專利名稱：：阿樸菲類生物堿、氧代阿樸菲類生物堿及它們的衍生物在制備抗細(xì)菌藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及阿樸菲類生物堿、氧代阿樸菲類生物堿及它們的衍生物的新用途，尤其涉及阿樸菲類生物堿、氧代阿樸菲類生物堿及它們的衍生物在制備抗細(xì)菌藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：金黃色葡萄球菌(StaphylococcusAureus,SA)是臨床上引起化膿性感染和醫(yī)院內(nèi)感染以及引起食品污染和細(xì)菌性食物中毒的常見的病原菌，也是一種重要的人畜共患病病原。廣泛地存在于自然環(huán)境中，是人和動物體表及上呼吸道的常見菌，也是引起多種化膿性感染最常見的致病菌之一，可引起人類多種組織和臟器的感染如局部化膿感染、肺炎、偽膜性腸炎、心包炎等，甚至敗血癥、膿毒癥等全身感染。多種動物及人均有易感性，嚴(yán)重地危害人類和畜禽的生命健康。SA是一種常見的革蘭氏陽性球菌，在抗菌素應(yīng)用之前，其感染死亡率已超過90%，直至20世紀(jì)40年代青霉素進(jìn)入臨床，這一狀況才得以改善。1942年少數(shù)臨床分離株出現(xiàn)青霉素耐藥，19441945年間，耐藥性達(dá)1222%，至20世紀(jì)70年代幾乎達(dá)100%。1959年，耐青霉素酶的β-內(nèi)酰胺類抗生素甲氧西林和苯唑西林類藥物進(jìn)入臨床，成為治療金黃色葡萄球菌感染的主要藥物。但1961年便在英國發(fā)現(xiàn)世界首例耐藥株，金黃色葡萄球菌被劃分為甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌(Methicillin-sensitiveS.aureus,MSSA)和耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(Methicillin-ResistantS.aureus,MRSA)。從此，MRSA逐漸成為全世界醫(yī)院感染的主要病因，目前在許多國家MRSA的感染率仍在增長。根據(jù)感染者來自社區(qū)或者來自醫(yī)療相關(guān)機(jī)構(gòu)，MRSA區(qū)分為社區(qū)獲得性耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(CommunityAcquiredMRSA/Community-AssociatedMRSA,CA-MRSA)和醫(yī)院獲得性耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(HospitalAcquiredMRSAHealthCare-AssociatedMRSA/NosocomialAcquiredMRSA，HA-MRSA)。MRSA幾乎對所有β-內(nèi)酰胺類抗生素都耐藥，HA-MRSA對其它臨床常用抗生素，如紅霉素，氯霉素，四環(huán)素也耐藥。MRSA的出現(xiàn)并廣泛傳播使得臨床上葡萄球菌感染治療變得十分困難，可供選擇的藥物越來越少。萬古霉素是糖肽類抗生素的代表，作為80年代末治療重度MRAS感染的特效藥物，在臨床上廣泛應(yīng)用。輻射面如同其他抗菌藥物一樣，在使用萬古霉素進(jìn)行治療過程中，金黃色葡萄球菌對萬古霉素敏感性也逐漸下降。1997年日本首先報道了萬古霉素中介的金黃色葡萄球菌(vnacmycinintermediatestaphylococcusaureus，VISA)，緊接著美國、法國等也相繼報道檢出VISA，2002年美國密歇根州報道了首例萬古霉素耐藥的金黃色葡萄球菌(Vaneomycin-resistantstaphylococcusaureus,VRSA)更弓丨起了醫(yī)學(xué)界的廣泛關(guān)注。