專利名稱：：一種淫羊藿甙注射劑及其制備方法和應用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及藥物制備及應用領(lǐng)域，更具體涉及一種淫羊藿武注射劑及其制備方法和在制備治療心腦血管疾病藥物中的應用。技術(shù)背景淫羊藿是常用的中藥，是Berberridaceae科淫羊藿屬(五/"'me^w附gem^s少植物。中華人民共和國藥典(2000年版)收載了如下五種淫羊藿藥材，藥材為干燥的地上部分。即淫羊藿、箭葉淫羊藿、柔毛淫羊藿、巫山淫羊藿、朝鮮淫羊藿等。淫羊藿主要含有異戊烯基取代的黃酮甙(淫羊藿甙)。其主要藥效為補腎壯骨、增強內(nèi)分泌，具有激素作用，可促進骨髓細胞DNA含成，促進骨細胞的生長。淫羊藿甙均有3個糖基，即多糖基淫羊藿甙。多糖基淫羊藿甙活性較低，而低糖基淫羊藿甙(即淫羊藿單甙)或淫羊藿甙元活性卻較高。這一研究為從事植物藥提取活性成分的企業(yè)指明了方向，目前市場已有淫羊藿單甙供應。在淫羊藿應用方面，基本上是依據(jù)其補腎壯陽，怯風除濕等功用主治作用。如《中華人民共和國藥典》(2005年版，一部)淫羊藿條中(功能與主治)為補腎陽，強筋骨，怯風濕。用于陽萎遺精，筋骨痿軟，風濕痹痛，麻木拘攣；更年期高血壓。檢索淫羊藿甙中國專利，共有公幵專利19件，其中涉及到提取純化方面的制備方法專利3件，涉及用于減肥制劑專利2件，涉及用于性功能調(diào)節(jié)制劑專利4件，涉及抗排異，抗風濕，抗骨質(zhì)增生制劑專利各1件，其它專利7件。未發(fā)現(xiàn)淫羊藿甙用于制備治療心腦血管疾病藥物方面的專利。
發(fā)明內(nèi)容根據(jù)我們的研究，發(fā)現(xiàn)淫羊藿甙具有擴張血管的作用，可以用于制備治療心腦血管疾病藥物。由于淫羊藿甙難溶于水，作為口服制劑，利用率較低，為了提高其利用率，首先要解決淫羊藿甙難溶于水的問題，使其能用于注射制劑；其次要解決注射制劑的制備問題；還要解決它對心腦血管疾病的藥理效果問題。基于上述問題，根據(jù)我們的研究結(jié)果，確定其劑型為注射制劑。因此本發(fā)明的目的是提供一種淫羊藿甙注射劑及其制備方法。本發(fā)明的另一目的是提供一種淫羊藿甙注射劑在制備治療心腦血管疾病的藥物中的應用。本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的。本發(fā)明的一種淫羊藿甙注射劑，其特征在于它是由淫羊藿甙非水溶劑按重量/體積比例為1:5—30，溶解后加入適量注射用水和/或注射劑用輔料制備而成的靜脈注射劑；所述的淫羊藿甙的純度為90%—99%;所述的非水溶劑是吐溫-80、聚乙二醇(200,400)、乙醇、丙二醇、甘油、中的一種或幾種的混合溶劑；所述的注射劑用輔料是填充劑，選自甘露醇、乳糖中的一種；所述的靜脈注射劑，包括水針，輸液和凍干粉針劑，每支注射液中含淫羊藿式30—100mg。本發(fā)明的一種淫羊藿甙注射液，其特征在于它是由淫羊藿甙非水溶劑按重量/體積比例為1:8-20，溶解后加入適量注射用水和注射劑用輔料制備而成。本發(fā)明的的一種淫羊藿甙注射液，其特征在于其制備方法按以下步驟進行-(1)取適量淫羊藿甙，在40"8(TC溶于適量體積的非水溶劑中；(2)加入適量注射用水溶解，加或不加注射劑用輔料，補足注射用水；(3)用滅菌垂熔玻璃漏斗或其他配制注射液用過濾方法過濾，灌封、滅菌后搖動，即得；(4)將加注射劑用輔料的注射液經(jīng)除菌過濾，灌注于西林瓶，每瓶l-2ml，蓋塞，冷凍干燥，壓塞即得凍干粉針劑。本發(fā)明的的一種淫羊藿甙注射劑，其特征在于其在制備治療心腦血管疾病的藥物中的應用。