專利名稱：一種銀杏葉提取物的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及對(duì)銀杏葉中的黃酮及內(nèi)酯成分的提取工藝方法。
背景技術(shù)：
銀杏葉提取物具有改善心腦血管循環(huán)，治療心腦血管疾病，提高記憶，清除氧自由基，延緩衰老的作用，有治療和保健雙重效果。其有效成分是銀杏黃酮及內(nèi)酯，其含量高低及相對(duì)比例決定其質(zhì)量的優(yōu)劣。目前從銀杏葉中提取銀杏葉提取物的制備工藝有1、水抽法，包括A、水抽提-乙醇沉淀法，B、水抽提-樹(shù)脂法；2、乙醇抽提法；3、丙酮抽提法等。這些方法同時(shí)將銀杏黃酮及內(nèi)酯提取出來(lái)，又因銀杏葉質(zhì)量受天氣、產(chǎn)地、采集時(shí)間、存期等因素影響，含量不穩(wěn)定，以上工藝難以保證抽提物中的黃酮與內(nèi)酯的含量均達(dá)到質(zhì)量指標(biāo)以及黃酮與內(nèi)酯比例的相對(duì)穩(wěn)定，因此難以生產(chǎn)出高質(zhì)量的銀杏葉提取物。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提出一種旨在能獲得具有銀杏黃酮及內(nèi)酯的含量及相對(duì)比例穩(wěn)定的銀杏葉提取物的制備新方法。
本發(fā)明采用乙醇粗提-大孔樹(shù)脂法及超臨界CO2提取純化-勾兌的技術(shù)方案，即將銀杏葉粉碎后用乙醇浸提，提取物濃縮后酒沉，上清液層用來(lái)精制銀杏黃酮，沉淀物用來(lái)精制銀杏內(nèi)酯；采用大孔樹(shù)脂法精制銀杏黃酮，超臨界CO2法精制銀杏內(nèi)酯，分別制得銀杏黃酮和銀杏內(nèi)酯提取物，然后在測(cè)定提取物的銀杏黃酮和銀杏內(nèi)酯的含量的基礎(chǔ)上勾兌調(diào)配出具有銀杏黃酮和銀杏內(nèi)酯穩(wěn)定含量和配比的銀杏葉提取物。其具體工藝步驟為(1)提取銀杏有效成分，(1.1)、將銀杏干葉粉碎后，加乙醇浸提，得浸提液，條件是浸提溫度為60-80℃，乙醇濃度為65-75％；(1.2)、將所得的浸提液過(guò)濾后真空濃縮成濃縮液；(1.3)、將所得的濃縮液加入用酸將濃度為5-20％的乙醇調(diào)節(jié)至pH值為2-5的酸性乙醇溶液，靜置，使其充分沉淀，過(guò)濾，將上清液和沉淀物分開(kāi)備用；(2)提取銀杏黃酮，(2.1)、將(1.3)所得的上清液過(guò)大孔樹(shù)脂柱；(2.2)、上清液過(guò)柱后用65-75％乙醇水溶液淋洗，收集流出液；(2.3)、將收集的流出液減壓回收乙醇后，真空噴霧干燥而得銀杏黃酮提取物；(3)提取銀杏內(nèi)酯，
(3.1)、(1.3)所得的沉淀物加入吸附劑。吸附劑可為聚酰胺、硅藻土或大孔樹(shù)脂。吸附劑以聚酰胺為最佳。
(3.2)將上步加有吸附劑的沉淀物裝入超臨界CO2萃取釜，進(jìn)行超臨界CO2萃取，萃取工藝條件是萃取溫度為45-60℃，萃取壓力為20-40Mpa，攜帶劑為50-80％乙醇；其最佳工藝條件是萃取溫度為55℃，萃取壓力為25Mpa，攜帶劑為70％乙醇。