2004年美國報道了第三株VRSA，并為美國感染性疾病控制中心確證。由于大多數(shù)抗生素都對MRSA效果不理想，臨床上對其治療可選用的抗菌藥物越來越少，使得MRSA成為臨床最關(guān)注的一類耐藥菌。因此，探討新的對策及開發(fā)新的抗SA和抗MRSA藥物顯得尤為重要。發(fā)明人檢索到如下四項專利申請CN1923813A，阿樸菲及氧化阿樸菲類生物堿的用途；CN1425652A，一類具有抑制肝炎病毒活性型的阿樸菲生物堿；CN1267670A，具有抗腫瘤活性的兩個新阿樸菲-芐基異喹啉化合物；CN101407520A，阿樸菲類生物堿及其衍生物的醫(yī)藥新用途。以上涉及阿樸菲類生物堿的應(yīng)用研究的專利文獻(xiàn)，限于抗腫瘤，抑制肝炎病毒，治療自身免疫性疾病，炎癥反應(yīng)，由自身免疫疾病及其相關(guān)疾病所導(dǎo)致的具有組織損傷或感染的功能異常，移植的排異反應(yīng)，由骨髓移植造成的移植物抗宿主疾病或過敏性疾病，或該類生物堿的抗真菌作用，但沒有一項專利文獻(xiàn)涉及阿樸菲型生物堿及其衍生物的抗細(xì)菌作用。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明目的是提供阿樸菲類生物堿、氧代阿樸菲類生物堿及它們的衍生物的新用途，即在制藥中的新應(yīng)用。本發(fā)明所涉及到的阿樸菲類生物堿、氧代阿樸菲類生物堿或它們的衍生物為以下通式(1)、(2)和(3)中的任意一種，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>其中R1,R2,R3,R11,R12，R13,R14=H,OH,OCH3,F,Br,Cl,CH3,NH2,OAc,CH2OH,CHO,C00H,COONa；R4,R5,R6,R7,R9,R10=H,OH,OCH3,F,Br,Cl,CH3,NH2,OAc，羰基，CH2OH,CHO,C00H,COONa；R8=CH3H；R1R2R2R3，R11R12，R12R13，R13R14=OCH2O0更具體的，本發(fā)明涉及以下結(jié)構(gòu)式17的阿樸菲類生物堿、阿樸菲類生物堿或它們的衍生物為<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>實際上，本發(fā)明涉及上述阿樸菲類生物堿、氧代阿樸菲類生物堿及它們的衍生物在制備抗細(xì)菌藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明還涉及上述阿樸菲類生物堿、氧代阿樸菲類生物堿及它們的衍生物在制備抗金黃色葡萄球菌藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明還涉及上述阿樸菲類生物堿、氧代阿樸菲類生物堿及它們的衍生物在制備抗耐甲氧西林金黃色葡萄球菌藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明還涉及上述阿樸菲類生物堿、氧代阿樸菲類生物堿及它們的衍生物在制備抗金黃色葡萄球菌和耐甲氧西林金黃色葡萄球菌藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明還涉及上述阿樸菲類生物堿、氧代阿樸菲類生物堿及它們的衍生物的藥物上可接受的鹽類在制備抗細(xì)菌藥物中的應(yīng)用。具體涉及，阿樸菲類生物堿、氧代阿樸菲類生物堿及它們的衍生物的藥物上可接受的鹽類在制備抗金黃色葡萄球菌藥物中的應(yīng)用；在制備抗耐甲氧西林金黃色葡萄球菌藥物中的應(yīng)用；在制備抗金黃色葡萄球菌和耐甲氧西林金黃色葡萄球菌藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明上述的阿樸菲類生物堿、氧代阿樸菲類生物堿和它們的衍生物的各化合物單體可以單獨使用，也可以是以其中的任意兩個或者兩個以上單體以任意比例進(jìn)行組合的藥物組合物的形式使用。