專利名稱:白穎苔草在制備抗病毒的藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及白穎苔草在制備抗單純皰疹病毒1型(Herpes simplex virus, HSV-1)、單純皰疹病毒2型(Herpes simplex virus, HSV-2)和人巨細(xì)胞病毒(Human cytomegalovirus, HCMV)的藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù):
白穎苔草,莎草科、苔草屬,拉丁文Carex rigescens (Franch. )V. Krecz. (C. stenophyllaffahlb. var. rigescens Franch.),又名小羊胡子草,在我國(guó)分布于遼寧、華 北、山東、河南、西北等地,常見(jiàn)于草地、山坡和河邊,為多年生植物,形態(tài)特征具細(xì)長(zhǎng)匍匐 根狀莖,稈高5 40厘米,基部有黑褐色纖維狀分裂的舊葉鞘。葉片短于稈,寬1 3毫米, 扁平。穗狀花序卵形或矩圓形,小穗5 8個(gè),密集生于稈端;小穗卵形或?qū)捖研?,長(zhǎng)5 8 毫米,頂部少數(shù)雄花,其他都為雌花。苞片鱗片狀,果囊卵形或橢圓形,與鱗片近等長(zhǎng),兩面 具多數(shù)脈,基部圓,略具海綿狀組織,邊緣無(wú)翅,頂端急縮為短喙,喙口具2小齒,小堅(jiān)果寬 橢圓形。現(xiàn)在多用作公園、風(fēng)景區(qū)、庭園觀賞草坪或適當(dāng)踐踏的休息草坪,是高速公路、鐵路 兩旁等地優(yōu)良的地被植物。白穎苔草作為藥用植物,在《本草綱目》、《中藥志》、《中華人民共和國(guó)藥典》(2005 版)均無(wú)記載,《中華本草》記載歸經(jīng)三焦、脾、胃、腎,味甘、苦、澀,性平,具有清熱利尿通淋 作用,主治乳糜尿。但目前尚未見(jiàn)白穎苔草或白穎苔草提取物具有抗病毒活性的資料報(bào)道。Flu A屬于正粘科病毒,在人類和其它生物每年都有小范圍的流行,引起上呼吸系 統(tǒng)感染。大流行時(shí),可引起嚴(yán)重呼吸系統(tǒng)感染,甚者引起肺炎、腦炎甚至死亡;HCMV、HSV-I、HSV-2屬于皰疹科病毒,HCMV引起免疫底下人群的嚴(yán)重感染,宮內(nèi)感染造成流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎和畸形,新生兒黃疸、肝炎、肺炎等,同時(shí)也是人類動(dòng)脈粥樣硬化的 重要病原之一 ;HSV-I和HSV-2不僅引起口唇或生殖粘膜皰疹,同時(shí)也是引起腦炎、肝炎、全 身嚴(yán)重感染甚至宮內(nèi)感染的重要病原;RSV主要引起呼吸系統(tǒng)感染,在嬰幼兒、老年以及免疫缺陷人群引起嚴(yán)重肺炎,是 人類上呼吸道感染的重要病原之一。
發(fā)明內(nèi)容
針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù),本發(fā)明提供了白穎苔草在制藥中的新用途白穎苔草在制備抗HSV-I的藥物中的應(yīng)用。白穎苔草在制備抗HSV-2的藥物中的應(yīng)用。白穎苔草在制備抗HCMV的藥物中的應(yīng)用。白穎苔草在制備抗Flu A的藥物中的應(yīng)用。白穎苔草在制備抗RSV的藥物中的應(yīng)用。所述白穎苔草的應(yīng)用具體為先將白穎苔草進(jìn)行前處理,然后將前處理得到的提 取物用于制備抗病毒的藥物,如可將提取物與醫(yī)學(xué)上可接受的輔料一起制成膠囊劑、片劑、顆粒劑、口服液制劑等,將提取物進(jìn)一步純化也可以制成注射制劑。所述前處理為以下六種方式之一