特別需要強調(diào)的是淫羊藿甙與非水溶劑的比例，這點對于制備保持溶液澄明度，符合注射給藥要求的注射液來說是至關(guān)重要的。如淫羊藿甙所占比例過大，則原料藥在非水溶劑中會達到飽和濃度，當制備過程中加處方量的水稀釋時溶液即會出現(xiàn)不同程度的渾濁現(xiàn)象，導致過濾困難和不必要的原料浪費以及影響注射液中藥物含量恒定等情況，增加生產(chǎn)難度；淫羊藿甙比例過小，則會不必要地增加非水溶媒用量，影響臨床用藥安全性。我們通過大量的處方篩選試驗，摸索出既可提高淫羊藿甙溶解性，又可以滿足注射用藥要求的合理的制劑處方和制備方法，通過使用適量的非水溶劑，增加淫羊藿甙的溶解度和保持溶液的穩(wěn)定性，避免在臨床稀釋使用時出現(xiàn)溶液渾濁、無法給藥等問題的發(fā)生，盡可能降低非水溶劑的用量，提高了原藥濃度，增加了臨床使用的安全性。本發(fā)明提供的處方和技術(shù)生產(chǎn)的注射劑，可以用任意比例的注射用水，氯化鈉或葡萄糖輸液稀釋，而保持溶液的澄明度，適合靜脈注射給藥。本發(fā)明提供淫羊藿甙注射液規(guī)格為10ml、20ml、50ml、100ml，每種規(guī)格注射液淫羊藿甙含量為6、3、1.2、lmg/ml。本發(fā)明提供淫羊藿甙凍干粉針劑規(guī)格為2ml、lml，每種規(guī)格注射液淫羊藿甙含量為30、60mg/ml。本發(fā)明所用的淫羊藿甙原料為從市場購進，經(jīng)HPLC檢測，淫羊藿甙的含量在90%—99%。步驟(3)中的滅菌后搖動，目的是克服一些非水溶劑的壇點問題。為進一步說明淫羊藿甙注射液的積極效果，本發(fā)明人對所制備的注射液和凍干粉針分別進行了加速穩(wěn)定性實驗、過敏性試驗、全身用藥刺激性試驗、溶血試驗等實驗，結(jié)果表明本發(fā)明的淫羊藿甙注射液質(zhì)量穩(wěn)定，安全性符合注射劑質(zhì)量要求，可滿足臨床用藥需要。現(xiàn)分述如下1.淫羊藿甙注射液加速穩(wěn)定性實驗對本發(fā)明的方法制備而得的淫羊藿甙注射液按加速穩(wěn)定性試驗法(國家藥品監(jiān)督局《中藥新藥研究的技術(shù)要求》)進行了穩(wěn)定性研究。穩(wěn)定性試驗考察的項目分別為性狀、pH值、澄明度、含量測定等項，供加速穩(wěn)定性試驗的淫羊藿甙注射液樣品由北京天瑞祥云科技有限公司提供，樣品批號分別為注射液060604;淫羊藿甙凍干粉針060718。材料與方法樣品批號060604、060718(北京天瑞祥云科技有限公司提供)1)試驗條件37"4(TC，相對濕度75%。2)考察時間0月、2個月、3個月、6個月。3)試驗開始時間060604批為2006年6月4日，060718批為2006年7月18曰4)考察項目性狀、pH值、澄明度、含量測定；試驗結(jié)果如表2-l和2-2所示，淫羊藿甙注射液在本試驗條件下很穩(wěn)定。<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>注澄明度為加如注射用水后檢査；含量測定為測定每支凍干粉中淫羊藿甙含量。二、淫羊藿甙注射液全身用藥刺激性試驗試驗材料受試藥淫羊藿甙注射液，規(guī)格10ml/支，每支含淫羊藿甙60mg，由北京天瑞祥云科技有限公司提供。批號060604，臨用時用無菌生理鹽水溶解配制成所需濃度。動物西蘭種白兔，雄性，由廣州第一軍醫(yī)大學動物室提供，符合二級標準。試驗方法選取4只健康的新西蘭種白兔，體重為3—3.2kg，飼養(yǎng)一周后供試驗用。分別于兔子的左耳耳緣靜脈推注TD，右耳注射無菌生理鹽水作為參比對照，每次3mg/kg，藥液濃度為6mg/ml，連續(xù)給予3天。