R?9?(2?膦酰甲氧基丙基)?腺嘌呤一水合物晶體及制備、富馬酸替諾福韋二吡呋酯制備
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種R?9?(2?膦酰甲氧基丙基)?腺嘌呤一水合物晶體，本發(fā)明晶體純度高、質(zhì)量好，能夠用于進(jìn)一步制備高質(zhì)量的富馬酸替諾福韋二吡呋酯。同時(shí)，本發(fā)明還提供了一種所述R?9?(2?膦酰甲氧基丙基)?腺嘌呤一水合物晶體的制備方法，本發(fā)明方法所用原料易得，且操作簡(jiǎn)便，晶體產(chǎn)率高、質(zhì)量好；同時(shí)，本發(fā)明方法中通過(guò)分批加料等操作步驟，也進(jìn)一步提高了所述晶體的產(chǎn)率。進(jìn)一步的，本發(fā)明還提供了一種富馬酸替諾福韋二吡呋酯的制備方法，本發(fā)明方法中，以本發(fā)明所制得的高純度R?9?(2?膦酰甲氧基丙基)?腺嘌呤一水合物晶體為原料，從而可以制得高質(zhì)量的富馬酸替諾福韋二吡呋酯產(chǎn)物，并具有產(chǎn)物產(chǎn)量好，操作方法簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)。
【專利說(shuō)明】
R-9-(2-麟酰甲氧基丙基)-腺嘌昤一水合物晶體及制備、富馬 酸替諾福韋二吡呋酯制備
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及化合物晶體領(lǐng)域，具體的，本發(fā)明涉及R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌 呤一水合物晶體及制備、富馬酸替諾福韋二吡呋酯制備。
【背景技術(shù)】
[0002] 富馬酸替諾福韋二吡呋酯是一種核苷酸反轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(NRTI)替諾福韋的酯類 前體藥物，并能夠用于治療艾滋病及HBV感染。富馬酸替諾福韋二吡呋酯最早是由美國(guó)吉利 德科學(xué)公司(Gilead Sciences)研制的，其制劑為300mg片劑，商品名Viread?。
[0003] 2001年10月26日由美國(guó)FDA首次批準(zhǔn)富馬酸替諾福韋二吡呋酯上市的。隨后，在歐 盟、日本和澳大利亞等100多個(gè)國(guó)家和地區(qū)批準(zhǔn)臨床使用。我國(guó)于2007年8月22日批準(zhǔn)美國(guó) 吉利德公司進(jìn)口替諾福韋二吡呋酯300mg片劑，商品名為韋瑞德。FDA于2008年8月11日將 Viread?擴(kuò)大適應(yīng)癥，并將其用于治療有肝代償功能的成人慢性乙肝病毒感染者。歐盟、澳 大利亞、新西蘭和土耳其等國(guó)也相繼批準(zhǔn)臨床使用。
[0004] 富馬酸替諾福韋二吡呋酯片主藥成分為富馬酸替諾福韋二吡呋酯，為一種一磷酸 腺苷的開(kāi)環(huán)核苷磷化二酯結(jié)構(gòu)類似物，富馬酸替諾福韋二吡呋酯首先需要經(jīng)二酯的水解轉(zhuǎn) 化為替諾福韋，然后發(fā)揮藥理作用。
[0005] R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一水合物是合成富馬酸替諾福韋二吡呋酯最關(guān) 鍵的中間體，直接影響著終產(chǎn)物富馬酸替諾福韋二吡呋酯的質(zhì)量。然而，在現(xiàn)有技術(shù)中，對(duì) R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一水合物晶體并沒(méi)有進(jìn)行過(guò)任何深入的研究或者報(bào)道。 同時(shí)，由于富馬酸替諾福韋二吡呋酯片是經(jīng)美國(guó)FDA和歐盟EDMA批準(zhǔn)即可用于HIV感染又可 用于HBV感染的少數(shù)藥物之一，而且富馬酸替諾福韋二吡呋酯也是一種非常好的抗乙肝病 毒藥。因此，開(kāi)發(fā)一種高純度R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一水合物晶體，并進(jìn)一步將 其用于制備富馬酸替諾福韋二吡呋酯，這無(wú)論是對(duì)于治療艾滋病還是乙肝而言，都是非常 有意義的。
[0006] 有鑒于此，特提出本發(fā)明。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明的第一目的在于提供一種R-9_(2-膦酰甲氧基丙基）_腺嘌呤一水合物晶 體，本發(fā)明R-9_(2-膦酰甲氧基丙基)_腺嘌呤一水合物晶體純度高、質(zhì)量好，能夠用于進(jìn)一 步制備高質(zhì)量的富馬酸替諾福韋二吡呋酯。
[0008] 本發(fā)明的第二目的在于提供一種所述R-9_(2-膦酰甲氧基丙基)_腺嘌呤一水合物 晶體的制備方法，本發(fā)明方法所用原料易得，且操作簡(jiǎn)便，晶體產(chǎn)率高、質(zhì)量好；同時(shí)，本發(fā) 明方法中通過(guò)分批加料等操作步驟，也進(jìn)一步提高了所述晶體的產(chǎn)率。
[0009] 本發(fā)明的第三個(gè)目的在于提供一種富馬酸替諾福韋二吡呋酯的制備方法，本發(fā)明 方法中，通過(guò)首先制備R-9_(2-膦酰甲氧基丙基)_腺嘌呤一水合物晶體再進(jìn)一步制備目標(biāo) 產(chǎn)物，從而可以制得高質(zhì)量的富馬酸替諾福韋二吡呋酯產(chǎn)物，并具有產(chǎn)物產(chǎn)量好，操作方法 簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)。
