專利名稱：鵝血抗癌制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種抗癌制劑，具體地說是以新鮮鵝血分離的血清、血細(xì)胞分別為主要原料制成的鵝血清制劑，鵝血細(xì)胞制劑。
眾所周知，惡性腫瘤是嚴(yán)重威脅人類生命健康的常見疾病，世界公認(rèn)的難題，而改善中、晚期腫瘤癥狀，延長生存期是當(dāng)今中、西醫(yī)腫瘤治療學(xué)重要課題之一，目前國內(nèi)外從動物，植物中尋找新的抗癌方法，成份越來越受到人們的關(guān)注，其中一個重要來源主是民間抗癌動植物。乞今為止惡性腫瘤主要治療方法是手術(shù)、放、化療。臨床實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)在″三大″治療期間或治療之后一種既能抗癌又能扶正的輔助治療制劑是迫切需要的，然而這種具有雙向功能制劑較少，雖然也有一些，但治療效果不十分理想。
本發(fā)明是在大膽探索，認(rèn)真篩選，反復(fù)論證的基礎(chǔ)上產(chǎn)生的。
本發(fā)明的目的在于提供一種綜合利用鵝血，具有對惡性腫癌，抗癌扶正，消化系潰瘍，萎縮性胃炎等慢性疾病有輔助治療的鵝血制劑。
本發(fā)明的解決方案基于祖國醫(yī)學(xué)古今醫(yī)藥專著對鵝血的論述，應(yīng)用現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)手段和臨床觀察，經(jīng)醫(yī)學(xué)碩士課題，省自然基金課題專項(xiàng)研究完成。
實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)鵝血抗癌活性成份主要存在血清部分，經(jīng)體外癌細(xì)胞培養(yǎng)，動物實(shí)驗(yàn)、少量臨床觀察，對SR(小鼠乳腺癌)、S180(肉瘤180)、Ehrlichascites cell(艾氏腹水癌)均有明顯抑瘤效應(yīng)，與對照組相比(P＜0.05)。對晚期肝癌，結(jié)腸癌等病人臨床應(yīng)用，抗癌扶正效果明顯，對消化系潰瘍萎縮性胃炎有明顯輔助治療效果。本發(fā)明之鵝血抗癌制劑為以鵝血分離的鵝血清制劑，和/或分離的鵝血細(xì)胞制劑?？梢允侨魏我环N藥物學(xué)上所說的劑型。其中鵝血清可佐以蜂蜜液，蜂王漿作調(diào)味，抑菌，增強(qiáng)營養(yǎng)，滑潤易服，并對其抗癌活性成份起滋養(yǎng)作用，分離的鵝血細(xì)胞及固體成份實(shí)驗(yàn)顯示對乙酸所制大鼠胃腸粘膜損傷有明顯修復(fù)作用，并在腸道中分解的代謝產(chǎn)物促進(jìn)胃腸濡動，排出體內(nèi)的有害物質(zhì)，俗稱體內(nèi)清洗劑。配以精選出的山藥、白芨、積殼、莪術(shù)、延胡索制成片劑，具有養(yǎng)胃生精、行氣止痛、抗?jié)?，抗腫瘤等增效之功。
鵝血清口服液主要原料的組成(體積)為鵝血清 50～100％蜂蜜液 10～50％蜂王漿 2～15％鵝血清口服液主要原料的最佳組成(體積)為鵝血清 65％蜂蜜液 30％蜂王漿 5％鵝血細(xì)胞片主要原料的組成(重量份)為鵝血細(xì)胞干燥粉 20～35份 山藥 10～20份白芨10～15份 枳殼 5～15份莪術(shù)10～20份 延胡索 10～20份鵝血片主要原料的最佳組成(重量)為鵝血細(xì)胞干燥粉 25份 山藥15份白芨15份 枳殼10份莪術(shù)10份 延胡索 