(Z^et/c/off1flas stt/tzeri) 5-15份，沼澤紅假單胞菌(7?Aoc/osec/oset/c/o_ffl〇t/as j〇ac/t/st_ris) 20-40份和唐菖蒲伯克霍爾德氏菌(5t/i姑o_/c/e_ria g_/ac/1_/i)CGMCC N0.6492 的40-60份菌液分別制備菌液混合獲得。通過利用復(fù)合促生菌劑及提供的制備的微生物肥料在蔬菜促生中的應(yīng)用，對黃瓜、番茄、辣椒和茄子等蔬菜中應(yīng)用具有顯著突出的促生作用，獲得良好的技術(shù)效果。【具體實施方式】
[0015]
[0016]下面，舉實施例說明本發(fā)明，但是，本發(fā)明并不限于下述的實施例。
[0017] 本發(fā)明采用的唐菖蒲伯克霍爾德氏菌Wac/iWi)，菌株編號為 LJ20。該菌株已于申請日前保藏于布達佩斯條約微生物國際保藏單位:中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC)。地址:北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號，中國科學(xué)院微生物研究所，郵編:1〇〇1〇1。保藏日期是2012年9月3日，保藏號是CGMCC N0.6492。經(jīng)微生物學(xué)鑒定為唐菖蒲伯克霍爾德氏菌(j9t/rlAo2c/eria g^ac/1ii)。該菌株最適生長條件為:溫度35°C，培養(yǎng)基采用固體LB培養(yǎng)基，培養(yǎng)條件:pH 7.0,時間16h;菌落中等大小、扁平，表面干燥、有褶皺，邊緣整齊，不透明；顯微觀察其菌體呈短桿狀，芽孢中生，不膨大;依照第九版《伯杰氏系統(tǒng)細菌學(xué)鑒定手冊》jWkoua』〇/ 5>ste?atic fecter1-如燈》)和《常用細菌系統(tǒng)鑒定手冊》對LJ20菌株進行形態(tài)學(xué)測定，生理生化檢測確定LJ20菌株為克霍爾德氏菌屬(及/r處o^c/eria)中的成員。通過BLAST同源比對，菌株LJ20的16S rDNA 序列在NCBI數(shù)據(jù)庫中進行BLAST分析后，構(gòu)建系統(tǒng)進化樹，該菌株LJ20與Wac/iWi AY268167處于最小分支，是其近似種;進而將該菌株LJ20確定為唐菖蒲伯克霍爾德氏菌(Burkholderia glad1li)。[〇〇18] 本發(fā)明進一步提供了菌種唐菖蒲伯克霍爾德氏菌從o^c/eria CGMCC N0.6492的保存條件，采用LB培養(yǎng)基成分:蛋白胨1%(W/V)，酵母膏0.5%(W/V)，氯化鈉1% (W/V)，瓊脂2%(W/V)，pH 7.0，121°(:滅菌30分鐘。1^培養(yǎng)基培養(yǎng)條件:在其1^培養(yǎng)基斜面上35° C條件下，培養(yǎng)16小時，后采用無菌的脫脂牛奶為保護劑，真空冷凍干燥后低溫保存;平時使用保存在LB培養(yǎng)基的斜面上，4° C冰箱保存?zhèn)溆谩?br>[0019]本發(fā)明中選用的所有菌種和原輔材料，以及選用的菌種培養(yǎng)條件和方法都為本領(lǐng)域熟知選用的，本發(fā)明中涉及到的%都為重量百分比，除非特別指出除外。