[0010] -種R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一水合物晶體，所述晶體的X-射線粉末圖 中2Θ為7.5768、15.0221、15.6349、16.0135;其中，所述R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤 一水合物結(jié)構(gòu)如下：
[0011] 本發(fā)明中，R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一水合物以特定的晶體形式存在，而 這也使得該化合物具有較高的純度以及較好的穩(wěn)定性，這也進(jìn)一步有利于制備高質(zhì)量的富 馬酸替諾福韋二吡呋酯終產(chǎn)物。
[0012] 可選的，本發(fā)明中，所述R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一7K合物晶體的X-射線 粉末圖中 2Θ 為7·5768、15·0221、15·6349、16·0135、18·2180、22·5071、23·5315、24·8028。
[0013] 可選的，本發(fā)明中，所述R-9-(2_膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一7Κ合物晶體的X-射線 粉末圖基本如圖8所示。
[0014] 可選的，本發(fā)明中，所述R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一水合物晶體的X-射線 粉末數(shù)據(jù)基本如表1所示。
[0015] 同時(shí)，本發(fā)明還提供了一種所述的R-9_(2-膦酰甲氧基丙基)_腺嘌呤一水合物晶 體的制備方法，所述方法包括如下步驟：
[0016] (1)向DMF中分別加入腺嘌呤、R_( + )_碳酸丙烯酯以及氫氧化鈉，并加熱保溫反應(yīng)， 然后降溫并加入甲醇和異丙醇的混合溶液，加入后，繼續(xù)降溫析晶，然后過(guò)濾，并將濾餅洗 滌、干燥，即得到R-9_(2-羥基丙基)腺嘌呤；（2)向NMP中分別加入步驟(1)所制得的R-9-(2-羥基丙基)腺嘌呤、甲苯磺酰氧甲基膦酸二乙酯、叔丁醇鎂并反應(yīng);然后，向反應(yīng)體系內(nèi)加入 冰醋酸、溴化鈉以及環(huán)己烷，回流分水后，將環(huán)己烷蒸出，降溫并再次加入溴化鈉，繼續(xù)反 應(yīng);在反應(yīng)體系中分批次加入三甲基氯硅烷，并繼續(xù)反應(yīng)，然后停止反應(yīng)，并在冷卻后，向 反應(yīng)體系中加入水，并攪拌溶解，然后靜置分液，在水相中加入三水合乙酸鈉，并在其溶解 后冷卻靜置，然后過(guò)濾，并將濾餅洗滌干燥，即得到R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一水 合物晶體粗品；（3)將步驟(2)中所制得的R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一水合物晶體 粗品溶于水中，并加熱溶解，然后降溫?cái)嚢栉鼍Р⑦^(guò)濾，將濾餅洗滌干燥后，即得到產(chǎn)物R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一水合物晶體。
[0017] 本發(fā)明方法所用原料易得，且制備過(guò)程的操作簡(jiǎn)便，所制得的晶體產(chǎn)率高、質(zhì)量 好。同時(shí)，本發(fā)明方法中，通過(guò)分批加入溴化鈉、三甲基氯硅烷等原料，也避免了一次加入原 料而產(chǎn)生反應(yīng)速率過(guò)快、副反應(yīng)過(guò)多所導(dǎo)致的產(chǎn)率降低。
[0018] 本發(fā)明中的反應(yīng)流程如下：
[0020] 可選的，本發(fā)明中，步驟(1)中所述加熱反應(yīng)并保溫為加熱至135~145°C并保溫反 應(yīng)。進(jìn)一步的，所述保溫反應(yīng)的時(shí)間為4_5h。
[0021] 可選的，本發(fā)明中，步驟(1)中所述降溫為降溫至100-120°c。
[0022] 可選的，本發(fā)明步驟(1)中所述甲醇的用量為腺嘌呤用量的2-4倍，所述異丙醇的 用量為腺嘌呤用量的2-4倍;優(yōu)選的，本發(fā)明步驟（1)中所述甲醇的用量為腺嘌呤用量的3 倍，所述異丙醇的用量為腺嘌呤用量的3倍。進(jìn)一步的所述甲醇和異丙醇混合溶液的加入時(shí) 間為15_60min。
[0023] 可選的，本發(fā)明中，步驟（1)中所述繼續(xù)降溫為繼續(xù)降溫至0-5°C;進(jìn)一步的，所述 繼續(xù)降溫反應(yīng)的時(shí)間為2_3h。
[0024] 可選的，本發(fā)明中，步驟（1)中所述濾餅洗滌為先將濾餅以異丙醇泡洗一次，然后 再以少量異丙醇淋洗2次。
[0025] 可選的，本發(fā)明中，步驟（1)中還進(jìn)一步包括在濾餅洗滌后，將濾餅用離心機(jī)將濾 餅中產(chǎn)物與溶劑分離(即甩干)后，再進(jìn)行干燥的步驟。
[0026] 可選的，本發(fā)明中，步驟(1)所述干燥的時(shí)間為4_6h，所述干燥的溫度為70-80°C。
[0027] 可選的，本發(fā)明中，步驟(2)中R-9_(2-羥基丙基)腺嘌呤、甲苯磺酰氧甲基膦酸二 乙酯以及叔丁醇鎂反應(yīng)的溫度為70-80°C;進(jìn)一步的，所述反應(yīng)的時(shí)間為3_4h。
