N-芳基苯并三唑類氮氧衍生物及其合成方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一系列N?芳基苯并三唑類氮氧衍生物及其合成方法。本發(fā)明所述的N?芳基苯并三唑類氮氧衍生物具有如下式(I)所示結構，其制備方法為：取下述式(II)所示結構的N?羥基苯并三唑衍生物、式(III)所示結構的有機硼試劑、銅鹽和堿性物質，置于有機溶劑中，在氧氣存在的條件下反應，制得目標物粗品。本發(fā)明所述方法簡單易控，周期短；制得的部分N?芳基苯并三唑類氮氧衍生物具有良好的抗腫瘤活性。所述式(I)、式(II)和式(III)所示結構的化合物分別如下：
【專利說明】
N-芳基苯并三唑類氮氧衍生物及其合成方法
技術領域
[0001] 本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術領域，具體涉及一種N-芳基苯并三唑類氮氧衍生物及其合成 方法。
【背景技術】
[0002] 苯并三唑類氮氧衍生物廣泛存在于許多藥物分子中，是重要的生理活性單元，在 抗菌、抗癌方面具有重要的應用。目前，很多研究工作者致力于這方面的研究，但是現有的 三唑類氮氧衍生物的合成方法步驟長，且底物和試劑存在局限性或者實驗操作條件復雜， 限制了該類化合物的進一步的深入研究。

【發(fā)明內容】

[0003] 本發(fā)明要解決的技術問題是提供一系列結構新穎的N-芳基苯并三唑類氮氧衍生 物，以及它們的合成方法。
[0004] 本發(fā)明涉及下式（I)所示化合物或其藥學上可接受的鹽：
[0006] 其中：
[0007] X表示碳或氮原子；
[0008] An表示未取代的噻吩基，或者是未取代的萘基，或者是未取代、單取代或二取代 的苯基，其中，取代基為Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、Cl~4的烷基、齒原子、未取代的苯基、 硝基或甲酯基；
[0009] Ri表不氣、Ci~4的烷基、Ci~4的烷氧基、Ci~4的全氣烷基或齒原子，或者是未取代、單 取代或^取代的苯基，其中，取代基為Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、Cl~4的烷基或齒原子； [00 10] R2表不氣、Cl~4的烷基、Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基或齒原子，或者是未取代、單 取代或^取代的苯基，其中，取代基為Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、Cl~4的烷基或齒原子； [00 11] R3表不氣、Cl~4的烷基、Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基或齒原子，或者是未取代、單 取代或^取代的苯基，其中，取代基為Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、Cl~4的烷基或齒原子； [00 12] R4表不氣、Cl~4的烷基、Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基或齒原子，或者是未取代、單 取代或^取代的苯基，其中，取代基為Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、Cl~4的烷基齒原子。
[0013] 上述化合物中：
[0014] An進一步優(yōu)選為未取代、單取代或二取代的苯基，其中，取代基為C&4的烷氧基、 Cl~4的烷基、齒原子、未取代的苯基、硝基或甲酯基；
[0015] Ri進一步優(yōu)選為氫、C1-C4烷基、鹵原子或Cl~4的烷氧基；
[0016] R2進一步優(yōu)選為氫、C1-C4烷基、鹵原子或Ci~4的烷氧基；
[0017] R3進一步優(yōu)選為氫、Ci-C4烷基、鹵原子或Ci~4的烷氧基；
[0018] R4進一步優(yōu)選為氫、&-C4烷基、齒原子或的烷氧基。
[0019] 上述式（I)所示化合物的合成方法，主要包括以下步驟：取N-羥基苯并三唑衍生 物、有機硼試劑、銅鹽和堿性物質，置于有機溶劑中，在氧氣存在的條件下反應，制得目標物 粗品；其中：
[0020] 所述的N-羥基苯并三唑衍生物具有下述(II)所示結構：
[0022]其中，
[0023] X表示碳或氮原子；
[0024] Ri表不氣、Ci~4的烷基、Ci~4的烷氧基、Ci~4的全氣烷基或齒原子，或者是未取代、單 取代或^取代的苯基，其中，取代基為Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、Cl~4的烷基或齒原子；
[0025] R2表不氣、Ci~4的烷基、Ci~4的烷氧基、Ci~4的全氣烷基或齒原子，或者是未取代、單 取代或^取代的苯基，其中，取代基為Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、Cl~4的烷基或齒原子；