10份鵝血細(xì)胞指鵝紅、白、血小板細(xì)胞及固體成份鵝血抗癌制劑的生產(chǎn)方法是1、采血可分人工活體翅翼靜脈無菌采血法和機(jī)器處死采血法，實(shí)驗(yàn)資料顯示體重在3Kg以上青年鵝，每月可采2-3次，并可通過科學(xué)喂養(yǎng)增強(qiáng)抗癌效應(yīng)；血清經(jīng)過濾，血細(xì)胞自然凝固成塊后，分別置于無菌容器；2、取蜂蜜，加其等容2倍無菌蒸餾水置85～95℃恒溫箱半小時，趁熱濾過冷至10℃以下；另取蜂王漿，置膠體磨研磨，濾過，再取對羥基苯甲酸乙酯，用乙酯溶解，加水至100ml，攪均、濃度為0.1％；3、將鵝血清、蜂蜜液、蜂王漿、對羥基苯甲酸乙酯混入攪拌容器，攪均灌裝，每支5～10ml，既可得口服液，采用紫外線輻照滅菌法，低溫保存。
4、取鵝血細(xì)胞凝塊，在-15℃下冷凍干燥，粉碎成120細(xì)度，再取白芨、山藥、枳殼、延胡索、莪術(shù)置入多功能提取罐中，煎煮2次，第1次2小時，第2次1小時，去藥渣，取煎液，濃縮至相對密度為1.30(20℃)，加乙醇至含醇量為70％靜置，取上清液回收乙醇，濃縮至相對密度為1.33(20℃)的稠膏，用無菌器保存；5、將鵝血細(xì)胞干燥粉，藥物稠膏，10％淀粉漿混均勻后制成顆粒，置入干燥箱2小時，控制水分在3.5％左右，用14目篩整粒，加適量的硬脂酸鎂，壓制成異形片，包薄膜衣，即可成鵝血片。
本發(fā)明組方設(shè)計(jì)特色在于抗癌，鵝血清，扶正，蜂蜜，蜂王漿；清除體內(nèi)有害物質(zhì)，鵝血細(xì)胞(有機(jī)體清洗劑之稱)；行氣、止痛、止血、抗癌、抗?jié)冇们暹x中藥；具有如下優(yōu)點(diǎn)1、克服發(fā)了傳統(tǒng)生飲全血法存在著易污染、難保存、服法困難、無療程、劑量之弊以及傳統(tǒng)法易對患者產(chǎn)生誤導(dǎo)、主次難分的缺點(diǎn)。
2、本發(fā)明在制備過程中力圖保護(hù)原料中抗癌活性成份不受破壞，少而精，易服、易吸收。
3、本發(fā)明選用藥膳同源的天然動植物藥為原料，即抗癌又扶正，對人體無毒無害，符合國家藥政法，食品衛(wèi)生法規(guī)定。
4、與白細(xì)胞介素II、香茹多糖產(chǎn)品對照，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)證明抗癌效應(yīng)均優(yōu)之(P＜0.05)。
5、本發(fā)明對消化系潰瘍，萎縮性胃炎等慢性疾病有顯著治療作用。
6、實(shí)驗(yàn)資料顯示本發(fā)明對實(shí)驗(yàn)鼠有一定的防癌作用。


圖1鵝血抗癌制劑的生產(chǎn)工藝2實(shí)驗(yàn)1的座標(biāo)3實(shí)驗(yàn)2的座標(biāo)4實(shí)驗(yàn)3的座標(biāo)5實(shí)驗(yàn)4的座標(biāo)6實(shí)驗(yàn)5的座標(biāo)7實(shí)驗(yàn)6的座標(biāo)8實(shí)驗(yàn)7的座標(biāo)9實(shí)驗(yàn)8的座標(biāo)圖實(shí)施例按下述配比原料口服液(按100支為準(zhǔn))鵝血清650ml、蜂蜜100克、蜂王漿50克、無菌蒸餾水280ml，對羥基甲酸乙酯0.5克。
片劑(按1000片為準(zhǔn))鵝血細(xì)胞干燥粉500克、山藥300克、白芨300克、枳殼200克、延胡索200克、莪術(shù)200克、淀粉60克、硬脂酸鎂適量。