[0028] 可選的，本發(fā)明中，步驟(2)中所述回流反應(yīng)的時(shí)間為1 _2h。
[0029]可選的，本發(fā)明中，步驟(2)中所述環(huán)己烷蒸出的溫度為110-120°C。
[0030] 可選的，本發(fā)明中，步驟(2)中所述降溫為降溫至90°C以內(nèi)。
[0031]可選的，本發(fā)明中，步驟(2)中所述繼續(xù)反應(yīng)為在80-90°C條件下繼續(xù)攪拌反應(yīng)30-60min〇
[0032] 可選的，本發(fā)明中，步驟(2)中所述反應(yīng)體系中分批次加入三甲基氯硅烷并繼續(xù)反 應(yīng)的反應(yīng)溫度為80_90°C ;進(jìn)一步的，所述反應(yīng)步驟的整體反應(yīng)時(shí)間為5_8h。
[0033] 可選的，本發(fā)明中，步驟(2)中所述冷卻為冷卻至60_70°C。
[0034]可選的，本發(fā)明中，步驟(2)中所述攪拌溶解的溫度為60-70°C，攪拌溶解的時(shí)間為 1-2h〇
[0035]可選的，本發(fā)明中，步驟（2)中所加入三水合乙酸鈉的質(zhì)量為腺嘌呤質(zhì)量的1.1 -1.3倍。
[0036]可選的，本發(fā)明中，步驟(2)中所述冷卻靜置為冷卻至0_5°C，并靜置3_5h。
[0037] 可選的，本發(fā)明中，步驟(2)中所述濾餅洗滌干燥為將濾餅分別以冷純化水和丙酮 洗滌，然后將濾餅用離心機(jī)將濾餅中產(chǎn)物與溶劑分離（即甩干)后，再進(jìn)行干燥;進(jìn)一步的， 所述干燥溫度為65~75°C，干燥時(shí)間5~6小時(shí)。
[0038] 可選的，本發(fā)明中，所述水的質(zhì)量為R-9_(2-膦酰甲氧基丙基)_腺嘌呤一水合物晶 體粗品的8~13倍。
[0039] 可選的，本發(fā)明中，步驟(3)中所述加熱溶解為加熱到回流溫度進(jìn)行溶解。進(jìn)一步 的，在加熱溶解后，還進(jìn)一步包括繼續(xù)攪拌lh，再進(jìn)行降溫析晶的步驟。
[0040] 可選的，本發(fā)明中，步驟(3)中所述降溫?cái)嚢铻榻禍刂?_5°C，并攪拌lh。
[0041] 可選的，本發(fā)明中，步驟(3)中所述濾餅洗滌干燥為濾餅分別以冷純化水和丙酮洗 滌后，然后將濾餅用離心機(jī)將濾餅中產(chǎn)物與溶劑分離（即甩干)后，再進(jìn)行干燥;進(jìn)一步的， 所述干燥的溫度為65~75°C，干燥的時(shí)間7~8小時(shí)。
[0042] 可選的，本發(fā)明所述方法中，步驟(1)中腺嘌呤、R-( + )_碳酸丙烯酯、氫氧化鈉以及 DMF的質(zhì)量比為(0.8-1.2) :(0.9-1.1):(0.2-0.3): (6-7)。
[0043] 本發(fā)明中，通過(guò)對(duì)原料加入比例的選擇和調(diào)整，從而可以提高原料的轉(zhuǎn)化率，并提 高反應(yīng)收率。
[0044] 可選的，本發(fā)明所述方法中，步驟(2)中R-9_(2-羥基丙基)腺嘌呤、甲苯磺酰氧甲 基膦酸二乙酯、叔丁醇鎂以及NMP的質(zhì)量比為(0.9-1.1):(2-3) :(0.6-1.0): (3-5)。
[0045]可選的，本發(fā)明所述方法中，步驟(2)中R-9_(2-羥基丙基）腺嘌呤、冰醋酸、溴化 鈉、環(huán)己烷、再次加入溴化鈉以及三甲基氯硅烷的質(zhì)量比為：（0.9-1.1):(0.3-0.6) :(0.2-0.5):(1.5-2.5):(1.4-2)：(3-4)〇
[0046]可選的，本發(fā)明所述方法中，步驟（2)中所述三甲基氯硅烷為分三次加入，每次加 入時(shí)間間隔為0.5-1.5h。
[0047]本發(fā)明中，通過(guò)對(duì)三甲基氯硅烷加入次數(shù)以及加入時(shí)間間隔的選擇和調(diào)整，從而 可以對(duì)反應(yīng)速率進(jìn)行調(diào)控，進(jìn)而抑制副反應(yīng)的發(fā)生，并提高產(chǎn)率。
[0048]可選的，本發(fā)明所述方法中，每次加入三甲基氯硅烷的比例為(5-7): (1-3): (0.5-2)〇
[0049] 本發(fā)明中，通過(guò)對(duì)三甲基氯硅烷每次加入量的調(diào)整和優(yōu)化，從而進(jìn)一步控制了反 應(yīng)速率，提高了反應(yīng)收率。
[0050] 可選的，本發(fā)明所述方法中，步驟(3)中，R-9_(2-膦酰甲氧基丙基)_腺嘌呤一水合 物晶體粗品與水的質(zhì)量比為1: (8-13)。
[0051] 本發(fā)明中，通過(guò)對(duì)重結(jié)晶所用水量的調(diào)整和優(yōu)化，可以使得晶體粗品能夠完全溶 解，同時(shí)也會(huì)由于用水量過(guò)多而導(dǎo)致的晶體過(guò)渡溶解無(wú)法析出，以及進(jìn)一步所帶來(lái)的晶體 產(chǎn)率降低。
[0052]進(jìn)一步的，本發(fā)明還提供了一種富馬酸替諾福韋二吡呋酯的制備方法:首先按照 本發(fā)明所述方法制備R-9_(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一水合物晶體，再由R-9-(2-膦酰甲 氧基丙基)_腺嘌呤一水合物晶體經(jīng)酯化成鹽制備富馬酸替諾福韋二吡呋酯。