[0026] R3表不氣、Ci~4的烷基、Ci~4的烷氧基、Ci~4的全氣烷基或齒原子，或者是未取代、單 取代或^取代的苯基，其中，取代基為Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、Cl~4的烷基或齒原子； [00 27] R4表不氣、Cl~4的烷基、Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基或齒原子，或者是未取代、單 取代或^取代的苯基，其中，取代基為Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、Cl~4的烷基齒原子； [0028]所述的有機硼試劑具有下述(III)所示結構：
[0029] AnBWHhail);其中，An表示未取代的噻吩基，或者是未取代的萘基，或者是未 取代、單取代或二取代的苯基，其中，取代基為Cl~4的烷氧基、Ch4的全氟烷基、Ch4的烷基、 鹵原子、未取代的苯基、硝基或甲酯基。
[0030] 上述合成方法中，涉及的原料N-羥基苯并三唑衍生物可參考現有文獻(B.X.Yu， Z.Huang，M.Zhang，D.Dillard，and H.T.Ji，Acs Chem.Biol，2013,8,524-529或 N ? J ? Leonard，K ? Co lankiewice，J ? Org ? Chem ? 1969，34，359-365)進行合成，也可自選設計合 成路線進行合成，在此不再詳述。涉及的原料有機硼試劑可以直接從市場上購買得到(如苯 基硼酸、對甲基硼酸，對三氟甲基硼酸、2-萘基硼酸等）。
[0031] 上述合成方法中，所述的銅鹽可以是選自溴化銅、碘化銅、氯化銅、硫酸銅、醋酸 酮、硝酸銅、三氟甲磺酸銅、溴化亞銅、碘化亞銅和氯化亞銅中的一種或兩種以上的組合。當 銅鹽的選擇為上述兩種以上物質的組合時，它們的配比可以為任意配比。
[0032] 上述合成方法中，所述的堿性物質可以是含有羥基的堿類物質，具體可以是選自 磷酸三鉀、氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鈣、氫氧化銫、碳酸銫，碳酸鉀、叔丁醇鉀、叔丁醇鈉、 氟化鉀、吡啶、三乙胺和N，N-二異丙基乙基胺中的一種或兩種以上的組合。當堿性物質的 選擇為上述兩種以上物質的組合時，它們的配比可以為任意配比。
[0033]上述合成方法中，所述的有機溶劑可以是選自苯、甲苯、環(huán)己烷、石油醚、四氯化 碳、四氫呋喃、乙酸乙酯、乙腈、乙醚、二氯甲烷、丙酮、三氯甲烷、正己烷和二氧六環(huán)中一種 或兩種以上的組合。當有機溶劑的選擇為上述兩種以上物質的組合時，它們的配比可以為 任意配比。
[0034]上述合成方法中，反應一般選擇在空氣條件下進行，同時反應優(yōu)選是在低于80°C 的條件下進行，進一步優(yōu)選是在常溫至60°C的條件下進行，更優(yōu)選是在常溫至40°C的條件 下進行。反應是否完全可采用TLC跟蹤檢測。根據
【申請人】的經驗，當反應在常溫至60°C條件 下進行時，反應時間控制在10~24h較為適宜。
[0035] 為了使反應更有利地進行，進一步提高目標產物的收率，優(yōu)選在反應進行之前加 入添加劑，所述的添加劑可以是選自硫酸鈉、硫酸鎂、氯化鈣、五氧化二磷、3A分子篩、4A分 子篩和5A分子篩中的一種或兩種以上的組合。當添加劑的選擇為上述兩種以上物質的組合 時，它們的配比可以為任意配比。
[0036] 本發(fā)明所述的合成方法中，各原料的用量配比為化學計量比，在實際操作時，N-羥 基苯并三唑衍生物、有機硼試劑、銅鹽和堿性物質的摩爾比通常為1.0:1.0~5.0:0.1~ 1.0。所述有機溶劑的用量以能夠溶解參加反應的原料為宜，通常情況下，以lmmol的N-羥基 苯并三唑衍生物為基準，所有參加反應的原料通常用1~10mL的有機溶劑來溶解。當反應需 要加入添加劑時，添加劑的加入量通常為N-羥基苯并三唑衍生物物質的量的4.0-10.0倍。
[0037] 由上述方法制得的是式（I)化合物的粗品，可采用現有常規(guī)的純化方法對其進行 純化以提高式(I)化合物的純度。通常采用硅膠薄層色譜或硅膠柱層析，或者是重結晶的方 式進行純化，在層析時用的洗脫劑和重結晶時用的溶劑相同，可以是由石油醚和乙酸乙酯 按10:1~1:1的體積比組成的混合溶劑，也可以是由正己烷和乙酸乙酯按10:1~1:1的體積 比組成的混合溶劑，還可以是由石油醚和甲醇按1 〇〇: 1~1 〇: 1的體積比組成的混合溶劑，又 或者是由二氯甲烷和甲醇按100:1~10:1的體積比組成的混合溶劑。
[0038]與現有技術相比，本發(fā)明提供了一系列結構新穎的N-芳基苯并三唑類氮氧衍生 物，以及它們的合成方法。本發(fā)明提供的合成方法簡單易控，周期短，所得某些化合物對 Hepg2腫瘤株具有較好的活性。
【具體實施方式】
[0039] 下面結合具體實施例對本發(fā)明作進一步的詳述，以更好地理解本發(fā)明的內容，但 本發(fā)明并不限于以下實施例。