生產(chǎn)方法如下先分離鵝血清，血細(xì)胞，分別集中無菌容器，其中血清經(jīng)濾過。取蜂蜜、加無菌蒸餾水置85～95℃恒溫箱半小時，趁熱濾過，濾液冷至10℃以下；另取蜂王漿，置膠體磨研磨，濾過；再取對羥基苯甲酸乙酯；用75％乙醇溶解。加無菌蒸餾水至100ml，攪均，濃度為0.1％；將鵝血清、蜂蜜液、蜂王漿、對羥基苯甲酸乙酯混入攪拌容器，攪均灌裝，每支10ml，既可得口服液，采用紫外線輻照滅菌法、低溫保存。另血細(xì)胞凝塊，在-15℃下冷凍干燥，粉碎成120目細(xì)度；再取山藥、白芨、枳殼、延胡索、莪術(shù)置入多功能提取罐中，煎煮2次，第1次2小時，第2次1小時，去藥渣，取煎液、濃縮至相對密度為1.30(20℃)，加乙醇至含醇為70％靜置，取上清液回收乙醇，濃縮至相對密度為1.33(20℃)的稠膏，用無菌容器保存。將鵝血細(xì)胞干燥粉，藥物稠膏，10％淀粉漿混均勻后制成顆粒，置入干燥箱70℃干燥24小時，控制水分在3.5％左右，用14目篩整粒，加適量的硬脂酸鎂，壓制成異形片，包薄膜衣，再包裝即成鵝血片。
發(fā)明者通過鵝血清對小鼠艾氏腹水癌增殖抑制系列實(shí)驗(yàn)，驗(yàn)證了鵝血清抗癌效果，實(shí)驗(yàn)方法，過程、結(jié)果如下材料與方法 供血鵝9只，購自湖北地區(qū)，體重2.5～5Kg，5雄4雌；藥品生理鹽水系武漢濱湖制藥廠產(chǎn)品，批號970107；白細(xì)胞介素II；北京四環(huán)生物工程制品廠生產(chǎn)，批號970311；小牛血清中德三利生物制品廠生產(chǎn)，批號97041；瘤株小鼠艾氏腹水癌購自湖北省腫瘤研究所；動物昆明小鼠購自湖北省醫(yī)學(xué)科學(xué)動物中心；方法在鵝翅翼靜脈處常規(guī)消毒，用無菌注射器行靜脈采血，其量根據(jù)治療組鼠數(shù)而定，一般每次約5～10ML，在酒精燈火焰旁無菌區(qū)將鵝血沿壁緩慢注入無菌試管，用蓋塞嚴(yán)，置入37℃水浴恒溫箱1/2-1小時，使其凝固，取出離心(1500轉(zhuǎn)/分5-10分鐘)，又在無菌環(huán)境中吸出鵝血清，按實(shí)驗(yàn)所需劑量行小鼠腹腔注射。動物造模；抽取艾氏腹水癌細(xì)胞，加入生理鹽水在顯微鏡下調(diào)整癌細(xì)胞濃度為1×107/mm3，0.2ml接種小鼠各組，于第二天開始治療，對照觀察；給途徑腹腔注射。
觀測指標(biāo)1、體重法測腹水癌細(xì)胞增殖變性1)設(shè)空白對照組驗(yàn)證該法可行性，精確性，其結(jié)果方法可行，能大體反映細(xì)胞增殖趨勢；2)先稱基礎(chǔ)體重，隔3-4天后每日稱體重；3)按體重均數(shù)繪制曲線圖。
2、漏斗法測腹水量1)實(shí)驗(yàn)中每死亡一只均解剖，置入漏斗使腹水流入刻度試管，算累計(jì)腹水量，2)若腹水稱少用注射器吸；3)同步處計(jì)死計(jì)腹水量，X±SD，T檢驗(yàn)3、生存期檢測，觀察逆轉(zhuǎn)現(xiàn)象4、生存質(zhì)量觀察，毛色，活動度、糞便、藥物反應(yīng)等。
5、同步處死胸腺，脾、肝稱濕重，腹水癌細(xì)胞濃度為了客觀反映鵝血清能否抗癌以及其效價(jià)，作用機(jī)理，減少實(shí)驗(yàn)誤差，特連續(xù)重復(fù)實(shí)驗(yàn)8次，結(jié)果如下以體重法觀察小鼠Ehrlich ascites cell增殖曲線圖可見，8批重復(fù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果基本相同，鵝血清(GBS)組曲線相比而言較平坦，一般在5～8天(少數(shù)在14天)有差異(P＜0.05)，以后差異漸趨加大，實(shí)驗(yàn)觀察到3～5天正是癌細(xì)胞在體內(nèi)增殖高峰，之后體重呈進(jìn)行性增加(癌細(xì)胞呈指數(shù)性增殖)。