當(dāng)本發(fā)明上述的化合物與賦形劑或可藥用載體制成藥物時，所述的化合物單體，或者單體的組合物在抗細(xì)菌藥物中重量百分比含量為藥物總重量的0.199%，優(yōu)選為0.590%。本發(fā)明所述的阿樸菲類生物堿、氧代阿樸菲類生物堿和它們的衍生物可以利用包括吸附樹脂柱層析、硅膠柱層析、反相硅膠柱層析，減壓柱層析等多種常規(guī)分離手段從小葉地不容中獲得，或者通過合成以及半合成手段獲得；也可以商購或按現(xiàn)有的方法制備。本發(fā)明采用的可藥用載體或賦形劑采用藥學(xué)上可接受的、對人和動物無毒和惰性的可藥用載體或賦形劑。所述的藥用載體或賦形劑是一種或多種選自固體，半固體和液體稀釋劑，填料以及藥物制品輔劑。所述藥用載體或賦形劑選自以下的至少一種賦形劑，粘合劑，潤滑劑，崩解劑，包衣劑，乳化劑，懸浮劑，溶劑，穩(wěn)定劑，吸收劑，注射用水和等滲劑。本發(fā)明具有的優(yōu)點(1)本發(fā)明對已知的阿樸菲類生物堿、氧代阿樸菲類生物堿和它們的衍生物發(fā)掘了新的醫(yī)療用途，開拓了一個新的應(yīng)用領(lǐng)域。(2)本發(fā)明的阿樸菲類生物堿、氧代阿樸菲類生物堿和它們的衍生物這一類化合物對金黃色葡萄球菌、耐甲氧西林金黃色葡萄球菌具有顯著的抗菌活性，為尋求新的抗細(xì)菌藥物提供一類新的化合物。(2)本發(fā)明的產(chǎn)品制備工藝簡單，并可制成口服劑型、注射劑型、片劑等抗菌消炎消腫類藥物，使用方便。圖1是小葉地不容乙酸乙酯提取物的提取與初步分離；圖2是小葉地不容乙酸乙酯提取物中單體生物堿1、2、3和5的分離流程圖；①是硅膠柱層析(Pet.:Ace./Pet.CHC13/CHC13CH30H/CHC13Ace.)②是凝膠柱層析(S印hadex-LH20)③是中性氧化鋁柱層析(Pet.:Ace./Pet.CHC13/CHC13CH30H/CHC13Ace.)④是重結(jié)晶圖3是小葉地不容乙酸乙酯提取物中單體生物堿4、5和6的分離流程圖；①是硅膠柱層析(Pet.:Ace./Pet.CHC13/CHC13CH30H/CHC13Ace.)④是重結(jié)晶圖4是小葉地不容乙酸乙酯提取物中單體生物堿7的分離流程圖；①是硅膠柱層析(Pet.:Ace./Pet.CHC13/CHC13CH30H/CHC13Ace.)②是凝膠柱層析(S印hadex-LH20)④是重結(jié)晶圖5是化合物1、2和5對金黃色葡萄球菌S.Aureus和MRSA的抑制作用；圖6是化合物3和6對金黃色葡萄球菌S.Aureus和MRSA的抑制作用；圖7是化合物4對金黃色葡萄球菌S.Aureus和MRSA的抑制作用；圖8是化合物7對金黃色葡萄球菌S.Aureus和MRSA的抑制作用。具體實施例方式現(xiàn)在將更詳細(xì)地通過以下實施例來描述本發(fā)明中阿樸菲類生物堿、氧代阿樸菲類生物堿及它們的衍生物具有抗細(xì)菌藥理作用，但并不限制本發(fā)明的保護(hù)范圍。實施例1從小葉地不容塊根中提取分離單體生物堿17小葉地不容(St印haniasucciferaH.S.LoetTsoong)的干燥塊根16.OKg粉碎后用體積分?jǐn)?shù)為95%的乙醇室溫浸提三次，每次7d，減壓回收乙醇至無醇味，得乙醇提取物，將其分散于水中成懸濁液，如圖1所示，依次用石油醚和乙酸乙酯各萃取3次，分別濃縮后得到石油醚浸膏(168.5g)和乙酸乙酯浸膏(90.3g)，剩余水部分過濾后，經(jīng)D-IOl大孔吸附樹脂柱色譜，依次用水和甲醇洗脫，收集甲醇洗脫液，減壓濃縮得甲醇浸膏(133.Og)。將乙酸乙酯浸膏(90.3g)先以石油醚-丙酮(體積比1051)梯度洗脫，再以氯仿_甲醇(體積比1001)梯度洗脫，得到15個流份(Fr.1Fr.15)。