專利名稱：：調(diào)脂顆粒及其在制備防治高血脂癥伴肝功能異常藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及中藥
技術(shù)領(lǐng)域：
。具體涉及調(diào)脂顆粒的中藥復(fù)方制備及其在防治髙血脂癥伴肝功能異常中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：髙脂血癥是由于脂肪代謝轉(zhuǎn)運(yùn)異常，使血漿膽固醇(TC)和/或甘油三翻(TG)等超過正常范圍的一種病癥，它是動(dòng)脈粥樣硬化(AS)和冠心病(CHD)等心腦血管疾病發(fā)生的重要危險(xiǎn)因素。近年來，隨著人們生活水平的提高，高脂血癥的發(fā)病率不斷上升，脂肪肝、冠心病和缺血型腦中風(fēng)的發(fā)病率明顯上升。其中，不少高脂血癥患者合并肝功能異常。此類病人的治療非常矛盾，西藥的降脂療效雖然明確，但是具有常見的肝臟毒副作用，這就束縛了降脂藥物的臨床運(yùn)用。因此，研發(fā)具有降脂、保肝作用的調(diào)脂中藥制劑，成為醫(yī)藥界關(guān)注的熱點(diǎn)。蘇州市中醫(yī)院汪達(dá)成主任醫(yī)師是全國首批500名老中醫(yī)之一。汪老根據(jù)多年的臨床經(jīng)驗(yàn)，創(chuàng)調(diào)脂顆粒(由蒲黃、姜黃、澤瀉、萊菔子四味中藥按一定比例組成)，作為院內(nèi)制劑經(jīng)多年實(shí)踐，每獲良效。痰濁和淤血作為高脂血癥發(fā)病的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，"痰淤互結(jié)"可能是高脂血癥最重要的病理狀態(tài)。因此，在治療上主張以泄?jié)峄担钛鰹橹鳌Ｔ摲侥茉诮档脱耐瑫r(shí)降低肝醵譜，恢復(fù)受損肝功能。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明要解決的技術(shù)問題在于應(yīng)用蒲黃、姜黃、澤瀉、萊菔子四味中藥按照一定的重量配比組成復(fù)方及其在防治高血脂癥中的應(yīng)用。本發(fā)明提供了一種調(diào)脂顆粒中藥復(fù)方，其特征在于所述復(fù)方由蒲黃、姜黃、澤瀉、萊菔子四味中藥組成，其重量配比分別為0.5~9.5:0.5~9.S:0.5-9.5:0.5~9.5。本發(fā)明提供的調(diào)脂顆粒中藥復(fù)方可通過添加通用的藥用輔助成份，可以制成口服顆粒劑、片劑、膠囊劑或口服液。本發(fā)明的另一目的是提供了一種調(diào)脂顆粒的中藥復(fù)方在防治髙血脂癥伴肝功能異常中的應(yīng)用本發(fā)明的技術(shù)方案是(l)臨床初步觀察選取蘇州中醫(yī)院門診或住院病人，共33例，其中單純高膽固醇血癥7例，單純高甘油三酯血癥16例，混合性髙脂血癥10例。病程在3個(gè)月-5年不等，屬中醫(yī)痰濁阻遏或氣滯血瘀癥。全部病例使用調(diào)脂顆粒，每次一袋，每日2次，早晚沖服，8周為一療程。試驗(yàn)前2周及試驗(yàn)間避免使用影響脂質(zhì)代謝的藥物治療期間飲食規(guī)律與治療前基本保持一致。觀察調(diào)脂顆粒對(duì)血脂以及安全性指標(biāo)的影響。(2)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究通過脂肪乳劑灌胃的方法建立髙血脂癥伴肝功能異常的大鼠模型，選用調(diào)脂顆粒作為治療藥物，研究髙血脂癥伴肝功能異常的大鼠肝組織的病理學(xué)改變，觀察調(diào)脂顆粒對(duì)髙血脂癥伴肝功能異常的大鼠模型的治療作用，從而為調(diào)脂顆粒治療商血脂癥伴肝功能異常提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。結(jié)果(l)調(diào)脂顆?？梢悦黠@降低髙血脂癥病人的血脂，并且對(duì)病人的安全性指標(biāo)檢測表明其對(duì)肝臟無毒副作用，臨床使用安全。(2)調(diào)脂顆?？梢悦黠@降低肝功能異常的高脂血癥大鼠的肝臟系數(shù)和血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白-膽固醇(LDL-C)、游離脂肪酸(FFA)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)和丙二醛(MDA)的含量；升高血清髙密度脂蛋白-膽固醇(HDL-C)含量以及提髙超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)的活性。