[0020]實施例一:復(fù)合促生菌劑的制備復(fù)合促生菌劑，含有芽孢桿菌(jfeciDus Sj〇.)20公斤，灰色鏈霉菌(?StrejDtoffijces griset/s)20公斤，多脂鱗傘(/%o_/1ta ac/ijDosa)5公斤，高山被抱霉(i/brtiere_/_/a a_/j〇i/3a) 5公斤，柱狀黃桿菌(/773 7〇/73(^61^"?(^〇_/"備31'6)5公斤，斯氏假單胞菌(/?56"0?〇?〇/335 stt/tzeri) 5公斤，沼澤紅假單胞菌(7?Aoc/osec/oset/c/c_t/as j〇ac/t/stris) 20公斤和唐菖蒲伯克霍爾德氏菌(執(zhí)/rAAo_/c/eria g_/ac/1_/i)CGMCC N0.6492的40公斤，分別制備的菌液混合獲得復(fù)合促生菌劑。[〇〇21]實施例二:復(fù)合促生菌劑的制備復(fù)合促生菌劑，含有芽孢桿菌印.)40公斤，灰色鏈霉菌50公斤，多脂鱗傘[a a15公斤，高山被抱霉d_r[ie_re_/_/a 15公斤，柱狀黃桿菌(Wac6>_/M?/]are) 15公斤，斯氏假單胞菌{Pseudomonas stutzeri) 15^jr,{Rhodosedoseudomouas padustris)40公斤和唐菖蒲伯克霍爾德氏菌(j9orA/?6>_Weria Wad1hOCGMCC N0.6492的60公斤，分別制備的菌液混合獲得復(fù)合促生菌劑。[〇〇22]實施例三:復(fù)合促生菌劑的制備復(fù)合促生菌劑，含有芽孢桿菌印.)30公斤，灰色鏈霉菌 ^ri*sew*s)40公斤，多脂鱗傘a^i/76>*sa)10公斤，高山被抱霉d_r[ie_re_/_/a 10公斤，柱狀黃桿菌(Wa10公斤，斯氏假單胞菌{Pseudomonas stutzeri) 10^jr*,{Rhodosedoseudomouas padustris)30公斤和唐菖蒲伯克霍爾德氏菌(j9orA/?6>_Weria f/ad1hOCGMCC N0.6492的50公斤，分別制備的菌液混合獲得復(fù)合促生菌劑。
[0023]實施例四:復(fù)合促生菌劑的制備復(fù)合促生菌劑，含有芽孢桿菌印.)25公斤，灰色鏈霉菌 ^ri*sew*s)45公斤，多脂鱗傘a(^i/76>*sa)6公斤，高山被抱霉14公斤，柱狀黃桿菌(/7/^6>/^(^虹〗訓(xùn)？(^6>_/腫/^作)12公斤，斯氏假單胞菌(/^仙(^6>肌咖*5 *s totoeri) 14公斤，沼澤紅假單胞菌/7a^*s^ri*s) 35公斤和唐菖蒲伯克霍爾德氏菌r/ad1hOCGMCC N0.6492的55公斤，分別制備的菌液混合獲得復(fù)合促生菌劑。[〇〇24]實施例五:復(fù)合促生菌劑的制備復(fù)合促生菌劑，含有芽孢桿菌印.)25公斤，灰色鏈霉菌 ^ri*sew*s)48公斤，多脂鱗傘adi/76>*sa)14公斤，高山被抱霉d_rfie_re_/_/a 公斤，柱狀黃桿菌(Wa15公斤，斯氏假單胞菌{Pseudomonas stutzeri) jr , WiW^L\^^-M^{Rhodosedoseudomouas padustris) 25公斤和唐菖蒲伯克霍爾德氏菌(及/rAAWeria Wad1hOCGMCC N0.6492的40公斤菌液分別制備菌液混合獲得。
[0025]實施例六:復(fù)合促生菌劑的制備復(fù)合促生菌劑，含有芽孢桿菌印.)35公斤，灰色鏈霉菌 ^ri*sew*s)45公斤，多脂鱗傘a^i/76>*sa)10公斤，高山被抱霉d_r[ie_re_/_/a 公斤，柱狀黃桿菌(Wa15公斤，斯氏假單胞菌{Pseudomonas stutzeri) 5公斤，WiW^L\^^M^{Rhodosedoseudomouas padustris)^Q 公斤和唐菖蒲伯克霍爾德氏菌f/ad1hOCGMCC N0.6492的60公斤，分別制備的菌液混合獲得復(fù)合促生菌劑。