有趣的是曾用2組鵝血清(GBS I II)進(jìn)行對照雖有個體差異，但組間不明顯(P＞0.05)，并且逐漸趨向一致，表明可重復(fù)性強(qiáng)。鵝血清(GBS)與空白組(control)、生理鹽水(NS)相比差異明顯(P＜0.05)，表明用該法治療與不治療其結(jié)果截然不同；與白細(xì)胞介素2組進(jìn)行了三批對照，其中有2批差異延遲在12天之后(P＜0.05)，表明鵝血清抗癌作用較之持久，且副作用小；與小牛血清(NBS)比較，早期抑癌作用更明顯(P＜0.05)，表明鵝血清抗癌作用非是″異性蛋白″；與香菇多糖差異說明鵝血清具有抗癌與扶正的雙重功能；重復(fù)實(shí)驗(yàn)可推知鵝血抗癌成份主要在血清中，這是繼續(xù)研究的基石。
在8批重復(fù)實(shí)驗(yàn)中，有4批共5只小鼠經(jīng)GBS治療出現(xiàn)逆轉(zhuǎn)現(xiàn)象，經(jīng)分析此現(xiàn)象決非偶然決非個體差異或未接種引起；1、對照組無此現(xiàn)；2、多次重復(fù)，盡管是少數(shù)；3、文獻(xiàn)指出，接種EAC懸液在106/ml，成功率100％；4、此逆轉(zhuǎn)現(xiàn)象可反證(即無腹水生長持續(xù)20天以上，之后才長出腹水，生存期在35天以上)。癌出現(xiàn)逆轉(zhuǎn)是當(dāng)今夢昧以求的事。
8批實(shí)驗(yàn)有6批實(shí)驗(yàn)觀察生存期，其中有5批生存期均在20天以上，有的達(dá)到平均29天，超過文獻(xiàn)記載的11-17天，僅有一批低于對照組。
第8批實(shí)驗(yàn)于第12天同步處死，EAC增殖曲線，腹水量，癌細(xì)胞濃度，胸腺，脾重量與空白對照組均有顯著性差異(P＜0.05或P＜0.01)，表明GBS確有顯著抗癌作用，對宿主免疫臟器有保護(hù)和促進(jìn)作用。另有2只小鼠腹水量約0.2～0.4ml，鏡檢癌細(xì)胞濃度15～17/mm3，這對逆轉(zhuǎn)現(xiàn)象是個較好的解釋，表明用藥后癌細(xì)胞數(shù)逐漸減直至消失。表1體內(nèi)GBS對小鼠Ehrlich ascites cell的抗腫瘤作用組別 動物數(shù) 基礎(chǔ)體重 劑量+療程生存期(天) 逆轉(zhuǎn)累計(jì)腹水(只) (X+SD) (天) (只)量(ml)(g) 720 730 X+SD (X+SD)GBS 8 28.25±2.12 0.2ml/只×12 2/80/8 15.25±3.536 0/89.929±2.231NS 8 29±3.21 0.2ml/只×12 0/80/8 12.375±1.419 0/89.614±3.801注第4天、第6天GBS與NS比較P＜0.05表2體內(nèi)GBS對小鼠Ehrlich ascites cell的抗腫瘤作用組別 動物數(shù) 基礎(chǔ)體重劑量+療程生存期(天) 逆轉(zhuǎn)累計(jì)腹水量(只) (X+SD)(天)(只)量(ml)(g) 720 730 X+SD (X+SD)GBS I 10 23.1±3.213 0.2ml/只×18 7/101/10 20±6.733 0/10 2.98±2.469GBSII 10 22.05±2.291 0.2ml/只×18 9/103/10 29±11.711 2/10 3.82 5±3.569NS10 22.75±0.974 0.2ml/只×18 8/103/10 25.8±9.41 80/10 