專利名稱：一種實驗用的動物呼吸管理方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于實驗方法領(lǐng)域，涉及一種實驗用的動物呼吸管理方法，尤其涉及一種控制實驗動物呼吸道的同時進行麻醉維持的方法。
背景技術(shù)：
在動物實驗過程中，對動物操作前一般需對動物進行麻醉，而實驗室中一般所用的麻醉藥，如水合氯醛和戊巴比妥，對實驗動物的呼吸和循環(huán)均有不同程度的抑制作用，表現(xiàn)為血壓下降、心率減慢、潮氣量減小和呼吸頻率減慢等。在某些有特殊要求的實驗中則需對動物呼吸道進行管理，而這一般都是用動物呼吸機進行，但呼吸機缺少麻醉機的功能，它無法向呼吸管理對象輸送麻醉氣體。有些學者將麻醉揮發(fā)罐連接到呼吸機，使輸送氣體中含有一定濃度麻醉氣體，可以對實驗動物進行吸入麻醉，但此方法存在一個缺點，那就是吸入氣體中的吸入麻醉藥濃度不恒定，而且許多學者多采用氣管切開的方式進行氣道管理，這對實驗動物所造成的創(chuàng)傷和應激都遠大于氣管插管，這與臨床真正意義上的吸入麻醉管·理還有一定的距離。在國內(nèi)，李娜、龔永泉、李亞輝、王響音、王海濱等學者在氣管插管和氣管切開這兩種方法對生命體征影響、拔管一周后死亡率和插管成功率等方面均做了研究，結(jié)果表明氣管插管法在插管時間和拔管一周后死亡率明顯優(yōu)于氣管切開，而且在對生命體征(如HR和SpO2)的影響，明顯小于氣管切開。此外，在吸入麻醉藥對神經(jīng)發(fā)育這一研究領(lǐng)域中，學者們通常將實驗動物直接置于一個暴露箱中(箱子中含鈉石灰等0)2吸收物質(zhì))，然后從箱子的一個開口端向箱子中通吸入麻醉藥和氧氣的混合氣體，另一個開口端連接活性炭等廢氣回收裝置，不對實驗動物進行氣管切開或插管等操作。如此，實驗動物是在一個含有大量吸入麻醉藥的密閉空間中進行麻醉的，而且缺少呼吸道管理，我們簡要地稱之為“箱子模型”。Greg Stratmann等學者于2009年在Anesthesiology雜志上發(fā)表的一篇名為((Isoflurane differently affects neurogenesis and long-term neurocognitivefunction in 60-day-old and 7-day-old rats》的文章，其中出生后7天(簡稱P7)和出生后60天大鼠(簡稱P60)就是在上述的“箱子模型”中麻醉4h，他的研究結(jié)果顯示P7大鼠在麻醉誘導后即刻便出現(xiàn)高碳酸血癥和酸中毒，PaCO2波動于92-186 mmHg，動脈血PH值始終處于6. 8-7. 3之間，而且死亡率高達21% ；Changlian Zhu等學者于2010年在Journalof Cerebral Blood Flow & Metabolism 雜志中發(fā)表一篇名為《Isoflurane anesthesiainduced persistent, progressive memory impairment, caused a loss of neural stemcells, and reduced neurogenesis in young, but not adult, rodents〉〉文章，他們米用的動物為P14和P60天Wistar大鼠和P14天C57BL/6J小鼠，與上述相同，麻醉同樣在“箱子模型”進行，時間為35min，連續(xù)進行四天，在麻醉誘導后P14大鼠出現(xiàn)輕度呼吸性酸中毒和高碳酸血癥，而且吸入麻醉組動物動脈血PH值顯著低于正常組(P14 P < 0. 