[0053]本發(fā)明中，通過(guò)使用本發(fā)明R-9_(2-膦酰甲氧基丙基)_腺嘌呤一水合物晶體為原 料制備富馬酸替諾福韋二吡呋酯，因而可以制得高質(zhì)量的富馬酸替諾福韋二吡呋酯產(chǎn)物， 并具有產(chǎn)物產(chǎn)量好，操作方法簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)。
[0054] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果為：
[0055] (1)本發(fā)明R-9_(2-膦酰甲氧基丙基)_腺嘌呤一水合物晶體純度高、穩(wěn)定性好，能 夠用于進(jìn)一步制備高質(zhì)量的富馬酸替諾福韋二吡呋酯。
[0056] (2)本發(fā)明R-9_(2-膦酰甲氧基丙基)_腺嘌呤一水合物晶體的制備方法所用原料 易得，且操作簡(jiǎn)便，晶體產(chǎn)率高、質(zhì)量好；同時(shí)，本發(fā)明方法中通過(guò)分批加料等操作步驟，也 進(jìn)一步提尚了所述晶體的廣率。
[0057] (3)本發(fā)明富馬酸替諾福韋二吡呋酯以本發(fā)明高純度R-9_(2-膦酰甲氧基丙基)_ 腺嘌呤一水合物晶體為原料，從而可以制得高質(zhì)量的富馬酸替諾福韋二吡呋酯產(chǎn)物，并具 有產(chǎn)物產(chǎn)量好，操作方法簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)。
【附圖說(shuō)明】
[0058]圖1為本發(fā)明R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一水合物晶體的HPLC圖譜；
[0059] 圖2為本發(fā)明R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一水合物晶體晶體差示掃描量熱 測(cè)定圖（DSC圖）；
[0060] 圖3為本發(fā)明R-9-(2-膦酰甲氧基丙基）-腺嘌呤一水合物晶體晶體熱重測(cè)定圖 (TGA圖）；
[0061] 圖4為本發(fā)明R-9_(2-膦酰甲氧基丙基)_腺嘌呤一水合物晶體晶體紅外吸收光譜 圖；
[0062] 圖5為本發(fā)明R-9_(2-膦酰甲氧基丙基)_腺嘌呤一水合物晶體晶體質(zhì)譜圖；
[0063] 圖6為本發(fā)明R-9_(2-膦酰甲氧基丙基)_腺嘌呤一水合物晶體晶體H-NMR圖；
[0064] 圖7為本發(fā)明R-9_(2-膦酰甲氧基丙基)_腺嘌呤一水合物晶體晶體C-NMR圖；
[0065] 圖8為本發(fā)明R-9_(2-膦酰甲氧基丙基)_腺嘌呤一水合物晶體晶體X-射線衍射圖。
【具體實(shí)施方式】
[0066] 下面將結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的實(shí)施方案進(jìn)行詳細(xì)描述，但是本領(lǐng)域技術(shù)人員將會(huì) 理解，下列實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明，而不應(yīng)視為限制本發(fā)明的范圍。實(shí)施例中未注明具體 條件者，按照常規(guī)條件或制造商建議的條件進(jìn)行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為 可以通過(guò)市售購(gòu)買(mǎi)獲得的常規(guī)產(chǎn)品。
[0067] 實(shí)施例1
[0068] 1)按重量份數(shù)比，稱取1份腺嘌呤、0.983份R-( + )_碳酸丙烯酯、0.025份氫氧化鈉、 7份的N，N-二甲基甲酰胺，備用；
[0069] 將N，N_二甲基甲酰胺、腺嘌呤、R_( + )_碳酸丙烯酯、氫氧化鈉依次加入到反應(yīng)容器 中，加熱至135~145°C，保溫反應(yīng)4~5h，降溫，冷卻到約100~120°C時(shí)，向反應(yīng)溶液中加入3 倍甲醇和3倍異丙醇的混合溶液，15~60min加完，冷卻到0~5°C，攪拌2~3小時(shí)后離心過(guò) 濾，濾餅以冷異丙醇泡洗一次，再以少量冷異丙醇淋洗2次，甩干，并在70~80°C條件下干燥 4~6h，得(R)-9-(2-羥基丙基)腺嘌呤(HPA)，備用。
[0070] 2)按重量份數(shù)比計(jì)稱取1份ΗΡΑ、2.5份對(duì)甲苯磺酰氧甲基膦酸二乙酯（DESMP)、 〇. 88份叔丁醇鎂(ΜΤΒ)和4份Ν-甲基吡咯烷酮(ΝΜΡ)，備用；
[0071] 向ΝΜΡ(Ν-甲基吡咯烷酮)溶液中加入HPA、DESMP和叔丁醇，并在70~80°C條件下反 應(yīng)3~4h;反應(yīng)完成后，向反應(yīng)體系內(nèi)加入0.5份冰醋酸，15分鐘后加入0.36份溴化鈉、2份環(huán) 己烷，并在升溫回流分水條件下1~2小時(shí)，并在110~120°C條件下蒸出環(huán)己烷;然后對(duì)反應(yīng) 體系進(jìn)行降溫，并在降溫至90 °C內(nèi)后，再在反應(yīng)體系內(nèi)加入1.77份溴化鈉，并在80~90 °C攪 拌30~60分鐘；
[0072] 然后，在80~90°C溫度條件下，向反應(yīng)液內(nèi)分三次加入3.28份三甲基氯硅烷 (TMSC1)，其中第一次加入TMSC1總量的6/9，第二次加入TMSC1總量的2/9，第三次加入TMSC1 總量的1/9，每次加入的間隔時(shí)間為lh，并在加入后繼續(xù)反應(yīng)4h，停止反應(yīng)。
