專利名稱：從純中藥制劑中提取具有改善急性心肌供血不足抗缺氧抗心肌梗塞原料藥的方法
技術領域：
本發(fā)明涉及純中藥制劑的萃取有效成份的方法。其商品名為“三參通脈”。
背景技術：
在本發(fā)明問世之前治療心肌供血不足的藥物較多，如復方丹參片、地奧心血康等針對抗缺氧和抗心肌梗塞作用的藥物，再提高一個層次的療效或比速效救心丸更快的藥物不多見。

發(fā)明內(nèi)容技術方案包括處方新工藝、工藝流程圖及各種毒理、藥理綜述。
技術解決方案是本發(fā)明的目的公開一種在純中藥藥劑中提取具有改善急性心肌供血不足抗缺氧抗心肌梗塞藥物的方法及提供一種高純度的原料藥。
將丹參12％、三七3％、川芎9％、紅花8％、牛膝8％、人參12％、黃芪12％、五味子7％、淫羊藿10％、葛根7％、何首烏7％、肉桂5％。將丹參、三七、川芎、紅花、牛膝、人參、黃芪、五味子、淫羊藿、葛根、何首烏、肉桂植物浸入二氧化碳中，當二氧化碳處于臨界壓力、臨界溫度時，利用物理性質(zhì)介于液體與氣體之間的雙重特性，將丹參、三七、川芎、紅花、牛膝、人參、黃芪、五味子、淫羊藿、葛根、何首烏、肉桂植物的揮發(fā)油和其它成分萃取、溶解在二氧化碳中，再與氣態(tài)二氧化碳分離，從而獲取純化制品。在使用二氧化碳超臨界萃取技術的同時，本發(fā)明將丹參、三七、川芎、紅花、牛膝、人參、黃芪、五味子、淫羊藿、葛根、何首烏、肉桂植物的其它成分，用65％乙醇提取出來后，通過大孔樹脂柱，用大孔樹脂吸附，再用乙醇將吸附在大孔樹脂上的成分洗脫，再次將植物制品分離純化，噴霧干燥，用氣相層析法進行指痕圖譜成分定量測定后，制成工藝和成分穩(wěn)定的標準原料藥。
藥理實驗表明，本發(fā)明的方法能顯著延長小鼠存活時間，延長小鼠存活時間呈劑量依賴關系。大劑量復方制品與模型對照組比較，均能明顯延長小鼠存活時間80％和136.8％。大劑量復方制品組使豚鼠ST段上移，不論自身對照或組間對照均有顯著性差異。復方制品小、大劑量組與生理鹽水組比較，對豚鼠T波增高均有顯著抑制。結(jié)扎貓的冠脈后，心電圖立即出現(xiàn)各種心肌缺血異常，結(jié)扎3小時后，生理鹽水組梗塞心肌重量占心室肌總重量的16.48±2.98％。復方制品小、大劑量組分別為9.34±1.61％和10.99±1.51％，與生理鹽水組比較均有顯著性差異。復方制品大劑量組增顯著增加貓冠脈血流量，增加離體兔心冠脈流量，且隨著劑量的增加，作用增強，給藥30分鐘內(nèi)流量增加最明顯，復方制品小、中、大三個劑量組對離體兔的心率均呈減慢作用，其中大劑量組作用最明顯。復方制品使離體兔心收縮振幅顯著減少，同時張力增加，三個劑量組呈劑量依賴關系。
為了驗證和重復本發(fā)明增加冠脈血流量制品的藥理活性，對100例心肌缺血，并服用硝酸甘油不明顯的患者，按照國際心臟病學會，及世界衛(wèi)生組織臨床命名標準化聯(lián)合專題組制定的“缺血性心臟病的命名，及診斷標準”，進行臨床觀察和安全性考查。在觀察期間，未發(fā)現(xiàn)毒副作用及不良反應，治療后，患者血、尿常規(guī)及肝功能等指標亦無異常改變。本發(fā)明進行100例臨床觀察，對服用不同劑量硝酸甘油患者的心絞痛的顯效率和總有效率分別為44％、87％，其療效明顯優(yōu)于對照藥硝酸甘油，對心電圖的總有效率達68％，與硝酸甘油相近，但其顯效率明顯高于硝酸甘油，說明該藥對心電圖的療效仍好于硝酸甘油對照組。
復方制劑中提取純中藥制劑中提取具有改善急性心肌供血不足抗缺氧抗心肌梗塞藥物的方法采用先進的大孔樹脂吸附有效成份并使用氣相指痕光譜定量，保證藥品的穩(wěn)定性和高質(zhì)量。
本發(fā)明的創(chuàng)造性通過臨床毒理、藥理來體現(xiàn)，下面僅提供部分資料，實審時再提供更多的資料。


圖1本發(fā)明的工藝流程圖。
圖2復方制品對腦垂體后葉素所致豚鼠心電圖的對抗作用。
圖3結(jié)扎貓冠脈前降支后的心電圖。
圖4復方制品對離體免心的作用。
其工藝流程描述如下(1)本發(fā)明處方丹參120g、三七30g、川芎90g、紅花80g、牛膝80g、人參120g、黃芪120g、五味子70g、淫羊藿100g、葛根70g、何首烏70g、肉桂50g。
(2)溶劑超臨界萃取溶劑為二氧化碳其余為65％乙醇。
(3)揮發(fā)油棕色油狀物。
提取液棕色液體。
(4)物理參數(shù)超臨界萃取的壓力為1～10MPa，溫度20-50℃；65％乙醇回流提取的壓力為常壓，溫度為85℃；減壓回收的壓力為真空度0.02～0.04MPa，溫度為80-85℃；樹脂吸附的壓力為常壓，溫度為常溫；噴霧干燥的壓力為常壓，溫度為80-85℃。
(5)操作過程①12味藥材破碎成直徑1～2cm的小塊，然后用二氧化碳超臨界萃取設備提取揮發(fā)油，得揮發(fā)油(1)。
②提取揮發(fā)油后的藥材，加3倍量65％乙醇回流提取3小時，濾過，得濾液(2)；藥渣加2倍量65％乙醇回流提取2小時，濾過，得濾液(3)；藥渣再加1倍量65％乙醇回流提取1小時，濾過，得濾液(4)。
③合并濾液(2)、(3)、(4)，靜置，取上清液，得提取液(5)。
④減壓回收提取液(5)，得濃縮液(6)。
⑤濃縮液(6)中加1倍量水，常溫靜置6小時，吸取上清液用大孔樹脂進行吸附。
⑥用65％乙醇洗脫吸附在樹脂上的化學成分于乙醇中，得洗脫液(7)。
⑦將洗脫(7)進行噴霧干燥，得藥粉，再加入揮發(fā)油(1)，即得。
具體實施方式