如圖2所示，F(xiàn)r.6(43.3g)經(jīng)硅膠柱色譜，以石油醚-丙酮梯度(15101)洗脫，得到11個流份(Fr.6-1Fr.6-11)。Fr.6-3(20.8g)經(jīng)硅膠柱色譜和多次重結(jié)晶得到化合物1(2.Og)和化合物2(12.5g)。Fr.6-6(2.Og)經(jīng)反復(fù)硅膠柱色譜得到化合物3(5.Omg)和化合物5(5.Omg)0如圖3所示，F(xiàn)r.7(15.2g)經(jīng)硅膠柱色譜，氯仿-甲醇-二乙胺梯度洗脫，得10個流分(Fr.7-1Fr.7-10)，F(xiàn)r.7-9(250.Omg)經(jīng)S印hadexLH-20柱色譜，氯仿-甲醇(體積比11)洗脫得化合物4(12.Omg)。Fr.7-2(10.Og)經(jīng)硅膠柱色譜，石油醚-丙酮梯度洗脫，再經(jīng)中性氧化鋁柱色譜洗脫后得到化合物5(40.Omg)。Fr.7-8(1.2g)經(jīng)硅膠柱色譜，氯仿_甲醇梯度洗脫，再經(jīng)S印hadexLH-20柱色譜，氯仿-甲醇(體積比11)洗脫后經(jīng)重結(jié)晶得到化合物6(11.2mg)。如圖4所示，F(xiàn)r.9(5.Og)經(jīng)硅膠柱色譜，以氯仿-甲醇梯度(體積比100101)洗脫，得到6個流份(Fr.9-1Fr.9-6)。Fr.9-3(450.Omg)經(jīng)硅膠柱色譜，氯仿-甲醇(體積比501)洗脫，再經(jīng)S印hadexLH-20柱色譜后經(jīng)重結(jié)晶得到化合物7(25.Omg)。實施例2單體化合物的理化和波譜數(shù)據(jù)去氫克班寧(1)淡黃色針狀結(jié)晶(氯仿)，mp155156°C，遇體積分?jǐn)?shù)10%的硫酸顯黃色，碘化鉍鉀反應(yīng)顯橙紅色。EI-MSm/z337[Μ]+，結(jié)合1H-NMR和13C-NMR譜數(shù)據(jù)推定其分子式為C2。H19N04。1H-MR(400MHz,CDCl3)δ:8·66(1Η，d，J=9.1Hz，Η-11)、7·03(1Η，d,J=9.IHz,H-10)、6·90(1Η,s,Η_3)、6·87(1Η,s,Η_7)、6·18(2Η,s,OCH2O)、3·99(3Η,s,8-OCH3)、3.98(3Η，s，9-OCH3)、3.36(2Η，t，J=6.OHz，5_CH2)、3.20(2Η，t，J=6.OHz，4_CH2)、3.12(3Η,s,N-CH3)；13C-NMR(1OOMHz，CDCl3)δ143.7(C_l)、117.4(C-Ia)、118.7(C-Ib)、145.2(C-2)、123.3(C_3)、127.3(C_3a)、30.6(C_4)、50.5(C_5)、141.6(C_6a)、94.4(C_7)、129.3(C-7a),157.5(C_8)、150.2(C_9)、106.8(C_10)、108.8(C_11)、118.2(C-Ila)、100.8(OCH2O)、40.5(N-CH3)、60.5(8_0CH3)、56.2(9_0CH3)?？税鄬?2)白色塊狀結(jié)晶(甲醇)，mp116118°C，D26=-54.6°(cl.0，CHCl3)，遇體積分?jǐn)?shù)10%的硫酸顯棕黃色，碘化鉍鉀反應(yīng)顯橙紅色。EI-MSm/z339[M]+，結(jié)合1H-WR和13C-NMR譜數(shù)據(jù)推定其分子式為C20H21NO401H-WrGOOMHz,CDCl3)δ7.81(1Η,d,J=8.6Hz，H-ll)、6.88(1H，d,J=8.6Hz，H-10)、6.52(1H,s,H-3)、6.06(1H,d,J=1.4Hz,OCH2O)、5.90(1H,d,J=1.4Hz,OCH2O)、3.90(3H,s，9-0CH3)、3.81(3H，s，8_0CH3)、3.67(1H，dd,J=4.3,14.7Hz,H_7a)、3.053.18(3H,overlapped,H_6a，H_4a，H_5a)、2.64(1H