05 ；P60 P< 0. 05)。以上說明這種麻醉方式，尤其是對出生后不久的幼年動物，在這樣的吸入麻醉藥環(huán)境下極易造成呼吸抑制而導致呼吸性酸中毒等代謝紊亂，因此，在“吸入麻醉藥對神經(jīng)發(fā)育影響”這個研究領(lǐng)域中所用的吸入麻醉藥暴露模型并不能排除內(nèi)環(huán)境紊亂這個因素對神經(jīng)發(fā)育的影響，同時這與現(xiàn)今臨床上所采用的吸入麻醉方式也是截然不同的！
綜上所述，以上兩種方法因氣管切開造成的應激反應和呼吸抑制造成的呼吸性酸中毒對于神經(jīng)發(fā)育的影響都還不能排除，以上所用仍存在一定缺陷。在這一研究領(lǐng)域，急需一種既能對實驗動物進行良好的呼吸管理，減少應激反應，保證機體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定，排除呼吸性酸中毒等代謝紊亂和創(chuàng)傷性應激等干擾因素對神經(jīng)發(fā)育影響的吸入麻醉維持方法。在臨床上，麻醉機不僅可用于全身麻醉的病人，還能用于輔助危重病人麻醉過程中的呼吸，并且能復合使用其他麻醉藥物，以不同形式做復合麻醉，是一種能將麻醉和非麻醉氣體提供給病人所使用的醫(yī)療設備，是現(xiàn)今麻醉醫(yī)生對病人進行全身麻醉所不可缺少的設備。按使用年齡進行分類，可分為成人用麻醉機、小兒用麻醉機和成人小兒兼用麻醉機。在人們的觀念中，麻醉機一直是用于成人或小兒的麻醉或呼吸管理，很少會將它與動物呼吸管理聯(lián)系在一起。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種實驗用的動物呼吸管理方法，通過以下步驟實現(xiàn)
(1)麻醉誘導取出生14天的SD大鼠，體重在25g-40g之間，先用誘導箱內(nèi)2%異氟烷或3%七氟烷吸入進行麻醉誘導，給藥后至給動物經(jīng)口插管無體動，即誘導時間一般為5min左右；
(2)插管用尖端包有膠布的鑷子挑起大鼠舌頭，若無體動反應，則判斷為誘導成功。插管時需兩人操作，將大鼠腹部朝上地平置于泡沫板上，一人用手指輕柔地將大鼠上肢固定，并用小手電筒照于大鼠喉部，光線可透過大鼠喉部皮膚照亮聲門，另一人用兩把尖端包有膠布的鑷子，右手鑷子將舌頭提起后，再由左手鑷子接過，并將舌體向左嘴角方向移動，然后右手持一 20G靜脈留置針緩慢地由右嘴角插入口中，此時操作者視線與大鼠聲門水平持平，可適當用留置針尖端塑料管子輔助左手鑷子挑起后墜舌體以更好地暴露聲門，由于我們只用2%異氟烷或3%七氟烷進行吸入誘導，所以大鼠仍保留自主呼吸，暴露聲門后，可見聲門隨呼吸開閉，在聲門打開時，將留置針尖端插入通過聲門插入氣道內(nèi)，然后迅速拔出管芯，并用洗耳球吹入適量氣體，觀察胸廓有無起伏，如胸廓隨氣體吹入對稱起伏，則說明導管在氣道內(nèi)，插入深度以嘴角外保留約0. 5cm管子為宜(經(jīng)解剖已證實此深度不會誤入主支氣管，并經(jīng)實踐證實能維持良好通氣)；
