一種穩(wěn)定性好的健骨注射液的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及了一種穩(wěn)定性好的健骨注射液的制備方法，屬于中藥制劑【技術(shù)領(lǐng)域】。包括如下步驟：取戰(zhàn)骨（莖）片，加入氯化鉀水溶，浸泡，過濾后，取殘渣；再在殘渣中用乙醇水溶液浸泡，取上清液，濾過，將濾液濃縮，再用大孔吸附樹脂對濃縮液進行吸附，得到凈化液；在凈化液中加入乙醇，放置，濾過，濾液氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值，放置，濾過，回收乙醇后，加適量注射用水及活性炭，放置過夜，濾過，濾液加入聚山梨酯和苯甲醇，用鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH值，加注射用水，濾過，灌封，滅菌，即得。本發(fā)明通過利用大孔吸附樹脂進行除雜，可以防止一些影響到主成分穩(wěn)定性的雜質(zhì)進入至提取液中，避免這些雜質(zhì)影響到注射液的長期穩(wěn)定性。
【專利說明】一種穩(wěn)定性好的健骨注射液的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及了一種穩(wěn)定性好的健骨注射液的制備方法，屬于中藥制劑【技術(shù)領(lǐng)域】。【背景技術(shù)】
[0002]目前，在衛(wèi)生部頒藥品標(biāo)準(zhǔn)(中藥成方制劑第14冊)中記載了一種健骨注射液的制備及質(zhì)量控制方法，采用的是戰(zhàn)骨(莖XPremna fulva Craib)作為主成分，經(jīng)過提取后制劑而得到。但是該方法制備得到的注射液的穩(wěn)定性不好，效期通常在24個月后，會出現(xiàn)主成分降解的情況。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的是提供一種穩(wěn)定性好的健骨注射液的制備方法，技術(shù)方案是: 一種穩(wěn)定性好的健骨注射液的制備方法，包括如下步驟:
第I步、按重量份計，取戰(zhàn)骨(莖)片2500g，加入I~3wt.%濃度的氯化鉀水溶液3000g，浸泡10~12小時,過濾后,取殘洛；
第2步、再在殘渣中用20~30 vol.%的乙醇水溶液浸泡60~100小時，取上清液，濾過，將濾液的重量濃縮至第I步中戰(zhàn)骨片重量的6~8倍，再用大孔吸附樹脂對濃縮液進行吸附，所 述的大孔吸附樹脂的重量是濃縮液重量的0.05~0.1倍，得到凈化液；
第3步、在凈化液中加入乙醇，使凈化液中的乙醇含量達到80wt.%以上，放置10~30小時，濾過，濾液用20wt.%的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至7.0~7.5，放置24小時，濾過，回收乙醇后，加適量注射用水及活性炭，放置過夜，濾過，濾液加入聚山梨酯80和苯甲醇各10ml，用20%鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH值至7.0~7.5，加注射用水，濾過，灌封，滅菌，即得。
[0004]第3步中，注射用水的加入量優(yōu)選是1000~1500ml。
[0005]所述的大孔吸附樹脂選自AB-8、NKA、HDP-100、HDP-722、HDP-750、D101 中的一種；優(yōu)選是DlOl。
[0006]有益效果
本發(fā)明通過對戰(zhàn)骨片預(yù)先用氯化鉀溶液進行浸泡，分解掉一部分有機雜質(zhì)，并且可以使活性物質(zhì)能夠更多地從細胞中分離出來；接下來，再利用大孔吸附樹脂進行除雜，可以防止一些影響到主成分穩(wěn)定性的雜質(zhì)進入至提取液中，避免這些雜質(zhì)影響到注射液的長期穩(wěn)定性。
[0007]
【具體實施方式】
[0008]實施例1
穩(wěn)定性好的健骨注射液的制備方法，包括如下步驟:
第I步、按重量份計，取戰(zhàn)骨(莖)片2500g，加入Iwt.%濃度的氯化鉀水溶液3000g，浸泡10小時,過濾后,取殘洛；第2步、再在殘渣中用20vol.%的乙醇水溶液浸泡60小時，乙醇溶液的重量是戰(zhàn)骨片重量的2倍，取上清液，濾過，將濾液的重量濃縮至第I步中戰(zhàn)骨片重量的6倍，再用大孔吸附樹脂對濃縮液進行吸附，所述的大孔吸附樹脂的重量是濃縮液重量的0.05倍，得到凈化液；
第3步、在凈化液中加入乙醇，使凈化液中的乙醇含量達到80wt.%，放置10小時，濾過，濾液用20wt.%的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至7.0~7.5，放置24小時，濾過，回收乙醇后，加適量注射用水及活性炭，放置過夜，濾過，濾液加入聚山梨酯80和苯甲醇各10ml，用20wt.%鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH值至7.0~7.5，加注射用水，濾過，灌封，滅菌，即得。
[0009]大孔吸附樹脂是HDP-722，第3步中，注射用水的加入量是1000ml。
[0010]實施例2
