專利名稱：增強(qiáng)薏苡仁活性的工藝方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及到用微生物轉(zhuǎn)化技術(shù)處理中藥的方法。
背景技術(shù)：
薏苡仁是一種藥、食兩用的中藥，具有抗癌、抗病毒、調(diào)節(jié)免疫等諸多功效，可以開發(fā)成各種藥物、保健食品、美容化妝品等。1957年，日本中山宗春發(fā)現(xiàn)薏苡仁乙醇提取物有抗癌作用，1984年，沼田光弘經(jīng)研究認(rèn)為抗癌成分是棕櫚酸、硬脂酸、油酸、亞油酸。我國劉和眾發(fā)明了一種用索氏抽提法從薏苡仁中提取抗癌物質(zhì)中性脂的方法(91106269.6)，還申請了薏苡仁提取物在制備治療紅斑角化癥、鱗狀毛囊角化癥、紅皮癥藥物中的應(yīng)用(ZL93115904.0)，李大鵬(申請?zhí)?5115453.2)申請了薏苡仁的新醫(yī)療用途，即薏苡仁在制備具有抗艾滋病、止痛和保護(hù)胃粘膜作用的藥物中的應(yīng)用，李大鵬還申請了(申請?zhí)?2110839.7)一種用于配制抗癌靜脈乳劑用的提取中性油脂的方法。鄒遠(yuǎn)東(申請?zhí)?1141627.0)通過利用蛋白酶處理來增加人對薏苡有效成分的吸收，增加其抗癌活性。
采取某種工藝提高和增加薏苡仁的藥用活性成分再進(jìn)行提取，目前尚無有效的方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服已有技術(shù)的缺陷，提供一種通過微生物途徑增強(qiáng)薏苡仁活性的工藝方法。
本發(fā)明所述的增強(qiáng)薏苡仁活性的工藝方法由以下步驟組成一、將薏苡仁粉碎，放入容器內(nèi)，加入水使其充分濕潤；二、將已培養(yǎng)好的根霉菌培養(yǎng)物或提取根霉菌所產(chǎn)生的酶，加入上述薏苡仁粉中，攪拌均勻，在40-100℃條件下轉(zhuǎn)化處理4-30小時(shí)。
上述的薏苡仁為市售的薏苡仁，既可以是薏苡仁，也可以是薏苡仁中特定的有效成分；所述的根霉菌可以為市售的根霉菌如根霉酒曲；所述的根霉菌培養(yǎng)物為根霉菌用常規(guī)方法培養(yǎng)而獲得的培養(yǎng)物；所述的根霉菌產(chǎn)生的酶為根霉菌按常規(guī)的微生物培養(yǎng)方法培養(yǎng)后，經(jīng)常規(guī)的酶提取方法獲得的酶。所述的根霉菌可直接采用市售的、連載體一起加入，也可以采用將根霉菌株接種于培養(yǎng)液中，培養(yǎng)好后，用其培養(yǎng)物，其用量為0.01％--10％，達(dá)到發(fā)酵目的即可。所述的提取根霉菌所產(chǎn)生的酶的用量為0.001％--0.1％。
在步驟一中加入水的目的主要是使薏苡仁粉充分濕潤，便于轉(zhuǎn)化，加入量一般為薏苡仁粉的1倍以上，如果加入量太大，會(huì)增加后處理的成本。
本發(fā)明所述的根霉菌含有豐富的酶系，如糖化酶、淀粉酶、脂肪酶等，不僅能降解薏苡仁的大分子如淀粉、蛋白質(zhì)、脂肪等，有利于薏苡仁的有效的成分吸收，而且還能利用根霉中的一些其它酶將薏苡仁中一些沒有活性的前體物質(zhì)轉(zhuǎn)化成有活性的成分。
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是通過微生物轉(zhuǎn)化的方法，將薏苡仁中的無活性或低活性的前體物質(zhì)轉(zhuǎn)化為高活性的有效成分，或?qū)⑥曹尤手杏绊懹行С煞轴尫诺拇蠓肿咏到?，從而有利于有效小分子成分的提取或吸收，從而達(dá)到提高薏苡仁的藥用有效成分的含量、種類和提取得率、或增強(qiáng)人體的吸收的效果，還可改善口感，提高薏苡仁作為藥品、食品等各種產(chǎn)品的開發(fā)價(jià)值。
為了更好地理解本發(fā)明，下面用實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行說明一、對本發(fā)明產(chǎn)物采用浸漬法分三次直接加入6倍量的95％的乙醇浸泡，減壓濃縮干燥，得膠狀提取物600g，膠狀物再經(jīng)丙酮提取后，可得含抗癌成分的油狀物200g，比未用該方法的薏苡仁按相同方法提取得到的油狀物總量增加30％以上。該產(chǎn)物經(jīng)MTT法抗癌細(xì)胞活性測定，對A549、BEL-7402、B16、SPC-A1、K562等癌細(xì)胞株有效，半數(shù)致死濃度為(IC50)為千分之一，主要有效成分為油酸、亞油酸及其酯類。