(3)機械通氣導管位置判斷完成后迅速連接帶有三號氣管導管接頭的兒童用螺紋管(此時麻醉機已打開，可向大鼠輸送0. 3:0. 3空氧及吸入麻醉藥混合氣體，氣體分別由空氣壓縮鋼瓶和氧氣壓縮鋼瓶輸送)進行壓力控制呼吸(參數(shù)設置Pressure — 23 cmH20,R—35次/min，I :E— 1:2)，同時打開異氟烷揮發(fā)罐，調(diào)整濃度至I. 7%，或打開七氟烷揮發(fā)罐，并調(diào)整濃度至2. 4%。(這兩種吸入麻醉藥濃度是根據(jù)麻醉維持過程中每小時末進行腹主動脈血壓測量，保證血壓在正常范圍內(nèi)而確定的最高濃度值)接著用手術(shù)用的4號線將留置針縫至右嘴角進行固定，插管深度保持不變。以上過程在2分鐘之內(nèi)完成；麻醉機選用歐美達麻醉機(OHMEDA 7900)；
(4)麻醉維持將大鼠放置于36°C保溫毯中進行保溫，密切關(guān)注大鼠唇色、體動情況和體溫是否正常，確保麻醉維持過程平穩(wěn)；
(5)動脈測壓和血氣分析P14天SD大鼠吸入麻醉維持4h,用于給予吸入麻醉的每只P14天大鼠測壓和采血一次，分別在1、2、3、4小時末進行腹主動脈測壓并采血用于血氣分析。本發(fā)明針對目前試驗中出現(xiàn)的氣管切開創(chuàng)傷應激反應大，動物呼吸機不能輸出恒定濃度的吸入麻醉藥以及“箱子模型”內(nèi)環(huán)境嚴重紊亂和高死亡率等幾點問題，將臨床用麻醉機用于動物實驗的麻醉，并將小動物進行氣管插管，用動物體溫維持儀進行保溫，在麻醉過程中將體溫始終維持在生理水平(36. 5±0. 5°C)，如此，不僅解決了麻醉過程中小動物的呼吸管理問題，還能在整個麻醉過程中維持同一濃度的吸入麻醉濃度和機體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定。本發(fā)明提供的方法是一種即可降低實驗動物應激反應，又能在進行長時間(如4h)吸入麻醉過程中維持實驗動物生命體征平穩(wěn)，低死亡率并且能平穩(wěn)蘇醒的麻醉方法，以排除創(chuàng)傷應激、缺血缺氧、高碳酸血癥和酸中毒等干擾因素對實驗結(jié)果的影響。本發(fā)明是一種在有效控制實驗動物呼吸道的同時向動物輸出濃度恒定的揮發(fā)性麻醉藥進行吸入麻醉維持的方法。


圖I是采用臨床用麻醉機進行實驗動物呼吸道管理的結(jié)構(gòu)圖。圖2是采用“箱子模型”進行吸入麻醉藥暴露的結(jié)構(gòu)圖。
具體實施例方式本發(fā)明結(jié)合附圖和實施例，作進一步的說明。實施例I 一種實驗用的動物呼吸管理方法
(I)誘導取一只出生后14天的雄性SD大鼠，稱其體重為35g，放于一誘導箱中，向其通入2%異氟烷進行吸入麻醉誘導，至大鼠無體動，避免噪音以及其他動物影響誘導過程。(2)插管為防止金屬過于尖銳損傷幼年動物組織，因而采用尖端包有膠布的鑷子挑起大鼠舌頭，若無體動反應，則判斷為誘導成功。插管時需兩人操作，將大鼠腹部朝上地平置于泡沫板上，一人用手指輕柔地將大鼠上肢固定，并用手掌輕壓大鼠腹部以及后肢，另一手拿一小手電筒照于大鼠喉部(相當于臨床上使用的喉鏡)，光線可透過大鼠喉部皮膚照亮聲門。