穩(wěn)定性好的健骨注射液的制備方法，包括如下步驟:
第I步、按重量份計，取戰(zhàn)骨(莖)片2500g，加入3wt.%濃度的氯化鉀水溶液3000g，浸泡12小時,過濾后,取殘洛；
第2步、再在殘渣中用30 vol.%的乙醇水溶液浸泡100小時，乙醇溶液的重量是戰(zhàn)骨片重量的2倍，取上清液，濾過，將濾液的重量濃縮至第I步中戰(zhàn)骨片重量的8倍，再用大孔吸附樹脂對濃縮液進行吸附，所述的大孔吸附樹脂的重量是濃縮液重量的0.1倍，得到凈化液；
第3步、在凈化液中加入乙醇，使凈化液中的乙醇含量達到80wt.%，放置30小時，濾過，濾液用20wt.%的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至7.0~7.5，放置24小時，濾過，回收乙醇后，加適量注射用水及活性炭，放置過夜，濾過，濾液加入聚山梨酯80和苯甲醇各10ml，用20wt.%鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH值至7.0~7.5，加注射用水，濾過，灌封，滅菌，即得。
[0011]大孔吸附樹脂是AB-8 ;第3步中，注射用水的加入量是1500ml。
[0012]實施例3
穩(wěn)定性好的健骨注射液的制備方法，包括如下步驟:
第I步、按重量份計，取戰(zhàn)骨(莖)片2500g，加入2wt.%濃度的氯化鉀水溶液3000g，浸泡11小時,過濾后,取殘洛；
第2步、再在殘渣中用25 vol.%的乙醇水溶液浸泡80小時，乙醇溶液的重量是戰(zhàn)骨片重量的2倍，取上清液，濾過，將濾液的重量濃縮至第I步中戰(zhàn)骨片重量的7倍，再用大孔吸附樹脂對濃縮液進行吸附，所述的大孔吸附樹脂的重量是濃縮液重量的0.07倍，得到凈化液；
第3步、在凈化液中加入乙醇，使凈化液中的乙醇含量達到80wt.%，放置20小時，濾過，濾液用20wt.%的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至7.0~7.5，放置24小時，濾過，回收乙醇后，加適量注射用水及活性炭，放置過夜，濾過，濾液加入聚山梨酯80和苯甲醇各10ml，用20wt.%鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH值至7.0~7.5，加注射用水，濾過，灌封，滅菌，即得。
[0013]大孔吸附樹脂是DlOl。第3步中，注射用水的加入量是1200ml。
[0014]對照例I
與實施例3的區(qū)別在于:未通過氯化鉀溶液進行預(yù)處理。更具體的步驟是:
第I步、按重量份計，取戰(zhàn)骨片2500g，用25 vol.%的乙醇水溶液浸泡80小時，乙醇溶液的重量是戰(zhàn)骨(莖)片重量的2倍，取上清液，濾過，將濾液的重量濃縮至中戰(zhàn)骨片重量的7倍，再用大孔吸附樹脂對濃縮液進行吸附，所述的大孔吸附樹脂的重量是濃縮液重量的
0.07倍，得到凈化液；
第2步、在凈化液中加入乙醇，使凈化液中的乙醇含量達到80wt.%，放置20小時，濾過，濾液用20wt.%的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至7.0~7.5，放置24小時，濾過，回收乙醇后，加適量注射用水及活性炭，放置過夜，濾過，濾液加入聚山梨酯80和苯甲醇各10ml，用20wt.%鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH值至7.0~7.5，加注射用水，濾過，灌封，滅菌，即得。
[0015]大孔吸附樹脂是DlOl。第2步中，注射用水的加入量是1200ml。
[0016]對照例2
與實施例3的區(qū)別在于:未通過大孔吸附樹脂進行吸附除雜。更具體的步驟是:
第I步、按重量份計，取戰(zhàn)骨片2500g，加入2wt.%濃度的氯化鉀水溶液3000g，浸泡11小時，過濾后，取殘渣；
第2步、再在殘渣中用25 vol.%的乙醇水溶液浸泡80小時，乙醇溶液的重量是戰(zhàn)骨(莖)片重量的2倍，取上清液，濾過，將濾液的重量濃縮至第I步中戰(zhàn)骨片重量的7倍，得到濃縮液；
第3步、在濃縮液中加入乙醇，使凈化液中的乙醇含量達到80wt.%，放置20小時，濾過，濾液用20wt.%的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至7.0~7.5，放置24小時，濾過，回收乙醇后，加適量注射用水及活性炭， 放置過夜，濾過，濾液加入聚山梨酯80和苯甲醇各10ml，用20wt.%鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH值至7.0~7.5，加注射用水，濾過，灌封，滅菌，即得。
[0017]第3步中，注射用水的加入量是1200ml。
[0018]檢驗方法
采用衛(wèi)生部頒藥品標(biāo)準(zhǔn)WS3-B-2768-97 (中藥成方制劑第14冊)健骨注射液 【性狀】本品為黃棕色或棕紅色的澄明液體。
[0019]【鑒別】(I)取本品2ml，置具塞錐形瓶中，加入無水乙醇25ml，搖勻，靜置10分鐘，濾過，取濾液2ml置燒杯中，加入四氫硼鉀約5mg，搖勻，逐滴加入數(shù)滴鹽酸，即顯櫻紅色或紫紅色。