丹參120g、三七30g、川芎90g、紅花80g、牛膝80g、人參120g、黃芪120g、五味子70g、淫羊藿100g、葛根70g、何首烏70g、肉桂50g。
將12種植物復方原料，用超臨界流體二氧化碳萃取劑，萃取12種植物揮發(fā)油成分，再將氣態(tài)二氧化碳萃取劑與植物成份分離，精餾后備用，將二氧化碳超臨界萃取后的12種植物復方原料，每100kg分別加入300kg、200kg、100kg、65％的乙醇，在85℃條件下，回流提取3小時，2小時，1小時，合并乙醇提取的濾液，在85℃條件下，回收乙醇，并將濾液濃縮，將每100kg濃縮濾液，加入100kg水，在常溫條件下，靜置6小時，吸附上清液，通過大孔樹脂填充的柱子，用大孔樹脂吸附，用65％的乙醇將吸附在大孔樹脂上的成分洗脫至乙醇，在85℃條件下，噴霧干燥，用氣相層析測定儀器，進行指痕圖譜成分定量測定后，制成標準原料藥。
本發(fā)明的創(chuàng)造性通過毒理、藥理臨床來體現(xiàn)，實審時補充提供，現(xiàn)簡介如下從純中藥制劑中提取具有改善急性心肌供血不足抗缺氧、抗心肌梗塞原料藥的方法藥理作用丹參、三七、川芎、紅花、牛膝、人參、黃芪、五味子、淫羊藿、葛根、何首烏、肉桂植物復方制品灌胃給藥，能顯著延長小鼠耐缺氧存活時間，對異丙腎上腺素引起的心臟耗氧量增加的小鼠，其抗缺氧作用尤為明顯。本品十二指腸給藥，能顯著對抗腦垂體后葉素誘發(fā)的豚鼠ST段上移和T波抬高，具有抗急性心肌缺血作用；對麻醉開胸貓能顯著縮小結(jié)扎冠脈前降支所致的心肌梗塞范圍，增加冠脈血流量，但對血壓和心率無明顯影響。本品對離體兔心有增加冠脈流量、抑制心肌收縮力和減慢心率作用。
試驗目的 根據(jù)本方劑的功能主治，觀察復方制品對急性心肌缺血，結(jié)扎冠脈所致的心肌梗塞范圍，在體或離體冠脈血流量及缺氧作用的影響。
一、抗缺氧作用受試藥物丹參、三七、川芎、紅花、牛膝、人參、黃芪、五味子、淫羊藿、葛根、何首烏、肉桂植物復方制品臨用前，用蒸餾水配成0.2g/ml和0.6g/ml濃度備用。
硫酸異丙腎上腺注射液0.5mg/ml，批號860804。
動物雄性小白鼠體重20±2g.每組10只。
1.對小鼠常壓耐缺氧的影響方法取健康的小鼠50只，按體重隨機分為5組。空白對照組灌胃給予生理鹽水；復方制品小、大劑量組分別灌服7.2g/kg和6g/kg；每天一次，連續(xù)7天，給藥容積均為0.36ml/10g。于末次給藥后45min，分別將小鼠放入容積相等的250ml廣口瓶內(nèi)密閉，瓶內(nèi)放入鈉石灰10g，瓶塞涂勻凡士林。以呼吸停止為指標，記錄動物的存活時間，各給藥組與空白對照組t檢驗，評價藥物的作用。
結(jié)果如表1所示，給藥組能顯著延長小鼠存活時間(P＜0.05～0.001)，復方制品延長小鼠存活時間呈劑量依賴關系。
2.對異丙腎上腺素性小鼠耐缺氧的影響方法取健康的小鼠60只，按體重隨機分為空白對照、模型對照、復方制品小、大劑量、空白對照和模型對照組灌服生理鹽水，其余各組給藥途徑，劑量、容積和給藥天數(shù)，均與上述常壓耐缺氧實驗相同。于末次給藥后15min，除空白對照組腹腔注射生理鹽水外，其余各組腹腔注射異丙腎上腺素溶液10mg/kg，30min后，按上述方法分別將小鼠放入密閉的廣口瓶內(nèi)，觀察小鼠的存活時間。
結(jié)果如表2所示，模型對照組與空白對照組比較，顯著縮短小鼠存活時間(P＜0.001)，提示異丙腎上腺素引起的心臟耗氧量增加的小鼠，明顯降低其耐缺氧能力。復方制品小、大劑量組與模型對照組比較，均能明顯延長小鼠存活時間(P＜0.001)，分別延長80％和136.8％。
二、復方制品對腦垂體后葉素所致豚鼠心肌缺血的影響受試藥物丹參、三七、川芎、紅花、牛膝、人參、黃芪、五味子、淫羊藿、葛根、何首烏、肉桂植物復方制品用蒸餾水稀釋配成0.33g/ml溶液備用。
垂體后葉素注射液10μ/ml，臨用前，用生理鹽水稀釋成1μ/ml備用。
動物豚鼠體重245-285g，雌雄兼用。
儀器雙道心電圖機，C2a型，意大利產(chǎn)；慢速勻速電動注射器，F(xiàn)135型，英國Palmer廠產(chǎn)。
方法向豚鼠腹腔注射烏拉坦(1.0～1.2g/kg)麻醉后，剝離一側(cè)頸靜脈，插入一塑料管，另一端聯(lián)接于慢速電動注射器，以0.02ml/min勻速向靜脈內(nèi)持續(xù)注入生理鹽水，以防血凝。將針狀電極插入豚鼠四肢及V3皮下位置上，標定電壓為1cm＝1mV。待心電圖穩(wěn)定后，從頸靜脈注入垂體后葉素0.5μ/kg，立即將電動注射器注射速度調(diào)至0.6ml/min，持續(xù)1min，然后將速度調(diào)回0.02ml/min。垂體后葉素注入后，用心電示波器觀察心電圖變化，并隨時記錄之。然后，將豚鼠隨機分組，于注入垂體后葉素后20min，分別由十二指腸給予如下藥物(1)對照組注入生理鹽水；(2)復方制品小、大劑量組分別注入2.0、6.0g/kg；給藥容積均為0.6ml/100g。給予上述藥物40min時，即給予垂體后葉素1h時，重復注入同劑量的垂體后葉素，記錄心電圖。比較兩次給予垂體后葉素后V3心電圖T波和ST段的差異變化，用t檢驗評價藥物的抗心肌缺血作用。
結(jié)果1.對ST段上移的對抗作用生理鹽水組前后兩次給予垂體后葉素自身對照，ST段的變化無顯著性差異(P＞0.05)。小劑量復方制品組給藥后ST段上移明顯受到抑制(P＜0.01)，但與生理鹽水組比較，沒有顯著性差異(P＞0.05)。大劑量復方制品組給藥后ST段上移，不論自身對照或組間對照均有顯著性差異(P＜0.01)(表3、圖2)。
