專利名稱：晶體治療劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種具有式(I)結(jié)構(gòu)的1-{6-乙氧基-5-[3-乙基-6，7二氫-2-(2-甲氧乙基)-7-氧代-2H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-5-基]-3-吡啶基磺?；鶀-4-乙基哌嗪的多晶型物 具有如下文實(shí)質(zhì)定義的PXRD花樣如WO 01/27113中所詳述的，1-{6-乙氧基-5-[3-乙基-6，7二氫-2-(2-甲氧乙基)-7-氧基-2H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-5-基]-3-吡啶基磺?；鶀-4-乙基哌嗪是一種強(qiáng)效的和選擇性的cGMP PDE5抑制劑而且特別用于治療男性勃起功能障礙。
成功用于制藥工業(yè)的關(guān)鍵在于一種活性物質(zhì)的物理化學(xué)性質(zhì)在制備和藥物加工以及在運(yùn)輸、貯存和最終治療應(yīng)用的整個(gè)必需過程中要么是已知的要么是可以合理預(yù)測(cè)的。某些情況下，化合物能夠顯示出所需的藥用特性，但由于所述活性化合物本身具有不令人滿意物理特性如較差的化學(xué)或加工性能，所以所述化合物不能被直接用于一種適當(dāng)?shù)乃幬锝M合物中。因此，將穩(wěn)定的晶體物質(zhì)用于制藥工業(yè)是非常理想的，這是由于晶體物質(zhì)一般比它們的無(wú)晶形對(duì)應(yīng)物更穩(wěn)定，它們具有一種確定的結(jié)構(gòu)，該結(jié)構(gòu)可以通過X-射線衍射重復(fù)表征，X-射線衍射可被用來確定特定多晶形物的存在。
本發(fā)明提供了晶體結(jié)構(gòu)的1-{6-乙氧基-5-[3-乙基-6，7-二氫-2-(2-甲氧乙基)-7-氧基-2H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-5-基]-3-吡啶基磺酰基}-4-乙基哌嗪。
本文所定義的1-{6-乙氧基-5-[3-乙基-6，7-二氫-2-(2-甲氧乙基)-7-氧基-2H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-5-基]-3-吡啶基磺?；鶀-4-乙基哌嗪的晶體物質(zhì)也可以被認(rèn)為是1-{6-乙氧基-5-[3-乙基-6，7-二氫-2-(2-甲氧乙基)-7-氧基-2H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-5-基]-3-吡啶基磺酰基}-4-乙基哌嗪的非溶劑化產(chǎn)物，其中本文所定義的非溶劑化產(chǎn)物是指一種基本上不含被結(jié)合在晶格中的保留溶劑的產(chǎn)物或者換句話說不含被包埋在或被結(jié)合在晶體中的溶劑的產(chǎn)物。盡管優(yōu)選的是本發(fā)明的晶體物質(zhì)在表面不保留溶劑，但是被保留在晶格表面上的溶劑沒有被包括在被保留溶劑的定義中。本文所定義的基本上不含被保留的溶劑是指被保留在晶格結(jié)構(gòu)中的溶劑或被包埋在晶體中的溶劑總量小于1％，優(yōu)選地小于約0.85％，更優(yōu)選地小于約0.3％以及特別地從0至0.25％。
具有下文所定義的XRD花樣的1-{6-乙氧基-5-[3-乙基-6，7-二氫-2-(2-甲氧乙基)-7-氧基-2H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-5-基]-3-吡啶基磺酰基}-4-乙基哌嗪晶體具有很高的熔點(diǎn)而且早期的研究表明該晶體是非吸濕性的、穩(wěn)定的以及具有很好的制劑特性。