[0073]將反應(yīng)液冷卻到60~70 °C，加入水溶解固體，60~70 °C攪拌1小時(shí)，靜置，分液。水 層加入1.13份三水合乙酸鈉，溶解后，冷卻靜置12~48小時(shí)，析出固體產(chǎn)物，降溫到0~5°C， 靜置4小時(shí)，離心過(guò)濾，濾餅分別以冷純化水和丙酮洗滌，甩干，并在65~75 °C條件下干燥5 ~6小時(shí)，得到R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤(PMPA)-水合物晶體粗品。
[0074] 3)將步驟2)所得R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤(PMPA)-水合物晶體粗品溶于 10倍的純化水中；然后，將體系升溫到回流溫度，待固體完全溶解后，繼續(xù)攪拌1小時(shí);接著， 將體系降溫到〇-5°C，并在攪拌1小時(shí)后離心過(guò)濾，濾餅分別以冷純化水和丙酮洗滌，甩干， 并在65~75°C條件下干燥5~6小時(shí)，得到R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一水合物晶體， 并稱重，經(jīng)計(jì)算晶體的收率為52%。
[0075] 然后，對(duì)實(shí)施例1所制得的晶體進(jìn)行產(chǎn)物表征，其結(jié)果如下：
[0076] 首先，對(duì)晶體進(jìn)行HPLC檢測(cè)，由圖1所示本發(fā)明R-9_(2-膦酰甲氧基丙基)_腺嘌呤 一水合物晶體的HPLC圖譜可知，實(shí)施例1所制得晶體的純度為99.6。
[0077] 然后，對(duì)晶體進(jìn)行DSC檢測(cè)，由圖2所示本發(fā)明R-9_(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一 水合物晶體晶體差示掃描量熱測(cè)定圖（DSC圖）可知，實(shí)施例1中所制得的R-9-(2-膦酰甲氧 基丙基)_腺嘌呤一水合物晶體熔點(diǎn)為275°C。
[0078] 接著，對(duì)晶體進(jìn)行TGA檢測(cè)，由圖3所示本發(fā)明R-9_(2-膦酰甲氧基丙基)_腺嘌呤一 水合物晶體晶體熱重測(cè)定圖（TGA圖）可知，實(shí)施例1中晶體在99.03 °C附近有一個(gè)吸熱峰為 初熔，在272.25°C附近有一個(gè)吸熱峰為分解點(diǎn)。進(jìn)一步對(duì)TGA分析可知，實(shí)施例1中產(chǎn)物晶體 在95-101.9°C重量減少約5.0%，與其1個(gè)結(jié)晶水的含量相近，在270°C后其慢慢分解，至492 °(：重量減少40%以上。以上說(shuō)明實(shí)施例1中產(chǎn)物晶體含1個(gè)結(jié)晶水，其熔點(diǎn)（分解點(diǎn)）約為 272 Γ。
[0079] 接下來(lái)，對(duì)晶體進(jìn)行使用紅外圖譜檢測(cè)，由圖4所示本發(fā)明R-9_(2-膦酰甲氧基丙 基)-腺嘌呤一水合物晶體晶體紅外吸收光譜圖可知，實(shí)施例1中晶體用KBr壓片測(cè)得的圖譜 在 3392cm-1，3218cm-1，3107cm-1，3066cm- 1，2969cm-1，2931cm-1，2293cm-1，1698cm- 1，1614cm-1， 1558cm-1，1514cm-1，1483cm- 1，1410cm-1，1359cm-1，1237cm-1，1105cm- 1，1077cm-1，1005cm-1， 937cm-1，879cm- 1，834cm-1，787cm-1，751cm-1，716cm- 1，652cm-1，606cm-1，527cm-1，477cm- 1 有較 強(qiáng)吸收峰。
[0080] 然后，對(duì)晶體進(jìn)行質(zhì)譜檢測(cè)，由圖5所示本發(fā)明R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤 一水合物晶體晶體質(zhì)譜圖可知，本發(fā)明晶體的分子離子峰為286，與其分子量M-1 -致。
[0081 ] 接下來(lái)，對(duì)實(shí)施例1的晶體進(jìn)行H-NMR(DMSO，400MHZ)檢測(cè)，由圖6所示本發(fā)明R-9-(2 -膦酰甲氧基丙基）-腺嘌呤一水合物晶體晶體H-匪R圖可知，實(shí)施例1中晶體的δ Η為： 8.132(s，lH，2-H)，8·138(s，lH，8-H)，7.246(dd，2H，-NH2)，，4·182-4.288(dd，2H，- NCH2CH)，3·896-3·904(m，1H，-CH2-CH-0)，3·551-3·624(dd，2H，-0CH2P)，3·346(dd，2H，2 個(gè)-OH),1.018-1.028(d，3H，-CH3)。
[0082] 然后，對(duì)實(shí)施例1的晶體進(jìn)行晶體C-NMR(DMSO，400MHZ)檢測(cè)，由圖7為本發(fā)明R-9-(2-膦酰甲氧基丙基）-腺嘌呤一水合物晶體晶體C-匪R圖可知，實(shí)施例1種晶體的δ(：為： 118.700-156.322(腺嘌呤環(huán)上5個(gè)〇,75.721(-〇12-〇1(〇13)-0-上的(：），64.267(-(：!12?0上的 C)，39.571-40.405(與腺嘌呤環(huán)上N相連的亞甲基上的C)，17.467(甲基C)
[0083]最后，對(duì)實(shí)施例1的晶體進(jìn)行粉末X射線衍射(XRD)分析，由圖8所示本發(fā)明R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一水合物晶體晶體X-射線衍射圖，實(shí)施例1晶體的在2Θ值為 7·5768、15·0221、15·6349、16·0135、18·2180、22·5071、23·5315、24·8028 等處有明顯的特 征峰;進(jìn)一步的，實(shí)施例1晶體粉末衍射峰數(shù)據(jù)具體如下表1所示：