2.對T波抬高的對抗作用生理鹽水組，前后兩次給予垂體后葉素自身對照，T波變化無顯著性差異(P＞0.05)。復方制品小、大劑量組與生理鹽水組比較，T波增高均被顯著抑制(P＜0.01)。(表3、圖2)三、復方制品對結(jié)扎貓冠脈所致心肌梗塞的影響受試藥物及試劑1.丹參、三七、川芎、紅花、牛膝、人參、黃芪、五味子、淫羊藿、葛根、何首烏、肉桂植物復方制品配制同實驗二。
2.氯化硝基四氮唑蘭，批號900103。
動物雜種貓體重2.2～4.0kg，雌雄兼用。
儀器SJ-42多導生理記錄儀方法將貓用戊巴比妥鈉(35mg/kg)麻醉后，切開氣管，連接人工呼吸機維持呼吸。四肢皮下插入心電圖電極，連于多導生理記錄儀。將貓隨機分組，描記正常心電圖后，經(jīng)十二指腸分別注入如下藥物。(1)對照組注入生理鹽水；(2)復方制品小、大劑量組分別注入1g/kg和3g/kg；給藥容積均為0.3ml/100g。給藥后，即行開胸，暴露心臟，剪開心包，將心包膜縫合于胸壁開口處，細心剝離冠脈前降支左分支，并于給藥后30min，用絲線結(jié)扎左分支根部，關閉胸腔。隨時描記心電圖。結(jié)扎后3h，處死貓，摘取心臟，剃除心房及心室脂肪組織，只保留心室，用生理鹽水洗凈后，橫斷剪成0.3～0.4cm厚園形心肌片6片，濾紙吸干，放入用磷酸緩沖液(pH7.4)配制的0.1％氯化硝基四氮唑蘭溶液中，37℃溫育15min。然后將未染色心肌與染成紫蘭色心肌用手術剪分開，分別稱重。以未染色心室肌重占全心室肌重的％表示，進行組間t檢驗，評價藥物的抗心肌梗塞作用。
結(jié)果如圖3所示，結(jié)扎冠脈后心電圖立即出現(xiàn)各種心肌缺血異常心電圖改變。結(jié)扎后3h，生理鹽水組梗塞心肌重量占心室肌總重量的16.48±2.98％。復方制品小、大劑量組分別為9.34±1.61％及10.99±1.51％，與生理鹽水組比較均有顯著性差異(P＜0.01)(表4)四、復方制品對麻醉貓血壓、心率及冠脈血流量的影響受試藥物丹參、三七、川芎、紅花、牛膝、人參、黃芪、五味子、淫羊藿、葛根、何首烏、肉桂植物復方制品配制同實驗二。
動物雜種貓體重2.8～4.2kg，雌雄兼用。
儀器多導生理記錄儀，ST-42型，激光多普勒流量計，PF2型，瑞典產(chǎn)。小動物人工呼吸器，英國Palmer廠產(chǎn)。
方法貓腹腔注射戊巴比妥鈉(35mg/kg)麻醉后，在人工呼吸條件下沿胸骨左緣剪斷2～5肋骨，拉開胸腔，暴露心臟。剪開心包，將剪開的心包膜縫合于胸壁開口處。將針狀心電圖電極插于四肢皮下，通過描記心電圖計數(shù)心率。把充滿含肝素生理鹽水的膠管的動脈套管插入股動脈，膠管的另一端連接壓力換能器，描記股動脈血壓。待血壓及心電圖穩(wěn)定后，將流量計探頭放于左冠狀動脈前降支下1/3固定的同一部位，測其血流量。測試條件20℃，4HRZ，0.25S。取健康的貓隨機分為對照組、復方制品小、大劑量組各組給藥劑量、容積和給藥途徑與實驗三相同，從十二指腸分別注入藥物后15、30、45和60min，描記血壓、心電圖曲線，同時并測定冠脈血流量，給藥各組與生理鹽水組之間進行t檢驗，評價藥物作用。
結(jié)果1.對心率的影響 如表5所示，各組給藥前后心電圖基本無變化，從心電圖上反映的心率各組間亦無顯著性差異(P＞0.05)，提示復方制品對麻醉貓心率無明顯影響。
2.對血壓的影響 給藥后各組血壓隨著時間的推移，均逐漸略有下降，但各組各時間內(nèi)與給藥前比較均無顯著性差異，給藥各組與生理鹽水組比較亦無顯著性差異(P＞0.05)，提示復方制品對麻醉貓血壓無明顯影響(表6)。
3.對冠脈血流量的影響 由表7可見，復方制品小劑量組與生理鹽水組比較，冠脈血流量雖有所增加，但無顯著性差異(P＞0.05)。復方制品大劑量組能顯著增加冠脈血流量23.4～27.0％(P＜0.05～0.01)。
五、復方制品對離體兔心的影響受試藥物 丹參、三七、川芎、紅花、牛膝、人參、黃芪、五味子、淫羊藿、葛根、何首烏、肉桂植物復方制品使用時用濾紙濾過兩次。用蒸餾水稀釋配成100mg/ml和333.3mg/ml溶液備用。
動物 家兔體重1.8～2.4kg，雌雄兼用。
儀器 二道生理記錄儀，LMS-2A型，離體心臟灌注裝置，英國Palmer廠產(chǎn)。
方法 取健康家兔隨機分組，每組8只。擊頭致昏后，立即摘取心臟，按Langendorff法用95％O2+5％CO2的Locke溶液灌注離體兔心，溫度37℃±0.5℃。心尖部用兔心夾夾住后，通過絲線連接于拉力換能器(JH-1B-100)上，用二道生理記錄儀描記心肌收縮振幅、心率變化曲線。待心臟搏動穩(wěn)定后，測定心臟30s內(nèi)的流出量、心率和收縮振幅，為給藥前的正常值。然后，向與心臟連接的膠管內(nèi)分別注入下列藥物(1)陰性對照組注入生理鹽水；(2)復方制品組分別注入30mg、100mg或300mg；給藥容積均為0.3ml。給藥后，立即收取30s內(nèi)流量，并記錄心率及收縮振幅。比較給藥前、后上述三項指標值有無顯著性差異，用t檢驗評價藥物的作用。
