一種巴戟天寡糖6聚糖在制備抗心肌缺血及再灌注損傷藥物中的應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了巴戟天提取物以及巴戟天寡糖6聚糖在制備抗心肌缺血和/或再灌注損傷及促進治療性血管新生藥物中的應(yīng)用。所述的心肌缺血及再灌注損傷是心肌在血液灌注停止或不良時，即經(jīng)歷缺血、缺氧損傷，及重新建立循環(huán)、恢復(fù)血供后給機體帶來的再次損傷。對在體大鼠心肌缺血再灌注損傷模型及離體純化培養(yǎng)的乳鼠心肌細胞缺氧復(fù)氧損傷模型均有保護作用，可顯著縮小心肌梗死面積﹑減輕再灌注期心律失常的發(fā)生，有效保護心肌細胞的形態(tài)，減輕缺氧復(fù)氧對心肌細胞的損傷。所述的促進治療性血管新生是通過一些方法的刺激包括某些藥物的治療作用增加功能性的冠狀動脈分支或側(cè)支，達到恢復(fù)缺血心肌血供，改善心臟功能的目的。
【專利說明】一種巴戟天寡糖6聚糖在制備抗心肌缺血及再灌注損傷藥物中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及植物提取物的藥物應(yīng)用領(lǐng)域，具體涉及巴戟天寡糖在制備抗心肌缺血及再灌注損傷藥物中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]冠狀動脈粥樣硬 化性心臟病(coronary heart disease, CAD),簡稱冠心病，也稱為缺血性心臟病，是人類常見的心血管疾病，是最主要的成人致死性心血管疾病。冠心病導(dǎo)致的急性心肌梗塞是目前造成心血管疾病發(fā)病率高、死亡率高的主要原因。冠心病發(fā)病持續(xù)增多，而且年輕化趨勢明顯。冠心病在臨床上表現(xiàn)有嚴(yán)重的心肌缺血病癥，嚴(yán)重威脅人類健康。冠心病患者的死亡率和長期預(yù)后與心肌損傷面積所決定的左心室功能相關(guān)，而心肌損傷面積是由心肌缺血的程度和時間決定的。心肌在血液供應(yīng)阻斷30min以上，就會引起各細胞器超微結(jié)構(gòu)的改變和功能障礙，導(dǎo)致心肌細胞不可逆的損傷甚至死亡。心肌缺血性損傷隨著缺血時間的延長而加重。
[0003]溶栓、冠脈動脈搭橋以及冠脈介入等是治療急性心肌梗死的有效方法，這些方法可以使阻塞冠脈再通，但心肌缺血的及時再灌注，雖然可以挽救部分損傷但尚未壞死的心肌細胞，也可能加重缺血心肌的損傷，表現(xiàn)為心肌細胞的壞死加快，細胞腫脹，肌纖維收縮帶的形成，心肌內(nèi)出血以及無灌流現(xiàn)象，還可能產(chǎn)生嚴(yán)重的再灌注心律失常。這種冠心病發(fā)作治療中發(fā)生的心肌缺血再灌注損傷(myocardial ischemical reperfusioninjury, MIRI)嚴(yán)重影響了冠脈血運重建后即時的生存率和遠期心功能的恢復(fù)。
[0004]巴戟天(Radixmorinda off icinalis, RM0),為菌草科植物(Rubiaceae),是我國著名的四大南藥之一，也是出口創(chuàng)匯的名貴藥材。巴戟天具有補腎壯陽，強筋骨，祛風(fēng)濕之功效，毒理實驗證明它是一種安全的藥物。有文獻報道，5~7年生巴戟天總糖的含量可超過50%，是巴戟天化學(xué)成分的重要組成部分。活性研究顯示，巴戟天糖類成分具有免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗抑郁、抗應(yīng)激、抗炎、抗氧化、抗衰老等作用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明對巴戟天提取物特別是提取于菌草科植物巴戟天(Morinda officinalisHow)的干燥根的巴戟天寡糖(Morindae officinalis oligosaccharides, M00)的生物活性進行了研究。 申請人:意外的發(fā)現(xiàn)，巴戟天提取物在抗心肌缺血和/或再灌注損傷中具有明顯活性。對其活性成分追蹤發(fā)現(xiàn)其保護心肌缺血及再灌注損傷、促進血管新生作用的有效成分為菊淀粉型低聚寡糖的混合物，其中巴戟天寡糖單體中4、5、6聚糖對促進缺氧復(fù)氧損傷后的人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVEC)增殖及小管形成作用最明顯，且三者間作用相互協(xié)同。