二、對本發(fā)明產(chǎn)物采用浸漬法分三次直接加入6倍量的20％的乙醇浸泡，過濾得濾液，將濾液濃縮至5-10升時(shí)，加入1.5倍量的95％乙醇，濾掉沉淀→回收濾液中的酒精，繼續(xù)蒸干，得黃褐色物質(zhì)500克，經(jīng)處理后該物質(zhì)的得率比未處理薏苡仁按同樣方法提取能增加得率200％以上，經(jīng)MTT法測定，該提取物對癌細(xì)胞具有明顯的活性。
具體實(shí)施方案實(shí)施例1取薏苡仁10千克→粉碎至能過40目篩，置于50升發(fā)酵容器→加入米根霉(Rhizopus oryzae)麥麩培養(yǎng)物500g→加入1.2倍量的水→攪拌均勻→80℃轉(zhuǎn)化處理4-12小時(shí)→本發(fā)明產(chǎn)物。
本發(fā)明產(chǎn)物為一中間產(chǎn)物，對其采用浸漬法分三次直接加入6倍量的95％的乙醇浸泡，減壓濃縮干燥，得膠狀提取物600g，膠狀物再經(jīng)丙酮提取后，可得含抗癌成分的油狀物200g，比未用該方法的薏苡仁按相同方法提取得到的油狀物總量增加30％以上。該產(chǎn)物經(jīng)MTT法抗癌細(xì)胞活性測定，對A549、BEL-7402、B16、SPC-A1、K562等癌細(xì)胞株有效，半數(shù)致死濃度為(IC50)為千分之一，主要有效成分為油酸、亞油酸及其酯類。
實(shí)施例2配制3％--10％薏苡仁粉水溶液→滅菌→接種純種米根霉，28℃條件搖瓶發(fā)酵3-7天→將含根霉菌的培養(yǎng)物按1％的重量比加入充分濕潤的薏苡粉中→攪拌均勻→60℃轉(zhuǎn)化處理12-25小時(shí)→本發(fā)明產(chǎn)物。后續(xù)處理同實(shí)施例1。
實(shí)施例3配制馬鈴薯液體培養(yǎng)基→滅菌→接種純種米根霉，28℃條件搖瓶發(fā)酵3-7天→加入2-10倍量的硫酸銨于培養(yǎng)基中，過濾沉淀，得根霉菌粗酶制劑→加入薏苡仁粉重量百分比0.05％根霉菌酶于薏苡仁粉中→加入1倍量的水→攪拌均勻→60℃轉(zhuǎn)化處理6-16小時(shí)→本發(fā)明產(chǎn)物。
本發(fā)明產(chǎn)物為一中間產(chǎn)物，對其采用浸漬法分三次直接加入6倍量的20％的乙醇浸泡，過濾得濾液，將濾液濃縮至5-10升時(shí)，加入1.5倍量的95％乙醇，濾掉沉淀→回收濾液中的酒精，繼續(xù)蒸干，得黃褐色物質(zhì)500克，經(jīng)處理后該物質(zhì)的得率比未處理薏苡仁按同樣方法提取能增加得率200％以上，經(jīng)MTT法測定，該提取物對癌細(xì)胞具有明顯的活性。
上述兩種方法的所得的油狀物和黃褐色水溶性成分經(jīng)處理后，可用于抗癌藥物的制備或功能食品的開發(fā)。
權(quán)利要求
1.一種增強(qiáng)薏苡仁活性的工藝方法，其特征在于由以下步驟組成一、將薏苡仁粉碎，放入容器內(nèi)，加入水使其充分濕潤；二、將已培養(yǎng)好的根霉菌培養(yǎng)物或提取根霉菌所產(chǎn)生的酶，加入上述薏苡仁粉中，攪拌均勻，在40-100℃條件下轉(zhuǎn)化處理4-30小時(shí)。
2.按照權(quán)利要求1所述的增強(qiáng)薏苡仁活性的工藝方法，其特征在于步驟二中所加入的已培養(yǎng)好的根霉菌培養(yǎng)物的重量百分比為0.01％--10％。
3.按照權(quán)利要求1所述的增強(qiáng)薏苡仁活性的工藝方法，其特征在于步驟二中所加入的提取根霉菌所產(chǎn)生的酶的重量百分比為0.001％--0.1％。
全文摘要
本發(fā)明涉及到用微生物轉(zhuǎn)化技術(shù)處理中藥的方法。本發(fā)明所述方法由以下步驟組成一.將薏苡仁粉碎，放入容器內(nèi)，加入水使其充分濕潤；二.將已培養(yǎng)好的根霉菌培養(yǎng)物或提取根霉菌所產(chǎn)生的酶，加入上述薏苡仁粉中，攪拌均勻，在40－100℃條件下發(fā)酵處理4－30小時(shí)。本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是通過微生物轉(zhuǎn)化的方法，將薏苡仁中的無活性或低活性的前體物質(zhì)轉(zhuǎn)化為高活性的有效成分，或?qū)⑥曹尤手杏绊懹行С煞轴尫诺拇蠓肿咏到猓瑥亩欣谟行》肿映煞值奶崛』蛭?，達(dá)到提高薏苡仁的藥用有效成分的含量、種類和提取得率的效果，提高薏苡仁作為藥品、食品等各種產(chǎn)品的開發(fā)價(jià)值。
文檔編號A61P37/00GK1634372SQ20041007956
公開日2005年7月6日 申請日期2004年11月17日 優(yōu)先權(quán)日2004年11月17日
發(fā)明者王興紅 申請人:云南大學(xué)