結(jié)果1.對離體兔心冠脈流量的影響 復方制品有顯著增加冠脈流量作用，且隨著劑量的增加，作用增強。給藥后30s內(nèi)流量增加最明顯，與給藥前比較，小、中、大三個劑量組分別平均增加1.2、2.0、5.3ml(P＜0.01)。生理鹽水對冠脈流量無影響(表8、圖4)2.對離體兔心心率的影響 復方制品的三個劑量組對離體兔心的心率均呈減慢(P＜0.01)，其中大劑量組作用最明顯(表9)3.對離體兔心心肌收縮的影響 生理鹽水對離體兔心收縮振幅無影響。其他各給藥組均使收縮振幅顯著減小(P＜0.01)，同時張力增加，復方制品三個劑量組呈劑量依賴關系。(表10、圖4)結(jié)論1.小鼠灌胃給予復方制品7.1、21.6g/kg·d，連續(xù)給藥7天，能顯著延長小鼠耐缺氧的存活時間；對異丙腎上腺素引起心臟耗氧量增加的小鼠，其抗缺氧作用尤強。
2.從豚鼠十二指腸注入復方制品2.0、6.0g/kg，能顯著抑制垂體后葉素誘發(fā)的ST段上移和T波增高，并呈劑量依賴關系，提示制品具有抗急性心肌缺血作用。
3.給麻醉開胸貓十二指腸注入復方制品1.0、3.0g/kg，顯著縮小結(jié)扎冠脈前降支所致的心肌梗塞范圍，提示制品具有抗心肌梗塞作用。
4.給麻醉開胸貓十二指腸注入上述劑量的復方制品能顯著增加冠脈血流量，持續(xù)1小時以上，但對血壓和心率無明顯影響。
5.復方制品對離體兔心能顯著增加冠脈流量，減慢心率，抑制心肌收縮力。
表1 復方制品對小鼠常壓耐缺氧的影響
與生理鹽水比較*P＜0.05、**P＜0.01、***P＜0.001表2 復方制品對異丙腎上腺素性小鼠耐缺氧的影響
與模型對照比較*P＜0.05、**P＜0.01、***P＜0.001與空白對照比較+++P＜0.001
表3復方制品對腦垂體后葉素所致豚鼠心電圖ST-T波的影響(X±SD)
與給藥前比較，*P＞0.05、**P＜0.05、***P＜0.01與生理鹽水組比較，△P＞0.05、△△P＜0.05、△△△P＜0.01·正常、給藥前、給藥后A.生理鹽水組(6.0ml/kg)B.復方制品小劑量組(2.0ml/kg)C.復方制品大劑量組(6.0ml/kg)·注A正常心電圖(結(jié)扎前)B、C、D結(jié)扎后心電圖表4復方制品對結(jié)扎貓冠脈所致心肌梗塞的影響(X±SD)
表5復方制品對麻醉開胸貓心率的影響(X±SD)
表6復方制品對麻醉開胸貓頸動脈血壓的影響
表7復方制品對麻醉開胸貓冠脈血流量的影響
與生理鹽水比較*P＜0.01、**P＜0.01；與給藥前比較，( )增減冠脈血流量％·A.生理鹽水、B.復方制品小劑量、C.復方制品中劑量、D.復方制品大劑量表8復方制品對離體兔心冠脈流量的影響(X±SD)
與給藥前比較，**P＜0.01
表9復方制品對離體兔心心率的影響
與給藥前比較，**P＜0.01表10復方制品對離體兔心收縮振幅的影響
與給藥前比較，**P＜0.01復方制品臨床觀察丹參、三七、川芎、紅花、牛膝、人參、黃芪、五味子、淫羊藿、葛根、何首烏、肉桂植物復方增加冠狀血流量的制品(觀察組)，該制品具改善心肌供血不足，預防和輔助治療胸痹、冠心病引起的胸悶、心悸、氣短、喘息等癥。對100例冠心病心絞痛服用擴冠藥硝酸甘油，而胸痛、心悸、氣短等癥狀改善不明顯的患者進行了臨床療效觀察和安全性考查。
根據(jù)國際心臟病學會和協(xié)會及世界衛(wèi)生組織臨床命名標準化聯(lián)合專題組制定的《缺血性心臟病的命名及診斷標準》，制定如下診斷標準勞累性心絞痛系由于運動或其他增加心肌耗氧量的情況下，誘發(fā)的短暫胸痛發(fā)作，休息或舌下含服硝酸甘油后疼痛常可迅速消失。
(1)初發(fā)型勞累性心絞痛患者過去未發(fā)生過心絞痛，現(xiàn)發(fā)病在一個月以內(nèi)者；或有過穩(wěn)定型心絞痛已數(shù)月不發(fā)生心絞痛而又發(fā)生心絞痛者。
(2)穩(wěn)定型勞累性心絞痛患者每日、每周疼痛發(fā)作的次數(shù)及誘發(fā)疼痛的勞累和情緒因素大致相同，疼痛的性質(zhì)、部位亦無大變化。疼痛持續(xù)時間多在3～5分鐘，不超過10分鐘，病程在一個月以上者。
心電圖療效評定標準1.顯效心電圖恢復到“大致正常”或達到“正常心電圖”。
2.有效S-T段降低，以治療后回升0.05mV以上，但未達正常水平，在主要導聯(lián)倒置T波變淺(達25％以上)或T波由平坦變直立，房室或室內(nèi)傳導阻滯改善者。
3.無效心電圖基本與治療前相同。
4.加重S-T段較治療前降低0.05mV以上，在主要導聯(lián)倒置T波加深(達25％以上)，或直立T波變平坦、平坦T波變倒置，以及出現(xiàn)異位心律、房室傳導阻滯或室內(nèi)傳導阻滯。
觀察結(jié)果(一)觀察組與對照組心絞痛療效比較從表11可見，觀察組心絞痛的顯效率、總有效率分別為44％、87％，而對照組對心絞痛的顯效率、總有效率則分別為26.7％、65％。經(jīng)X2檢驗，其顯效率有顯著性差異，P＜0.05；總有效率有非常顯著差異，P＜0.001，明顯優(yōu)于對照組藥物。
表11兩組心絞痛療效比較
注*P＜0.05、***P＜0.001(二)觀察組與對照組心電圖療效比較從表12可見，觀察組心電圖的顯效率和總有效率分別為28％、68％，而對照組分別為5％、61.7％。經(jīng)X2檢驗，其顯效率有非常顯著性差異，P＜0.001；而總有效率無顯著性差異，P＞0.05。
表12兩組心電圖療效比較
注***P＜0.001(三)觀察組與對照組硝酸甘油減停率比較從表13可見，觀察組硝酸甘油高劑量組減停率為74.1％，中劑量組為92.3％，低劑量組為95.7％，說明觀察組藥物對服用高、中、低不同劑量硝酸甘油的患者有較為明顯的減停作用，但三種劑量之間經(jīng)統(tǒng)計學處理無顯著性差異，P＞0.05。與對照組相同劑量減停率比較，亦無顯著性差異，P＞0.05。提示兩組對服用不同劑量硝酸甘油的減停率相近。