,dd,J=3.8，15.9Hz,H_4b)、2.59(3H,s,N-CH3)、2.55(1H,td,J=3.7,11.4Hz,H_5b)、2.31(1H，t,J=14.2Hz,H_7b)；13C-NMR(1OOMHz,CDCl3)δ142.1(C-I),116.5(C-Ia),126.4(C-Ib),146.6(C-2),106.8(C_3)、126.4(C-3a)、29·0(C_4)、53·6(C_5)、61·9(C_6a)、26.8(C_7)、129.7(C_7a)、152.O(C_8)、145.9(C-9)、110.3(C-10)、123.1(C-Il),124.5(C_lla)、100.6(OCH2O),43.8(N-CH3)、60.7(8-0CH3)、55.7O-OCH3)。7-氧代克班寧(3)紅色針狀結(jié)晶(氯仿)，mp269271°C，遇體積分?jǐn)?shù)10%的硫酸顯紫紅色，碘化鉍鉀反應(yīng)顯橘紅色。EI-MSm/z335[Μ]+，結(jié)合1H-NMR和13C-NMR譜數(shù)據(jù)推定其分子式為C19H13NO5151H-匪R(400MHz，CDCl3)δ:8·82(1Η，d，J=5·ΙΗζ，Η_5)、8·34(1Η，d,J=8.9Hz，H-ll)、7.68(lH，d，J=5.lHz，H_4)、7.21(lH，d，J=8.9Hz，H_10)、7.06(1H,s,H-3)、6.32(2H,s,OCH2O)、4.01(3H,s,OCH3)、3.96(3H,s,OCH3)；13C-NMR(1OOMHz，CDCl3)δ:153.7(C-I),108.6(C_la)、122·O(C-Ib),151.8(C_2)、102·0(C_3)、126·7(C_3a)、117.2(C-4),144.5(C_5),151.3(C_6a),181.5(C_7),135.5(C_7a),146.5(C_8)、144.6(C-9)、123.5(C—10)、123.8(C_l1)、125.7(C-Ila),102.2(OCH2O)、61.5(8_0CH3)、56.3O-OCH3)。7-0xodehydrocaaverine(4)黃色針狀結(jié)晶(氯仿)，mp188193°C，遇體積分?jǐn)?shù)10%的硫酸顯黃色，碘化鉍鉀反應(yīng)顯橘紅色。EI-MSm/z277[M]+,結(jié)合1H-匪R和13C-NMR譜數(shù)據(jù)推定其分子式為C17H11NO3。1H-NMR和13C-NMR數(shù)據(jù)具體歸屬為1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ9.04(1Η,d,J=8.IHz,H-11)、8·75(1Η,d,J=5.2Ηζ,Η_5)、8·53(1Η,d,J=7.9Hz，Η-8)、7.91(1Η，td，J=1.2，8.3Ηζ，Η-10)、7.74(1Η，td,J=1.0，8.ΟΗζ，Η_9)、7.61(1Η,d,J=5.2Ηζ,Η_4)、7·27(1Η,s,Η_3)、4·09(3Η,s,OCH3)；13C-NMR(100MHz,CDCl3)δ;143.4(C-I),108.6(C_la)、117.3(C-Ib),153.0(C_2)、111.9(C_3)、130.8(C_3a)、120.4(C-4),144.0(C_5),164.6(C_6a),184.7(C_7),130.3(C_7a),126.4(C_8)、125.2(C-9)、134.O(C-IO)、129.4(C-Il)、137.2(C-Ila)、56·3(2_0CH3)。該化合物僅見報道于合成領(lǐng)域，為一個新的天然產(chǎn)物，命名為7-0xodehydrocaaverine。4，5_雙氧代去氫克班寧(5)橙色針晶(乙醇)，mp278281°C，遇體積分?jǐn)?shù)10%的硫酸顯紅色，碘化鉍鉀反應(yīng)顯橘紅色。