在末次給藥后肉眼觀察血管的外觀狀況，然后在距離注射部位lcm處向耳根部方向取一段1.5cm左右的血管，用1%的福爾馬林溶液固定，進行病理組織學檢查。試驗結(jié)果給藥一側(cè)與生理鹽水一側(cè)的耳尖部病變皆一致，皮下組織內(nèi)有輕度慢性炎細胞浸潤，以淋巴細胞為主。表皮完好，無損傷，無增生，皮下附屬腺無病變。給藥側(cè)軟骨正常，軟骨外有空泡空隙，兩旁血管充血，一只充血較嚴重，另三只充血較輕。皮膚表皮完好，無缺損，皮下組織無炎癥，附屬腺無病變。給生理鹽水側(cè)，耳中部僅見軟骨外有空泡空隙，血管不充血，表皮上皮完好無損，皮下組織無炎癥，附屬腺無病變。結(jié)論本品連續(xù)給藥后，給藥側(cè)與對照側(cè)的耳尖部均有輕度的炎癥，可能是注射操作不當引起，與用藥無關(guān)；給藥一側(cè)耳中部出現(xiàn)充血，但未見炎癥。病理檢査未出現(xiàn)異常的變化。在本試驗中，連續(xù)應用淫羊藿甙注射液未見有血管刺激性。三、淫羊藿甙的過敏性試驗試驗材料淫羊藿甙注射液，規(guī)格10ml/支，每支含淫羊藿甙60mg，由北京天瑞祥云科技有限公司提供。批號060604，臨用時用無菌生理鹽水溶解配制成3mg/ml的濃度。陽性藥卵白蛋白(Albiminegg)，Sigma公司產(chǎn)品，華美生物工程公司分裝，批號BP0034。用無菌生理鹽水配制成4%的濃度。動物豚鼠，由廣州第一軍醫(yī)大學動物室提供，符合二級標準。試驗方法選取體重250、350g的豚鼠20只，隨機分成兩組，每組10只。每只豚鼠隔日尾靜脈注射藥液0.5ml，共注射3次，其中5只在第1次注射藥物后14天再從股靜脈注射原藥液lml，進行抗原攻擊，另外5只在第1次注射藥物后21天再從頸靜脈注射藥液lml，進行抗原攻擊。在抗原攻擊后，如有過敏反應，則在注藥后幾分鐘內(nèi)發(fā)生，根據(jù)豚鼠表現(xiàn)進行平分，平分標準見下表。如果高于2分為有過敏反應，2分以下表明該藥無致敏作用。試驗設兩組，一組為淫羊藿甙注射液組，給予淫羊藿甙注射液，一組為陽性對照組，給予卵白蛋白。反應級數(shù)反應癥狀反應級數(shù)反應癥狀0無明顯反應3多次或連續(xù)咳嗽，伴有呼吸困難或痙攣，抽搐等1有輕微抓鼻，顫抖或豎毛2有幾次咳嗽，有抓鼻，顫抖或豎毛4痙攣，抽搐，大小便失禁，休克死亡試驗結(jié)果抗原攻擊后的動物表現(xiàn)評分見下表序號12345678910淫羊藿甙注射液1110010000卵白蛋白組4444444343結(jié)論本試驗中，淫羊藿甙注射液沒有引起動物的過敏反應。四、淫羊藿甙溶血試驗2%細胞混懸液的制備取兔血20ml，用玻璃棒攪動血液，除去纖維蛋白原，使成脫纖血液，加5、10ml的生理鹽水，搖勻，2000、2500rpm離心5分鐘，除去上清液，沉淀的紅細胞再用5-10ml生理鹽水如法洗滌3-次，至上清液不顯紅色為止。將所得紅血球用生理鹽水配成2%的懸液，供試驗用。取淫羊藿甙凍干粉用生理鹽水配制成9mg/ml的溶液備用。試驗方法取試管7只，按表3配比量依次加入2%紅細胞懸液和生理鹽水，混勻后，于37'C恒溫箱放置半小時，然后分別加入不同量的藥液(第六管為對照管)，搖勻后，置37'C恒溫箱中。開始每隔15分鐘觀察一次，1小時后，每隔1小時觀察一次，共觀察2小時，如溶液呈透明紅色，即表示溶血，如溶液中有棕紅色或紅棕色絮狀沉淀，表示有紅細胞凝聚作用。表3淫羊藿甙凍干粉溶血反應試驗試管號1234567供試品()0.10.20.30.40.5生理鹽水o2.42.32.22,12.02.5蒸餾水2.52%紅西胞混懸液O2.52.52.52.52.52.52.5結(jié)批號060718+9<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>試驗結(jié)果顯示l一5號試管未出現(xiàn)溶血反應或凝集反應，說明淫羊藿甙凍干粉在本試驗條件下不產(chǎn)生溶血反應和凝集反應。