表13兩組服用不同劑量硝酸甘油減停率比較
(四)觀察組治療前后血脂測值比較從表14可見，觀察組患者治療前血漿總膽固醇，甘油三脂平均測值與治療后平均測值比較，均有非常顯著性差異，P＜0.01或P＜0.001。提示觀察組藥物有降低血漿總膽固醇和甘油三脂的作用。
表14觀察組治療前后血脂測值(X±SD)比較
注**P＜0.01、***P＜0.001
(五)觀察組治療前后血壓測值的比較從表15可見，觀察組治療前后收縮壓，經(jīng)T檢驗，有顯著性差異，P＜0.05，而舒張壓，無顯著性差異，P＞0.05。提示觀察組藥物有一定的調(diào)節(jié)收縮壓的作用。
表15觀察組治療前后血壓測值(X±SD)比較
注**P＜0.05(六)安全性、毒副作用及不良反應觀察組藥物療程期間未發(fā)現(xiàn)毒副作用及不良反應。治療后患者血、尿常規(guī)及肝功能等指標亦無異常改變，說明使用該藥是安全可靠的。
(七)討論1.對12種植物復方增加冠脈血流量制品進行100例臨床觀察對服用不同劑量硝酸甘油患者的心絞痛的顯效率和總有效率分別為44％、87％，其療效明顯優(yōu)于對照組藥物。對心電圖的總有效率達68％，與對照組相近，但其顯效率明顯高于對照組，說明該藥對心電圖的療效仍好于對照組。
2.復方制品能明顯改善心絞痛以外的其他臨床癥狀，心悸不寧和氣短的療效優(yōu)于對照組。
3.復方制品能使患者明顯減少服用硝酸甘油的劑量，但高、中、低劑量組之間沒有明顯差別，并與對照組亦無明顯差別。
4.復方制品有一定的降低血總膽固醇、甘油三脂和調(diào)節(jié)收縮壓的作用。
結(jié)論丹參、三七、川芎、紅花、牛膝、人參、黃芪、五味子、淫羊藿、葛根、何首烏、肉桂植物復方制品經(jīng)臨床觀察證明對服用擴冠藥硝酸甘油，而心絞痛癥狀改善不明顯的患者服用該藥則可取得較明顯效果，同時該藥對心電圖及心悸不寧、氣短等有顯著改善作用，還有一定的降脂和調(diào)節(jié)血壓作用。
從純中藥制劑中提取具有改善急性心肌供血不足抗缺氧、抗心肌梗塞原料藥的方法藥效學實驗研究本發(fā)明灌胃給藥，能顯著延長小鼠耐缺氧存活時間，對異丙腎上腺素引起的心臟耗氧量增加的小鼠，其抗缺氧作用尤為明顯。本品十二指腸給藥，能顯著對抗腦垂體后葉素誘發(fā)的豚鼠ST段上移和T波抬高，具有抗急性心肌缺血作用；對麻醉開胸貓能顯著縮小結(jié)扎冠脈前降支所致的心肌梗塞范圍，增加冠脈血流量，但對血壓和心率無明顯影響。本品對離體兔心有增加冠脈流量、抑制心肌收縮力和減慢心率作用。本品上述的抗缺氧和抗心肌梗塞作用明顯優(yōu)于復方丹參片或地奧心血康。
試驗目的根據(jù)本方劑的功能主治，觀察復方制品對急性心肌缺血，結(jié)扎冠脈所致的心肌梗塞范圍，在體和離體冠脈血流量及缺氧作用的影響，并以復方丹參片或地奧心血康作陽性對照藥。
一、抗缺氧作用受試藥物1.本發(fā)明每ml含生藥量1.0g。臨用前，用蒸餾水配成0.2g/ml和0.6g/ml濃度備用。
2.復方丹參片廣州白云山制藥總廠中藥廠產(chǎn)品，每片0.25g，批號930804。將片劑研磨成細粉后，用蒸餾水配成0.05g/ml混懸液備用。
3.地奧心血康膠囊中科院成都生物研究所制藥廠產(chǎn)品，每粒100mg，批號941202。用蒸餾水配成5mg/ml混懸液備用。
4.硫酸異丙腎上腺注射液上海第十制藥廠產(chǎn)品，0.5mg/ml，批號860804。
動物昆明種雄性小白鼠由中國醫(yī)科大學實驗動物中心提供(合格證遼實質(zhì)合字3號，遼實條合字1號)，體重20±2g，每組10只。
(一)對小鼠常壓耐缺氧的影響方法取健康的小鼠50只，按體重隨機分為5組?？瞻讓φ战M灌胃給予生理鹽水；復方制品大、小劑量組分別灌服7.2g/kg和21.6g/kg；復方丹參片組灌服1.8g/kg；在奧心血康組灌服0.18g/kg，每天一次，連續(xù)7天，給藥容積均為0.36ml/10g。天末次給藥后45min，分別將小鼠放入容積相等的25ml廣口瓶內(nèi)密閉，瓶內(nèi)放入鈉石灰10g，瓶塞涂勻凡士林。以呼吸停止為指標，記錄動物的存活時間，各給藥組空白對照組之間進行t檢驗，評價藥物的作用。
結(jié)果 如表1所示，各給藥組除地奧心血康無抗缺氧作用外，均能顯著延行小鼠存活時間(P＜0.05-0.001)，復方制品延長小鼠存活時間呈劑量依賴關系，且與復方丹參片組比也有顯著性差異(P＜0.05>，說明本品抗氧作用優(yōu)于復方丹參片。
(二)對異丙腎上腺素性小鼠耐氧的影響方法 取健康的小鼠60只，按體重隨機分為空白對照、模型對照、復方制品小、大劑量、復方丹參片和地奧心血康等6組。除空白對照和模型對照級灌服生理鹽水外，其余各組給藥途徑，劑量、容積和給藥天數(shù)，均與上述常壓耐缺氧實驗相同。于末次給藥后15min，除空白對照組腹腔注射生理鹽水外，其余各組腹腔注射異丙腎上腺素溶液10mg/kg，30min后，按上述方法分別將小鼠放入密閉的廣口瓶內(nèi)，觀察小鼠的存活時間。
結(jié)果 如表2所示，模型對照組與空白對照組比較，顯著縮短小鼠存活時間(P＜0.01)，提示異丙腎上腺素引起的心臟耗氧量增加的小鼠，明顯降低其耐缺氧能力。復方制品小、大劑量組與模型對照組比較，均能明顯延長小鼠存活時間(P＜0.001)，分別延長80％和136.8％；復方丹參片和地奧心血康僅延長24.5％和31.7％。本品對心臟耗氧量增加情況下的抗氧能力，明顯強于后兩種藥物(P＜0.001)。