另一人用兩把尖端包有膠布的鑷子，右手鑷子將舌頭提起后，再由左手鑷子接過，并將舌體向左嘴角方向移動(相當于臨床上用喉鏡從患者右嘴角滑入口中，并將舌體推向左邊)，然后右手持一保留針芯但剪去尖端的20G靜脈留置針(保留針芯，但將針芯尖端剪去，以免金屬質(zhì)地過硬而損傷大鼠喉部組織，相當于氣管導管管芯)緩慢地由右嘴角置入口中，此時操作者視線與大鼠聲門水平持平，可適當用留置針尖端塑料管子輔助左手鑷子挑起后墜舌體以更好地暴露聲門，由于保留大鼠自主呼吸，可見聲門隨呼吸開閉，在聲門打開時，將留置針尖端迅速插入通過聲門插入氣道內(nèi)，然后迅速拔出管芯，并用洗耳球吹入少量氣體，觀察胸廓有無起伏，如胸廓隨氣體吹入對稱起伏，則說明導管在氣道內(nèi)，插入深度以嘴角外保留約0. 5cm管子為宜(經(jīng)解剖已證實此深度不會誤入主支氣管，并經(jīng)實踐證實能維持良好通氣)。(3)機械通氣圖I是本模型所采用將空氣、氧氣壓縮鋼瓶與麻醉機相連，并用于P14 SD大鼠吸入麻醉維持的簡易結(jié)構(gòu)圖。在氧氣和空氣鋼瓶提供氣源的條件下，麻醉機向置于操作臺上、用保溫毯進行36°C保溫的P14 SD大鼠輸入空、氧和吸入麻醉藥混合性氣體以進行吸入麻醉。導管位置判斷完成后迅速連接帶有三號氣管導管接頭的兒童用螺紋管進行壓力控制呼吸，參數(shù)按上述，打開異氟烷的揮發(fā)罐并調(diào)至I. 7%吸入濃度。接著用手術(shù)用4號線將留置針縫至右嘴角進行固定，插管深度保持不變。以上過程在2分鐘之內(nèi)完成。(4)麻醉維持將大鼠放置于已事先調(diào)好溫度的保溫毯中進行保溫(36°C)。此過程中應密切關(guān)注大鼠唇色、體動情況和體溫是否正常，確保麻醉維持過程平穩(wěn)。(5)動脈測壓和血氣分析若此大鼠需在機械通氣Ih后進行動脈血壓測定和血氣分析，則在Ih后將此大鼠移至解剖顯微鏡下，剖腹暴露腹主動脈進行測壓和采血，此過程在90s之內(nèi)完成，而且操作過程中大鼠無體動。實施例2 —種實驗用的動物呼吸管理方法
(I)誘導取一只出生后14天的雄性SD大鼠，稱其體重為33g，放于一誘導箱中，向其通入3%七氟烷進行吸入麻醉誘導，直至大鼠無體動，避免噪音以及其他動物影響誘導過程。 (2)插管為防止金屬過于尖銳損傷幼年動物組織，因而采用尖端包有膠布的鑷子挑起大鼠舌頭，若無體動反應，則判斷為誘導成功。插管時需兩人操作，將大鼠腹部朝上地平置于泡沫板上，一人用手指輕柔地將大鼠上肢固定，并用手掌輕壓大鼠腹部以及后肢，另一手拿一小手電筒照于大鼠喉部，光線可透過大鼠喉部皮膚照亮聲門。另一人用兩把尖端包有膠布的鑷子，右手鑷子將舌頭提起后，再由左手鑷子接過，并將舌體向左嘴角方向移動，然后右手持一保留針芯但剪去尖端的20G靜脈留置針(保留針芯，但將針芯尖端剪去，以免金屬質(zhì)地過硬而損傷大鼠喉部組織，相當于氣管導管管芯)緩慢地由右嘴角置入口中，此時操作者視線與大鼠聲門水平持平，可適當用留置針尖端塑料管子輔助左手鑷子挑起后墜舌體以更好地暴露聲門，由于保留大鼠自主呼吸，可見聲門隨呼吸開閉，在聲門打開時，將留置針尖端迅速插入通過聲門插入氣道內(nèi)，然后迅速拔出管芯，并用洗耳球吹入少量氣體，觀察胸廓有無起伏，如胸廓隨氣體吹入對稱起伏，則說明導管在氣道內(nèi)，插入深度以嘴角外保留約0. 