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一種誘導紅豆杉細胞生產(chǎn)10-去乙酰漿果赤霉素Ⅲ的培養(yǎng)基添加劑的制作方法

文檔序號:9611791閱讀:416來源:國知局
一種誘導紅豆杉細胞生產(chǎn)10-去乙酰漿果赤霉素Ⅲ的培養(yǎng)基添加劑的制作方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及細胞工程技術領域,具體涉及一種誘導紅豆杉細胞生產(chǎn)10-去乙酰漿果赤霉素III的培養(yǎng)基添加劑。
【背景技術】
[0002]紫杉醇(paclitaxel)是從紅豆杉科紅豆杉屬(Taxus)植物的樹皮中提取得到的二萜類化合物。它是一種新型的微管穩(wěn)定劑,具有獨特抗癌活性,被美國國立癌癥研究所認為是近15?20年來腫瘤化療的最重要的進展。作為晚期卵巢癌的二線治療藥,至今已在40多個國家獲準上市,并在乳腺癌、肺癌、白血病、胃腸道癌及介入治療后的血管再狹窄等治療上顯示了令人鼓舞的療效。紫杉醇由于資源匱乏和水溶性低的問題而限制了它的臨床應用。
[0003]多烯紫杉醇是在C4和C5位置上含有一個帶有氧四環(huán)的紫杉烷環(huán)結構,并在C13位置上含有一個龐大的酯側鏈。在其體外活性結構關系中顯示C13酯側鏈的特性和構型對于多烯紫杉醇體外抗微管蛋白活性是置關重要的。相對于紫杉醇而言,多烯紫杉醇的水溶性顯著提升,用于細胞凋亡和癌癥治療的藥物活性高于紫杉醇,因此其制備方法受到了廣泛的關注。
[0004]現(xiàn)有技術中,多烯紫杉醇的制備方法是利用其前體物質10-去乙酰漿果赤霉素III進行化學修飾實現(xiàn)的,該前體物質目前仍主要通過紅豆杉細胞培養(yǎng)的方式獲得。然而一方面由于受代謝調控的限制,紅豆杉細胞分泌10-去乙酰漿果赤霉素III的傾向并不旺盛;另一方面受限于培養(yǎng)密度、細胞產(chǎn)量等因素,使得目標產(chǎn)物的得率較低。

【發(fā)明內容】

[0005]本發(fā)明旨在針對現(xiàn)有技術的技術缺陷,提供一種誘導紅豆杉細胞生產(chǎn)10-去乙酰漿果赤霉素III的培養(yǎng)基添加劑,以解決現(xiàn)有技術中紅豆杉細胞對10-去乙酰漿果赤霉素III的分泌量較低的技術問題。
[0006]為實現(xiàn)以上技術目的,本發(fā)明采用以下技術方案:
[0007]—種誘導紅豆杉細胞生產(chǎn)10-去乙酰漿果赤霉素III的培養(yǎng)基添加劑,包括以下重量份的成分:鉬酸鈉8?10份,秋水仙素4?6份,組氨酸2?3份,芹菜素1?2份,蛋白胨1?2份,酵母粉1?2份,連翹1?2份,雞骨草1?2份,扁豆衣1?2份,景天三七1?2份,水50?60份。
[0008]作為優(yōu)選,還包括1?2重量份的金銀花。
[0009]作為優(yōu)選,還包括1?2重量份的松花粉。
[0010]作為優(yōu)選,還包括1?2重量份的絞股藍。
[0011]作為優(yōu)選,還包括1?2重量份的升麻。
[0012]作為優(yōu)選,所述添加劑由以下重量份的成分組成:鉬酸鈉9份,秋水仙素5份,組氨酸2.5份,芹菜素1.5份,蛋白胨1.5份,酵母粉1.5份,連翹1.5份,雞骨草1.5份,扁豆衣1.5份,景天三七1.5份,水55份。
[0013]作為優(yōu)選,所述添加劑由以下重量份的成分組成:鉬酸鈉8.5份,秋水仙素5.5份,組氨酸2.1份,芹菜素1.3份,蛋白胨1.7份,酵母粉1.6份,連翹1.2份,雞骨草1.1份,扁豆衣1.4份,景天三七1.5份,金銀花1.4份,松花粉1.1份,絞股藍1.5份,升麻1.8份,水57份。