(3.3)、將所得的萃取物減壓濃縮后，真空噴霧干燥而得銀杏內(nèi)酯提取物；(4)分別對(duì)所得的銀杏黃酮提取物和銀杏內(nèi)酯提取物稱量并勾兌調(diào)配，使調(diào)配后的銀杏葉提取物產(chǎn)品中的總黃酮含量≥24％，總內(nèi)酯≥6％。
本發(fā)明方法能保證制得具有銀杏黃酮和銀杏內(nèi)酯穩(wěn)定含量和配比的高質(zhì)量的銀杏葉提取物，不受銀杏葉本身質(zhì)量因素的影響，從而解決了現(xiàn)有銀杏葉提取工藝制備銀杏葉提取物所存在的問(wèn)題。本法工藝簡(jiǎn)單，生產(chǎn)成本低，所制備的銀杏葉提取物總黃酮含量≥24％，總內(nèi)酯≥6％，質(zhì)量穩(wěn)定；回收率≥80％。


附圖為超臨界CO2萃取系統(tǒng)示意圖。
圖中1為CO2氣瓶，2為冷凍箱，3為攜帶劑罐，4為流量計(jì)，5為高壓泵，6為計(jì)量泵，7為萃取釜，8、9、10為分離釜，11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26為閥門。
具體實(shí)施方案制備銀杏提取物的工藝步驟如下(1)提取銀杏有效成分，(1.1)、將銀杏干葉粉碎后，放于水浴鍋中，分三次加分別為銀杏干葉重量的5倍、4倍、3倍的乙醇對(duì)銀杏葉分別浸提3小時(shí)、2小時(shí)、1小時(shí)，浸提溫度為70℃，乙醇濃度為75％，每次浸提后，收集提取液，將三次收集的提取液合并；(1.2)、將所得的浸提液過(guò)濾后真空濃縮成濃縮液；(1.3)、將所得的濃縮液加入酸性乙醇溶液，該酸性溶液為用鹽酸將濃度為15％的乙醇調(diào)節(jié)至pH值為3的乙醇溶液，靜置10小時(shí)，使其充分沉淀，過(guò)濾，將上清液和沉淀物分開(kāi)備用；(2)提取銀杏黃酮，(2.1)、將(1.3)所得的上清液過(guò)大孔樹(shù)脂柱，過(guò)程如下a、先對(duì)大孔樹(shù)脂預(yù)處理，取粒度為30-60目的AB-8樹(shù)脂，加水浸泡24小時(shí)后，再用5％的氫氧化鈉浸泡4小時(shí)，用蒸餾水沖洗至近中性；再加入5％鹽酸浸泡4小時(shí)，用蒸餾水沖洗至近中性；再加入95％乙醇浸泡8小時(shí)后，用蒸餾水反復(fù)洗至無(wú)乙醇味時(shí)備用；b、將處理好的樹(shù)脂裝入玻璃層析柱，用蒸餾水沖至平衡，然后將(1.3)所得的上清液過(guò)柱，調(diào)節(jié)流速約60滴/min，待溶液都過(guò)完后，用15％乙醇(pH＝3)淋洗直至流出液由綠色渾濁液變成棕色澄清液時(shí)進(jìn)入下一步收集步驟；(2.2)、用75％乙醇水溶液(pH＝3)淋洗，收集流出液，直至流出液變?yōu)榍辶翞橹梗?2.3)、將收集的流出液減壓回收乙醇后，真空噴霧干燥即得銀杏黃酮提取物；(3)提取銀杏內(nèi)酯，(3.1)、用超臨界CO2萃取方法對(duì)(1.3)所得的沉淀物提取銀杏內(nèi)酯(用附圖所示的超臨界CO2萃取系統(tǒng))，其工藝流程是將(1.3)所得的沉淀物加入吸附劑聚酰胺，裝入超臨界CO2萃取釜7，在萃取釜7加熱到萃取溫度55℃后，向萃取釜通入液態(tài)CO2和攜帶劑(萃取劑)70％濃度的乙醇，在25Mpa萃取壓力下循環(huán)，萃取1小時(shí)后，在分離釜8得到稠狀膏，在分離釜9得到顏色較深的溶液，在分離釜萃10得到較清的溶液。從分離釜9得到的溶液經(jīng)薄膜濃縮后得到稠狀浸膏，該浸膏與從分離釜8得到稠狀膏合并即為銀杏內(nèi)酯萃取物備用以進(jìn)入下一工序步驟。分離釜10所得的溶液可加入萃取釜重復(fù)使用，所說(shuō)的分離釜8、9、10的溫度分別調(diào)節(jié)到60℃、45℃、40℃。