5cm管子為宜。(3)機械通氣導管位置判斷完成后迅速連接帶有三號氣管導管接頭的兒童用螺紋管進行壓力控制呼吸，參數(shù)按上述，打開七氟烷的揮發(fā)罐并調(diào)至2. 4%吸入濃度。接著用手術(shù)中所用的4號線將留置針縫至右嘴角進行固定，插管深度保持不變。以上過程在2分鐘之內(nèi)完成。(4)麻醉維持將大鼠放置于已事先調(diào)好溫度的保溫毯中進行保溫(36°C)。此過程中應密切關(guān)注大鼠唇色、體動情況和體溫是否正常，確保麻醉維持過程平穩(wěn)。(5)動脈測壓和血氣分析若此大鼠需在機械通氣Ih后進行動脈血壓測定和血氣分析，則在Ih后將此大鼠移至解剖顯微鏡下，剖腹暴露腹主動脈進行測壓和采血，此過程在90s之內(nèi)完成，而且操作過程中大鼠無體動。實施例3 —種實驗用的動物呼吸管理方法
(I)誘導取一只出生后14天的雄性SD大鼠，稱其體重為30g，放于一誘導箱中，向其通入2%異氟烷進行吸入麻醉誘導，至大鼠無體動，避免噪音以及其他動物影響誘導過程。(2)插管與實施例I相同。 (3)機械通氣與實施例I相同。(4)麻醉維持與實施例I相同。(5)動脈測壓和血氣分析若此大鼠需在機械通氣2h后進行動脈血壓測定和血氣分析，則在2h后將此大鼠移至解剖顯微鏡下，剖腹暴露腹主動脈進行測壓和采血，此過程在90s之內(nèi)完成，而且操作過程中大鼠無體動。實施例4 一種實驗用的動物呼吸管理方法
(I)誘導取一只出生后14天的雄性SD大鼠，稱其體重為31g，放于一誘導箱中，向其通入3%七氟烷進行吸入麻醉誘導，至大鼠無體動，避免噪音以及其他動物影響誘導過程。(2)插管與實施例2相同。( 3 )機械通氣與實施例2相同。(4)麻醉維持與實施例2相同。(5)動脈測壓和血氣分析若此大鼠需在機械通氣2h后進行動脈血壓測定和血氣分析，則在2h后將此大鼠移至解剖顯微鏡下，剖腹暴露腹主動脈進行測壓和采血，此過程在90s之內(nèi)完成，而且操作過程中大鼠無體動。實施例5 —種實驗用的動物呼吸管理方法·
(I)誘導取一只出生后14天的雄性SD大鼠，稱其體重為30g，放于一誘導箱中，向其通入2%異氟烷進行吸入麻醉誘導，至大鼠無體動，避免噪音以及其他動物影響誘導過程。(2)插管與實施例I相同。 (3)機械通氣與實施例I相同。(4)麻醉維持與實施例I相同。(5)動脈測壓和血氣分析若此大鼠需在機械通氣3h后進行動脈血壓測定和血氣分析，則在3h后將此大鼠移至解剖顯微鏡下，剖腹暴露腹主動脈進行測壓和采血，此過程在90s之內(nèi)完成，而且操作過程中大鼠無體動。實施例6 —種實驗用的動物呼吸管理方法
(I)誘導取一只出生后14天的雄性SD大鼠，稱其體重為31g，放于一誘導箱中，向其通入3%七氟烷進行吸入麻醉誘導，至大鼠無體動，避免噪音以及其他動物影響誘導過程。(2)插管與實施例2相同。(3)機械通氣與實施例2相同。(4)麻醉維持與實施例2相同。(5)動脈測壓和血氣分析若此大鼠需在機械通氣3h后進行動脈血壓測定和血氣分析，則在3h后將此大鼠移至解剖顯微鏡下，剖腹暴露腹主動脈進行測壓和采血，此過程在90s之內(nèi)完成，而且操作過程中大鼠無體動。實施例7 —種實驗用的動物呼吸管理方法
