專利名稱：抗毒素的制備工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種抗毒素的制備工藝。
背景技術(shù)：
抗毒素是由相應毒素或類毒素免疫動物所得的免疫血漿(血清)，經(jīng)胃酶消化硫酸銨鹽析制得的免疫球蛋白制劑。目前，抗毒素的制備方法包括下述步驟1、用蒸餾水將各種抗毒素的免疫血漿稀釋，并用胃酶進行消化處理得消化液；2、將消化液進行第一次沉淀及加溫過濾處理，在消化液中加入硫酸銨，并調(diào)節(jié)pH值，然后將消化液加溫并保持，再降溫，用濾槽過濾，收集上清液，廢棄沉淀；3、將上述上清液進行第二次沉淀過濾，即在上述上清液中加入硫酸銨，靜置，用濾槽過濾，取沉淀物，棄上清液；4、明礬沉淀；即將上述沉淀物稀釋，再在稀釋液中加明礬，靜置，濾槽過濾，取上清液，廢棄沉淀；5、將上述上清液濃縮即可制得上清液。該工藝的不足之處是處理時間長，因而制品在濾槽中暴露時間長，制品易受污染。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是為了提供一種處理時間短、過濾操作簡便、快速，可有效防止制品發(fā)生污染的抗毒素制備工藝。
本發(fā)明的目的可通過如下措施來實現(xiàn)一種抗毒素的制備工藝，包括下述步驟(1)消化步驟，即用公知的免疫血漿消化工藝，將免疫血漿消化；(2)第一次沉淀過濾處理步驟，在免疫血漿消化液中按重量體積比加入10-20％(w/v)的硫酸銨形成混懸液，在上述混懸液中按重量體積比加入1-3％(w/v)的助濾劑；然后將上述加入助濾劑的混懸液用板框壓濾法過濾，取上清液；
(3)第二次沉淀過濾處理步驟，在上述(2)步的上清液中按重量體積比加入15-25％(w/v)的硫酸銨形成混懸液，在上述混懸液中按重量體積比加入2-4％(w/v)的助濾劑；然后將上述加入助濾劑的混懸液用板框壓濾法過濾，去上清液，取沉淀物；(4)吸附沉淀，將上述(3)步的沉淀物用其重量30-40倍水稀釋；然后在上述稀釋液中按重量體積比加入1-3％(w/v)的吸附劑形成混懸液；在上述混懸液中按重量體積比加入0.5-2％(w/v)的助濾劑，再將加入助濾劑的混懸液用板框壓濾法過濾，取上清液；(5)將上述(4)步的上清液濃縮至硫酸銨含量小于0.1％(w/v)即可制得抗毒素原液。
所述的助濾劑為硅藻土。
所述的吸附劑選自氫氧化鋁、三氯化鋁、明礬、活性炭中的一種。
所述的各步中進行板框壓濾時的壓力為0.02-0.15Mpa，過濾時間為1-2小時。
在上述(2)、(3)、(4)中還包括在加入硫酸銨后，再調(diào)節(jié)pH值。
本發(fā)明相比現(xiàn)有技術(shù)具有如下優(yōu)點1、本發(fā)明采用板框壓濾法過濾，縮短了工藝中的過濾時間，而且使得制品生產(chǎn)周期由原工藝的5天變?yōu)楦倪M工藝的3天。
2、本發(fā)明在處理液中加入硅藻土作為助濾劑，解決了抗毒素生產(chǎn)中過濾工藝中不能用壓濾法過濾的難題，使得過濾操作簡便，快速。
3、本發(fā)明采用板框壓濾法過濾，減少了原工藝中濾槽過濾制品的暴露時間，從而有效防止了制品污染的發(fā)生。
4、本發(fā)明采用新工藝不會對制品質(zhì)量造成任何影響。
5、本發(fā)明改進的方法省工、省力、節(jié)約勞動力50％左右。
具體的實施方式本發(fā)明還將結(jié)合實施例作進一步詳述一種抗毒素的制備工藝，包括下述步驟1.消化用蒸餾水將免疫血漿稀釋3倍，用2N鹽酸調(diào)pH至3.3±0.1，每1ml消化液中加入8個活力單位的胃酶及甲苯0.2％(ml/ml)，于29-31℃處理1.5小時。
2.第一次沉淀及加溫處理在上述處理的消化液中加入固體硫酸銨(按100ml加入15g)，用2N氫氧化鈉調(diào)整pH值，各種抗毒素的pH值條件如下白喉及破傷風抗毒素調(diào)至5.2±0.1；氣性壞疽及肉毒抗毒素調(diào)節(jié)pH至4.8±0.1。然后加溫處理，白喉、破傷風、氣性壞疽抗毒素加溫至58℃；肉毒抗毒素加溫至51℃，均保持30分鐘。加溫完畢，降溫至45℃以下。將降溫處理的混懸液每100ml加入2g硅藻土(助濾劑)，采用板框壓濾法(壓力為0.02-0.15Mpa，時間為1-2小時)過濾，取上清液，沉淀廢棄。