二、本發(fā)明以腦垂體后葉素所致豚鼠心肌缺血的影響1.復方制品沈陽飛龍保健品有限公司提供，每ml含生藥量1.0g，批號9401105。另用蒸餾水稀釋配成0.33g/ml溶液備用。
2.復方丹參片廣州白云山制藥總廠中藥廠產(chǎn)品，每片0.25g，批號930804。蒸餾水浸泡后，配成0.2g/ml混懸液備用。
3.地奧心血康膠囊中科院成都生物研究所制藥廠產(chǎn)品，每粒100mg，批號941202。用蒸餾水配成0.02g/ml混懸液備用。
4.垂體后葉素注射液沈陽市生物化學制藥廠產(chǎn)品，10u/ml，批號941101。臨用前，用生理鹽水稀釋成1μ/ml備用。
動物 豚鼠由沈陽醫(yī)學院動物室提供(合格證遼實質(zhì)合字4號，遼實條合字13號)，體重245-285g，雌雄兼用。
儀器 雙道心電圖機，C2a型，意大利產(chǎn)；慢速勻速電動注射器，F(xiàn)135型，英國Palme廠產(chǎn)。
方法 向豚鼠腹腔注射烏拉坦(1.0-1.2g/kg)麻醉后，剝離一側(cè)頸靜脈，插入一塑料管，另一端聯(lián)接于慢速電動注射器，以0.32ml/min勻速向靜脈內(nèi)持續(xù)注入生理鹽水，以防血凝。將針狀電極插入豚鼠四肢及V3皮下位置上，標定電壓為1cm＝1mv。待心電圖穩(wěn)定后，從頸靜脈注入垂體后葉素0.5u/kg，立即將電動注射器注射速度調(diào)至0.6ml/min，持續(xù)1min，然后將速度調(diào)回0.02ml/min。垂體后葉素注入后，用心電示波器觀察心電圖變化，并隨時記錄之。然后，將53只豚鼠隨機分為5組，于注入垂體后葉素后20min，分別由十二指腸給予如下藥物(1)對照組；注入生理鹽水；(2)復方制品小、大劑量組分別注入2.0、6.0g/kg(3)復方丹參片組；注入1.2g.kg；(4)地奧心血康組注入0.12g/kg，給藥容積均為0.6ml/100g。給予上述藥物40min時，即給予垂體后葉素1h時，重復注入同劑量的垂體后葉素，記錄心電圖，比較兩次給予垂體后葉素后V3心電圖T波和ST段的差異變化，用t檢驗評價藥物的抗心肌缺血作用。
結(jié)果1.以ST段上移的以抗作用生理鹽水組前后兩次予垂體后葉素自身對照，ST段的變化無顯著性差異(P＞0.05)。小劑量復方制品組給藥后ST段上移明顯受到抑制(P＜0.05)，但與生理鹽水組比較，沒有顯著性差異(p＞0.05)。大劑量復方制品組給藥后ST段上移，不論自身對照或組間對照均有顯著性差異(P＜0.01).復方丹參片和地奧心血康也有相似的抗急性心肌缺血作用(表3、圖2)。
2.對T波抬高的以抗作用生理鹽水組前后兩次給予垂體后葉素自身對照，T波變化無顯著性差異(P＞0.05)。復方制品小、大劑量組與生理鹽水組比較，T小組增高均被顯著抑制(P＜0.01)。復方丹參片和地奧心血康也有相似的抗急性心肌缺血作用(表3、圖2)。
三、復方制品對結(jié)扎貓冠脈所致心肌梗塞的影響1.復方制品、復方丹參片的配制同實驗二。
2.氯化硝基四氮唑蘭上海前進試劑廠產(chǎn)品，批號900103。
動物 雜種貓購于沈陽市動物市場，體重2.2-4.0kg，雌雄兼用。
儀器 將貓用戊巴比妥鈉(35mg/kg)麻醉后，切開氣管，連接人工呼吸機維持呼吸。四肢皮下插入心電圖電極，連于多導生理記錄儀。將26只貓隨機分為4組，描記正常心電圖后，經(jīng)十二腸分別注入如下藥物。(1)對照組注入生理鹽水；(2)復方制品小、大劑量組分別注入1g/kg和3g/kg；(3)復方丹參片組注入0.6g/kg，給藥容積均為0.3g/100g。給藥后，即行開胸，暴露心臟，剪開心包，將心包膜縫合于胸壁開口處，細心剝離冠脈前降支左分支，并于給藥后30min，用絲線結(jié)扎左分去根部，關閉胸腔。隨時描記心電圖。結(jié)扎后3h，處死貓，摘取心臟，剃除心房及心室脂肪組織，只保留心室，用生理鹽水洗凈后，橫斷剪成0.3-0.4cm厚園形心肌片6片，濾紙吸干，放放入用磷酸緩沖液(PH7.4)配制的0.1％氯化硝基四氮唑蘭溶液中，37℃溫育15min。然后，將末染色心肌與染成紫蘭色心肌用手術剪分開，分別稱重。以末染色心室肌重占全心室肌重的％表示，進行組間t檢驗，評價藥物的抗心肌梗塞作用。
結(jié)果 如圖3所示，結(jié)扎冠脈后心電圖立即出現(xiàn)各種心肌缺血異常心電圖改變。結(jié)扎后3h，生理鹽水組梗塞心肌重量占心室肌總重量的16.48±2.98％。復方制品小、大劑量組分別為9.34±1.61％及10.99±1.51％，與生理鹽水組比較均有顯著性閉差異(P＜0.01)。復方丹參片也有相似的結(jié)果(表4)。復方制品大劑量組與復方丹參片組比較，有顯著性差異(P＜0.05)，前者抗心肌梗塞作用優(yōu)于后者。
四、復方制品對麻醉貓血壓、心率及冠脈血流量的影響受試藥物 復方制品、復方丹參片的配制同實驗二。
動物 雜種貓購于沈陽市動物市場，體重2.8-4.2kg，雌雄兼用。
儀器 多導生理記錄儀，ST-42型，上海醫(yī)用儀器廠生產(chǎn)。激光多普勒流量計，PF2型，瑞典產(chǎn)。小動物人工呼吸器，英國Palmer廠產(chǎn)。