(I)誘導取一只出生后14天的雄性SD大鼠，稱其體重為29g，放于一誘導箱中，向其通入2%異氟烷進行吸入麻醉誘導，至大鼠無體動，避免噪音以及其他動物影響誘導過程。( 2 )插管與實施例I相同。(3)機械通氣與實施例I相同。( 4 )麻醉維持與實施例I相同。(5)動脈測壓和血氣分析若此大鼠需在機械通氣4h后進行動脈血壓測定和血氣分析，則在4h后將此大鼠移至解剖顯微鏡下，剖腹暴露腹主動脈進行測壓和采血，此過程在90s之內(nèi)完成，而且操作過程中大鼠無體動。實施例8 —種實驗用的動物呼吸管理方法
(I)誘導取一只出生后14天的雄性SD大鼠，稱其體重為28g，放于一誘導箱中，向其通入3%七氟烷進行吸入麻醉誘導，至大鼠無體動，避免噪音以及其他動物影響誘導過程。(2)插管與實施例2相同。(3)機械通氣與實施例2相同。(4)麻醉維持與實施例I相同。(5)動脈測壓和血氣分析若此大鼠需在機械通氣4h后進行動脈血壓測定和血氣分析，則在4h后將此大鼠移至解剖顯微鏡下，剖腹暴露腹主動脈進行測壓和采血，此過程在90s之內(nèi)完成，而且操作過程中大鼠無體動。實施例9 一種實驗用的動物呼吸管理方法
(I)誘導取一只出生后14天的雄性SD大鼠，稱其體重為27g，放于一誘導箱中，向其通入2%異氟烷進行吸入麻醉誘導，至大鼠無體動，避免噪音以及其他動物影響誘導過程。(2)插管與實施例I相同。 (3)機械通氣與實施例I相同。(4)麻醉維持與實施例I相同。(5)動脈測壓和血氣分析若此大鼠需在機械通氣Ih后進行動脈血壓測定和血氣分析，則在Ih后將此大鼠移至解剖顯微鏡下，剖腹暴露腹主動脈進行測壓和采血，此過程在90s之內(nèi)完成，而且操作過程中大鼠無體動。實施例10 —種實驗用的動物呼吸管理方法
(I)誘導取一只出生后14天的雄性SD大鼠，稱其體重為29g，放于一誘導箱中，向其通入3%七氟烷進行吸入麻醉誘導，至大鼠無體動，避免噪音以及其他動物影響誘導過程。(2)插管與實施例2相同。(3)機械通氣與實施例2相同。(4)麻醉維持與實施例2相同。(5)動脈測壓和血氣分析若此大鼠需在機械通氣Ih后進行動脈血壓測定和血氣分析，則在Ih后將此大鼠移至解剖顯微鏡下，剖腹暴露腹主動脈進行測壓和采血，此過程在90s之內(nèi)完成，而且操作過程中大鼠無體動。實施例11 一種實驗用的動物呼吸管理方法
(I)誘導取一只出生后14天的雄性SD大鼠，稱其體重為31g，放于一誘導箱中，向其通入2%異氟烷進行吸入麻醉誘導，至大鼠無體動，避免噪音以及其他動物影響誘導過程。(2)插管與實施例I相同。(3)機械通氣與實施例I相同。(4)麻醉維持與實施例I相同。(5)動脈測壓和血氣分析若此大鼠需在機械通氣2h后進行動脈血壓測定和血氣分析，則在2h后將此大鼠移至解剖顯微鏡下，剖腹暴露腹主動脈進行測壓和采血，此過程在90s之內(nèi)完成，而且操作過程中大鼠無體動。實施例12 —種實驗用的動物呼吸管理方法
(I)誘導取一只出生后14天的雄性SD大鼠，稱其體重為32g，放于一誘導箱中，向其通入3%七氟烷進行吸入麻醉誘導，至大鼠無體動，避免噪音以及其他動物影響誘導過程。(2)插管與實施例2相同。(3)機械通氣與實施例I相同。
(4)麻醉維持與實施例I相同。(5)動脈測壓和血氣分析若此大鼠需在機械通氣2h后進行動脈血壓測定和血氣分析，則在2h后將此大鼠移 至解剖顯微鏡下，剖腹暴露腹主動脈進行測壓和采血，此過程在90s之內(nèi)完成，而且操作過程中大鼠無體動。實施例13 —種實驗用的動物呼吸管理方法