EI-MSm/z365[Μ]+，結(jié)合1H-NMR和13C-NMR譜數(shù)據(jù)推定其分子式為C20H15NO601H-NMR(400MHz,CDCl3)δ8.64(1Η,d，J=9.2Hz，H-11)、7·99(1Η,s,Η_7)、7·79(1Η,s,Η_3)、7·30(1Η,d,J=9.2Ηζ,Η-10)、6·40(2Η,s,0CH20)、4·04(6Η，s，2X0CH3)、3·79(3Η，s，N-CH3)；13C-NMR(100MHz,CDCl3)δ150.7(C-I),115.2(C-Ia),120.3(C-Ib),147.7(C-2),108.3(C-3),123.0(C_3a),174.6(C-4)、156.6(C-5),132.5(C_6a),113.6(C_7),126.9(C_7a),150.8(C_8),143.9(C-9)、108.O(C-IO)、123.O(C-Il)、119.9(C-Ila)、102.9(OCH2O)、61.3(8_0CH3)、56.3(9_0CH3)、30.6O-OCH3)。氧化克班寧(6)白色針狀結(jié)晶(氯仿)，mp133135°C，^=-66。(c1.0，CHCl3),遇體積分?jǐn)?shù)10%的硫酸顯灰色，碘化鉍鉀反應(yīng)顯橘紅色。EI-MSm/z:355[M]+,結(jié)合1H-WR和13C-NMR譜數(shù)據(jù)推定其分子式為C20H21NO501H-WrGOOMHz,CD3OD)δ:7·78(1Η,d,J=8.7Hz,H-11)、6·93(1Η,d,J=8.7Ηζ,Η-10)、6.61(1Η,s,Η-3)、6·09(1Η,d,J=0.9Hz,OCH2O)、5·93(1Η,d,J=0.9Hz,OCH2O)、4·36(1Η,dd,J=3.8，14.4Hz,H_6a)、4.06(1Η,dd,J=4.4，13.9Hz,H_7b)、3.86(3Η,s，9_0CH3)、3.82(3Η,s，8-0CH3)、3·74(1Η,dd,J=5.9，12.3Hz,H_5b)、3·64(1Η,ddd,J=4.9，12.7，12.8Hz,H-5a)、3.23(1H,ddd,J=4.9，12.7，12.8Hz,H_4a)、3.12(3H,s,N-CH3)、3.02(1H,dd,J=4.6，17.9Hz，H_4b)、2.58(1H，t,J=14.1Hz,H_7a)；13C-NMR(1OOMHz，CD3OD)δ:144.7(C-I),117.8(C_la)、122·3(C-Ib),150.0(C_2)、107·7(C_3)、124·7(C_3a)、28.1(C-4)、68.1(C-5)、75.6(C_6a)、22.7(C_7)、127.6(C_7a)、147.3(C_8)、154.0(C_9)、112.3(C-IO),124.3(C-Il),124.7(C-lla),102.8(OCH2O),47.6(N-CH3)、61.2(8_0CH3)、56.3(9-0CH3)。(-)-Sukhodianine(7)無色針狀結(jié)晶(氯仿)，mp133135°C，[α]^=-48°(c1.0,MeG)H:)i遇體積分?jǐn)?shù)10%的硫酸顯黃色，碘化鉍鉀反應(yīng)顯橘紅色。EI-MSm/z:355[M]+,結(jié)合1H-WR和13C-NMR譜數(shù)據(jù)推定其分子式為C20H21NO501H-WrGOOMHz,CDCl3)δ7.88(1Η,d,J=8.6Hz,H-11)、6.98(1H,d,J=8.6Hz,H-10)、6.51(1H,s,Η-3)、6·05(1H,d,J=1.3Hz,OCH2O)，、5·88(1Η,d,J=1.3Hz,OCH2O)、5.39(1Η,d,J=2.7Ηζ,Η_7)、3.95(3Η,s，9_0CH3)、3.90(3Η,s，8_0CH3)、3.063.13(3Η,overlapped,H_4a，H_5a，H_6a)、2.592.