[0040] 以下各實施例中涉及的N-羥基苯并三唑衍生物參照下述合成路線進行合成：
[0042] 在100mL圓底燒瓶中加入反應物Sl(11.655mmol)和乙醇(40mL)，攪拌均勻后注入 水合肼S2( 116.6mmol，lOequiv)，該混合物在回流條件下攪拌反應20h后停止反應使其冷卻 到室溫;減壓濃縮除去反應液中的乙醇，向殘留液中加入20mL甲醇，用濃鹽酸酸化后有沉淀 物析出，過濾，收集濾液，將濾液減壓濃縮后得產物S3(即N-羥基苯并三唑衍生物）。
[0043]以下各實施例中涉及的有機硼試劑均為從市場上直接購買得到。
[0044] 實施例1
[0045] 按下述合成路線合成本發(fā)明所述的N-芳基苯并三唑類氮氧衍生物。
[0047] 將(：11((^(：)2(0.3111111〇1，5411^)川-羥基苯并三唑底物（0.3111111〇1)、芳基硼酸 (0.9mmol)置于反應管中，加入3mL二氧六環(huán)，室溫下加入吡啶(3mmol，0.24mL);在40°C下攪 拌反應12-24h，所得反應物加入水（10mL)，用二氯甲烷萃取(2X lOmL)，合并有機相，用無水 硫酸鈉干燥后過濾，減壓除去溶劑，硅膠柱層析分離(石油醚/乙酸乙酯= 10:1~1:1，體積 比），得到目標產物3。不同的目標產物及其表征如下：
[0048] 3aa:固體，49mg，77%yield;mp llS-lier.1!!匪R(400MHz，CDCl3):S8.03(d，J = 8.5Hz，lH)，7.75(d，J = 8.6Hz，lH)，7.70-7.61(m，3H)，7.56(t，J = 7.9Hz，2H)，7.44(td，J = 7.6,4.6Hz，2H);13C 匪R(100MHz，CDC13):S135.8，132.9，131.2，131.1，130.0，128.5， 124.8,122.4,115.9,111.4.IR(neat):3046,1593,1502,1459,1417,1123,750cm _1；MS(ESI) m/z[M+H]+calcd【(^[<：12111(^30] + :212.0824;化1111(1:212.0813.其結構式如下：
[0050] 3ab:固體，69mg，95%yield;mp lSO-lSrC.1!!匪R(400MHz，CDCl3):S8.03(d，J = 8.5Hz,lH),7.67-7.55(m,4H),7.45-7.40(m,lH),7.08-7.03(m,2H),3.87(s,3H)； 13C NMR (100MHz,CDC13):8 = 159.8,133.2,130.9,130.8,128.6,124.7,124.4,115.8,115.1, 111.3,55.6;IR(neat):3070,1602,1514,1460,1412,1251,744cm- 1 .MS(ESI)m/z(M+H) + calcd for[Ci2Hi2N30] +: 242 ? 0930;found: 242 ? 0919 ?其結構式如下：
[0052] 3ac:固體，31mg，43%yield;mp lQS-iger.1!!匪 R(400MHz，CDC13):S10.07(s， 1H),8.12-8.04(m,3H),7.95-7.86(m,3H),7.73(ddd,J=8.4,7.1,0.9Hz,lH),7.54-7.48 (m，lH). 13C NMR(100MHz，CDC13):S190.4，140.4，135.2，132.7，131.9，131.8，131.5，125.4， 121.7，116.3，111.6;IR(neat):3096,2755，1690，1597，1417，1210,739cm- 1;MS(ESI)m/z(M+ H)+calcd for[Ci3Hi0N302] +:240? 0773;found:240? 0761 ?其結構式如下：
[0054] 3ad:固體，31mg，43%yield;mp lQS-iger.1!!匪 R(400MHz，CDC13):S10.07(s， 1H),8.12-8.04(m,3H),7.95-7.86(m,3H),7.73(ddd,J=8.4,7.1,0.9Hz,lH),7.54-7.48 (m，lH); 13C NMR(100MHz，CDC13):S190.4，140.4，135.2，132.7，131.9，131.8，131.5，125.4， 121.7，116.3，111.6;IR(neat):3096,2755，1690，1597，1417，1210,739cm- 1;MS(ESI)m/z(M+ H)+calcd for[Ci3Hi0N302] +:240? 0773;found:240? 0761 ?其結構式如下：