具體實施例方式下面的實施例可以幫助本領(lǐng)域的技術(shù)人員更全面的理解本發(fā)明。但不以任何方式限制本發(fā)明。實施例1處方淫羊藿甙6g吐溫-80100ml水補足至1000ml制法取淫羊藿甙，在50"6(TC下溶于處方量吐溫-80中，攪拌下加入部分水，溶解后，補水至1000ml，用滅菌垂熔玻璃漏斗過濾，灌封，滅菌后搖動，即得10ml規(guī)格淫羊藿甙注射液100支。以本制備方法制備而得的樣品，經(jīng)加速穩(wěn)定性試驗證明在試驗條件下有很好的穩(wěn)定性，各項指標均符合注射劑標準(中國藥典2005年版附錄IB)。本注射液2支(6mg/ml)加入到250、500ml規(guī)格的5%葡萄糖輸液和氯化鈉輸液中未出現(xiàn)渾濁等異常現(xiàn)象，動物溶血試驗、熱源檢查(按中國藥典2005版一部附錄XID進行)、刺激性試驗以及過敏性試驗(中國藥典2005年版附錄XIK)表明完全符合規(guī)定標準。實施例2處方淫羊藿甙12g吐溫-80100ml水補足至2000ml制法取淫羊藿甙，在50-60°C下溶于處方量吐溫-80中，攪拌下加入部分水，溶解后，補水至2000ml，用滅菌垂熔玻璃漏斗過濾，灌封，滅菌搖動，即得10ml規(guī)格淫羊藿甙注射液200支。實施例3處方淫羊藿甙12g乙醇100ml甘油10ml水補足至1000ml制備方法取處方量的淫羊藿甙，室溫下溶于處方量的乙醇和甘油中，攪拌溶解后，加入部分注射用水，攪勻后，加入葡萄糖，攪拌溶解，再補注射用水至1000ml，過濾，灌封，滅菌，即得10ml規(guī)格淫羊藿甙注射液100支。實施例4處方淫羊藿甙12g乙醇100ml聚乙二醇-200100ml甘露醇20g水補足至2000ml制備方法取處方量的淫羊藿甙，室溫下溶于處方量的乙醇和聚乙二醇-200的混合溶劑中，攪拌溶解后，加入部分注射用水，再加入甘露醇，溶解后補注射用水至2000ml,過濾，灌封，滅菌，即得10ml規(guī)格淫羊藿甙注射液200支。實施例5處方淫羊藿甙12g乙醇100ml聚乙二醇-400100ml甘露醇20g水補足至2000ml制備方法取處方量的淫羊藿甙，室溫下溶于處方量的乙醇和聚乙二醇-400的混合溶劑中，攪拌溶解后，加入部分注射用水，再加入甘露醇，溶解后補注射用水至2000ml，過濾，灌封，滅菌，即得10ml規(guī)格淫羊藿甙注射液200支。實施例6處方淫羊藿甙12g吐溫-80100ml甘露醇200g水補足至800ml制法取淫羊藿甙，在50"6(TC下溶于處方量吐溫-80中，攪拌下加入部分水，再加入甘露醇，溶解后，補水至800ml，用0.20um濾膜過濾，分裝于10ml西林瓶中，每瓶4ml，蓋塞，冷凍干燥，壓塞，即得淫羊藿甙凍干粉200支。實施例7處方淫羊藿甙10g吐溫-80100ml水補足至10000ml制法取淫羊藿甙，在50-6(TC下溶于處方量吐溫-80中，攪拌下加入部分水，溶解后，補水至10000ml，用滅菌垂熔玻璃漏斗過濾，灌封，滅菌后搖動，即得100ml規(guī)格淫羊藿甙輸液劑100瓶。需要說明的是用吐溫-80為非水溶劑，需要克服吐溫-80的壇點問題，滅菌后搖動是克服這一問題的有效方法。，一種淫羊藿甙注射劑，其特征在于在制備治療心腦血管疾病的藥物中的應根據(jù)我們研究發(fā)現(xiàn)，淫羊藿甙能應用于制備治療心腦血管疾病的藥物，其作用機制是其直接對血管的調(diào)節(jié)作用。