①白穎苔草鮮榨汁取白穎苔草,物理方法榨汁,得到提取物。②白穎苔草水提取物取白穎苔草,加雙蒸水煮開(kāi),過(guò)濾獲煮汁,即為水提取物。③白穎苔草丙酮提取物取白穎苔草,經(jīng)水/丙酮提取,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)得膏狀物,即為 丙酮提取物,將其溶于細(xì)胞維持液中備用于試驗(yàn)。④白穎苔草醇提取物取白穎苔草,經(jīng)水/甲醇(或乙醇)提取,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)得膏狀 物,即為醇提取物,將其溶于細(xì)胞維持液中備用于試驗(yàn)。⑤白穎苔草乙酸乙酯提取物將丙酮提取物用石油醚、氯仿萃、乙酸乙酯分部抽 提,即為乙酸乙酯提取物,將其溶于細(xì)胞維持液中備用于試驗(yàn)。⑥白穎苔草硅膠柱分離組分將⑤中的乙酸乙酯提取物用硅膠柱分離,用氯仿/ 甲醇梯度洗脫,收集氯仿/甲醇的6 4、5 5、4 6洗脫組分即為柱分離組分,將其溶于 細(xì)胞維持液中備用于試驗(yàn)。經(jīng)實(shí)驗(yàn)證明,白穎苔草上述不同提取物對(duì)HSV-I、HSV-2、HCMV, RSV和flu A均有 顯著的抑制作用a.白穎苔草鮮榨汁抑制HSV U HSV 2、RSV在HEK293細(xì)胞出現(xiàn)CPE效應(yīng) (CytopathicEffect, CPE),IC50 分別為之-11.96、〗-10.56.和 2,.50,TI 分別為 895. 78,522. 76 和 274. 37 ;抑制 HCMV AD169 在 HEL 發(fā)生 CPE, IC50 為 2-10.47,TI 為 512 ;抑制 Flu A 在 MDCK 發(fā)生 CPE, IC50 為 2_7.58,TI 為 73. 52。b.白穎苔草水提取物抑制HSV 1、HSV 2、RSV在HEK293發(fā)生CPE,IC50分別為 2-4.50^2-4.46.禾口 2-3·76,Ti 分別為 6. 45 和 6. 92 和 2. 20 ;抑制 HCMV AD169 在 HEL 發(fā)生 CPE,IC50 為 2-5.38,TI 為 12. 91 ;抑制 Flu A 在 MDCK 發(fā)生 CPE,IC50 為 2-4.39,TI 為 6. 36。c.白穎苔草丙酮提取物抑制HSV 1、HSV 2和RSV在ΗΕΚ293發(fā)生CPE,IC50分別 為 2-ια5ι、2-9·60 和 2i94,TI 分別為 247. 28,130. 60 禾口 166. 57 ;抑制 HCMV AD169 在 HEL 發(fā)生 CPE, IC50 為 2-8.61,TI 為 73. 01 ;抑制 Flu A 在 MDCK 發(fā)生 CPE, IC50 為 2-7.88,TI 為 42. 52。d.白穎苔草醇提取物抑制HSV 1、HSV 2和RSV在HEK293發(fā)生CPE,IC50分別為 2-9·94、2-8·63 禾ρ 2-8·54,ΤΙ 分別為 176. 07、71.01和66. 72 ;抑制 HCMV AD169 在 HEL,IC5tl 為 2-8·38, TI 為 64. 89 ;抑制 Flu A 在 MDCK 發(fā)生 CPE, IC50 為 2"854, TI 為 70. 52。e.白穎苔草乙酸乙酯提取物抑制HSV 1、HSV 2和RSV在HEK293發(fā)生CPE,IC50 分別為 2-1L44、2-10.09 和 2-9.54,TI 分別為 451. 