制備本發(fā)明具有式(I)結(jié)構(gòu)的1-{6-乙氧基-5-[3-乙基-6，7-二氫-2-(2-甲氧乙基)-7-氧基-2H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-5-基]-3-吡啶基磺?；鶀-4-乙基哌嗪可以按照下文中的實(shí)施例和制備部分的所述內(nèi)容來進(jìn)行。
具有式(I)結(jié)構(gòu)的1-{6-乙氧基-5-[3-乙基-6，7-二氫-2-(2-甲氧乙基)-7-氧基-2H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-5-基]-3-吡啶基磺?；鶀-4-乙基哌嗪的XRD花樣可以按照下文詳述的方法來表征。X-射線衍射熔點(diǎn)為162-165℃的1-{6-乙氧基-5-[3-乙基-6，7-二氫-2-(2-甲氧乙基)-7-氧基-2H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-5-基]-3-吡啶基磺酰基}-4-乙基哌嗪的單晶X-射線衍射(XRD)花樣(按照實(shí)施例1的方法制得的)是通過單晶X射線衍射來測(cè)定的。利用Siemens R4RA/v衍射計(jì)對(duì)一種典型的晶體進(jìn)行了觀測(cè)并收集一組1數(shù)據(jù)(最大sinΘ/λ＝0.5)。原子散射因子取自International Tables for X-RayCrystallography(International Tables for X-Ray Crystallography，第四卷，55，99，149頁(yè)，伯明翰Kynoch出版社，1974)。所有的晶體學(xué)計(jì)算通過SHELXTL系統(tǒng)而得到簡(jiǎn)化(G.M.Sheldrick，SHELXTL，用戶手冊(cè)，Nicolet Instruments Co.，1981)。所有的衍射數(shù)據(jù)是在室溫下進(jìn)行收集的。
模擬粉末X-射線衍射(PXRD)花樣(如表1所示強(qiáng)度大于1％)是通過利用Cerius2Diffraction-Crystal Module由單晶體數(shù)據(jù)建立的，其中Cerius2Diffraction-Crystal Module采用輻射＝1.54178，其具有的偏振因子為0.5，沒有采用單色儀。測(cè)得所述晶體的大小為500×500×5003且具有洛倫茲峰形。在2-55°的2θ角范圍內(nèi)模擬衍射峰。
所述晶體學(xué)計(jì)算(強(qiáng)度計(jì)算)通過利用SHELXTL系統(tǒng)而被簡(jiǎn)化(G.M.Sheldrick，SHELXTL，用戶手冊(cè)，Nicolet Instrument Co.，1981)。最終的R-指數(shù)是4.60％。
模擬的PXRD花樣的主峰(以θ角的度數(shù)表示)被列于表1。本文所定義的主峰是那些強(qiáng)度大于1％的峰。
表1
因此本發(fā)明提供了具有按照上文所述方法測(cè)定的由表1實(shí)質(zhì)定義的PXRD花樣的1-{6-乙氧基-5-[3-乙基-6，7二氫-2-(2-甲氧乙基)-7-氧基-2H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-5-基]-3-吡啶基磺?；鶀-4-乙基哌嗪物質(zhì)。
正如晶體學(xué)領(lǐng)域的技術(shù)人員所了解的，當(dāng)表1中各種峰的相對(duì)強(qiáng)度由于諸多因素如晶體在X-射線束中的定向效應(yīng)或被分析物質(zhì)的純度或樣品的結(jié)晶程度而發(fā)生變化時(shí)，所述峰的位置將基本保持在表中所定義的位置上。