[0056] 3ae:固體，57mg，79%yield;mp 匪R(400MHz，CDCl3):S8.03(d，J = 8.5Hz,lH),7.75(d,J=8.6Hz,lH),7.65-7.60(m,lH),7.45-7.40(m,lH),7.29(s,2H),7.08 (s，1H)，2.40(s，6H); 13C NMR(100MHz，CDC13) :S140.0,135.6,132.9,131.1，130.9，130.3, 124.7,120.2,115.8,111.6,21.3;IR(neat):3063,1601,1495,1468,1414,1362,764cm-SMS (ESI)m/z(M+H)+calcd for[Ci4Hi4N30] +:240? 1137;found:240? 1125?其結構式如下：
[0058] 3af:固體，58mg，80%yield;mp 匪 R(400MHz，CDCl3):S7.99(d，J = 8.5Hz，lH)，7.73(d，J = 8.6Hz，lH)，7.59(t，J = 7.8Hz，lH)，7.40(td，J = 8.0,3.6Hz，2H)， 7.24-7.16(m，2H)，6.93(dd，J = 8.4,2.3Hz，lH)，3.81(s，3H);13C 匪R(100MHz，CDC13) :S 160.7.136.8.132.9.131.2.131.1.130.6.124.8.115.9.114.4.114.0. 111.6.108.2.55.6； IR(neat): 3070,1597,1498,1460,1417,1212,752cm-1 ;MS(ESI)m/z(M+H) + calcd for [C13H12N3O2 ] + : 242 ? 0930; found: 242 ? 0917 ?其結構式如下：
[0060] 3ag:固體，53mg，68%yield;mp leS-ierC.1!! NMR(400MHz，CDCl3):S8.11(d，J = 1.9Hz，lH)，8.05(dd，J= 17.9,8.6Hz，2H) ,7.93-7.88(m，2H)，7.85(d，J = 8.6Hz，1H)，7.80 (dd，J = 8.8,2.1Hz，lH)，7.67(dd，J = ll .6,4.0Hz，1H) ,7.61-7.53(m，2H)，7.49-7.44(111， 1H);13C 匪R(100MHz，CDC13) :S133.2，133.1,133.0,132.5,131.3,131.1,130.3,128.0， 127.9.127.5.127.1.124.9.120.5.120.4.116.0. 111.5.1R(neat):3032,1591,1464,1417, 1356,1155,747cm_1；MS(ESI)m/z(M+H) +calcd for[Ci6Hi2N30] + :262.0980；found:262.0968. 其結構式如下：
[0062] 3ah:固體，70mg，77%yield;mp lie-inr.1!! NMR(400MHz，CDCl3):S8.07(d，J = 8.5Hz,lH),7.71(d,J=8.6Hz,lH),7.67-7.61(m,3H),7.48-7.38(m,3H),7.21-7.15(m, 3H)，7.09(dt，J = 9.1，1.9Hz，2H);13C NMR(100MHz，CDC13):S157.9，156.0，133.1,131.1， 131.0. 130.5.130.1.124.8.124.3.119.6.119.3.116.0.111.3.1R(neat):3060,1590, 1501,1416,1386,1242,751cm- 1 ;MS(ESI)m/z(M+H)+calcd for[Ci8Hi4N302] + : 304.1086; found: 304 ? 1073 ?其結構式如下：
[0064] 3ai:固體，70mg，77%yield;mp lie-inr.1!!匪R(400MHz，CDCl3):S8.07(d，J = 8.5Hz,lH),7.71(d,J=8.6Hz,lH),7.67-7.61(m,3H),7.48-7.38(m,3H),7.21-7.15(m, 3H)，7.09(dt，J = 9.1，1.9Hz，2H);13C NMR(100MHz，CDC13):S157.9，156.0，133.1,131.1， 131.0. 130.5.130.1.124.8.124.3.119.6.119.3.116.0.111.3；IR(neat):3060,1590, 1501,1416,1386,1242,751cm- 1 ;MS(ESI)m/z(M+H)+calcd for[Ci8Hi4N302] + : 304.1086; found: 304 ? 1073 ?其結構式如下：
[0066] 3ba:固體，44mg，60%yield;mp Wg-lSOr.1!!匪R(500MHz，CDCl3):S7.68(d，J = 7.9Hz，2H)，7.63(d，J = 9.2Hz，lH)，7.56(t，J = 7.9Hz，2H)，7.45(t，J = 7.4Hz，lH)，7.32(s， 1H)，7.27(dd，J = 8.9，1.9Hz，lH)，3.90(s，3H) ;13C 匪R(125MHz，CDC13) :S157.8，135.8， 131.9.123.0. 128.5.128.3.124.1.122.1.112.3.94.4.56.0；IR(neat):3036,1595,1508, 1446，1417,1268,767cm- 1 ;MS(ESI)m/z(M+H)+calcd for[Ci3Hi2N302] + : 242.0930; found: 242.0920.其結構式如下：