66(2H,overlapped,H_4b，H_5b)、2.61(3H,s,N-CH3)；13C-NMR(100MHz,CDCl3)δ142.2(C_l)、115.5(C-Ia)、123.8(C-Ib)、147.3(C_2)、107.0(C-3)、128·7(C-3a),29.0(C-4),53.4(C-5)、59.7(C_6a)、65.9(C_7)、129.4(C_7a)、152.1(C-8)、146.8(C_9)、112.5(C_10)、123.6(C_11)、121.9(C-Ila)、62.2(8_0CH3)、55.8O-OCH3)。實施例3阿樸菲及氧代阿樸菲類生物堿的體外抗細(xì)菌活性3.1實驗材料3.1.1受試藥去氫克班寧、克班寧、7-(^0(^1^(11~0033￥61^1^、7-氧代克班寧、4，5-雙氧代去氫克班寧、氧化克班寧、(J-Sukhodianine從小葉地不容中提取分離的單體化合物。氯仿天津市富宇精細(xì)化工有限公司，批號20080901去氫克班寧、克班寧、7-(^0(^1^(11~0033￥61^1^、7-氧代克班寧、4，5-雙氧代去氫克班寧、氧化克班寧、(J-Sukhodianine分別用氯仿配制成lmg/ml的濃度，受試藥于室溫25°C保存。實驗前，將藥物充分混勻，分別進(jìn)行藥效學(xué)試驗。3.1.2實驗菌株金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)ATCC51650、耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(methicillin-resistantStaphylococcusaureus,MRSA)ATCC9551由中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶生物技術(shù)研究所提供。3.1.3培養(yǎng)液牛肉膏蛋白胨瓊脂(NA)培養(yǎng)基牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl5g，瓊脂20g，定容至1L，pH=7.47.6，高壓滅菌(12rC，15min)待其自然冷卻后于4°C保存?zhèn)溆谩?.2實驗方法3.2.1采用濾紙片瓊脂擴(kuò)散法測定化合物的抗菌活性采用NA培養(yǎng)基，將S.aureus、MRSA分別制成一定濃度的菌懸液(IO5IO7Cfu/mL)，用棉簽將其均勻涂布于供試無菌平板，制成含菌平板。將樣品配成濃度為lOmg/mL的溶液，取50μL分別滴加于滅菌濾紙片上(Φ=6mm)，待溶劑揮干后將濾紙片貼于含菌平板上，每處理重復(fù)三次，以10μL濃度為0.08mg/mL硫酸卡那霉素作為陽性對照。放置20min后，再放入培養(yǎng)箱中37°C無光照培養(yǎng)，24h后測定抑菌圈直徑(D)，包含濾紙片直徑6mm，通過比較抑菌圈直徑大小來確定抗菌活性。實驗結(jié)果見表1以及圖58。由表1可看出去氫克班寧、克班寧、7-0xodehydrocaaverine、7_氧代克班寧、4，5-雙氧代去氫克班寧、氧化克班寧對S.aureus、MRSA均有抑菌活性，(-)-Sukhodianine僅對S.Aureus有抑菌活性。表1阿樸菲類及氧代阿樸菲類生物堿對S.aureus和MRSA的抑菌活性Tab.1TheantibacterialactivityofAporphineAlkaloidsandOxoaporphinealkaloidsagainstS.aureusandMRSA<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>注濾紙圓片直徑為6mm。甲醇作陰性對照。S.aureus和MRSA以硫酸卡那霉素作為陽性對照，抑菌圈直徑分別為3436mm，3437mm。