[0006]巴戟天寡糖4聚糖分子式:C24H42021，分子量:666.58，CAS登錄號:13133_07_8，化學(xué)名稱:鹿果四糖Nystose,結(jié)構(gòu)式I ;縮寫Hex4。
[0007]巴戟天寡糖5聚糖分子式:C3QH52 026，分子量:828.72，CAS登錄號:59432-60_9，化學(xué)名稱:鹿果五糖lF-fructofuranosylnystose,結(jié)構(gòu)式II ;縮寫Hex5。
[0008]巴戟天寡糖6聚糖分子式=C36H62O31,分子量:990.86，化學(xué)名稱:蔗果六糖Fru^ (2-1)-[Fru^ (2-1) ]4-a (2_l)Glc，結(jié)構(gòu)式 III，縮寫 Hex6。
[0009]我們的研究首次發(fā)現(xiàn)，巴戟天4、5、6聚糖可以顯著縮小心肌梗死面積，減輕缺氧復(fù)氧對心肌細胞的損傷，減少再灌注期心律失常的發(fā)生，有效保護心肌細胞的形態(tài)，促進治療性血管新生，其治療效果優(yōu)于地奧心血康和麝香保心丸。上述心肌缺血及再灌注損傷是心肌在血液灌注停止或不良時，即經(jīng)歷缺血、缺氧損傷，及重新建立循環(huán)、恢復(fù)血供后給機體帶來的再次損傷。促進治療性血管新生是通過一些方法的刺激包括某些藥物的治療作用增加功能性的冠狀動脈分支或側(cè)支，達到恢復(fù)缺血心肌血供，改善心臟功能的目的。
[0010]基于上述發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的目的在于提供巴戟天提取物特別是巴戟天4、5、6聚糖在制備抗心肌缺血再灌注損傷藥物方面的新用途。
[0011]本發(fā)明提供了巴戟天提取物在制備抗心肌缺血、再灌注損傷或促進治療性血管新生藥物中的應(yīng)用。
[0012]進一步地，所述巴戟天提取物提取于茜草科植物巴戟天的干燥根。
[0013]進一步地，本發(fā)明提供了巴戟天寡糖在制備制備抗心肌缺血、再灌注損傷或促進治療性血管新生藥物中的應(yīng)用。優(yōu)選地，所述巴戟天寡糖包含結(jié)構(gòu)式1、結(jié)構(gòu)式II和結(jié)構(gòu)式III中所示化合物的一種或多種
[0014]
【權(quán)利要求】
1.一種巴戟天寡糖6聚糖化合物，其結(jié)構(gòu)如結(jié)構(gòu)式III所示
2.如權(quán)利要求1所述的化合物在制備抗心肌缺血、再灌注損傷或促進治療性血管新生藥物中的應(yīng)用。
3.一種藥物組合物，其特征在于，所述藥物組合物中包含權(quán)利要求1所述的化合物。
4.如權(quán)利要求3所述的藥物組合物，其中，所述藥物組合物劑型為注射劑、片劑、丸劑或膠囊劑。
5.一種巴戟天寡糖6聚糖的制備方法，包括如下步驟: 1)、將巴戟天提取物溶解于水中，然后冷凍干燥； 2)、在凍結(jié)干燥物中加入吡啶，并在O°C下邊攪拌，邊加入無水醋酸； 3)、在溫室狀態(tài)下攬祥24h后，減壓濃縮； 4)、殘留部分加入CHCl3，用飽和蘇打水、飽和食鹽水清洗； 5)、用硫酸鎂干燥后，再減壓去除CHCl3； 6)、用化合物精制法提純，展開溶媒為甲苯:乙酸乙酯=2:1—1:1 —1:2—1:3—1:5，得乙?；完旃烟?聚糖單體； 7)、核磁共振檢測確定乙酰化巴戟天寡糖6聚糖單體的結(jié)構(gòu)； 8)、乙?；完旃烟?聚糖單體脫乙?；? 將乙?；完旃烟?聚糖單體溶解于的MeOH中，再加入的CH3ONa,在室溫下攪拌`2.5h后，再加入Dowex 50W x2 [H+]進行中和，把樹脂過濾之后，減壓去除溶媒，將殘留部分溶解到H2O中，通過Bio-Gel P_2Gel:1OmL進行脫鹽，凍結(jié)干燥后，獲得白色固體； 9)、白色固體經(jīng)MALD1-TOF-MS的凝膠過濾后即得到巴戟天寡糖6聚糖純品。
【文檔編號】A61K31/702GK103665180SQ201310642321
【公開日】2014年3月26日 申請日期:2013年11月29日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月29日
【發(fā)明者】馮國清, 姚閔, 胡香杰, 趙勝, 張賀鳴, 楊景柯, 王奎鵬, 于爽, 察雪湘, 孟祥光, 吳瑤, 焦平利, 王寧, 劉茜, 徐君玲, 張曉寧, 郭婷婷, 王涵澄 申請人:鄭州大學(xué)