方法 貓腹腔注射戊巴比妥鈉(35mg/kg)麻醉后，在人工呼吸條件下沿胸骨左緣剪斷2-5肋骨，拉開胸腔，暴露心臟。剪開心包，將剪開的心包膜縫合于胸壁開口處。將針狀心電圖電極插于四肢皮下，通過描入股動脈，膠管的另一端連接壓力換能器，描記股動脈血壓。待備壓及心電圖穩(wěn)定后，將流量計探關放于左冠狀動脈前降支下1/3固定貓24只，隨機分為對照組、復方制品小、大劑量組復方丹參片4組。各組給藥劑量、容積和給藥途徑與實驗三相同，從十二腸分別注入藥物后15、30、45和60min，描記血壓、心電圖曲線，同時并測定冠脈搏、血流量，給藥務組與生理鹽水組之間進行t檢驗，評價藥物作用。
結(jié)果1.對心率的影響 如表5所示，各組給藥前后心電圖基本無變化，從心電圖上反映的心率各組間亦無顯著性差異(P＞0.05)，提示復方制品對麻醉貓心率明顯影響。
2.對血壓的影響確良給藥后各組血壓隨著時間的推移，均逐漸略有下降，但各組各時間內(nèi)與給藥比較均無顯著性差異，給藥各組與生理鹽水組比較亦無顯著性差異(P＞0.05)，提示復方制品對麻醉貓血壓無明顯影響(表6)。
3.對冠脈血流量的影響 由表7可見，復方制品小劑量組與生理鹽水組比較，冠脈血流量雖有所增加，但無顯著性差異(P＞0.05)。復方制品大劑量組能顯著增加冠脈血流量23.4-27.0％(P＜0.05～0.01)。復方丹參片也有相似的作用，且與復方制品無顯著性差異。
五、復方制品對離體兔心的影響1.復方制品每ml含生藥量1.0g，使用時用濾紙濾過兩次。用蒸餾水稀釋配成100mg/ml和333.3mg/ml溶液備用。
2.復方丹參片用蒸餾水浸泡后，過濾，配成。
3.地奧心血康膠囊；用蒸餾水溶解后，過濾，配成5mg/ml溶液備用。
動物家兔購于沈陽醫(yī)學院動物室(合格證；遼實質(zhì)合字4號，遼實條合字13號)，體重1.8-2.4kg，雌雄兼用。
儀器 二道生理記錄儀，LMS-2A型，成都儀器廠產(chǎn)。離體心臟灌注裝置，英國Palemer廠產(chǎn)。
方法 取健康家兔48只，隨機分為6組，每組8只。擊頭致昏后，立即摘取心臟，按Langendorff法用95％+5％CO2的Locke溶液灌注離體兔心，溫度37°±0.5℃。心尖部用兔心夾夾住后，通過絲線連接于拉力換能器(JH-1B-100)上，有二道生理記錄儀描記心肌收縮振幅、心率變化曲線。待心臟捕動穩(wěn)定后，然后，向與心臟連接的膠管內(nèi)分別注入下列藥物；(1)陰性對照組注入生理鹽水；(2)復方制品組分別注入30mg，100mg或300mg；(3)陽性對照組分別注入復方丹參片60mg或地奧心血康1.5mg，給藥容積均為0.3ml。給藥后，立即收取30s內(nèi)流量，并記錄心率及收縮振幅。比較給藥前、后上述三項指標值勤有無顯著性差異，用t檢驗評價藥物的作用。
結(jié)果1.對離體兔心冠脈流量的影響 復方制品有顯著增加冠脈流量作用，且隨著劑量的增加，作用增強。給藥后30s流量組分別平均增加1.2、2.0、5.3ml(P＞0.01)。復方丹參片也有相似增加冠脈流量作用(P＜0.01)，但在奧心血康可使冠脈血量顯著減少(P＜0.01)。生理鹽水對冠脈流量無影響(表8、圖4)。
2.對離體兔心心率的影響 復方制品的三個劑量組對離體兔心的心率均呈減慢作用(P＜0.01)，其中大劑量組作用最明顯。復方丹參片和地奧心血康也有相似的減慢心率作用(表9)。
3.對離體兔心心肌收縮影響 生理鹽水對離體兔心收縮振幅無影響。地奧心血康地給藥后30s內(nèi)，收縮振幅略增加，以后振幅逐漸減小。其他各給藥組均使收縮振幅顯著減小(P＜0.01)，同時張力增加，復方制品三個劑量組呈劑量依賴關系。(表10、圖4)結(jié)論1.小鼠灌胃給予復方制品7.2、21.6g/kg·d，連續(xù)給藥7天，能顯著延長小鼠耐缺氧的存活時間；對異丙腎上腺素引起心臟耗氧量增加的小鼠，其抗缺氧作用尤強，本品抗缺氧作用明顯優(yōu)于復方丹參片和地奧心血康。
2.從豚鼠十二腸注入復方制品2.0、6.0g/kg，能顯著抑制垂體后葉素誘發(fā)的ST段上移和T波增高，并呈劑量依賴關系，提示本品具有抗急性心肌缺血作用。復方丹參片和地奧心血康也有相似的抗心肌缺血作用。
3.給麻醉開胸貓十二指腸注入復方制品1.0、3.0g/kg，顯著縮小結(jié)扎冠脈前降支所致的心肌梗塞范圍，提示本品具有抗心肌梗塞作用，其作用優(yōu)于復方丹參片。
4.給麻醉開胸貓十二腸注入上述劑量的復方制品，能顯著增加冠脈血流量，持續(xù)1小時以上，但對血壓和心率無明顯影響。復方丹參片也有相似的作用。
5.本發(fā)明對離體兔心能顯著增加冠脈流量，減慢心率，抑制心肌收縮力。復方丹參片亦有相似的作用，而地奧心血康在增加心肌收縮力的同時，顯著減少冠脈流量。
從純中藥制劑中提取具有改善急性心肌供血不足抗缺氧、抗心肌梗塞原料藥的方法研究綜述隨著人民生活水平的不斷提高，膳食結(jié)構(gòu)改善，人們對飽和脂肪酸和膽固醇的攝入量大幅度增加，促使冠心病發(fā)病率和死亡率不斷增加，嚴重地影響人們身體健康和正常生活。但通常情況，冠心病患者只在病情發(fā)作期間重視治療，對未病先防和日常保健卻往往忽視，對減少冠心病的發(fā)病和死亡帶來不利影響。為此，研制對心肌供血不足具有改善作用，可以預防和輔助治療冠心病的保健新藥，為人類健康服務，將具有深遠的社會意義。
1.制備工藝的研究2.制劑穩(wěn)定性的考察我們通過對連續(xù)三批的本發(fā)明樣品二年的穩(wěn)定性考察，各項指標均符合制劑穩(wěn)定性方面的要求。