[0068] 3ea:固體，18mg，28%yield;mp nS-nyC.iH 匪 R(400MHz，CDCl3):S8.72(d，J = 3.0Hz,lH),8.23(dd ,J = 8.6,1.2Hz,lH),7.67(dd ,J=11.2,6.3Hz,3H),7.60(t ,J = 7.9Hz, 2H)，7.49(t，J = 7.4Hz，lH);13C NMR(100MHz，CDC13):S148.1,141.7,135.6,130.2,129.0， 125.9.125.8.122.0. 121.0;IR(neat):3052,1588,1503,1448,1402,1134,757cm-1 ;MS(ESI) m/z(M+H)+calcd for[CiiH9N40] +:213? 0776;found:213? 0765?其結構式如下：
[0070] 3fa:固體，47mg，56%yield;mp lSO-mr.1!! NMR(400MHz，CDC13):S8.39(s，1H)， 7.90-7.83(m,2H) ,7.71-7.67(m,2H) ,7.62(dd,J=10.6,5.1Hz,2H) ,7.52(dd,J = 8.2, 6.5Hz，1H);13C NMR(100MHz，CDC13) :S135.3，134.0，130.8，130.2，129.3，127.7，127.7, 127.2,124.6,122.7,114.7,114.6,112.6；IR(neat):3076,1601,1505,1454,1325,1126, 749cm- 1 ;MS(ESI)m/z(M+H)+calcd for[Ci3H9FN30]+: 280 ? 0698;found: 280 ? 0685 ?其結構式如 下：
[0072] 3dj:固體，54mg，60%yield;mp les-iesr.1!! NMR(500MHz，CDC13):S7.80-7.73 (m，6H)，7.58(d，J=15.0Hz，1H)，7.55-7.47(m，2H),7.46-7.38(m，2H)，7.30(dd，J=15.0， 2.9Hz，lH)，2.31(s，3H) ;13C 匪R(125MHz，CDC13):S140.5,138.2,136.6,136.2,135.8， 132.8,129.2,128.1,127.8,123.4,120.5,117.2,21.3；IR(neat):3050,1601,1545,1460, 1427，1278，768cm- 1 ;MS(ESI)m/z(M+H)+calcd for[Ci9Hi6N30] + :302? 1293;found:302? 1282? 其結構式如下：
[0074] 實施例2:
[0075]按下述合成路線合成本發(fā)明所述的N_芳基苯并三唑類氮氧衍生物。
[0077] 將CuCl2(0.3mmol)、N_羥基苯并三唑底物（0? 3mmol)、芳基硼酸（0.9mmol)置于反 應管中，加入3mLl，2-二氯乙烷，室溫下加入碳酸鉀（3mmol);在25°C下攪拌反應12-24h，所 得反應物加入水（10mL)，用二氯甲烷萃取(2X10mL)，合并有機相，用無水硫酸鈉干燥后過 濾，減壓除去溶劑，硅膠柱層析分離（正己烷/乙酸乙酯= 10:1~1:1，體積比），得到目標產 物3。不同的目標產物及其表征如下：
[0078] 3ga:固體，43mg，55%yield;mp WS-Wer.1!! NMR(500MHz，CDC13):S7.68-7.62 (m，2H)，7.60-7.48(m，3H)，7.34(d，J = 2.9，lH)，7.33(d，J = 3.1Hz，lH)，2.31(s，3H);13C 匪R(125MHz，CDC13):S140.0,137.8,132.5,131.8,128.2,127.0,125.4,122.0,118.8， 21 ? 9; IR(neat): 3046，1600，1497，1443，1423，1286，746cm-1 ;MS(ESI )m/z(M+H)+calcd for
[C13H11CIN3O] +: 260 ? 0591; found: 260 ? 0583 ?其結構式如下：
[0080] 3ha:固體，38mg，47%yield;mp NMR(500MHz，CDCl3):S = 7.67(dt，J = 3.7，1.9Hz，2H)，7.59(t，J = 7.0Hz，2H)，7.56-7.51(m，lH)，7.23(s，lH)，2.36(s，3H)， 2.31(s，3H) ;13C NMR(125MHz，CDC13):8 = 140.9,140.6,138.8,128.4,127.5,126.4,122.3， 120.4.119.0. 21.0.18.8；IR(neat):3064,1612,1535,1450,1414,1292,743cm_1；MS(ESI)m/ z(M+H)+calcd for[Ci4Hi3ClN30] +: 274 ? 0747;found: 274 ? 0741 ?其結構式如下：