本發(fā)明藥物適用于心腦血管病的治療，包括腦血栓、腦缺血、冠心病、心絞痛、心肌缺血、心衰、心律失常等。本發(fā)明的有益效果是(1)利用淫羊藿甙的直接調(diào)節(jié)血管作用，將淫羊藿甙用于制備治療心腦血管疾病的藥物，開辟了淫羊藿的新的應用領(lǐng)域。(2)經(jīng)藥效學試驗證明其療效顯著，為心腦血管性疾病的治療提供了新藥物。以下對本發(fā)明藥物的有益效果通過藥效學試驗作進一步明設計了犬大腦中動脈結(jié)扎所致腦缺血模型試驗，測定犬大腦中動脈結(jié)扎后的腦組織缺血區(qū)重量，犬大腦中動脈血流速度；以犬冠狀動脈前降支結(jié)扎法所致心肌梗塞模型試驗，考察淫羊藿甙注射液對心肌缺血酶學指標及左室梗塞范圍的影響，從而考察淫羊藿甙注射液對心腦血管疾病的治療作用。材料動物中國草種犬(雜種犬)，體重8.5—10.5kg。器材ACS-0-6T型天平，Model-820型組織切片機，OLYMPUSPM-10AD攝影顯微鏡，ES-1000SPM多譜勒超聲血流探測儀，Basic型半自動生化分析儀，泰盟BL420型生物機能信號系統(tǒng)，RODENTVENTILATORDH-150型呼吸機，BB6220型CO2培養(yǎng)箱，OLYMPUS1X70型倒置相差顯微鏡，DU640型紫外可見分光光度計，眼科剪、眼科攝及常用手術(shù)器械、0號手術(shù)絲線、血管夾等。藥品及試劑淫羊藿甙注射液(自制)，按成人與動物體表面積折算等效劑量換算，中劑量為淫羊藿甙20mg，高劑量為淫羊藿甙40mg,低劑量為淫羊藿甙10mg;以市售燈盞花素注射液、銀杏葉注射液為陽性藥對照，用量按成人與動物體表面積折算等效劑量換算；戊巴比妥鈉，中國醫(yī)藥集團(上海)化學試劑公司進口分裝；龍膽紫，成都科龍化工試劑廠；CPK試劑盒，北京中生生物工程高技術(shù)公司產(chǎn)品；LDH試劑盒，北京中生生物工程高技術(shù)公司產(chǎn)品；DMEM培養(yǎng)液，Hyclone公司，試驗時加入小牛血清20%、青、鏈霉素各100U/ml使用；0.25^胰蛋白酶，HyClone公司，試驗時用D-Hanks液稀釋為0.08%使用；D-Hanks，實驗室自己配置，-2(TC保存，用時恢復至室溫；LDH測試盒，南京建成生物工程研究所；AST測試盒，南京建成生物工程研究所；CK測試盒，南京建成生物工程研究所；小牛血清，HyClone公司。試驗方法1、犬大腦中動脈結(jié)扎所致腦缺血模型試驗草犬60只，隨機分成6組，每組10只，腹腔注射3%戊巴比妥鈉1.0ml/kg(30mg/kg)麻醉，固定于犬手術(shù)臺上，然后在犬右外眼角與右耳根部1/2處(中點)，用電刀切開皮膚，分離肌肉，用手術(shù)專用顱骨鉆鉆開顱骨，以咬骨鉗擴大顱骨孔，切開硬腦膜，找到大腦中動脈。先用多譜勒超聲血流探測儀測定大腦中動脈血流速度，然后靜脈注射給藥，給藥15min后，再次同前法測定大腦中動脈血流速度，隨后立即將大腦中動脈結(jié)扎造成腦缺血。大腦中動脈結(jié)扎6小時后，分離雙側(cè)頸總動脈并夾閉之，即刻從右側(cè)頸總動脈夾閉處的遠心端灌注20ml龍膽紫飽和溶液對腦組織進行染色，然后處死動物，開顱取出腦組織，稱全腦重，遂切下未染色的腦組織(即缺血區(qū)腦組織)稱重，求出其占全腦重量的百分率，并進行病理組織學檢査(按常規(guī)取腦組織，10%甲醛固定1周，H.E染色，石臘包埋切片，光學顯微鏡下觀察)，以判斷其是否屬于腦缺血性損傷，結(jié)果見表l、表2。