93,177. 29 和 121. 09 ;抑制 HCMVAD169 在 HEL 發(fā) 生 CPE, IC50 為 2-10.40,TI 為 213. 78 ;抑制 Flu A 在 MDCK 發(fā)生 CPE, IC50 為 54 ;TI 為 60. 55。f.白穎苔草硅膠柱分離組分抑制HSV 1、HSV 2和RSV在HEK293發(fā)生CPE,IC50 分別為 2_9_52、2_9·54 禾口 2_9·56,TI 分別為> 367. 09、> 372. 22 和>> 377. 41 ;抑制 HCMVAD169 在 HEL 發(fā)生 CPE, IC50 為 2-9.27,TI 為> 308. 69 ;抑制 Flu A 在 MDCK 發(fā)生 CPE, IC50 為 2"4'40, TI 為> 10. 56。為便于觀察與比較,上述內(nèi)容詳見(jiàn)表1。表1白穎苔草抑毒試驗(yàn)結(jié)果(IC5。/TI) 從上表可以看出,白穎苔草各提取物對(duì)多種病毒有顯著的抑制作用,這提示白穎 苔草不僅利尿通淋、治療乳糜尿(中華本草記載),而且在治療多種病毒感染性疾病領(lǐng)域存 在潛在的應(yīng)用價(jià)值,對(duì)皰疹科病毒(HSV-1、HSV-2、HCMV)感染性疾病的治療意義尤為重大。 本發(fā)明為白穎苔草臨床用于治療病毒感染性疾病提供實(shí)驗(yàn)依據(jù),對(duì)研制抗HSV-l、HSV-2、 HCMV、RSV和Flu A病毒的藥物提供了一定的指導(dǎo)意義,具有重要的參考價(jià)值。為了更好地理解本發(fā)明的實(shí)質(zhì),下面將結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說(shuō)明。
圖1為HSV-I病毒對(duì)照HEK293細(xì)胞出現(xiàn)完全CPE示意圖(200X);圖2為HSV-2病毒對(duì)照HEK293細(xì)胞出現(xiàn)完全CPE示意圖;(200X);圖3為HCMV病毒對(duì)照HEL細(xì)胞出現(xiàn)CPE示意圖;(200X);圖4為RSV病毒對(duì)照HEK293細(xì)胞出現(xiàn)90%以上CPE示意圖(200X);圖5為Flu-A病毒對(duì)照MDCK出現(xiàn)90%以上CPE示意圖(200 X);圖6為受到保護(hù)的HEK293細(xì)胞示意圖(200 X);圖7為受到保護(hù)的HEL細(xì)胞示意圖(200X)。圖8為受到保護(hù)的MDCK細(xì)胞示意圖(200 X);
具體實(shí)施例方式實(shí)施例白穎苔草提取物對(duì)病毒的作用研究(1)制備白穎苔草提取物取白穎苔草分別采用物理方法榨汁(新鮮草榨汁)、水煮、水/丙酮提取、水/乙醇 提取分別獲取鮮榨汁①、水提取物②、丙酮提取物③和醇提取物④,將③或④用石油醚、氯 仿、乙酸乙酯分部抽提,取乙酸乙酯萃取部分即為⑤,將⑤用硅膠柱分離,用氯仿/甲醇梯 度洗脫,收集氯仿/甲醇的6 4、5 5、4 6洗脫組分為⑥。將上述提取物分別溶于細(xì)胞維持液(含2%新生牛血清的MEM,GIBICO公司產(chǎn)品)中備用。