[0082] 3ia:固體，32mg，36%yield;mp NMR(500MHz，CDC13):S7.70-7.64 (m，2H)，7.61-7.47(m，3H)，7.41(s，lH)，3.92(s，3H)，2.15(s，3H);13C NMR(125MHz，CDC13): 5147.5.138.2.137.0. 128.5.127.2.122.8.122.0.118.0.110.9.61.0.17?0;IR(neat): 3064,1597,1525,1468,1432,1250,763cm _1；MS(ESI)m/z(M+H)+calcd for[Ci4Hi3ClN302] +: 290 ? 0696; found: 290 ? 0687 ?其結構式如下：
[0084] 3gk:固體，16mg，20%yield;mp nS-nyC.iH NMR(500MHz，CDC13):S7.62-7.55 (m，lH)，7.51-7.46(m，lH)，7.40(td，J=14.7,3.4Hz，lH)，7.35(d，J = 2.9Hz，lH)，7.40(td， J=14.7,3.4Hz，lH)，7.35(d，J = 2.9Hz，lH)，7.34-7.29(m，2H)，2.32(s，3H)，1.85(s，3H); 13C NMR(125MHz，CDC13): 8138.0,137.2,135.3,132.4,131.8,127.6,126.5,125.2,124.0， 118.0. 21.8.17.5；IR(neat):3065,1601,1496,1468,1424,1354,767cm_1；MS(ESI)m/z(M+H )+calcd for[Ci4Hi3ClN30] +: 274 ? 0747;found: 274 ? 0735 ?其結構式如下：
[0086] 3gl:固體，51mg，52%yield;mp nS-nyC.1!! NMR(500MHz，CDC13):S7.54(s，4H)， 7.35(d，J = 3.1Hz，1H)，7.32(d，J = 3.1Hz，1H)，2.31(s，3H) .13C 匪R(125MHz，CDC13) :S 144.1,138.3,132.0,131.1,126.6,125.0,121.8,118.2,118.1,21.83.IR(neat):3109, 1608,1468,1436,1322,1114,743cm_1；MS(ESI)m/z(M+H)+calcd for[Ci4Hi0ClF3N30] +: 328 ? 0465; found: 328 ? 0453 ?其結構式如下：
[0088] 3gm:固體，17mg，19%yield;mp lSS-lSrC.1!!匪 R(500MHz，CDCl3):S7.34(d，J = 1.4Hz，lH)，7.31(d，J=1.4Hz，lH)，6.72(s，2H)，2.50(s，6H)，2.32(s，3H)，2.27(s，3H); 13C NMR(125MHz，CDC13): 8 = 138.3,138.0,137.4,133.1,132.9,133.1,131.0,124.5,117.6， 22.3,19.3；IR(neat):3068,1618,1521,1468,1438,1352,767cm _1；MS(ESI)m/z(M+H)+calcd for [Ci6Hi7ClN30] +: 302 ? 1060; found: 302 ? 1058 ?其結構式如下：
[0090] 3gn:固體，62mg，65%yield;mp iss-iser.1!! NMR(500MHz，CDC13):S7.64-7.62 (m，lH)，7.61-7.58(m，lH) ,7.37-7.35(m，lH)，7.34(q，J = 3.2Hz，2H)，7.31(d，J = 3.1Hz， lH),2.65(t,J=14.1Hz,2H),2.31(s,3H),1.63-1.49(m,2H),1.40-1.25(m,2H),0.89(t,J =13.OHz，3H);13C NMR(125MHz，CDC13) : 8141.4,138.3，136.4，132.0，131.1，130.2,125.7， 122.0. 118.2.36.3.32.7.22.7.14.0；IR(neat):3076,1605,1524,1462,1425,1256,746cm -SMS^SDm/zW+Hrcalcd for[Ci7Hi9ClN30] + :316.1217;found:316.1208?其結構式如下：