(I)誘導取一只出生后14天的雄性SD大鼠，稱其體重為35g，放于一誘導箱中，向其通入2%異氟烷進行吸入麻醉誘導，至大鼠無體動，避免噪音以及其他動物影響誘導過程。(2)插管與實施例I相同。 (3)機械通氣與實施例I相同。(4)麻醉維持與實施例I相同。(5)動脈測壓和血氣分析若此大鼠需在機械通氣3h后進行動脈血壓測定和血氣分析，則在3h后將此大鼠移至解剖顯微鏡下，剖腹暴露腹主動脈進行測壓和采血，此過程在90s之內(nèi)完成，而且操作過程中大鼠無體動。實施例14 一種實驗用的動物呼吸管理方法
(I)誘導取一只出生后14天的雄性SD大鼠，稱其體重為34g，放于一誘導箱中，向其通入3%七氟烷進行吸入麻醉誘導，至大鼠無體動，避免噪音以及其他動物影響誘導過程。(2)插管與實施例2相同。(3)機械通氣與實施例2相同。(4)麻醉維持與實施例2相同。(5)動脈測壓和血氣分析若此大鼠需在機械通氣3h后進行動脈血壓測定和血氣分析，則在3h后將此大鼠移至解剖顯微鏡下，剖腹暴露腹主動脈進行測壓和采血，此過程在90s之內(nèi)完成，而且操作過程中大鼠無體動。實施例15 —種實驗用的動物呼吸管理方法
(I)誘導取一只出生后14天的雄性SD大鼠，稱其體重為36g，放于一誘導箱中，向其通入2%異氟烷進行吸入麻醉誘導，至大鼠無體動，避免噪音以及其他動物影響誘導過程。(2)插管與實施例I相同。 (3)機械通氣與實施例I相同。(4)麻醉維持與實施例I相同。(5)動脈測壓和血氣分析若此大鼠需在機械通氣4h后進行動脈血壓測定和血氣分析，則在4h后將此大鼠移至解剖顯微鏡下，剖腹暴露腹主動脈進行測壓和采血，此過程在90s之內(nèi)完成，而且操作過程中大鼠無體動。實施例16 —種實驗用的動物呼吸管理方法
(I)誘導取一只出生后14天的雄性SD大鼠，稱其體重為36g，放于一誘導箱中，向其通入3%七氟烷進行吸入麻醉誘導，至大鼠無體動，避免噪音以及其他動物影響誘導過程。(2)插管與實施例2相同。(3)機械通氣與實施例2相同。(4)麻醉維持與實施例2相同。(5)動脈測壓和血氣分析若此大鼠需在機械通氣4h后進行動脈血壓測定和血氣分析，則在4h后將此大鼠移至解剖顯微鏡下，剖腹暴露腹主動脈進行測壓和采血，此過程在90s之內(nèi)完成，而且操作過程中大鼠無體動。實施例17在以上16例實施例中，我們分別用I. 7%異氟烷或2. 4%七氟烷進行4h吸入麻醉維持，并在每小時末通過腹主動脈抽取動脈血，在采血后5min內(nèi)用Gem premier3000血氣分析儀進行血氣分析。表I為以上實施例1-16中16只P14 SD大鼠分別用兩種麻醉藥進行麻醉維持，并在麻醉維持過程中的lh、2h、3h和4h末采腹主動脈血進行血氣分析的數(shù)據(jù)。
表I 16組血氣分析數(shù)據(jù)如下(血氣分析儀Gem premier 3000)
丨
權(quán)利要求