病理組織學(xué)檢查結(jié)果顯示，給予調(diào)脂顆粒治療的大鼠肝細(xì)胞脂肪變性程度改變明顯減輕。下面結(jié)合附圖和實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步描述圖1為調(diào)脂顆粒治療6周后對(duì)高血脂癥伴肝功能異常的大鼠病理形態(tài)的影響(HEX200);A:正常對(duì)照組；B:模型組；C-E:分別為調(diào)脂顆粒4、8和16g/kg治療組；F:陽性藥(非諾貝特)對(duì)照組。具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步描述，下列實(shí)施例僅用于證明本發(fā)明的實(shí)用性，便于對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案的理解，而并不限制本發(fā)明的保護(hù)范圍實(shí)施例一、調(diào)脂顆粒對(duì)臨床髙脂血癥患者治療的初步觀察1、病例選擇患者來自2006年7月到2007年6月的蘇州中醫(yī)院門診或住院病人，共33例，其中男性16例，女性17例；年齡43歲-70歲之間，平均52.6歲。單純高膽固醇血癥7例，單純髙甘油三酯血癥16例，混合性高脂血癥10例。病程在3個(gè)月-5年不等，屬中醫(yī)痰濁阻遏或氣滯血瘀癥。2、診斷標(biāo)準(zhǔn)參考《中藥新藥治療高脂血癥的臨床研究指導(dǎo)原則》和《心血管藥物臨床研究評(píng)價(jià)方法的建議》。西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)高脂血癥在正常飲食情況下，2周內(nèi)(新病人)如2次測血清總TC>5.72mmol/L(220mg/dL)或TG>2.26mmol/L(200mg/dL)或高密度脂蛋白(HDL)《1.04mmol/L(40mg/dL)，結(jié)合病史、家族史和臨床表現(xiàn)(如黃色瘤、角膜老年環(huán)、肥胖等)即可確診。中醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)痰濁阻遏證形態(tài)肥胖，頭重如裹胸悶，嘔吐痰涎，肢麻沉重，或有心悸，失眠，口淡，食少，舌胖，舌苔滑膩，脈弦滑。氣滯血瘀證胸肋脹悶，走竄疼痛，心前區(qū)刺痛，舌尖邊有瘀點(diǎn)或瘀斑，脈沉澀。3、治療方法全部病例使用調(diào)脂顆粒，每次一袋，每日2次，早晚沖服，8周為一療程。試驗(yàn)前2周及試驗(yàn)間避免使用影響脂質(zhì)代謝的藥物治療期間飲食規(guī)律與治療前基本保持一致。4、觀察指標(biāo)和療效判定標(biāo)準(zhǔn)參照《中藥新藥治療髙脂血癥臨床研究指導(dǎo)原則》。觀察指標(biāo)i血脂指標(biāo)TG，TC，LDL-C,HDL-Cii安全性指標(biāo)肝功能和血、尿、便常規(guī)。血脂療效判定標(biāo)準(zhǔn)治療后血脂檢測恢復(fù)正常為臨床控制。治療后血脂檢測達(dá)到以下任何一項(xiàng)者為顯效TC下降^20。/。；TG下降^4(T/。；HDL-C升髙>0.26mmol/L(10mg/dL):(TC-HDL-C)/HDL-C下降>20%或達(dá)到正常值。治療后血脂檢測達(dá)到以下任何一項(xiàng)者為有效TC下降^10%但<20%;TG下降^20。/。但〈40。/。；HDL-C升髙>0.104mmol/L(4mg/dL)但〈0.26mmol/L(10mg/dL);(TC-HDL-C)/HDL-C下降>10%但<20°/。。治療后血脂檢測無明顯改善或改善達(dá)不到有效標(biāo)準(zhǔn)者為無效。5、統(tǒng)計(jì)方法樣本檢測結(jié)果以"X土SD"表示，用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件中配對(duì)T檢驗(yàn)，以P<0.05為顯著性差異。6、實(shí)驗(yàn)結(jié)果從臨床結(jié)果分析，調(diào)脂顆粒治療對(duì)痰濁阻遏、氣滯血瘀型髙脂血癥患者的總有效率達(dá)到87.87%,說明該方對(duì)此類型患者的血脂有很好的干預(yù)作用(見表1),而且能夠顯著的降低血清TC、TG和LDL-C，且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，升髙HDL-C水平(見表2)。