[0014]本發(fā)明通過在培養(yǎng)基中添加誘導子的方式干涉紅豆杉細胞自身代謝模式,從而定向誘導紅豆杉細胞分泌多烯紫杉醇半合成前體一一10-去乙酰漿果赤霉素III。本發(fā)明在用于細胞培養(yǎng)的慣常營養(yǎng)物基礎上優(yōu)選了多種微量元素并確定了最佳配比,在此基礎上添加了一定量的天然藥物成分旨在進一步促進該前體物質的產(chǎn)率。實驗發(fā)現(xiàn),在細胞培養(yǎng)液中添加本發(fā)明添加劑后,紅豆杉細胞對10-去乙酰漿果赤霉素III的分泌量顯著提升,同時能夠在一定程度增進細胞培養(yǎng)密度。本發(fā)明技術思路清晰,技術方案合理,具有良好的規(guī)模化應用前景。
【具體實施方式】
[0015]以下將對本發(fā)明的【具體實施方式】進行詳細描述。為了避免過多不必要的細節(jié),在以下實施例中對屬于公知的結構或功能將不進行詳細描述。除有定義外,以下實施例中所用的技術和科學術語具有與本發(fā)明所屬領域技術人員普遍理解的相同含義。
[0016]實施例1
[0017]—種誘導紅豆杉細胞生產(chǎn)10-去乙酰漿果赤霉素III的培養(yǎng)基添加劑,由以下重量份的成分組成:鉬酸鈉8份,秋水仙素4份,組氨酸2份,芹菜素1份,蛋白胨1份,酵母粉1份,連翹1份,雞骨草1份,扁豆衣1份,景天三七1份,水50份。
[0018]實施例2
[0019]—種誘導紅豆杉細胞生產(chǎn)10-去乙酰漿果赤霉素III的培養(yǎng)基添加劑,由以下重量份的成分組成:鉬酸鈉10份,秋水仙素6份,組氨酸3份,芹菜素2份,蛋白胨2份,酵母粉2份,連翹2份,雞骨草2份,扁豆衣2份,景天三七2份,水60份。
[0020]實施例3
[0021]—種誘導紅豆杉細胞生產(chǎn)10-去乙酰漿果赤霉素III的培養(yǎng)基添加劑,由以下重量份的成分組成:鉬酸鈉9份,秋水仙素5份,組氨酸2.3份,芹菜素1.8份,蛋白胨1.5份,酵母粉1.6份,連翹1.7份,雞骨草1.8份,扁豆衣1.2份,景天三七1.8份,水55份。
[0022]實施例4
[0023]—種誘導紅豆杉細胞生產(chǎn)10-去乙酰漿果赤霉素III的培養(yǎng)基添加劑,由以下重量份的成分組成:鉬酸鈉8.8份,秋水仙素5.4份,組氨酸2.7份,芹菜素1.2份,蛋白胨1.2份,酵母粉1.2份,連翹1.5份,雞骨草1.6份,扁豆衣1.4份,景天三七1.7份,金銀花1份,升麻1.1份,水52份。
[0024]實施例5
[0025]—種誘導紅豆杉細胞生產(chǎn)10-去乙酰漿果赤霉素III的培養(yǎng)基添加劑,由以下重量份的成分組成:鉬酸鈉9.4份,秋水仙素4.2份,組氨酸2.1份,芹菜素1.3份,蛋白胨1.1份,酵母粉1份,連翹2份,雞骨草1.9份,扁豆衣1.2份,景天三七1.9份,松花粉1.3份,絞股藍1.2份,升麻1.6份,水58份。
[0026]實施例6
[0027]—種誘導紅豆杉細胞生產(chǎn)10-去乙酰漿果赤霉素III的培養(yǎng)基添加劑,由以下重量份的成分組成:鉬酸鈉8.8份,秋水仙素5.4份,組氨酸2.7份,芹菜素1.2份,蛋白胨1.2份,酵母粉1.2份,連翹1.5份,雞骨草1.6份,扁豆衣1.4份,景天三七1.7份,金銀花1.5份,水55份。
[0028]實施例7
[0029]—種誘導紅豆杉細胞生產(chǎn)10-去乙酰漿果赤霉素III的培養(yǎng)基添加劑,由以下重量份的成分組成:鉬酸鈉9.2份,秋水仙素5.7份,組氨酸2.4份,芹菜素1.5份,蛋白胨1.5份,酵母粉1.7份,連翹1.7份,雞骨草1.2份,扁豆衣1.9份,景天三七2份,絞股藍1.8份,水59份。
[0030]實施例8