3.與治療作用有關的主要藥效學試驗研究我們進行了本發(fā)明對小鼠耐缺氧作用的研究、對腦垂體后葉素所致豚鼠心肌缺血的影響、對結(jié)扎貓冠脈所致心肌梗塞的影響、對麻醉貓血壓、心率及冠脈血流量的影響、對離體兔心的影響、對血瘀大鼠血液流變學的影響，并以復方丹參片、地奧心血康作為對照藥，結(jié)果表明(1)小鼠灌胃給予本發(fā)明7.2、21.6g/kg·d，連續(xù)給藥7天，能顯著延長小鼠耐缺氧的存活時間；對異丙腎上腺素引起心臟耗氧量增加的小鼠，其抗缺氧作用尤強。本品抗缺氧作用明顯優(yōu)于復方丹參片和地奧心血康。
(2)從豚鼠十二指腸注入本發(fā)明2.0、6.0g/kg，能顯著抑制垂體后葉素誘發(fā)的ST段上移和T波增高，并呈劑量依賴關系，提示本品具有抗急性心肌缺血作用。復方丹參片和地奧心血康也有相似的抗心肌缺血作用。
(3)給麻醉開胸貓十二指腸注入本發(fā)明1.0、3.0g/kg，顯著縮小結(jié)扎冠脈前降支所致的心肌梗塞范圍，提示本品具有抗心肌梗塞作用，其作用優(yōu)于復方丹參片。
(4)給麻醉開胸貓十二指腸注入上述劑量的本發(fā)明，能顯著增加冠脈血流量，持續(xù)1小時以上，但對血壓和心率無明顯影響。復方丹參片也有相似的作用。
(5)本發(fā)明對離體兔心能顯著增加冠脈流量，減慢心率，抑制心肌收縮力。復方丹參片亦有相似的作用，而地奧心血康在增加心肌收縮力的同時，顯著減少冠脈流量。
(6)對大鼠灌胃給予本發(fā)明3.6、10.8g/kg，每天一次，連續(xù)5天，能顯著降低血瘀大鼠全血比粘度、血漿比粘度和紅細胞壓積，并加速血沉時間，且呈一定的量效關系。復方丹參片也有相似的改善血液流變學作用。
4.動物急性毒性、長期毒性研究(1)急性毒性研究本發(fā)明小鼠灌胃給藥LD50及期限95％平均可信限為139.70±6.98g(生藥)/kg。
(2)長期毒性研究大鼠灌胃給予本發(fā)明8.75、17.5和35g(生藥)/kg，每天一次，連續(xù)8周。結(jié)果表明，對大鼠體征行為、生長發(fā)育、血象、肝腎功能等均無明顯的蓄積毒性反應。臟器系數(shù)及病理組織學檢查亦無異常改變，提示臨床用藥安全。
5.臨床研究以遼寧省中醫(yī)研究院為組長單位，以遼寧省丹東市中醫(yī)院、遼寧省沈陽市第七人民醫(yī)院為協(xié)作單位，對本發(fā)明進行了臨床研究。結(jié)果表明本發(fā)明對服用擴冠藥硝酸甘油而胸痛(心絞痛)癥狀改善不明顯的患者，服用該藥則取得較明顯的結(jié)果，其顯效率和總有效率分別為44％、87％；對心電圖的總有效率為68％；對心悸不寧、氣短等有顯著改善作用；能使患者明顯減少服用硝酸甘油的劑量；還有一定的降脂和調(diào)節(jié)血壓作用。說明該藥是一種治療冠心病心絞痛療效較好的藥物。
通過本發(fā)明臨床觀察，未發(fā)現(xiàn)毒副作用及不良反應。
權(quán)利要求
1.從純中藥制劑中提取具有改善急性心肌供血不足抗缺氧抗心肌梗塞藥物的方法，其特征在于將以下12位天然產(chǎn)物丹參、三七、川芎、紅花、牛膝、人參、黃芪、五味子、淫羊藿、葛根、何首烏、肉桂，采用先進的大孔樹脂吸附有效成份，并使用氣相指痕光譜定量。其重量百分比為由丹參12％、三七3％、川芎9％、紅花8％、牛膝8％、人參12％、黃芪12％、五味子7％、淫羊藿10％、葛根7％、何首烏7％、肉桂5％。將丹參、三七、川芎、紅花、牛膝、人參、黃芪、五味子、淫羊藿、葛根、何首烏、肉桂植物復方原料，用超臨界流體二氧化碳萃取劑，萃取丹參、三七、川芎、紅花、牛膝、人參、黃芪、五味子、淫羊藿、葛根、何首烏、肉桂植物揮發(fā)油成分，再將氣態(tài)二氧化碳萃取劑與植物成份分離，精餾后備用，將二氧化碳超臨界萃取后的12種植物復方原料，每100kg分別加入300kg、200kg、100kg、65％的乙醇，在85℃條件下，回流提取3小時，2小時，1小時，合并乙醇提取的濾液，在85℃條件下，回收乙醇，并將濾液濃縮，將每100kg濃縮濾液，加入100kg水，在常溫條件下，靜置6小時，吸取上清液，通過大孔樹脂填充的柱子，用大孔樹脂吸附，用65％的乙醇將吸附在大孔樹脂上的成分洗脫至乙醇中，在85℃條件下，噴霧干燥，用氣相層析測定儀器，進行指痕圖譜成分定量測定后，制成標準原料藥。
2.按照權(quán)利要求所述1從純中藥制劑中提取具有改善急性心肌供血不足抗缺氧抗心肌梗塞藥物的方法，其特征在于所述的原料藥可以制備成片劑、丸劑、膠囊、口服液及針劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及從一種純中藥制劑中提取具有改善急性心肌供血不足抗缺氧抗心肌梗塞藥物的方法，屬于天然產(chǎn)物藥理活性和分離與提純天然產(chǎn)物方法。其處方是丹參12％、三七3％、川芎9％、紅花8％、牛膝8％、人參12％、黃芪12％、五味子7％、淫羊藿10％、葛根7％、何首烏7％、肉桂5％。其工藝將丹參、三七、川芎、紅花、牛膝、人參、黃芪、五味子、淫羊藿、葛根、何首烏、肉桂植物復方原料，用超臨界流體二氧化碳萃取劑，萃取丹參、三七、川芎、紅花、牛膝、人參、黃芪、五味子、淫羊藿、葛根、何首烏、肉桂植物揮發(fā)油成分，再將氣態(tài)二氧化碳萃取劑與植物成分分離，精餾后備用。積極效果是純中藥制劑中提取具有改善急性心肌供血不足抗缺氧抗心肌梗塞藥物的方法采用先進的大孔樹脂吸附有效成分并使用氣相指痕光譜定量，保證藥品的穩(wěn)定性和高質(zhì)量。
文檔編號A61P9/10GK1650901SQ20041000115
公開日2005年8月10日 申請日期2004年2月2日 優(yōu)先權(quán)日2004年2月2日
發(fā)明者姜偉 申請人:姜偉