此外，對(duì)三大常規(guī)、肝功能(PT)檢査發(fā)現(xiàn)，該方對(duì)肝臟無毒副作用，臨床使用安全尚發(fā)現(xiàn)對(duì)有PT升髙者有降低PT的益處。表l調(diào)l脂顆粒對(duì)臨床高血脂癥患者的血脂療效觀察組別總例數(shù)臨床控制顯效(例)有效(例)無效(例)總有效率(例)調(diào)脂顆粒組331397487.87%表2調(diào)脂顆粒對(duì)臨床高血脂癥患者治療前后血脂的影響組別TCTGLDL-C(mmol/L)(mmol/L)(mmol/L)HDL-C(mmol/L)治療前治療后5.84±0.653.85±1.793.42±0.735.40±0.45*2.30±0.88*3.05±0.46*1.27土0.431.35土0.38治療前后比較*戶<0.05實(shí)施例二、調(diào)脂顆粒對(duì)大鼠髙血脂癥伴肝功能異常的治療作用研究1材料與方法1.l實(shí)驗(yàn)動(dòng)物SD大鼠，雄性，體重160-180g,清潔級(jí)，蘇州大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心供應(yīng)，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)XCYK(蘇)2002-0008，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證號(hào)SYXK(蘇)2002-0037。實(shí)驗(yàn)期間飼養(yǎng)室溫度20±2"C。1.2藥品和主要試劑調(diào)脂顆粒(TZKL),由蘇州市中醫(yī)院藥劑科提供。非諾貝特膠囊(陽性對(duì)照藥)，由法國利博福尼制藥有限公司提供，批號(hào)90052，規(guī)格為200mg/粒，進(jìn)口藥品注冊(cè)證號(hào)H20050004,臨用時(shí)用0.5%羧甲基纖維素鈉溶液配制1%的藥物濃度。膽固醇和3號(hào)膽鹽，由上?？笊锛夹g(shù)有限公司提供，批號(hào)20070712。丙基硫氧嘧啶，由蘇州東瑞制藥有限公司提供，批號(hào)071011004。各指標(biāo)檢測試劑盒，均由南京建成生物工程研究所提供。1.3實(shí)驗(yàn)方法將SD大鼠隨機(jī)分為2組，即正常對(duì)照組和造模組，造模組大鼠每天上午8:00-9:30灌服脂肪乳劑(內(nèi)含豬油15%，膽固醇6%,3號(hào)膽鹽2%，丙基硫氧嘧啶0.2%,丙二醇20%,吐溫-8016%),1ml/100g體重，1次/日，正常對(duì)照組灌服等體積的蒸餾水。連續(xù)灌服脂肪乳劑4周后隨機(jī)取大鼠3只，病理檢查見肝組織中充滿彌散性脂質(zhì)空泡時(shí)，提示肝臟脂質(zhì)聚集已經(jīng)形成，肝功能已經(jīng)受到損傷。此后繼續(xù)灌服脂肪乳劑2周，并將已形成的肝功能異常的大鼠隨機(jī)分成調(diào)脂顆粒4g/kg、8g/kg和16g/kg三個(gè)劑量組，非諾貝特20mg/kg組和模型對(duì)照組，每組大鼠10只，并開始給藥，各給藥組于每天下午2:00-3:30按不同劑量以0.2ml/100g體重灌胃，正常對(duì)照組和模型組給予等體積蒸餾水。連續(xù)給藥6周后，于處理前12h禁食，不禁水，然后以4%水合氯醛1ml/100g體重腹腔注射麻醉，腹主動(dòng)脈取血，檢測各項(xiàng)指標(biāo)。另取同一部位的一塊肝臟以10%福爾馬林溶液固定，用光鏡觀察肝組織的形態(tài)學(xué)改變。1.4血清指標(biāo)和肝系數(shù)測定按試劑盒提供的方法測定，即血清TC采用膽固醇氧化酶-PAP法測定，TG采用磷酸甘油氧化酶-PAP法測定，HDL-C采用磷鎢酸鎂(PTA-Mg++)沉淀法測定，LDL-C按下列公式計(jì)算，LDL-C-TC-(TG/2.2+HDL-C),ALT、AST、FFA、SOD、MDA和GSH-Px采用比色法測定。肝系數(shù)-肝重(g)/鼠重(100g)。1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以；士s表示，顯著性檢驗(yàn)采用one-wayANOVA檢驗(yàn)，對(duì)肝臟的病理學(xué)檢査結(jié)果采用等級(jí)資料的秩和檢驗(yàn)。