[0026]實施例七:利用復(fù)合促生菌劑制備微生物肥料利用上述實施例一至實施例六提供的復(fù)合促生菌劑制備的微生物肥料。配伍后的復(fù)合菌液充分吸附于載體;載體為種植蔬菜根莖基質(zhì)粉碎物，顆粒大小為l-30mm;輔料為尿素和過磷酸鈣，其中尿素與過磷酸鈣的重量比為1:3;載體和輔料的重量比為1:2;將蔬菜根莖基質(zhì)粉碎成l_30mm的段狀，加水至含水量40-70%，然后按體積比每立方米加入復(fù)合菌液100-300g，并混合均勻，在空氣溫度20-40°C下密封堆制固體發(fā)酵制備獲得。
[0027]實施例八:在辣椒、花生、水稻和番茄上進行6個微生物肥料的田間試驗，結(jié)果表明:施用上述實施例提供的微生物肥料可使花生和辣椒的氮肥用量降低20%，磷肥用量降低50%，并使花生和辣椒產(chǎn)量比常規(guī)施肥最高增加7.5%和20%;在水稻栽培中，當(dāng)N、P、K用量各降低 17%時，3個微生物肥料能使水稻產(chǎn)量略有增加；番茄栽培，N、P、K用量比常規(guī)施肥各降低30.7%，42.4%，50%時，番茄產(chǎn)量最高可增加27% ;在無公害辣椒栽培中，施用微生物肥料可以替代40%的有機肥，并且產(chǎn)量比常規(guī)施肥最高增加28%。同一微生物肥料針對不同作物會出現(xiàn)增產(chǎn)或減產(chǎn)2種相反的結(jié)果，應(yīng)針對不同作物研發(fā)相應(yīng)的專用微生物肥料。[〇〇28]1.1供試材料上述實施例七提供含有不同功能菌株的6個微生物肥料:試驗樣1;試驗樣2;試驗樣 3;試驗樣4;試驗樣5;試驗樣6。
[0029]1.2試驗方法試驗設(shè)6個微生物肥料處理，1個常規(guī)施肥處理，共7個處理。3次重復(fù)，隨機區(qū)組排列。
[0030]1.2.1辣椒試驗:以常規(guī)施肥，即腐熟廄肥45000 kg / hm2，尿素300 kg/hm2,重過磷酸鈣150 kg / hm2作對照，在施用與對照等量的廄肥時，6個微生物肥料各添加尿素240 kg/ hm2，重過磷酸|丐75 kg/ hm2作處理。微生物肥料用量300 kg/ hm2。 [〇〇31]1.2.2無公害辣椒試驗:以常規(guī)施肥，即腐熟廄肥35700 kg / hm2，牛糞71400 kg/ hm2，重過磷酸|丐195 kg/ hm2作對照；在施用腐熟廄肥21450kg/ hm2，牛奠 45000 kg/ hm2時，6個微生物肥料各添加過磷酸媽90 kg/ hm2作處理。微生物肥料用量 300 kg/ hm2〇[〇〇32]1.2.3花生試驗:以常規(guī)施肥，即腐熟廄肥30000 kg / hm2，尿素150 kg/hm2,重過磷酸鈣160.5 kg/ hm2作對照，在施用與對照等量的廄肥時，6個微生物肥料各添加尿素120 kg/ hm2，重過磷酸|丐81 kg/ hm2作處理。小區(qū)面積2.8 mX 4m。微生物肥料用量300 kg/ hm2。[〇〇33]1.2.4水稻試驗:以常規(guī)施肥，即腐熟芝麻餅肥300 kg/ hm2,烤煙專用肥(N:P205:K20= 10:10:20) 450 kg/ hm2，移栽 1 個月后追施K2SO4 90 kg/hm2，KN〇3 15 kg/ hm2作對照，在施用與對照等量的餅肥時，6個微生物肥料各添加水稻專用肥375 kg/ hm2,追肥同對照作處理。