2、犬冠狀動脈前降支結(jié)扎法所致心肌梗塞模型試驗健康犬60只，雌雄兼用，用戊巴比妥納30mg/kg靜脈麻醉后氣管插管(備作開胸時人工呼吸用)，分離左側(cè)頸總動脈，插入適當口徑的聚乙稀管(內(nèi)充滿肝素生理鹽水)，連接壓力換能器測定外周血壓(AP)，股靜脈插管接輸液管以備給藥，同時測定心電圖(BCGII)。從胸骨左緣沿第四或第五肋間開胸，切開一根肋骨并用撐開器撐開使全心充分暴露。剪開心包作心包吊籃，插入適當口徑的聚乙稀管(內(nèi)充滿肝素生理鹽水)，連接壓力換能器測定左室內(nèi)壓(LVP),左心室舒張未期壓(LVEDP)及左心室內(nèi)壓最大上升速率(LV+dp/dt)和最大下降速率(LV—dp/dt);分離深主動脈根部，用多譜勒超聲血流探測儀側(cè)定主動脈血流速度(用于折算心輸出量Q))。除直接測取上述參數(shù)外，按公式1(1〕計算，間接測定左心室心肌耗氧量。以上指標均同步記錄于泰盟BL420型生物機能信號系統(tǒng)上，等各項指標穩(wěn)定后，經(jīng)靜脈恒速滴注藥物，注射容量均為2ml/kg，注射前、注射后15min兩個時間點，均記錄上述各項參數(shù)一次。然后于左冠狀動脈前降支(LAD1/3處，供應心室前壁及心尖部的第一級血管分支起始部)雙重結(jié)扎，結(jié)扎后5、10、15、30、60和120min分別開機記錄上述各項參數(shù)。并在結(jié)扎LAD前和結(jié)扎后3h，取靜脈血測定乳酸脫氫酶(LDH)和磷酸肌酸激酶(CPK)含量；然后迅速放血摘取心臟，NBT染色法稱重并計算心室梗塞范圍。用配對T檢驗對模型組給藥前后差異進行顯著性比較，用組間T檢驗對各試驗組間結(jié)扎LAD增減比率(按公式2計算)進行顯著性比較，結(jié)果見表3。公式l:左心室心肌耗氧量MV02=Kl(BPsXHR)+K2〔(0.8BPs+0.2BPd)XHRXSV/BW〕+1.43MV02二左心室心肌耗氧量(ml02/min/100g),Kl=4.08X10-4，K2=3.25X1(H，BPs二收縮壓(mmHh),BPc^舒張壓(mmHh)HR二心率(beat/min)，SV-每搏輸出量(ml/beat)，BW二體重(kg)公式2:結(jié)扎LAD增減比率=增減比率給藥后數(shù)值一給藥前數(shù)值給藥前數(shù)值結(jié)扎LAD增減比率-(給藥后數(shù)值一給藥前數(shù)值〕/給藥前數(shù)值表1不同劑量的淫羊藿甙注射液對實驗性犬腦缺血的影響GT土SD)組別n(只)全腦重(g)腦缺血區(qū)重(g)腦缺血區(qū)重/全腦重(％)對照組1069.63±3.6018.90±4.8227.14±6.92燈盞花素注射液1056.96±6.9213.64±4.92+23.96±4.73+銀杏葉注射液1058.99±6.9212.98±3.92+22.01±6.63+淫羊藿甙40mg1069.69±3.209.63±2.38++13.81±4.39++淫羊藿甙20mg1058.69±6.2910.50±3.09++17.89±6.09++淫羊藿甙10mg1059.69±3.8211.68±2.09+19.56±2.69++注各給藥組與對照組比較+/><0.05;.表1結(jié)果顯示，對照組缺血區(qū)重/全腦重(％)為29.30±6.92，說明動物模型造模成功。各給藥組均可不一同程度地降低犬大腦中動脈結(jié)扎后的腦組織缺血區(qū)重量(尸O.Ol和戶<0.05)，其中以淫羊藿甙注射液高，中劑量組(戶O.01)效果最好，淫羊藿甙注射液低劑量組效果次之，效果均優(yōu)于市售燈盞花素注射液及銀杏注射液。表2:不同劑量的淫羊藿甙注射液對犬大腦中動脈血流速度的影響(義土SP)組別n(只)血流速度(cm/s，X士SD)給藥前峰值流速給藥前平均流速給藥后15min峰值流速給藥后15min平均流速對照組108.38±1.315.