3.第二次沉淀上述上清液用2N氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH至7.2±0.1，每100ml加硫酸銨20g，，攪拌均勻后，靜置1小時，將靜置后的混懸液每100ml加入3g硅藻土(助濾劑)，采用板框壓濾法(壓力為0.02-0.15Mpa，時間為1-2小時)過濾，取沉淀，上清液廢棄。
4.吸附沉淀用沉淀量的35倍水稀釋該沉淀，加明礬液至1％(g/ml)，用2N氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH至7.8±0.1，靜置1小時，將靜置的混懸液每100ml加硅藻土1g，采用板框壓濾法(壓力為0.02-0.15Mpa，時間為1-2小時)過濾，取上清液，沉淀廢棄。
5.濃縮將上述清液混合，通過超濾裝置進行超濾，濃縮至硫酸銨含量為0.1％(g/ml)以下。
上述各步中除采用加硫酸銨外，還可采用加入硫酸鈉、氯化鈉代替硫酸銨。
6.除菌過濾調(diào)整固體總量不超過20％(g/ml)，蛋白含量不超過17％(g/ml)。按調(diào)整后制品總量，加氯化鈉使最終含量為0.88％(g/ml)，加三氯甲烷使最終含量為0.5％(ml/ml)或硫柳汞0.1g/L或間甲酚2.5g/L為防腐劑。調(diào)節(jié)pH至6.6±0.1。除菌過濾，并做無菌試驗。
權(quán)利要求
1.一種抗毒素的制備工藝，包括下述步驟(1)消化步驟，即用公知的免疫血漿消化工藝，將免疫血漿消化；(2)第一次沉淀過濾處理步驟，在免疫血漿消化液中按重量體積比加入10-20％(w/v)的硫酸銨形成混懸液，在上述混懸液中按重量體積比加入1-3％(w/v)的助濾劑；然后將上述加入助濾劑的混懸液用板框壓濾法過濾，取上清液；(3)第二次沉淀過濾處理步驟，在上述(2)步的上清液中按重量體積比加入15-25％(w/v)的硫酸銨形成混懸液，在上述混懸液中按重量體積比加入2-4％(w/v)的助濾劑；然后將上述加入助濾劑的混懸液用板框壓濾法過濾，去上清液，取沉淀物；(4)吸附沉淀，將上述(3)步的沉淀物用其重量30-40倍的水稀釋；然后在上述稀釋液中按重量體積比加入1-3％(w/v)的吸附劑形成混懸液；在上述混懸液中按重量體積比加入0.5-2％(w/v)的助濾劑，再將加入助濾劑的混懸液用板框壓濾法過濾，取上清液；(5)將上述(4)步的上清液濃縮至硫酸銨含量小于0.1％(w/v)，即可制得抗毒素原液。
2.如權(quán)利要求1所述的抗毒素的制備工藝，其特征在于所述的助濾劑為硅藻土。
3.如權(quán)利要求1所述的抗毒素的制備工藝，其特征在于所述的吸附劑選自明礬、氫氧化鋁、三氯化鋁、活性炭中的一種。
4.如權(quán)利要求1所述的抗毒素的制備工藝，其特征在于所述的各步中進行板框壓濾時的壓力為0.02-0.15Mpa，過濾時間為1-2小時。
5.如權(quán)利要求1所述的抗毒素的制備工藝，其特征在于在上述(2)、(3)、(4)中還包括在加入硫酸銨后，再調(diào)節(jié)pH值。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種抗毒素制備工藝，該工藝包括公知的免疫血漿消化處理、兩次加硫酸銨的沉淀和第三次的吸附沉附沉淀、濃縮各步，在上述的沉淀步驟中均加入助濾劑后采用板框壓濾法過濾；本發(fā)明的工藝處理時間短、過濾操作簡便、快速，可有效防止制品發(fā)生污染。
文檔編號A61K39/395GK1483476SQ0213943
公開日2004年3月24日 申請日期2002年9月17日 優(yōu)先權(quán)日2002年9月17日
發(fā)明者李景玉, 謝貴林, 崔萱林, 周耀東 申請人:蘭州生物制品研究所