[0092] 3go:固體，50mg，67%yield;mp NMR(500MHz，CDCl3):S7.46(dd，J = 7.3，1.6Hz，lH)，7.35(d，J=1.4Hz，lH)，7.32(d，J=1.4Hz，lH)，6.37(t，J = 7.4Hz，lH)， 6 ? 33(dd，J = 7 ? 5，1 ? 6Hz，1H)，2 ? 32(s，3H); 13C NMR( 125MHz，CDC13): S142 ? 7，140 ? 5，137 ? 1， 134.3,129.4,122.4,117.4,108.6,100.1,22.3；IR(neat):3056,1587,1501,1408,1386, 1241，748cm- 1 ;MS(ESI )m/z(M+H)+calcd for[CiiH9C1N302] + : 250 ? 0383; found: 250 ? 0376 ?其 結構式如下：
[0094] 3gp:固體，66mg，70%yield;mp NMR(500MHz，CDC13):S7.80-7.97 (m，lH)，7.94-7.92(m，lH),7.76-7.75(m，lH)，7.72-7.69(m，lH)，7.35(d，J=3.1Hz，1H)， 7.32(d，J = 2.9Hz，lH)，3.92(s，3H)，2.31(s，3H);13C NMR(125MHz，CDC13) :S167.7,140.7， 138.3.132.3.132.0. 131.2.125.7.120.0.118.2.52.3.22.3；IR(neat):3062,1705,1640, 1545,1346,1134,767cm _1；MS(ESI)m/z(M+H)+calcd for[Ci5Hi3ClN303] + : 318.0645；found: 318.0632.其結構式如下：
[0096] 3ia:固體，23mg，30%yield;mp 189-19(TC/H NMR(500MHz，CDCl3):S7.68(dt，J = 3.7，1.9Hz，2H)，7.59(t，J=7.0Hz，2H)，7.56-7.52(m，lH)，2.58(s，3H)，2.50(s，3H)，2.42 (s，3H); 13C NMR(125MHz，CDC13) :S153.2,138.2,137.6,131.2,128.2,127.8,122.3,22.2， 16.2,15.6；IR(neat):3050,1586,1502,1446,1340,1135,767cm _1；MS(ESI)m/z(M+H)+calcd for[Ci4Hi5N40] +: 255 ? 1246; found: 255 ? 1235 ?其結構式如下：
[0098]實驗例1:本發(fā)明所述N-芳基苯并三唑類氮氧衍生物對多種人腫瘤株進行體外抑 制活性實驗：
[0099] (1)細胞培養(yǎng):將7404、財60、7702、此口82、了24細胞培養(yǎng)于含10%(體積比）胎牛血 清和1%(體積比）雙抗(含青霉素和鏈霉素）的01^11培養(yǎng)基，在溫度37°(：、5%〇)2及95%空氣 的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，隔天換液。待細胞長滿后進行傳代，凍存。
[0100] (2)種板:取處于對數生長期的細胞，去掉舊培養(yǎng)基，用PBS洗滌兩次，胰蛋白酶消 化細胞，待細胞變圓后加入新的培養(yǎng)基終止細胞消化并吹打懸浮細胞，制成單個細胞懸液。 取適量的細胞懸液，加入一定量的培養(yǎng)基稀釋，接種到96孔板中，每孔ISOiiL，每孔細胞數為 20000-40000〇
[0101] (3)加藥:于種有腫瘤細胞的96孔板中加入待測樣品，每孔20此，使樣品的最終濃 度為10yM，進行初篩。根據初篩的結果，對化合物設置不同的濃度梯度進行篩選，每組設置5 個復孔。加化合物后放C〇2培養(yǎng)箱培養(yǎng)48h，每孔加入10yL配好的MTT溶液，放C02培養(yǎng)箱繼續(xù) 培養(yǎng)4~6h。
[0102] (4)測試:吸棄96孔板內的培養(yǎng)基，加入100yL的DMS0,放搖床上震蕩5~lOmin，使 結晶的甲瓚完全溶解。用酶標儀以570nm的吸收波長，630nm的參比波長雙波長測定吸光度 (0D)值，計算抑制率。抑制率=(1_樣品組0D值/空白組0D值）X 100%，用SPSS軟件分別計算 各化合物對不同腫瘤細胞株的IC5Q值。其測試結果如下表1所示：
[0103]表1:
【主權項】