(2)細(xì)胞株與病毒株人胚腎細(xì)胞(HEK293,為HSV UHSV 2、RSV病毒敏感細(xì)胞)購(gòu)自美國(guó)Clontech公司;人胚肺細(xì)胞P12 (HEL P12,HCMV敏感株),由山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所微生物 學(xué)研究室贈(zèng)送;狗腎細(xì)胞(MDCK,流感病毒敏感細(xì)胞)引自中國(guó)CDC病毒病研究所;單純皰 疹病毒1型(HSV-I) Sm44株、單純皰疹病毒2型(HSV-I) 333株、呼吸道合胞病毒(RSV)Long 株、流感病毒甲型(FluA) 1995. AII :32094地方株和柯薩基病毒3型(Cox_B3)Nancy株引自 中國(guó)CDC病毒病研究所,人巨細(xì)胞病毒AD169株(HCMV AD169),引自中國(guó)生物制品鑒定所疫苗 三室。(3)細(xì)胞毒性測(cè)定參照文獻(xiàn)汪受傳,王霖,陳超等,清肺口服液含藥血清對(duì)呼吸道合胞病毒抑制作 用的實(shí)驗(yàn)研究,南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2008 ;24(1) 25 27的方法,將各樣品以2倍比做 系列稀釋(2—1 一5),然后按稀釋順序橫向接種于96板孔中的MDCK、HEL和HEK293上,每孔 100 μ L,每稀釋度縱向重復(fù)3孔(Α、B、C行),平行設(shè)微孔板D的1 6孔為細(xì)胞對(duì)照,7 12孔不接種細(xì)胞為空白對(duì)照,顯微鏡下每日觀察CPE,連續(xù)觀察7d,中性紅染色,在540nm波 長(zhǎng)測(cè)定OD值,將實(shí)驗(yàn)組與細(xì)胞對(duì)照組OD值相比計(jì)算細(xì)胞存活率,用Reed-Muench方法計(jì)算 藥物半數(shù)細(xì)胞中毒濃度(TD5tl)。(4)抑毒試驗(yàn)參照文獻(xiàn)汪受傳,王霖,陳超等,清肺口服液含藥血清對(duì)呼吸道合胞病毒抑制作用 的實(shí)驗(yàn)研究,南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2008 ;24(1) :25 27的方法,將樣品按稀釋順序橫向接 種于96板孔中的單層細(xì)胞上,每孔100 μ L,每稀釋度縱向重復(fù)4孔,微孔板的Α、B、C行加 含有100個(gè)TCID5tl的病毒100 μ L作為試驗(yàn)組,D行補(bǔ)充等容量細(xì)胞維持液為不同濃度藥物 對(duì)照,平行設(shè)F行作為病毒對(duì)照,E行的1 12作為細(xì)胞對(duì)照。共6個(gè)樣品和6個(gè)病毒試 驗(yàn)組,6 個(gè)樣品均包括 RSV-HEK293、HSV 1_HEK293、HSV 2_HEK293、Flu A-MDCK、HCMV-HEL 禾口 Cox B3-HEK293體外感染模型,37°C、5% CO2培養(yǎng),每日觀察CPE,連續(xù)觀察4d。病毒對(duì)照出 現(xiàn)90 %以上CPE時(shí),加1 %中性紅染色,用酶標(biāo)儀在波長(zhǎng)540nm波長(zhǎng)讀取A值,各組A值去 除病毒對(duì)照組A值,將各試驗(yàn)組與細(xì)胞對(duì)照組A值相比,獲得細(xì)胞存活率,用Reed-Muench 方法計(jì)算半數(shù)抑毒濃度(IC5tl),最終將TD5tl和IC5tl相比獲得抑毒指數(shù)(Tl)。(5)結(jié)果①樣品TD5tl的測(cè)定對(duì)照組細(xì)胞顯微鏡下觀察貼壁生長(zhǎng)致密、形態(tài)良好。榨汁、水 提取物、丙酮提取、醇提取物和乙酸乙酯萃取物的TD5tl在MDCK分別為Ζ—1·38、〗—1·72、〗—2·47、2_2_48 和 2_2』6 ;在 HEL 分別為 2-L47、2-L69、2_2_42、2-2·36 和 2_2·66,在 HEK293 分別為 2_l53Il81I2A 2_2 4和2_2 62,而硅膠柱分離成分在各細(xì)胞的最大稀釋度(1 2)均未測(cè)得細(xì)胞毒性,即TD5tl < 2—1,詳見(jiàn)表2、表3和表4。