小區(qū)面積66.7 m2。微生物肥料用量225 kg/ hm2。[〇〇34]1.2.5番茄試驗:以常規(guī)施肥，即尿素405kg/ hm2,磷酸二銨390 kg / hm2，硫酸鉀450 kg/hm2作對照，供試的6個微生物肥料處理，化肥用量均為尿素300 kg / hm2，磷酸二銨225 kg / hm2,硫酸鉀225 kg/ hm2。小區(qū)面積4 mX 2.7 m。微生物肥料用量300 kg/ hm2。
[0035]2試驗結(jié)果2.1辣椒田間試驗該試驗設(shè)計是施用微生物肥料的6個處理較辣椒常規(guī)施肥降低氮肥用量20%，降低磷肥用量50%。試驗結(jié)果顯示:施用微生物肥料試驗樣2和試驗樣4的處理，辣椒產(chǎn)量為11429 kg / hm2和12107 kg/ hm2，分別比常規(guī)施肥辣椒增產(chǎn)13%和20%。其他處理較對照均有減產(chǎn)，幅度在5% - 10.7%。初步試驗表明，試驗樣3和試驗樣1兩個微生物肥料，可以降低辣椒栽培的化肥施用量，并具有良好的增產(chǎn)效果。[〇〇36]2.2無公害辣椒田間試驗該試驗6個微生物肥料處理廄肥和牛糞用量較無公害辣椒常規(guī)施肥各降低40%，重過磷酸鈣和硫酸銨用量與對照相同。試驗結(jié)果顯示:施用微生物肥料試驗樣1和試驗樣2 處理的辣椒產(chǎn)量較常規(guī)施肥分別增產(chǎn)15%和28%，試驗樣3處理比對照略有增產(chǎn)，其他3 個微生物肥料處理較對照減產(chǎn)7%?10%。初步試驗表明，微生物肥料試驗樣1和試驗樣2 在無公害辣椒生產(chǎn)中具有降低有機肥用量和增加產(chǎn)量的雙重作用。[〇〇37]2.3花生田間試驗該試驗6個微生物肥料處理尿素和重過磷酸鈣用量較花生常規(guī)施肥對照分別降低20% 和50%。試驗結(jié)果顯示:微生物肥料試驗樣6處理花生產(chǎn)量較對照增產(chǎn)7.5%，處理試驗樣1和試驗樣3較對照增產(chǎn)6.7%，處理試驗樣4較對照略有增產(chǎn)，2個處理試驗樣5和試驗樣2較對照減產(chǎn)2%和5%。初步試驗表明，3個微生物肥料試驗樣6、試驗樣1和試驗樣3 在花生栽培中有較好的應(yīng)用效果。[〇〇38]2.4水稻田間試驗該試驗6個微生物肥料處理所用水稻專用化肥均比水稻常規(guī)用量降低17%。3個微生物肥料處理試驗樣3、試驗樣4和試驗樣5水稻產(chǎn)量比對照略有增加，但增產(chǎn)幅度極小，僅為1.6%左右，其他3個微生物肥料處理比對照略有減產(chǎn)，但減產(chǎn)幅度在5%以下。說明施用供試的6個微生物肥料替代17%的水稻化學(xué)專用肥不會對水稻產(chǎn)量造成大的影響。[〇〇39]2.5番茄田間試驗6個微生物肥料處理較對照氮肥用量降低30.7%，磷肥用量降低42.4%，鉀肥用量降低50%。從試驗結(jié)果得出，試驗樣1處理產(chǎn)量較對照增加3704 kg/ hm2，增產(chǎn)27%，試驗樣4和試驗樣5處理分別比對照增產(chǎn)20%和19%，試驗樣3和試驗樣6處理分別比對照增產(chǎn) 15%和13%，只有試驗樣2處理產(chǎn)量較對照減產(chǎn)3%。說明供試的6個微生物肥料除試驗樣2 外均有良好的增產(chǎn)效果，且能大幅度降低化肥的施用量。