[0020](2)取本品8ml，加鹽酸溶液(16 — 100) 20ml，置水浴上加熱回流I小時，用醋酸乙酯提取2次(30、30ml )，合并提取液，蒸干，殘渣加醋酸乙酯0.5ml使溶解，離心，取上層液作為供試品溶液。另取袖皮素對照品，加醋Ife乙酷制成每1ml含0.4mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各5 μ 1，分別點于同一以0.2%羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上，以甲苯一醋酸乙酯-甲酸(5:2:1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以三氯化鋁試液，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
[0021]【檢查】pH值應(yīng)為6.0~7.5 (附錄YD G)。
[0022]其他應(yīng)符合注射劑項下有關(guān)的各項規(guī)定(附錄I U)。
[0023]【含量測定】照高效液相色譜法(附錄VID)測定。
[0024]色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料；甲醇一醋酸一水(45:2:53)為流動相；檢測波長為288nm。理論板數(shù)按柚皮素峰計算，應(yīng)不低于1300。
[0025]對照品溶液的制備精密稱取在105°C干燥至恒重的柚皮素對照品IOmg,置50ml棕色量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml置IOml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得(每1ml中含柚皮素100 μ g)。
[0026]供試品溶液的制備精密量取本品5ml置10ml錐形瓶中，精密加入鹽酸溶液(16 — 100)15ml，搖勻，置沸水浴中回流I小時，取出，放冷，轉(zhuǎn)移入分液漏斗中，用少量水洗滌錐形瓶，洗滌液并入分液漏斗中，用醋酸乙酯振搖提取3次，每次用25ml，合并醋酸乙酯液于10ml燒杯中，并用少量醋酸乙酯洗滌分液漏斗，洗滌液并入燒杯中，置水浴上蒸干，殘渣用甲醇溶解，轉(zhuǎn)移至1ml量瓶中，并用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。
[0027]測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得。
[0028]本品每1ml含柚皮素(C15H12O5)不得少于50 μ g。
[0029]【穩(wěn)定性試驗方法】以上市包裝條件下進行長期穩(wěn)定性試驗，溫度25°C±2°C，相對濕度在60%± 5%，在O、3、6、9、12、18、24月末分別取樣檢測含量。
[0030]試驗結(jié)果如表1所示 表1產(chǎn)品化驗結(jié)果
【權(quán)利要求】
1.一種穩(wěn)定性好的健骨注射液的制備方法，其特征在于，包括如下步驟: 第I步、按重量份計，取戰(zhàn)骨(莖)片2500g，加入I~3wt.%濃度的氯化鉀水溶液3000g，浸泡10~12小時,過濾后,取殘洛； 第2步、再在殘渣中用20~30 vol.%的乙醇水溶液浸泡60~100小時，取上清液，濾過，將濾液的重量濃縮至第I步中戰(zhàn)骨片重量的6~8倍，再用大孔吸附樹脂對濃縮液進行吸附，所述的大孔吸附樹脂的重量是濃縮液重量的0.05~0.1倍，得到凈化液； 第3步、在凈化液中加入乙醇，使凈化液中的乙醇含量達到80wt.%以上，放置10~30小時，濾過，濾液用20wt.%的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至7.0~7.5，放置24小時，濾過，回收乙醇后，加適量注射用水及活性炭，放置過夜，濾過，濾液加入聚山梨酯80和苯甲醇各10ml，用20%鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH值至7.0~7.5，加注射用水，濾過，灌封，滅菌，即得。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的穩(wěn)定性好的健骨注射液的制備方法，其特征在于:注射用水的加入量優(yōu)選是1000~1500ml。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的穩(wěn)定性好的健骨注射液的制備方法，其特征在于:所述的大孔吸附樹脂選自 AB-8、NKA、HDP-100、HDP-722、HDP-750、D101 中的一種；優(yōu)選是 DlOl。
【文檔編號】A61K9/08GK104013741SQ201410279235
【公開日】2014年9月3日 申請日期:2014年6月23日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月23日
【發(fā)明者】王敏, 孟凡娟, 趙蘭華 申請人:王敏