表2白穎苔草榨汁、水提取物和丙酮提取物細(xì)胞毒性試驗(yàn)結(jié)果 表3白穎苔草醇提取物、乙酸乙酯提取物和硅膠柱層析成分細(xì)胞毒性試驗(yàn)結(jié)果 ②抑毒實(shí)驗(yàn)對(duì)照組細(xì)胞貼壁致密、形態(tài)良好。鏡下觀察發(fā)現(xiàn),HSV 1、HSV 2、 HCMVAD169、RSV、F1u A、Cox B3 病毒對(duì)照組分別在第 3d、3d、10d、2d、4d、2d 出現(xiàn) 90% 以上的 CPE,HSV 1和HSV 2在HEK293CPE則以腫脹、多細(xì)胞融合(HSV 1致多個(gè)細(xì)胞融和成大泡, 而HSV 2致融合為小泡)、變圓、脫落為主要特征(如圖1、2所示);HCMV AD169在HEL出現(xiàn) 的CPE則以細(xì)胞腫脹、脹圓、最終脫落為特征(如圖3所示);RSV在HEK293CPE以折光性增 強(qiáng)、變圓、脫落、破碎為主要特征(如圖4所示);Flu A在MDCK CPE以折光性增強(qiáng)、壞死、破 碎為主要特征(如圖5所示);柯薩基病毒在HEK293則以細(xì)胞折光性增強(qiáng)、變圓、破碎和脫 落為主。而抑毒試驗(yàn)各組細(xì)胞,按照樣品稀釋梯度,梯度規(guī)律出現(xiàn)CPE a鮮榨汁試驗(yàn)組HSV 1-HEK293在第10稀釋度之前、HSV 2-HEK293組在第9稀 釋度之前、HCMV AD169-HEL組在9孔之前、RSV-HEK293試驗(yàn)組細(xì)胞在第9稀釋度之前、 FluA-MDCK組細(xì)胞在第6稀釋度之前、細(xì)胞完全被保護(hù)(如圖6、7、8所示,細(xì)胞致密貼壁生 長(zhǎng)),之后出現(xiàn)CPE,CPE隨樣品濃度減小逐漸加重??滤_基B3-HEK293所有試驗(yàn)孔全部出 現(xiàn) CPE ;
b水提取物HSV 1-HEK293在第3稀釋度之前、HSV 2-HEK293組在第3稀釋度之 前、HCMV AD169-HEL組在4孔之前、RSV-HEK293試驗(yàn)組細(xì)胞在第2稀釋度之前、Flu A-MDCK 組細(xì)胞在第3稀釋度之前細(xì)胞完全被保護(hù),之后出現(xiàn)CPE,CPE隨樣品濃度減小逐漸加重。 柯薩基B3-HEK293所有試驗(yàn)孔全部出現(xiàn)CPE ;c丙酮提取物HSV 1-HEK293在第9稀釋度之前、HSV 2-HEK293組在第8稀釋度之 前、HCMV AD169-HEL組在7孔之前、RSV-HEK293試驗(yàn)組細(xì)胞在第8稀釋度之前、Flu A-MDCK 組細(xì)胞在第6稀釋度之前細(xì)胞完全被保護(hù),之后出現(xiàn)CPE,CPE隨樣品濃度減小逐漸加重。 柯薩基B3-HEK293所有試驗(yàn)孔全部出現(xiàn)CPE ;d醇提取物HSV 1-HEK293在第8稀釋度之前、HSV 2-HEK293組在第7稀釋度之 前、HCMV AD169-HEL組在7孔之前、RSV-HEK293試驗(yàn)組細(xì)胞在第7稀釋度之前、Flu A-MDCK 組細(xì)胞在第6稀釋度之前細(xì)胞完全被保護(hù),之后出現(xiàn)CPE,CPE隨樣品濃度減小逐漸加重。 