8.75±5.367注第6天GBSI與NS相比P＜0.05第14天GBSI、II與NS比較P＜0.05表3體內(nèi)GBS對小鼠Ehrlich ascytes cell的抗腫作用組別 動物數(shù) 基礎(chǔ)體重 劑量+療程 生存期(天) 逆轉(zhuǎn)(g)720 730 X+SDGBS 10 33.65±4.565 0.2ml/只×81/100/101 5±3.974 0/NSNS 10 29.95±5.139 0.2ml/只×84/101/102 7±4.244 0/10注由于基礎(chǔ)體重存在著差異，按所增體重進(jìn)行比較第6、8天GBS與NS比較P＜0.05表4體內(nèi)GBS對小鼠Ehrlich ascites cell的抗腫瘤作用組別 動物數(shù) 基礎(chǔ)體重 劑量+療程生存期(天)逆轉(zhuǎn)累計(jì)腹水(只)(X±SD) (天)(只) 量(ml)(g) 720 730 X+SD(X+SD)GBS 10 16.8±1.229 0.2ml/只×14 5/103/10 27±5.418 1/10 8.49±7.87IL-II 10 18.1±1.578 0.5萬/只×14 2/101/10 17±4.268 0/10 11.92±9.772NS10 18.1±2.058 0.2ml/只×14 2/101/10 20±2.264 0/10 14.35±6.788注第9天GBS與IL-II、NS比較均P＜0.05第13天GBS與IL-II、NS比較均P＜0.05表5體內(nèi)GBS對小鼠Ehrlich ascites cell的抗腫瘤作用組別 動物數(shù) 基礎(chǔ)體重 劑量+療程 生存期(天)逆轉(zhuǎn)(只)(X±SD) (天) (只)720 730GBS10 15.7±1.033 0.2ml/只×10 5/102/101/10IL-II 10 16.4±0.568 0.5萬/只×10 2/101/100/10NBS10 16.5±1.130 0.2ml/只×10 1/100/100/10注第6天GBS、IL-II與S比較P＜0.05表6體內(nèi)GBS對小鼠Ehrlich ascites cell的抗腫瘤作用組別 動物數(shù) 基礎(chǔ)體重 劑量+療程生存期(天) 逆轉(zhuǎn) 累計(jì)腹水量(只) (X+SD) (天) (只) 量(ml)(g) 720 730 X+SD (X+SD)GBS 8 22.063±2.352 0.2ml/只×18 3/8 1/8 21±6.94 0/8 9.625±6.121IL-II 8 22.188±1.624 0.5萬/只×18 1/8 0/8 20±5.36 0/8 17±7.186注在第14天GBS與IL-II比較P＜0.05表7 體內(nèi)GBS對小鼠Ehrlich ascites cell的抗腫瘤作用組別 動物數(shù) 基礎(chǔ)體重劑量+療程生存期(天)逆轉(zhuǎn)(只) (g) (天)(只)720 730 X±SDGBS 4 20.25±1.535 0.4ml/只×19 3/4 1/4 23±5.354 0/4Lentanin 4 23±3.5590.002mg/只×19 2/4 0/4 18±3.559 0/4注按所增長的體重進(jìn)行比較GBS與Lentanind在第8天比較P＜0.05、12天比較P＜0.01表8體內(nèi)GBS對小鼠Ehrlich ascites cell的抗腫瘤作用組別 動物數(shù) 基礎(chǔ)體重 劑量+療程 腹水量 癌細(xì)胞 胸脾重 脾重 肝重(只) (g) (天) (ml) (107/ml) (mg)(mg) (g)GBS 