2結(jié)果2.1對(duì)髙血脂癥伴肝功能異常的大鼠體重、肝重和肝系數(shù)的影響與正常對(duì)照組相比較，髙血脂癥伴肝功能異常模型組大鼠肝重和肝系數(shù)明顯升髙(P<0.01)。連續(xù)給藥6周后，調(diào)脂顆粒能顯著地降低髙血脂癥伴肝功能異常大鼠肝重和肝系數(shù)(P〈0.05或P<0.01),并呈劑量依賴性趨勢，但非諾貝特明顯升髙高血脂癥伴肝功能異常大鼠的肝重和肝系數(shù)(P<0.01)。給藥各組的大鼠體重未見明顯影響(見表3)。表3對(duì)髙血脂癥伴肝功能異常的大鼠體重、肝重和肝臟系數(shù)的影響(n=只數(shù)；mean±S.D.)組別n體重(g)肝重必肝臟系數(shù)(g/100g)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>尸O.Ol,與正常對(duì)照組比較；*尸<0.05,**戶<0.01，與模型組比較2.2對(duì)髙血脂癥伴肝功能異常的大鼠血脂的影響與正常對(duì)照組相比較，高血脂癥伴肝功能異常模型組大鼠血清TC、TG和LDL-C顯著升髙(P<0.05或P<0.01)。連續(xù)給藥6周后，調(diào)脂顆粒能顯著地降低髙血脂癥伴肝功能異常大鼠血清TC、TG、LDL-C、FFA的水平(P<0.05或P<0.01)，同時(shí)對(duì)血清HDL-C有一定的升髙作用(P<0.05)。非諾貝特也能明顯降低髙血脂癥伴肝功能異常大鼠血清TC、TG、LDL-C和FFA含量(P〈0.05或P〈0.01)，但對(duì)HDL-C未見明顯升髙作用(見表4)。表4對(duì)髙血脂癥伴肝功能異常大鼠血清TC、TG、HDL-C、LDL-C和FFA的影響(n-只數(shù)；mean±S.D.)組別nTC(mmoH)TG(mmol/L)HDL-C(mmol/L)LDL-C(mmol/L)FFA(wmoVL)正常對(duì)照組模型組TZKL4g/kgTZKL8g/kgTZKL16g/kg非諾K特20mg/kg1010101010102.19:10.380.95±0.152.88±0.37##1.27±0.292.48±0.36*1.02±0.11*2,34±0.45**0.%±0.16**2.26±0.45**0.92±0.17**2.04±0.43**0.8C±0.14**0.86±0.140.81±0.160.97±0.16*0.96±0.2。*1.04±0.17**0.88±0.090.90±0.451.50±0.46"1.04±0.42*0.94±0.51*0.79±0.52**0.80士0.48"465±101557±123419±122*402土106**387±113**438±117*P<0.01，與正常對(duì)照組比較；*尸<0.05,**尸<0.01，與模型組比較2.3對(duì)肝功能異常的髙脂血癥大鼠肝功能指標(biāo)的影響與正常對(duì)照組相比較，髙血脂癥伴肝功能異常模型組大鼠血清ALT和AST水平明顯升高(P<0.05)。連續(xù)給藥6周后，調(diào)脂顆粒可以降低大鼠血清ALT和AST水平(P<0.05或P<0.01)，但非諾貝特對(duì)ALT和AST未見有明顯影響(見表5)。表5對(duì)髙血脂癥伴肝功能異常的大鼠肝功能指標(biāo)的影響(!1=只數(shù)；mean±S.D.)正常對(duì)照組模型組TZKL4g/kgTZKL8g/kgTZKL16g/kg非諾貝特20mg/kgnALT(Kar亂)AST(KarU/L)1024.4±6.882.1±11.11033.0±8.7#93.8±12,2#1024.2丄6.0*81.2±12.1*1021.1±4.8"76.3±12.2**101020.0±5.9**75.6±12.7**27.7±7.386.6±11.3)0.05，與正常對(duì)照組比較；沐PO.05,"PO.01，與模型組比較2.4對(duì)高血脂癥伴肝功能異常的大鼠血清中SOD、MDA和GSH-Px的影響與正常對(duì)照組相比較，髙血脂癥伴肝功能異常模型組大鼠血清中MDA含量顯著增加(P<0.05或P<0.01),SOD和GSH-Px活性明顯降低(P<0.05)。連續(xù)給藥6周后，調(diào)脂顆粒能顯著地降低高血脂癥伴肝功能異常的大鼠血清中MDA含量(P《05或P〈0.01)，提高SOD和GSH-Px活性(P《05或P<0.01)。