柯薩基B3-HEK293所有試驗(yàn)孔全部出現(xiàn)CPE ;e乙酸乙酯萃取物HSV 1-HEK293在第10稀釋度之前、HSV 2-HEK293組在第9 稀釋度之前、HCMV AD169-HEL組在9孔之前、RSV-HEK293試驗(yàn)組細(xì)胞在第8稀釋度之前、 FluA-MDCK組細(xì)胞在第7稀釋度之前細(xì)胞完全被保護(hù),之后出現(xiàn)CPE,CPE隨樣品濃度減小 逐漸加重??滤_基B3-HEK293所有試驗(yàn)孔全部出現(xiàn)CPE ;f硅膠柱分離組分HSV 1-HEK293在第8稀釋度之前、HSV 2-HEK293組在第7 稀釋度之前、HCMV AD169-HEL組在6孔之前、RSV-HEK293試驗(yàn)組細(xì)胞在第8稀釋度之前、 FluA-MDCK組細(xì)胞在第3稀釋度之前細(xì)胞完全被保護(hù),之后出現(xiàn)CPE,CPE隨樣品濃度減小 逐漸加重。柯薩基B3-HEK293所有試驗(yàn)孔全部出現(xiàn)CPE ;將上述實(shí)驗(yàn)板用1 %中性紅染色、用酶標(biāo)儀測(cè)450nmA值,各組A值減掉病毒對(duì)照組 A值后,各實(shí)驗(yàn)組A值與細(xì)胞對(duì)照組A值相比獲得IC5Q,IC50與TD5Q相比獲得TI a鮮榨汁試驗(yàn)組抑制HSV 1、HSV 2、RSV在HEK293細(xì)胞發(fā)生CPE,IC50分別為 2-H.96^2-io.56.和 2iM,Ti 分別為 895. 78、522. 7 和 274. 37 ;抑制 HCMV AD169 在 HEL 細(xì)胞發(fā)生 CPE,IC50 為 2-10.47,TI 為 512 ;抑制 Flu A 在 MDCK 細(xì)胞發(fā)生 CPE,IC50 為 2_7.58, TI 為 73. 52。 CoxB3-HEK293所有試驗(yàn)孔全部出現(xiàn)CPE,表明白穎苔草榨汁對(duì)Cox B3無(wú)抑制作用。b水提取物抑制HSV 1、HSV 2和RSV在HEK293細(xì)胞發(fā)生CPE,IC50分別為2"4'50, 2-4.46 和 2-3.76,TI 分別為 6. 45,6. 92 和 2. 20 ;抑制 HCMV AD169 在 HEL 細(xì)胞發(fā)生 CPE,IC50 為 2-5.38,TI 為 12. 91 ;抑制 P1U A 在 MDCK 細(xì)胞發(fā)生 CPE, IC50 為 39, TI 為 6. 36。CoxB3_HEK293 所有試驗(yàn)孔全部出現(xiàn)CPE,表明白穎苔草水提取物對(duì)Cox B3無(wú)抑制作用。c丙酮提取物抑制HSV 1、HSV 2和RSV在HEK293細(xì)胞發(fā)生CPE,IC5(1分別為 2-10.51^2-9.60 和 2-9_94,分別為 247. 28,130. 60 和 166. 57 ;抑制 HCMV AD169 在 HEL 細(xì)胞發(fā)生 CPE,IC50 為 2-861,TI 為 73. 01 ;抑制 Flu A 在 MDCK 細(xì)胞發(fā)生 CPE,IC50 為 2-7.88,TI 為 42. 52。 CoxB3-HEK293所有試驗(yàn)孔全部出現(xiàn)CPE,表明白穎苔草丙酮提取物對(duì)Cox B3無(wú)抑制作用。d醇提取物抑制HSV UHSV 2、RSV在HEK293 細(xì)胞發(fā)生CPE,IC5(1 分別為 2-9_94、2_8_63 和 2-8.54,TI 分別為 176. 07,71. 01 和 66. 72 ;抑制 HCMV AD169 在 HEL 細(xì)胞發(fā)生 CPE,IC50 為 2-s.38,TI 為 64. 