1.一種實驗用的動物呼吸管理方法，通過以下步驟實現(xiàn) (1)麻醉誘導取出生14天的SD大鼠，體重在25g-40g之間，先用誘導箱內(nèi)2%異氟烷或3%七氟烷吸入進行麻醉誘導，至動物經(jīng)口插管無體動； (2)插管將大鼠腹部朝上地平置于泡沫板上，將大鼠上肢固定，并用小手電筒照于大鼠喉部，光線可透過大鼠喉部皮膚照亮聲門，用鑷子將舌頭提起后，并將舌體向左嘴角方向移動，然后由右嘴角將靜脈留置針插入口中，此時操作者視線與大鼠聲門水平持平，暴露聲門，在聲門打開時，將留置針尖端通過聲門插入氣道內(nèi)，然后迅速拔出管芯，并用洗耳球吹入適量氣體，觀察胸廓有無起伏，如胸廓隨氣體吹入對稱起伏，則說明導管在氣道內(nèi)，插入深度以嘴角外保留約0. 5cm管子； (3)機械通氣導管位置判斷完成后迅速連接帶有三號氣管導管接頭的兒童用螺紋管，進行壓力控制呼吸，參數(shù)設置=Pressure — 23 cmH20，R— 35次/min，I :E —1:2，此時麻醉機已打開，向大鼠輸送0. 3:0. 3空氧及吸入麻醉藥混合氣體，氣體分別由空氣壓縮鋼瓶和氧氣壓縮鋼瓶輸送，同時打開異氟烷揮發(fā)罐，調(diào)整濃度至I. 7%，或打開七氟烷揮發(fā)罐，并調(diào)整濃度至2. 4%，接著將留置針進行固定； (4)麻醉維持將大鼠放置于36°C保溫毯中進行保溫，密切關(guān)注大鼠唇色、體動情況和體溫是否正常，確保麻醉維持過程平穩(wěn)； (5)動脈測壓和血氣分析SD大鼠吸入麻醉維持4h，用于給予吸入麻醉的每只SD大鼠測壓和采血一次，分別在1、2、3、4小時末進行腹主動脈測壓并采血用于血氣分析。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種實驗用的動物呼吸管理方法，其特征在于，步驟(I)麻醉誘導時間為5 min。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種實驗用的動物呼吸管理方法，其特征在于，步驟(2)插管用鑷子尖端包有膠布。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種實驗用的動物呼吸管理方法，其特征在于，步驟(3)所用麻醉機選用歐美達麻醉機，OHMEDA 7900。
全文摘要
本發(fā)明提供一種實驗用的動物呼吸管理方法，通過將臨床用麻醉機用于動物實驗的麻醉，并將小動物進行氣管插管，用動物體溫維持儀進行保溫，在麻醉過程中將體溫始終維持在生理水平(37±0.5℃)。本發(fā)明解決了以往麻醉過程中小動物的呼吸管理問題，還在整個麻醉過程中維持同一濃度的吸入麻醉濃度和機體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定。是一種即可降低實驗動物應激反應，又能在進行長時間(如4h)吸入麻醉過程中維持實驗動物生命體征平穩(wěn)，低死亡率并且能平穩(wěn)蘇醒的麻醉方法，可排除創(chuàng)傷應激、缺血缺氧、高碳酸血癥和酸中毒等干擾因素對實驗結(jié)果的影響。本發(fā)明是一種在有效控制實驗動物呼吸道的同時向動物輸出濃度恒定的揮發(fā)性麻醉藥進行吸入麻醉維持的方法。
文檔編號A61M16/01GK102743238SQ20121022458
公開日2012年10月24日 申請日期2012年7月2日 優(yōu)先權(quán)日2012年7月2日
發(fā)明者吳彬彬, 林函, 游珊, 連慶泉 申請人:溫州醫(yī)學院附屬第二醫(yī)院