[0084]表1實(shí)施例1 R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一水合物晶體X-射線衍射峰數(shù)據(jù)：
[0086]
[0087] 實(shí)施例2
[0088] 1)按重量份數(shù)比，稱取0.8份腺嘌呤、1.1份R_( + )_碳酸丙烯酯、0.02份氫氧化鈉、6 份的N，N-二甲基甲酰胺，備用；
[0089] 將N，N_二甲基甲酰胺、腺嘌呤、R_( + )_碳酸丙烯酯、氫氧化鈉依次加入到反應(yīng)容器 中，加熱至135~145°C，保溫反應(yīng)4~5h，降溫，冷卻到約100~120°C時(shí)，向反應(yīng)溶液中加入3 倍甲醇和3倍異丙醇的混合溶液，15~60min加完，冷卻到0~5°C，攪拌2~3小時(shí)后離心過(guò) 濾，濾餅以冷異丙醇泡洗一次，再以少量冷異丙醇淋洗2次，甩干，并在70~80°C條件下干燥 4~6h，得(R)-9-(2-羥基丙基)腺嘌呤(ΗΡΑ)，備用。
[0090] 2)按重量份數(shù)比計(jì)稱取0.9份ΗΡΑ、3份對(duì)甲苯磺酰氧甲基膦酸二乙酯(DESMP)、1份 叔丁醇鎂(ΜΤΒ)和3份Ν-甲基吡咯烷酮(ΝΜΡ)，備用；
[0091] 向ΝΜΡ(Ν-甲基吡咯烷酮)溶液中加入HPA、DESMP和叔丁醇，并在70~80°C條件下反 應(yīng)3~4h;反應(yīng)完成后，向反應(yīng)體系內(nèi)加入0.3份冰醋酸，15分鐘后加入0.2份溴化鈉、1.5份 環(huán)己烷，并在升溫回流分水條件下1~2小時(shí)，并在110~120°C條件下蒸出環(huán)己烷;然后對(duì)反 應(yīng)體系進(jìn)行降溫，并在降溫至90°C內(nèi)后，再在反應(yīng)體系內(nèi)加入1.4份溴化鈉，并在80~90°C 攪拌30~60分鐘；
[0092] 然后，在80~90°C溫度條件下，向反應(yīng)液內(nèi)分三次加入3份三甲基氯硅烷(TMSC1)， 其中第一次加入TMSC1總量的5/7,第二次加入TMSC1總量的1/7,第三次加入TMSC1總量的1/ 7,每次加入的間隔時(shí)間為lh，并在加入后繼續(xù)反應(yīng)4h，停止反應(yīng)。
[0093]將反應(yīng)液冷卻到60~70 °C，加入水溶解固體，60~70 °C攪拌1小時(shí)，靜置，分液。水 層加入1.1份三水合乙酸鈉，溶解后，冷卻靜置12~48小時(shí)，析出固體產(chǎn)物，降溫到0~5 °C， 靜置4小時(shí)，離心過(guò)濾，濾餅分別以冷純化水和丙酮洗滌，甩干，并在65~75°C條件下干燥5 ~6小時(shí)，得到R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤(PMPA)-水合物晶體粗品。
[0094] 3)將步驟2)所得R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤(PMPA)-水合物晶體粗品溶于 8倍的純化水中；然后，將體系升溫到回流溫度，待固體完全溶解后，繼續(xù)攪拌1小時(shí);接著， 將體系降溫到〇-5°C，并在攪拌1小時(shí)后離心過(guò)濾，濾餅分別以冷純化水和丙酮洗滌，甩干， 并在65~75°C條件下干燥5~6小時(shí)，得到R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一水合物晶體， 并稱重，經(jīng)計(jì)算實(shí)施例2晶體的收率為42%，經(jīng)過(guò)HPLC測(cè)試，實(shí)施例2晶體的純度為99.1%， 最大單雜<0.8%。實(shí)施例2晶體的其他晶體表征結(jié)果與實(shí)施例1中檢測(cè)結(jié)果相同。
[0095] 實(shí)施例3
[0096] 1)按重量份數(shù)比，稱取1.2份腺嘌呤、0.9份R_( + )_碳酸丙烯酯、0.03份氫氧化鈉、7 份的N，N_二甲基甲酰胺，備用；
[0097]將N，N_二甲基甲酰胺、腺嘌呤、R_( + )_碳酸丙烯酯、氫氧化鈉依次加入到反應(yīng)容器 中，加熱至135~145°C，保溫反應(yīng)4~5h，降溫，冷卻到約100~120°C時(shí)，向反應(yīng)溶液中加入3 倍甲醇和3倍異丙醇的混合溶液，15~60min加完，冷卻到0~5°C，攪拌2~3小時(shí)后離心過(guò) 濾，濾餅以冷異丙醇泡洗一次，再以少量冷異丙醇淋洗2次，甩干，并在70~80°C條件下干燥 4~6h，得(R)-9-(2-羥基丙基)腺嘌呤(HPA)，備用。
[0098] 2)按重量份數(shù)比計(jì)稱取1.1份HPA、2份對(duì)甲苯磺酰氧甲基膦酸二乙酯(DESMP)、1份 叔丁醇鎂(MTB)和5份N-甲基吡咯烷酮(NMP)，備用；
[0099] 向NMP(N-甲基吡咯烷酮)溶液中加入HPA、DESMP和叔丁醇，并在70~80°C條件下反 應(yīng)3~4h;反應(yīng)完成后，向反應(yīng)體系內(nèi)加入0.6份冰醋酸，15分鐘后加入0.5份溴化鈉、2.5份 環(huán)己烷，并在升溫回流分水條件下1~2小時(shí)，并在110~120°C條件下蒸出環(huán)己烷;然后對(duì)反 應(yīng)體系進(jìn)行降溫，并在降溫至90°C內(nèi)后，再在反應(yīng)體系內(nèi)加入2份溴化鈉，并在80~90°C攪 拌30~60分鐘；