89 ;抑制 F1U A在MDCK 細(xì)胞發(fā)生 CPE, IC50 為 2-854,TI 為 70. 52。CoxB3_HEK293 所有試驗(yàn)孔全部出現(xiàn)CPE,表明白穎苔草醇提取物對(duì)Cox B3無(wú)抑制作用。e乙酸乙酯萃取物抑制HSV 1、HSV2和RSV在HEK293細(xì)胞發(fā)生CPE,IC50分別為2-il44、2-ia09 禾口 2-9_54,ti 為 451. 93>177. 29 和 121. 09 ;抑制 hcmv ad169 在 hel 細(xì)胞發(fā)生 cpe, IC50 為 2-10.40,TI 為 213. 78 ;抑制 Flu A 在 MDCK 細(xì)胞發(fā)生 CPE, IC50 為 2"8'54, TI 為 60. 55。 CoxB3-HEK293所有試驗(yàn)孔全部出現(xiàn)CPE,表明白穎苔草乙酸乙酯萃取物對(duì)Cox B3無(wú)抑制作用。f硅膠柱分離物抑制HSV 1、HSV 2和RSV在HEK293細(xì)胞發(fā)生CPE,IC50分別為 2-9.52、2-9.54 和 2-956 ;TI 分別為> 367. 09、> 372. 22 禾口,> 377. 41 ;抑制 HCMV AD169 在 HEL 細(xì) 胞的發(fā)生 CPE,IC50 為 2_9.27,TI 為> 308. 69 ;抑制 Flu A 在 MDCK 細(xì)胞發(fā)生 CPE,IC50 為 2_4.40, TI為10. 56。Cox B3-HEK293所有試驗(yàn)孔全部出現(xiàn)CPE,表明白穎苔草硅膠柱提取物對(duì)Cox B3無(wú)抑制作用。以上結(jié)果詳見(jiàn)表5、表6和表7。表5白穎苔草榨汁、水提取物和丙酮提取物抑毒試驗(yàn)結(jié)果 表6白穎苔草醇提取物、乙酸乙酯提取物和硅膠柱層析成分抑毒試驗(yàn)結(jié)果
由表5和表可得表7
表7白穎苔草各提取物抑毒試驗(yàn)結(jié)果(IC5(i/TI) 從以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出,白穎苔草具有顯著的抗皰疹科病毒(包括 HSV-1HEV-2HCMV)、抗副粘科病毒RSV和抗正粘科病毒flu_A的作用,但對(duì)腸道病毒cox_B 病毒無(wú)效。
權(quán)利要求
白穎苔草在制備抗單純皰疹-1病毒的藥物中的應(yīng)用。
2.白穎苔草在制備抗單純皰疹_2病毒的藥物中的應(yīng)用。
3.白穎苔草在制備抗人巨細(xì)胞病毒的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了白穎苔草在制備抗病毒的藥物中的應(yīng)用經(jīng)實(shí)驗(yàn)證明,白穎苔草對(duì)HSV-1、HSV-2、HCMV、RSV和flu A均有顯著的抑制作用,這提示白穎苔草在治療多種病毒感染性疾病領(lǐng)域存在潛在的應(yīng)用價(jià)值,對(duì)皰疹科病毒(HSV-1、HSV-2、HCMV)感染性疾病的治療意義尤為重大。本發(fā)明為白穎苔草臨床用于治療病毒感染性疾病提供實(shí)驗(yàn)依據(jù),對(duì)研制抗HSV-1、HSV-2、HCMV、RSV和Flu A病毒的藥物提供了一定的指導(dǎo)意義,具有重要的參考價(jià)值。
文檔編號(hào)A61P31/22GK101837086SQ20101019682
公開(kāi)日2010年9月22日 申請(qǐng)日期2008年7月31日 優(yōu)先權(quán)日2008年7月31日
發(fā)明者高川 申請(qǐng)人:高川