晶體學(xué)領(lǐng)域的技術(shù)人員還知曉利用一種不同的波長(zhǎng)進(jìn)行的測(cè)量將導(dǎo)致按照布拉格方程nλ＝2d sinθ產(chǎn)生不同的偏移。
通過利用可替代的波長(zhǎng)產(chǎn)生的其它1-{6-乙氧基-5-[3-乙基-6，7二氫-2-(2-甲氧乙基)-7-氧基-2H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-5-基]-3-吡啶基磺酰基}-4-乙基哌嗪的PXRD花樣被認(rèn)為是本發(fā)明晶體物質(zhì)的PXRD花樣可選代表，因而在本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。
通過不同途徑制備的如表1中記載的通過XRD花樣定義的同種化合物(如下文實(shí)施例部分所詳述的)的熔點(diǎn)范圍從155至165℃(在加熱速率為20℃/分鐘的條件下利用Perkin Elmer DSC7/TGA7測(cè)定的)。
實(shí)驗(yàn)表明本文所定義的晶體化合物傾向于以一種上文所詳述的以及下文所例示的多晶型物的形式存在。多晶型化合物尤其適用于藥用目的。
在下文中被稱作“所述化合物”的本發(fā)明的晶體化合物可以進(jìn)行單獨(dú)給藥，但是在人類治療當(dāng)中通常以與一種合適的藥用賦形劑、稀釋劑或載體混合的形式進(jìn)行給藥，其中所述藥用賦形劑、稀釋劑或載體是根據(jù)給藥途徑和標(biāo)準(zhǔn)給藥慣例進(jìn)行選擇的。
例如，為了進(jìn)行即時(shí)釋放-、延遲釋放-、修飾(modified)釋放-、控制釋放-如持續(xù)的-、雙向的-或脈沖的輸送給藥，所述化合物可以以含有調(diào)味劑或著色劑的片劑、膠囊(包括軟凝膠膠囊)、卵狀劑型(ovule)、酏劑、溶液或懸浮液的形式經(jīng)口服、頰或舌下給藥。所述化合物還可以以快速分散或快速溶解劑型或以高能分散體或包衣顆粒的形式進(jìn)行給藥。所述化合物的合適藥用制劑根據(jù)需要可以是包衣或非包衣形式的。
所述片劑可以含有賦形劑如微晶纖維素、乳糖、檸檬酸鈉、碳酸鈣、磷酸氫鈣、甘氨酸和淀粉(優(yōu)選地是玉米、馬鈴薯或木薯淀粉)，崩解劑如羥基乙酸淀粉鈉、交聯(lián)羧甲纖維素鈉和某些絡(luò)合硅酸鹽以及成粒粘合劑如聚乙烯吡咯烷酮、羥丙基甲基纖維素(HPMC)、羥丙基纖維素(HPC)、蔗糖、明膠和阿拉伯膠。另外，還可以包括潤(rùn)滑劑如硬脂酸鎂、硬脂酸、山萮酸甘油脂和滑石粉。
相似類型的固體組合物也可以被用作明膠膠囊中的填充劑。在這方面，優(yōu)選的賦形劑包括乳糖、淀粉、纖維素、乳糖或高分子量的聚乙二醇。對(duì)于含水懸浮液和/或酏劑來說，所述化合物可以與各種甜味劑或調(diào)味劑、色素或染劑、乳化劑和/或懸浮劑以及稀釋劑如水、乙醇、丙二醇和甘油及其混合物進(jìn)行混合。
修飾釋放和脈沖釋放劑型可以含有賦形劑如那些詳述的用于即時(shí)釋放劑型的賦形劑以及其它作為釋放速率修飾劑的賦形劑，這些賦形劑被包衣在所述裝置的體表和/或被包含在其體內(nèi)。釋放速率修飾劑包括，但不僅僅限于羥丙基甲基纖維素、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、乙基纖維素、醋酸纖維素、聚環(huán)氧乙烷、黃原膠、卡波姆、甲基丙烯酸銨共聚物、氫化蓖麻油、巴西棕櫚蠟、石蠟、鄰苯二甲酸乙酸纖維素、鄰苯二甲酸羥丙基甲基纖維素、甲基丙烯酸共聚物及其混合物。修飾釋放和脈沖釋放劑型可以含有一種或混合的釋放速率修飾賦形劑。釋放速率修飾賦形劑可能存在于所述劑型內(nèi)即存在于基質(zhì)內(nèi)，和/或存在于所述劑型的表面即存在于表面或包衣上。