非諾貝特顯著地降低血清中MDA含量(P<0.05)，但是對(duì)血清中SOD和GSH-Px活性未見明顯影響(見表6)表6對(duì)高血脂癥伴肝功能異常的大鼠血清中SOD、MDA和GSH-Px的影響(11=只數(shù)；mean士S.D.)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>尸<0.05，##尸<0.01，與正常對(duì)照組比較；*P<0.05,**P<0.01，與模型組比較2.5對(duì)高血脂癥伴肝功能異常的大鼠肝臟的病理組織學(xué)觀察大鼠肝臟經(jīng)石蠟切片并行HE染色，光鏡下觀察其病理組織學(xué)變化。正常對(duì)照組肝細(xì)胞排列呈索狀結(jié)構(gòu)，結(jié)構(gòu)正常。模型組可見彌漫性的脂質(zhì)空泡，并有融合現(xiàn)象，給予調(diào)脂顆粒后，肝細(xì)胞脂質(zhì)變性的程度明顯減輕，肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)趨于正常(見表7、圖1)。表7對(duì)髙血脂癥伴肝功能異常的大鼠肝臟的病理組織學(xué)觀察<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>小結(jié)1、給藥6周后，調(diào)脂顆?？娠@著降低髙血脂癥伴肝功能異常的大鼠肝重和肝臟系數(shù)。2、病理組織學(xué)觀察結(jié)果顯示，給予調(diào)脂顆粒治療6周后，髙血脂癥伴肝功能異常的大鼠肝細(xì)胞脂肪變性程度明顯減輕。3、給予調(diào)脂顆粒治療6周后，髙血脂癥伴肝功能異常的鼠血清TC、TG、LDL-C、FFA明顯降低，HDL-C明顯升髙。這些結(jié)果表明，調(diào)脂顆粒通過降低血脂可能對(duì)髙血脂癥伴肝功能異常的鼠具有一定的治療作用。4、給予調(diào)脂顆粒治療6周后，髙血脂癥伴肝功能異常的鼠血清ALT和AST水平明顯降低。此結(jié)果表明，調(diào)脂顆粒不僅對(duì)大鼠肝臟沒有毒性作用，反而具有一定的保肝作用。5、給予調(diào)脂顆粒治療6周后，高血脂癥伴肝功能異常的鼠血清中SOD和GSH-Px活性明顯升髙以及MDA含量明顯降低，表明調(diào)脂顆?？赡芡ㄟ^其抗氧化的作用對(duì)髙血脂癥伴肝功能異常的鼠肝臟具有一定的保護(hù)作用。6、調(diào)脂顆粒能夠明顯的降低髙脂血癥患者血脂水平，并且對(duì)患者的肝臟無毒副作用，臨床使用安全。實(shí)施例三一種用于治療髙血脂癥伴肝功能異常的制劑，由蒲黃、姜黃、澤瀉、萊菔子四味中藥按一定比例組成，其特征在于所述藥物通過添加通用的藥用輔助成份，可以制成口服顆粒劑、片劑、膠囊劑或口服液。權(quán)利要求1.一種調(diào)脂顆粒，其特征在于所述復(fù)方由蒲黃、姜黃、澤瀉、萊菔子四味中藥組成，其重量配比分別為0.5～9.5∶0.5～9.5∶0.5～9.5∶0.5～9.5。2.—種權(quán)利要求1所述的調(diào)脂顆粒在制備防治髙血脂癥伴肝功能異常藥物中的應(yīng)用。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的調(diào)脂顆粒在在制備防治髙血脂癥伴肝功能異常藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述藥物通過添加通用的藥用輔助成份，可以制成口服顆粒劑、片劑、膠囊劑或口服液。全文摘要本發(fā)明公開了一種調(diào)脂顆粒中藥復(fù)方的制備及其在防治高血脂癥伴肝功能異常藥物中的應(yīng)用。首先通過臨床試驗(yàn)的初步研究，觀察調(diào)脂顆粒對(duì)高血脂癥病人的血脂以及安全性指標(biāo)的影響；再次通過灌服脂肪乳劑復(fù)制大鼠高血脂癥伴肝功能異常的模型，選用調(diào)脂顆粒作為治療藥物，觀察調(diào)脂顆粒對(duì)高血脂癥伴肝功能異常的大鼠肝組織的病理學(xué)改變，研究調(diào)脂顆粒對(duì)高血脂癥伴肝功能異常大鼠模型的治療作用，從而為調(diào)脂顆粒治療高血脂癥伴肝功能異常提供依據(jù)。文檔編號(hào)A61K36/9066GK101579510SQ20091011537公開日2009年11月18日申請(qǐng)日期2009年5月12日優(yōu)先權(quán)日2009年5月12日發(fā)明者葛惠男,趙笑東,郭次儀,錢培剛,顧振綸申請(qǐng)人:蘇州市中醫(yī)醫(yī)院;蘇州中藥研究所