權(quán)利要求具有以下通式(1)和(2)的阿樸菲類生物堿、通式(3)氧代阿樸菲類生物堿和它們的衍生物以及它們的藥學(xué)上可接受的鹽在制備抗細(xì)菌藥物中的應(yīng)用，其中R1，R2，R3，R11，R12，R13，R14＝H，OH，OCH3，F(xiàn)，Br，Cl，CH3，NH2，OAc，CH2OH，CHO，COOH，COONaR4，R5，R6，R7，R9，R10＝H，OH，OCH3，F(xiàn)，Br，Cl，CH3，NH2，OAc，羰基，CH2OH，CHO，COOH，COONaR8＝CH3，H；R1R2，R2R3，R11R12，R12R13，R13R14＝OCH2O。FSA00000119237000011.tif2.權(quán)利要求1所述的阿樸菲類生物堿、氧代阿樸菲類生物堿和它們的衍生物以及它們的藥學(xué)上可接受的鹽在制備抗金黃色葡萄球菌藥物中的應(yīng)用。3.權(quán)利要求1所述的阿樸菲類生物堿、氧代阿樸菲類生物堿和它們的衍生物以及它們的藥學(xué)上可接受的鹽在制備抗耐甲氧西林金黃色葡萄球菌藥物中的應(yīng)用。4.權(quán)利要求1所述的阿樸菲類生物堿、氧代阿樸菲類生物堿和它們的衍生物以及它們的藥學(xué)上可接受的鹽在制備抗金黃色葡萄球菌和耐甲氧西林金黃色葡萄球菌藥物中的應(yīng)用。5.根據(jù)權(quán)利要求14任一權(quán)利要求所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的藥物的活性成分是所述通式(1)和(2)的阿樸菲類生物堿、通式(3)氧代阿樸菲類生物堿和它們的衍生物以及它們的藥學(xué)上可接受的鹽的任意一種或兩種以上的組合。6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的阿樸菲類生物堿、氧代阿樸菲類生物堿和它們的衍生物以及它們的藥學(xué)上可接受的鹽在抗細(xì)菌藥物中的重量百分比含量為藥物總質(zhì)量的0.199%。7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的阿樸菲類生物堿、氧代阿樸菲類生物堿和它們的衍生物以及它們的藥學(xué)上可接受的鹽在抗細(xì)菌藥物的重量百分比含量為藥物總質(zhì)量的0.590%。8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的阿樸菲類生物堿及其衍生物為結(jié)構(gòu)式1、2、6和7所示的化合物；所述的氧代阿樸菲類生物堿及其衍生物為結(jié)構(gòu)式3、4和5所示的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的抗細(xì)菌藥物為口服制劑、注射制劑或外用制劑。10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的口服制劑為片劑、膠囊劑或顆粒劑。全文摘要本發(fā)明公開了阿樸菲類生物堿、氧代阿樸菲類生物堿及它們的衍生物在制備抗細(xì)菌藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明對已知的阿樸菲類生物堿、氧代阿樸菲類生物堿和它們的衍生物以及它們的藥學(xué)上可接受的鹽發(fā)掘了新的醫(yī)療用途，開拓了一個新的應(yīng)用領(lǐng)域。本發(fā)明的阿樸菲類生物堿、氧代阿樸菲類生物堿和它們的衍生物以及它們的藥學(xué)上可接受的鹽這一類化合物對金黃色葡萄球菌、耐甲氧西林金黃色葡萄球菌具有顯著的抗菌活性，為尋求新的抗細(xì)菌藥物提供一類新的化合物。文檔編號A61P31/04GK101822675SQ201010171448公開日2010年9月8日申請日期2010年5月5日優(yōu)先權(quán)日2010年5月5日發(fā)明者戴好富,楊德蘭,梅文莉,王輝申請人:戴好富