(3.2)、將上步所得的銀杏內(nèi)酯萃取物減壓濃縮后，真空噴霧干燥而得銀杏內(nèi)酯提取物；(4)分別對(duì)所得的銀杏黃酮提取物和銀杏內(nèi)酯提取物分別用HPLC方法測(cè)定其銀杏黃酮和銀杏內(nèi)酯含量，按調(diào)配后的銀杏葉提取物產(chǎn)品中的總黃酮含量≥24％，總內(nèi)酯≥6％為標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)銀杏黃酮提取物和銀杏內(nèi)酯提取物分別稱量并勾兌調(diào)配，即得到本發(fā)明所述的銀杏葉提取物產(chǎn)品。
權(quán)利要求
1.一種銀杏葉提取物的制備方法，其工藝步驟為(1)提取銀杏有效成分，(1.1)、將銀杏干葉粉碎后，加乙醇浸提，得浸提液，條件是浸提溫度為60-80℃，乙醇濃度為65-75％；(1.2)、將所得的浸提液過(guò)濾后真空濃縮成濃縮液；(1.3)、將所得的濃縮液加入用酸將濃度為5-20％的乙醇調(diào)節(jié)至pH值為2-5的酸性乙醇溶液，靜置，使其充分沉淀，過(guò)濾，將上清液和沉淀物分開(kāi)備用；(2)提取銀杏黃酮，(2.1)、將(1.3)所得的上清液過(guò)大孔樹(shù)脂柱；(2.2)、上清液過(guò)柱后用65-75％乙醇水溶液淋洗，收集流出液；(2.3)、將收集的流出液減壓回收乙醇后，真空噴霧干燥而得銀杏黃酮提取物；(3)提取銀杏內(nèi)酯，(3.1)、(1.3)所得的沉淀物加入吸附劑；(3.2)、將上步加有吸附劑的沉淀物裝入超臨界CO2萃取釜，進(jìn)行超臨界CO2萃取，萃取工藝條件是萃取溫度為45-60℃，萃取壓力為20-40Mpa，攜帶劑為50-80％乙醇；(3.3)、將所得的萃取物減壓濃縮后，真空噴霧干燥而得銀杏內(nèi)酯提取物；(4)分別對(duì)所得的銀杏黃酮提取物和銀杏內(nèi)酯提取物稱量并勾兌調(diào)配，使調(diào)配后的銀杏葉提取物產(chǎn)品中的總黃酮含量≥24％，總內(nèi)酯≥6％。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的銀杏葉提取物的制備方法，其特征在于用超臨界CO2萃取工藝提取銀杏內(nèi)酯的工藝條件為萃取溫度為55℃，萃取壓力為25Mpa，攜帶劑為70％乙醇，吸附劑為聚酰胺。
全文摘要
本發(fā)明提供一種銀杏葉提取物的制備方法，該方法采用乙醇粗提－大孔樹(shù)脂法及超臨界CO
文檔編號(hào)C07D311/30GK1472206SQ02134490
公開(kāi)日2004年2月4日 申請(qǐng)日期2002年8月2日 優(yōu)先權(quán)日2002年8月2日
發(fā)明者吳惠勤, 程誌青, 謝培山, 顏玉貞, 黃芳, 張桂英 申請(qǐng)人:廣東省測(cè)試分析研究所