1. 下式(I)所示化合物或其藥學上可接受的鹽：其中： X表示碳或氮原子； An表示未取代的噻吩基，或者是未取代的萘基，或者是未取代、單取代或二取代的苯 基，其中，取代基為Ch4的烷氧基、Ch4的全氟烷基、Ch4的烷基、鹵原子、未取代的苯基、硝基 或甲酯基； Rl表氣、Cl~4的烷基、Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基或齒原子，或者是未取代、單取代 或>取代的苯基，其中，取代基為Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、Cl~4的烷基或齒原子； R2表；^氣、Cl~4的烷基、Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基或齒原子，或者是未取代、單取代 或>取代的苯基，其中，取代基為Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、Cl~4的烷基或齒原子； R3表；^氣、Cl~4的烷基、Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基或齒原子，或者是未取代、單取代 或>取代的苯基，其中，取代基為Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、Cl~4的烷基或齒原子； R4表；^氣、Cl~4的烷基、Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基或齒原子，或者是未取代、單取代 或>取代的苯基，其中，取代基為Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、Cl~4的烷基齒原子。2. 權利要求1所述化合物的合成方法，其特征在于:取N-羥基苯并三唑衍生物、有機硼 試劑、銅鹽和堿性物質，置于有機溶劑中，在氧氣存在的條件下反應，制得目標物粗品；其 中： 所述的N-羥基苯并三唑衍生物具有下述(II)所示結構： 其中，X表示碳或氮原子； Rl表氣、Cl~4的烷基、Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基或齒原子，或者是未取代、單取代 或>取代的苯基，其中，取代基為Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、Cl~4的烷基或齒原子； R2表；^氣、Cl~4的烷基、Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基或齒原子，或者是未取代、單取代 或>取代的苯基，其中，取代基為Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、Cl~4的烷基或齒原子； R3表；^氣、Cl~4的烷基、Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基或齒原子，或者是未取代、單取代 或^取代的苯基，其中，取代基為Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、Cl~4的烷基或齒原子； R4表不氣、Cl~4的烷基、Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基或齒原子，或者是未取代、單取代 或^取代的苯基，其中，取代基為Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、Cl~4的烷基齒原子； 所述的有機硼試劑具有下述(III)所示結構： ΑπΒ(ΟΗ)2(ΙΙΙ);其中，An表示未取代的噻吩基，或者是未取代的萘基，或者是未取代、 單取代或二取代的苯基，其中，取代基為Ch4的烷氧基、Ch4的全氟烷基、Ch4的烷基、鹵原 子、未取代的苯基、硝基或甲酯基。3. 根據權利要求2所述的合成方法，其特征在于:所述的銅鹽為選自溴化銅、碘化銅、氯 化銅、硫酸銅、醋酸酮、硝酸銅、三氟甲磺酸銅、溴化亞銅、碘化亞銅和氯化亞銅中的一種或 兩種以上的組合。4. 根據權利要求2所述的合成方法，其特征在于:所述的堿性物質為選自磷酸三鉀、氫 氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鈣、氫氧化銫、碳酸銫，碳酸鉀、叔丁醇鉀、叔丁醇鈉、氟化鉀、吡 啶、三乙胺和N，N-二異丙基乙基胺中的一種或兩種以上的組合。5. 根據權利要求2所述的合成方法，其特征在于:所述的有機溶劑為選自苯、甲苯、環(huán)己 烷、石油醚、四氯化碳、四氫呋喃、乙酸乙酯、乙腈、乙醚、二氯甲烷、丙酮、三氯甲烷、正己烷 和二氧六環(huán)中一種或兩種以上的組合。6. 根據權利要求2所述的合成方法，其特征在于:反應在低于80°C的條件下進行。7. 根據權利要求2所述的合成方法，其特征在于:反應在常溫至60°C的條件下進行。8. 根據權利要求2~7中任一項所述的合成方法，其特征在于:在反應進行之前加入添 加劑，所述的添加劑為選自硫酸鈉、硫酸鎂、氯化鈣、五氧化二磷、3A分子篩、4A分子篩和5A 分子篩中的一種或兩種以上的組合。9. 根據權利要求2~7中任一項所述的合成方法，其特征在于:還包括純化步驟:具體是 將制得的目標物粗品進行硅膠薄層色譜或硅膠柱層析，或者是重結晶，得到純化后的目標 物。10. 權利要求1所述化合物或其藥學上可接受的鹽在制備抗腫瘤藥物中的應用。
【文檔編號】C07D405/04GK105820132SQ201610315960
【公開日】2016年8月3日
【申請日】2016年5月12日
【發(fā)明人】莫冬亮, 石維敏, 馬小盼, 閉紅艷, 蘇桂發(fā), 陳春華, 鄒寧
【申請人】廣西師范大學