6 18.357±0.3ml/只×11 0.642± 97.667± 51.367±213.483± 1.367±2.304 0.549 85.645 26.147 118.397 0.398Cohtrol 6 17.714± 空白9.35± 410.53± 18.517± 59.78±1.15±2.079 2.519 214.0176.966 16.65 0.138T值 8.019 3.322 2.968 3.149 1.262P＜0.01＜0.01 ＜0.02 ＜0.02 ＜0.05注2組鼠數(shù)均為7只在第12天處死時發(fā)現(xiàn)各組均有一只體重保持在15g，留下觀察逆轉(zhuǎn)，Coutrol組那只于14天死亡，解剖腹水2ml，而GBS組那只出現(xiàn)逆轉(zhuǎn)。GBS與Contol在第7天，11天比較分割P＜0.05、P＜0.0權(quán)利要求
1.鵝血抗癌制劑，其特征是包括以鵝血作原料分離的血清制成的制劑，和/或分離的血細(xì)胞制成的制劑。
2.如權(quán)利要求1所述鵝血抗癌制劑，其特征是鵝血清制劑是口服液。
3.如權(quán)利要求2所述鵝血抗癌制劑，其特征是鵝血清口服液的組成(體積)包括為鵝血清 50～100％蜂蜜液 10～50％蜂王漿 2～15％
4.如權(quán)利要求3所述鵝血抗癌制劑，其特征是鵝血清口服液的主要最佳組成(體積)鵝血清 65％蜂蜜液 30％蜂王漿 5％
5.如權(quán)利要求1～4所述鵝血抗癌制劑，其特征是有抗癌效應(yīng)是指鵝血清，以新鮮血清最佳。
6.如權(quán)利要求1所述鵝血抗癌制劑，其特征是鵝血細(xì)胞制劑的主要原料的組成(重量份)為鵝血細(xì)胞干燥粉20～35份 山藥 10～20份白芨 10～15份 枳殼 5～15份莪術(shù) 10～20份 延胡索 10～20份
7.如權(quán)利要求6所述鵝血抗癌制劑，其特征是主要原料的最佳組成(重量)為鵝血細(xì)胞干燥粉 25份山藥 15份 白芨 15份枳殼10份莪術(shù)10份 延胡索 10份
8.如權(quán)利要求1、6、7所述鵝血抗癌制劑，其特征是鵝血細(xì)胞是指鵝紅、白、血小板細(xì)胞及固體成份。
9.如權(quán)利要求1所述鵝血抗癌制劑，其特征是所述制劑是任何一種藥物學(xué)上所說的劑型。
全文摘要
本發(fā)明涉及鵝血抗癌制劑——鵝血清制劑和/或鵝血細(xì)胞制劑。它是以新鮮鵝血為原料,分離鵝血清和血細(xì)胞。制劑包括血清佐以蜂蜜液、蜂王漿制成口服液,血細(xì)胞經(jīng)低溫干燥,粉碎、過目,配以山藥、白芨、枳殼、延胡索、莪術(shù)精選中藥經(jīng)科學(xué)加工制成鵝血片。本發(fā)明配方獨(dú)特,抑瘤顯著,減輕化療、放療對宿主毒副作用,提高機(jī)體紅細(xì)胞,淋巴細(xì)胞免疫能力,延長生存期,對惡性腫瘤,消化系統(tǒng)潰瘍,萎縮性胃炎等疾病有良好輔助治療作用,并有一定的防癌作用。本發(fā)明最大特點(diǎn)是經(jīng)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)研究和臨床運(yùn)用論證。
文檔編號A61K35/56GK1254561SQ9812167
公開日2000年5月31日 申請日期1998年11月23日 優(yōu)先權(quán)日1998年11月23日
發(fā)明者李航森, 鄒季, 王茹鳳, 吳獻(xiàn)群, 徐澤 申請人:湖北中醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院