[0040]實施例九:通過盆栽試驗，研究了上述實施例一至實施例六制備的六種不同的復(fù)合促生菌劑對土豆、黃瓜、茄子、辣椒、花生、大豆6種蔬菜根結(jié)線蟲的生物防治作用。結(jié)果表明:接種上述實施例一至實施例六制備的復(fù)合促生菌劑能夠降低根結(jié)級數(shù)，明顯抑制根結(jié)線蟲的生長，對每種蔬菜都有不能程度的防治效果。
[0041]植物寄生線蟲是植物侵染性病害的重要病原物之一，其對植物造成的危害超過細菌和病毒，僅次于病原真菌。蔬菜中以番茄、土豆、黃瓜、茄子、辣椒、花生、大豆等受害較重， 由于對番茄已經(jīng)進行多次田間試驗，效果較好，為了研究上述實施例制備的復(fù)合促生菌劑的適用范圍，把其余的6種蔬菜做為試驗對象，進行盆栽試驗，并對其生防效果進行比較，從而為深入研制開發(fā)上述實施例制備的復(fù)合促生菌劑及其在生產(chǎn)中的應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。[〇〇42]1材料與方法1.1試驗材料供試作物:土豆、黃瓜、茄子、辣椒、花生、大豆(種子站購買)。供試菌株:上述實施例制備的復(fù)合促生菌劑通過選購芽孢桿菌(BaciDus Sj0.)、灰色鏈霉菌(?StrejDtoffijces griset/s)、多脂鱗傘(/%o_/1ta ac/ijDosa)、高山被抱霉(i/b_rtie_re_/_/a a_/j〇i/3a)、柱狀黃桿菌 (/^/araAacteri? co_/t?zmare)、斯氏假單胞菌(Pset/c/off1flas stt/tzeri)、沼澤紅假單胞菌 (7?Aoc/osec/oset/c/c_t/as jOac/ustris)都為常見的菌種，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員可以通過公眾渠道獲得，唐菖蒲伯克霍爾德氏菌(及/rAAoic/eria Wac/12i)CGMCC N0.6492為
【申請人】前期獲得的保藏菌種。供試線蟲的采集與分離:從北票藍旗根結(jié)線蟲的發(fā)生地采樣，先把病根洗凈，挑取卵囊，進行孵化備用。[〇〇43]1.2盆栽試驗設(shè)計每種蔬菜分別進行育苗、移栽，每種蔬菜為30棵，分別加入根結(jié)線蟲2齡幼蟲2 000條/ 缽。每種蔬菜設(shè)2組處理，即處理組:15棵加入上述實施例制備的復(fù)合促生菌劑發(fā)酵液10 mL/缽;對照組(00:15棵不加上述實施例制備的復(fù)合促生菌劑作為對照。各處理采取定期除草、澆水等常規(guī)管理，比較各處理組每種蔬菜的結(jié)瘤情況、土里的線蟲數(shù)以及株高，干重。
[0044]1.3線蟲根結(jié)級數(shù)鑒定按Benjumin D的方法進行根結(jié)分級:無根結(jié)為0級；1%?20%有根結(jié)為1級；21%?40%有根結(jié)為2級;41%?60%有根結(jié)為3級;61%?80%有根結(jié)為4級;81%?100%有根結(jié)為5級。
[0045]2結(jié)果與分析通過對照組(CK)根結(jié)線蟲對每種蔬菜的根部侵染都很嚴重，始終是4?5級，線蟲數(shù)量也和接種前變化不明顯，線蟲的正常死亡率也很低。但是添加了上述實施例制備的復(fù)合促生菌劑劑后(處理組)，根結(jié)級數(shù)明顯下降，線蟲數(shù)量也大幅度下降，從株高和干重的指標(biāo)上來看，上述實施例制備的復(fù)合促生菌劑劑對每種蔬菜都有作用，株高和干重都有不同程度地提尚。