[0100] 然后，在80~90°C溫度條件下，向反應(yīng)液內(nèi)分三次加入4份三甲基氯硅烷(TMSC1)， 其中第一次加入TMSC1總量的5/12,第二次加入TMSC1總量的2/12,第三次加入TMSC1總量的 5/12,每次加入的間隔時(shí)間為lh，并在加入后繼續(xù)反應(yīng)4h，停止反應(yīng)。
[0101] 將反應(yīng)液冷卻到60~70 °C，加入水溶解固體，60~70 °C攪拌1小時(shí)，靜置，分液。水 層加入1.2份三水合乙酸鈉，溶解后，冷卻靜置12~48小時(shí)，析出固體產(chǎn)物，降溫到0~5°C， 靜置4小時(shí)，離心過(guò)濾，濾餅分別以冷純化水和丙酮洗滌，甩干，并在65~75°C條件下干燥5 ~6小時(shí)，得到R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤(PMPA)-水合物晶體粗品。
[0102] 3)將步驟2)所得R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤(PMPA)-水合物晶體粗品溶于 13倍的純化水中；然后，將體系升溫到回流溫度，待固體完全溶解后，繼續(xù)攪拌1小時(shí);接著， 將體系降溫到〇-5°C，并在攪拌1小時(shí)后離心過(guò)濾，濾餅分別以冷純化水和丙酮洗滌，甩干， 并在65~75°C條件下干燥5~6小時(shí)，得到R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一水合物晶體， 并稱重，經(jīng)計(jì)算實(shí)施例3晶體的收率為48 %，經(jīng)過(guò)HPLC測(cè)試，實(shí)施例3晶體的純度為99.3 %， 最大單雜<0.5%。實(shí)施例3晶體的其他晶體表征結(jié)果與實(shí)施例1中檢測(cè)結(jié)果相同。
[0103] 實(shí)施例4
[0104] 在DMF溶液中，分別加入適量實(shí)施例1所制得R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一 水合物晶體晶體以及氯甲基碳酸異丙酯，60°C條件下反應(yīng)4h后，加入富馬酸，繼續(xù)反應(yīng)5h， 然后，將反應(yīng)體系冷卻至0 °C后，離心過(guò)濾，濾餅分別以冷純化水和丙酮洗滌，甩干，并在65 ~75°C條件下干燥5~6小時(shí)，得到富馬酸替諾福韋二吡呋酯，并稱量，經(jīng)計(jì)算，富馬酸替諾 福韋二吡呋酯產(chǎn)物收率為90%。經(jīng)過(guò)HPLC測(cè)試，富馬酸替諾福韋二吡呋酯的純度為99%，最 大單雜<0.5%。
[0105] 對(duì)比例1
[0106] 首先，按照實(shí)施例1步驟(1)中所述方法制備(R)-9-(2-羥基丙基)腺嘌呤(ΗΡΑ)，并 備用。然后，按照實(shí)施例1步驟⑵中所述方法制備R-9_(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤(ΡΜΡΑ) 一水合物晶體粗品，其中溴化鈉為一次加料。最后，按照實(shí)施例1步驟(3)所述方法制備R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)_腺嘌呤一水合物晶體，并稱重，經(jīng)計(jì)算對(duì)比例1晶體的收率為30%，經(jīng) 過(guò)HPLC測(cè)試，對(duì)比例1晶體的純度為98.1 %，最大單雜彡0.9%。對(duì)比例1晶體的其他晶體表 征結(jié)果與實(shí)施例1中檢測(cè)結(jié)果相同。
[0107] 對(duì)比例2
[0108] 首先，按照實(shí)施例1步驟(1)中所述方法制備(R)-9-(2-羥基丙基)腺嘌呤(ΗΡΑ)，并 備用。然后，按照實(shí)施例1步驟⑵中所述方法制備R-9_(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤(ΡΜΡΑ) 一水合物晶體粗品，其中三甲基氯硅烷(TMSC1)為一次加料，并在加料反應(yīng)6h后，停止反應(yīng)。 最后，按照實(shí)施例1步驟(3)所述方法制備R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一水合物晶體， 并稱重，經(jīng)計(jì)算，對(duì)比例2晶體的收率為30%，經(jīng)過(guò)HPLC測(cè)試，對(duì)比例，2晶體的純度為 98.3%，最大單雜<0.7%。對(duì)比例2晶體的其他晶體表征結(jié)果與實(shí)施例1中檢測(cè)結(jié)果相同。
[0109] 對(duì)比例3
[0110] 首先，按照實(shí)施例1步驟(1)中所述方法制備(R)-9-(2-羥基丙基)腺嘌呤(ΗΡΑ)，并 備用。然后，按照實(shí)施例1步驟⑵中所述方法制備R-9_(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤(ΡΜΡΑ) 一水合物晶體粗品。其中，溴化鈉為一次加料；同時(shí)，三甲基氯硅烷(TMSC1)也為一次加料， 并在TMSC1加料反應(yīng)6h后，停止反應(yīng)。最后，按照實(shí)施例1步驟(3)所述方法制備R-9-(2-膦酰 甲氧基丙基)_腺嘌呤一水合物晶體，并稱重，經(jīng)計(jì)算對(duì)比例3晶體的收率為25%，經(jīng)過(guò)HPLC 測(cè)試，對(duì)比例3晶體的純度為97.3%，最大單雜<1.1%。對(duì)比例3晶體的其他晶體表征結(jié)果 與實(shí)施例1中檢測(cè)結(jié)果相同。