卯±1,028.82±4.936.12±1.68燈盞花素注射液107.32±3.965.96±2.9611.96±3.69+8.97±3.63+銀杏葉注射液107.36±4.395.02±2.8712.69±5.94+8.69±3.02+淫羊藿甙40mg107.39±3.245.29±1.2313.93±7,06++12.37±2.59++淫羊藿甙20mg108.03±4.125.44±1.2213.07±4.38++11.18±1.29++淫羊藿甙10mg106.92±3.865.20±2.1111.73±4.81+注各給藥組與對照組比較+尸<0.05;++尸<0.01.表2結(jié)果顯示，各給藥組均可明顯和顯著升高犬大腦中動脈平均血流速度，(P0.05和PO.Ol)，其中以淫羊藿甙注射液高，中劑量組效果最好(PO.Ol)，淫羊藿甙注射液低劑量組效果次之，且效果均優(yōu)于市售燈盞花素注射液及銀杏注射液。表3對麻醉犬結(jié)扎LAD心肌缺血酶學指標及左心室梗塞范圍的影響(文士SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>注n=10;與生理鹽水組比較+尸<0.05;++尸<0.01'由表三可見，各給藥組均可使左心室梗塞范圍明顯縮小(P<0.05)，顯著和明顯降低模型動物的LDH和CPK(P〈0.01和PO.05)，其中以淫羊藿式注射液高，中劑量組效果最好(PO.Ol)，淫羊藿甙注射液低劑量組效果次之(P<0.05)，且效果均優(yōu)于市售燈盞花素注射液及銀杏注射液。權(quán)利要求1.一種淫羊藿甙注射劑，其特征在于它是由淫羊藿甙∶非水溶劑按重量/體積比例為1∶5-30，溶解后加入適量注射用水和/或注射劑用輔料制備而成的靜脈注射劑；所述的淫羊藿甙的純度為90％-99％；所述的非水溶劑是吐溫-80、聚乙二醇(200，400)、乙醇、丙二醇、甘油、中的一種或幾種的混合溶劑；所述的注射劑用輔料是填充劑，選自甘露醇、乳糖中的一種；所述的靜脈注射劑，包括水針，輸液和凍干粉針劑，每支注射液中含淫羊藿甙30-100mg。2.如權(quán)利要求1的一種淫羊藿甙注射液，其特征在于它是由淫羊藿甙非水溶劑按重量/體積比例為h8—20，溶解后加入適量注射用水和注射劑用輔料制備而成。3.如權(quán)利要求1的一種淫羊藿甙注射液，其特征在于其制備方法按以下步驟進行(1)取適量淫羊藿甙，在4(K80。C溶于適量體積的非水溶劑中；(2)加入適量注射用水溶解，加或不加注射劑用輔料，補足注射用水；(3)用滅菌垂熔玻璃漏斗或其他配制注射液用過濾方法過濾，灌封、滅菌后搖動，即得；(4)將加注射劑用輔料的注射液經(jīng)除菌過濾，灌注于西林瓶，每瓶l-2ml，蓋塞，冷凍干燥，壓塞即得凍干粉針劑。4.如權(quán)利要求1，2的一種淫羊藿甙注射劑，其特征在于其在制備治療心腦血管疾病的藥物中的應用。全文摘要本發(fā)明公開了一種淫羊藿甙注射劑及其制備方法和應用，羊藿甙注射劑是由淫羊藿甙非水溶劑按重量/體積比例為1∶5-30，溶解后加入適量注射用水和/或注射劑用輔料制備而成的靜脈注射劑。藥劑學研究表明淫羊藿甙注射劑在加速穩(wěn)定性試驗條件下很穩(wěn)定，連續(xù)應用淫羊藿甙注射液未見有血管刺激性，不引起動物的過敏反應，不產(chǎn)生溶血反應和凝集反應，對心腦血管疾病有很好的藥理效果。文檔編號A61P9/00GK101601644SQ200810111588公開日2009年12月16日申請日期2008年6月10日優(yōu)先權(quán)日2008年6月10日發(fā)明者張曉芳申請人:張曉芳