[0031]—種誘導紅豆杉細胞生產(chǎn)10-去乙酰漿果赤霉素III的培養(yǎng)基添加劑,由以下重量份的成分組成:鉬酸鈉8.5份,秋水仙素5.5份,組氨酸2.1份,芹菜素1.3份,蛋白胨1.7份,酵母粉1.6份,連翹1.2份,雞骨草1.1份,扁豆衣1.4份,景天三七1.5份,金銀花1.4份,松花粉1.1份,絞股藍1.5份,升麻1.8份,水57份。
[0032]以上對本發(fā)明的實施例進行了詳細說明,但所述內容僅為本發(fā)明的較佳實施例,并不用以限制本發(fā)明。凡在本發(fā)明的申請范圍內所做的任何修改、等同替換和改進等,均應包含在本發(fā)明的保護范圍之內。
【主權項】
1.一種誘導紅豆杉細胞生產(chǎn)10-去乙酰漿果赤霉素III的培養(yǎng)基添加劑,其特征在于包括以下重量份的成分:鉬酸鈉8?10份,秋水仙素4?6份,組氨酸2?3份,芹菜素1?2份,蛋白胨1?2份,酵母粉1?2份,連翹1?2份,雞骨草1?2份,扁豆衣1?2份,景天三七1?2份,水50?60份。2.根據(jù)權利要求1所述的誘導紅豆杉細胞生產(chǎn)10-去乙酰漿果赤霉素III的培養(yǎng)基添加劑,其特征在于還包括1?2重量份的金銀花。3.根據(jù)權利要求1所述的誘導紅豆杉細胞生產(chǎn)10-去乙酰漿果赤霉素III的培養(yǎng)基添加劑,其特征在于還包括1?2重量份的松花粉。4.根據(jù)權利要求1所述的誘導紅豆杉細胞生產(chǎn)10-去乙酰漿果赤霉素III的培養(yǎng)基添加劑,其特征在于還包括1?2重量份的絞股藍。5.根據(jù)權利要求1所述的誘導紅豆杉細胞生產(chǎn)10-去乙酰漿果赤霉素III的培養(yǎng)基添加劑,其特征在于還包括1?2重量份的升麻。6.根據(jù)權利要求1所述的誘導紅豆杉細胞生產(chǎn)10-去乙酰漿果赤霉素III的培養(yǎng)基添加劑,其特征在于所述添加劑由以下重量份的成分組成:鉬酸鈉9份,秋水仙素5份,組氨酸2.5份,芹菜素1.5份,蛋白胨1.5份,酵母粉1.5份,連翹1.5份,雞骨草1.5份,扁豆衣1.5份,景天三七1.5份,水55份。7.根據(jù)權利要求1所述的誘導紅豆杉細胞生產(chǎn)10-去乙酰漿果赤霉素III的培養(yǎng)基添加劑,其特征在于所述添加劑由以下重量份的成分組成:鉬酸鈉8.5份,秋水仙素5.5份,組氨酸2.1份,芹菜素1.3份,蛋白胨1.7份,酵母粉1.6份,連翹1.2份,雞骨草1.1份,扁豆衣1.4份,景天三七1.5份,金銀花1.4份,松花粉1.1份,絞股藍1.5份,升麻1.8份,水57份。
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種誘導紅豆杉細胞生產(chǎn)10-去乙酰漿果赤霉素Ⅲ的培養(yǎng)基添加劑,該添加劑包括鉬酸鈉、秋水仙素、組氨酸、芹菜素、蛋白胨、酵母粉、連翹、雞骨草、扁豆衣、景天三七等成分。本發(fā)明通過在培養(yǎng)基中添加誘導子的方式干涉紅豆杉細胞自身代謝模式,從而定向誘導紅豆杉細胞分泌多烯紫杉醇半合成前體——10-去乙酰漿果赤霉素Ⅲ。實驗發(fā)現(xiàn),在細胞培養(yǎng)液中添加本發(fā)明添加劑后,紅豆杉細胞對10-去乙酰漿果赤霉素Ⅲ的分泌量顯著提升,同時能夠在一定程度增進細胞培養(yǎng)密度。本發(fā)明技術思路清晰,技術方案合理,具有良好的規(guī)模化應用前景。
【IPC分類】C12P17/02, C12N5/04
【公開號】CN105368889
【申請?zhí)枴緾N201510960016
【發(fā)明人】夏雪城, 夏爽
【申請人】天津市博愛生物藥業(yè)有限公司
【公開日】2016年3月2日
【申請日】2015年12月18日
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