[0111] 盡管已用具體實(shí)施例來(lái)說(shuō)明和描述了本發(fā)明，然而應(yīng)意識(shí)到，在不背離本發(fā)明的 精神和范圍的情況下可以作出許多其它的更改和修改。因此，這意味著在所附權(quán)利要求中 包括屬于本發(fā)明范圍內(nèi)的所有這些變化和修改。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一水合物晶體，所述晶體的X-射線粉末圖中2 0為7.5768、15.0221、15.6349、16.0135;其中，所述R-9-(2-膦酰甲氧基丙基）-腺嘌呤一水 合物結(jié)構(gòu)如下：2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的R-9-(2-膦酰甲氧基丙基）-腺嘌呤一水合物晶體，其特征在 于，所述晶體的 X-射線粉末圖中 29為7.5768、15.0221、15.6349、16.0135、18.2180、 22.5071、23.5315、24.8028。3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一水合物晶體的制備方 法，其特征在于，所述方法包括如下步驟： (1) 向DMF中分別加入腺嘌呤、R-( + )_碳酸丙烯酯以及氫氧化鈉，并加熱保溫反應(yīng)，然后 降溫并加入甲醇和異丙醇的混合溶液，加入后，繼續(xù)降溫析晶，然后過(guò)濾，并將濾餅洗滌、干 燥，即得到R-9_( 2-羥基丙基)腺嘌呤； (2) 向NMP中分別加入步驟（1)所制得的R-9-(2-羥基丙基)腺嘌呤、甲苯磺酰氧甲基膦 酸二乙酯、叔丁醇鎂并反應(yīng);然后，向反應(yīng)體系內(nèi)加入冰醋酸、溴化鈉以及環(huán)己烷，回流分水 后，將環(huán)己烷蒸出，降溫并再次加入溴化鈉，繼續(xù)反應(yīng);在反應(yīng)體系中分批次加入三甲基氯 硅烷，并繼續(xù)反應(yīng)，然后停止反應(yīng)，并在冷卻后，向反應(yīng)體系中加入水，并攪拌溶解，然后靜 置分液，在水相中加入三水合乙酸鈉，并在其溶解后冷卻靜置，然后過(guò)濾，并將濾餅洗滌干 燥，即得到R-9_(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一水合物晶體粗品； (3) 將步驟(2)中所制得的R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一水合物晶體粗品溶于水 中，并加熱溶解，然后降溫?cái)嚢栉鼍Р⑦^(guò)濾，將濾餅洗滌干燥后，即得到產(chǎn)物R-9_(2-膦酰甲 氧基丙基)_腺嘌呤一水合物晶體。4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述方法步驟(1)中腺嘌呤、R-( + )_碳酸丙 烯酯、氫氧化鈉以及DMF的質(zhì)量比為(0.8-1.2): (0.9-1.1): (0.2-0.3): (6-7)。5. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述方法步驟(2)中R-9-(2-羥基丙基)腺 嘌呤、甲苯磺酰氧甲基膦酸二乙酯、叔丁醇鎂以及NMP的質(zhì)量比為(0.9-1.1): (2-3): (0.6-1.0)：(3-5)〇6. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述方法步驟(2)中R-9-(2-羥基丙基)腺 嘌呤、冰醋酸、溴化鈉、環(huán)己烷、再次加入溴化鈉以及三甲基氯硅烷的質(zhì)量比為：（〇.9-1.1): (0.3-0.6)：(0.2-0.5)：(1.5-2.5)：(1.4-2)：(3-4)〇7. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述方法步驟(2)中，所述三甲基氯硅烷為 分三次加入，每次加入時(shí)間間隔為0.5-1.5h。8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，每次加入三甲基氯硅烷的比例為（5-7): (1-3):(0.5-2)。9. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述步驟（3)中，R-9-(2-膦酰甲氧基丙 基)_腺嘌呤一水合物晶體粗品與水的質(zhì)量比為1: (8-13)。10. -種富馬酸替諾福韋二吡呋酯的制備方法，其特征在于，首先按照權(quán)利要求3-9中 任一項(xiàng)所述方法制備R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一水合物晶體，再由R-9-(2-膦酰甲 氧基丙基)-腺嘌呤一水合物晶體經(jīng)酯化成鹽制備富馬酸替諾福韋二吡呋酯。
【文檔編號(hào)】C07F9/6561GK106046055SQ201610364010
【公開(kāi)日】2016年10月26日
【申請(qǐng)日】2016年5月27日
【發(fā)明人】劉勝文, 余丹, 余玉靜, 洪華云, 周震, 汪旭東, 羅松, 陳龍, 邵振, 徐朕
【申請(qǐng)人】湖北麗益醫(yī)藥科技有限公司