[0046]3 結(jié)論由于根結(jié)線蟲病是多種蔬菜的主要根系病害，它分布廣泛、危害嚴重、不易防治。為此， 該試驗對從土壤中分離出來的上述實施例制備的復(fù)合促生菌劑對根結(jié)線蟲防治的多樣性進行了研究，結(jié)果表明:上述實施例制備的復(fù)合促生菌劑劑對根結(jié)線蟲具有很好的生物防治效果，可以顯著降低根結(jié)線蟲的根結(jié)級數(shù)和2齡幼蟲數(shù)量，表現(xiàn)出明顯抑制根結(jié)線蟲生長的作用。此外，還能使植物的株高和干重都有不同程度地提高，能提高植株本身的抗病能力。通過上述實施例制備的復(fù)合促生菌劑劑的研制及其防治效果的比較，確定上述實施例制備的復(fù)合促生菌劑劑對各種根結(jié)線蟲的生物防治都有效果，值得進一步開發(fā)和推廣應(yīng)用。[〇〇47]通過上述試驗驗證，本發(fā)明提供的復(fù)合促生菌劑及利用復(fù)合促生菌劑制備微生物肥料在蔬菜中具有明顯突出的促生作用，特別是對于黃瓜、番茄、辣椒和茄子等蔬菜具有突出的促生作用，獲得良好的技術(shù)效果。
【主權(quán)項】
1.一種復(fù)合促生菌劑，含有芽孢桿菌(Bacillus sp.)20-40份，灰色鏈霉菌 (Streptomyces griseus)20_50份，多脂鱗傘(Phol1ta adiposa)5_15份，高山被抱霉 (Mortierella alpina)5_15份，柱狀黃桿菌(Flavobacterium columnare)5_15份，斯氏假 單胞菌(Pseudomonas stutzeri) 5-15份，沼澤紅假單胞菌(Rhodosedoseudomouas padustris) 20-40份和唐菖蒲伯克霍爾德氏菌(Burkholderia glad1li)CGMCC N0.6492 的40-60份，分別制備的菌液混合獲得復(fù)合促生菌劑。2.—種如權(quán)利要求1所述的復(fù)合促生菌劑在蔬菜促生中的應(yīng)用。3.—種復(fù)合促生菌劑制備的微生物肥料，其特征在于，使用權(quán)利要求1提供的復(fù)合促生 菌劑充分吸附于載體;載體為種植蔬菜根莖基質(zhì)粉碎物，顆粒大小為l-30mm;輔料為尿素和 過磷酸鈣，其中尿素與過磷酸鈣的重量比為1:3;載體和輔料的重量比為1:2;將蔬菜根莖基 質(zhì)粉碎成l_30mm的段狀，加水至含水量40-70%，然后按體積比每立方米加入復(fù)合菌液100-300g，并混合均勻，在空氣溫度20-40°C下密封堆制固體發(fā)酵制備獲得。4.一種如權(quán)利要求3所述的復(fù)合促生菌劑制備的微生物肥料在蔬菜促生中的應(yīng)用。
【文檔編號】C12R1/38GK106085918SQ201610606604
【公開日】2016年11月9日
【申請日】2016年7月29日 公開號201610606604.X, CN 106085918 A, CN 106085918A, CN 201610606604, CN-A-106085918, CN106085918 A, CN106085918A, CN201610606604, CN201610606604.X
【發(fā)明人】楊蓉, 龍宣杞, 侯敏, 詹發(fā)強, 崔衛(wèi)東, 楊文琦, 張崢
【申請人】新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)院微生物應(yīng)用研究所