快速分散或溶解劑型制劑(FDDF)可以含有下列成分天冬甜素、丁磺氨鉀、檸檬酸、交聯(lián)羧甲纖維素鈉、聚乙烯聚吡咯烷酮、抗壞血酸(diascorbic acid)、丙烯酸乙脂、乙基纖維素、明膠、羥丙基甲基纖維素、硬脂酸鎂、甘露糖醇、甲基丙烯酸甲酯、薄荷調(diào)味料、聚乙二醇、熱解法二氧化硅、二氧化硅、羥基乙酸淀粉鈉、延胡索酸硬脂酰鈉、山梨醇、木糖醇。本文用來描述FDDF的術(shù)語(yǔ)“分散”或“溶解”取決于所給藥物物質(zhì)的溶解性即當(dāng)所述藥物物質(zhì)是非溶性的時(shí)候，可以制備一種快速分散的劑型，而當(dāng)所述藥物物質(zhì)是可溶性的時(shí)候，可以制備一種快速溶解的劑型。
所述化合物還可以進(jìn)行非腸道給藥，例如腔內(nèi)(intracavernosally)給藥、靜脈內(nèi)給藥、動(dòng)脈內(nèi)給藥、腹膜內(nèi)給藥、鞘內(nèi)給藥、心室內(nèi)給藥、尿道內(nèi)給藥、胸骨內(nèi)給藥、顱內(nèi)給藥、肌內(nèi)給藥或皮下給藥，或者它們可以通過輸注或無(wú)針注射技術(shù)進(jìn)行給藥。為了進(jìn)行所述的非腸道給藥，所述化合物最好以無(wú)菌水溶液的形式進(jìn)行使用，該水溶液可含有其它物質(zhì)如含量足以使得所述溶液與血等滲的鹽或葡萄糖。如果需要，可以適當(dāng)?shù)貙?duì)所述水溶液進(jìn)行緩沖(優(yōu)選地緩沖到3至9的pH范圍)。利用本技術(shù)領(lǐng)域中的技術(shù)人員熟知的常規(guī)制藥技術(shù)可以方便地在無(wú)菌條件下制備合適的非腸道制劑。
用于對(duì)人進(jìn)行口服和非腸道給藥，所述化合物的每日劑量通常是從10至500mg(單次或多次給藥)。
因此，例如，根據(jù)需要而進(jìn)行單次或兩次或多次給藥時(shí)，所述化合物的片劑或膠囊可含有5mg至250mg的活性化合物。任何情況下，醫(yī)生都需要確定最適合于個(gè)體患者的實(shí)際劑量而且所述劑量隨著年齡、體重和特定患者的反應(yīng)的不同而不同。上述劑量只是舉例性質(zhì)的一般情況。當(dāng)然，可能存在個(gè)別劑量范圍高一些或低一些的例子，而這些例子也在本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員還能夠理解在某些條件下進(jìn)行治療(包括MED和FSD)時(shí)，所述化合物可以在“需要”的基礎(chǔ)上(即根據(jù)需要)以單次劑量的形式被攝取。
片劑制劑的實(shí)施例通常，一種片劑制劑含有0.01mg至500mg的所述化合物而片劑填充物的重量范圍是50mg至1000mg。以下舉例說明了一種10mg片劑的配制成分％w/w游離酸、游離堿或化合物鹽 10.000*乳糖 64.125淀粉 21.375交聯(lián)羧甲纖維素鈉(Croscarmellose Sodium) 3.000硬脂酸鎂 1.500*通常所述含量根據(jù)藥物活性來進(jìn)行調(diào)節(jié)。
通過常規(guī)方法，例如，直接壓片或濕法或干法造粒來制備所述片劑?？梢詫?duì)所述片劑核進(jìn)行適當(dāng)?shù)陌隆?br> 所述化合物還可以進(jìn)行鼻內(nèi)給藥或通過吸入進(jìn)行給藥而且以干粉吸入器的形式或以由加壓的容器、泵、噴霧或霧化器提供的氣溶膠的形式進(jìn)行便捷的輸送，所述加壓的容器、泵、噴霧或霧化器采用了適當(dāng)?shù)耐七M(jìn)劑如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟甲烷、氫氟鏈烷如1，1，1，2-四氟乙烷(HFA 134A[商標(biāo)]或1，1，1，2，3，3，3-七氟丙烷(HFA 227EA[商標(biāo)]、二氧化碳或其它合適的氣體。對(duì)于加壓的氣溶膠來說，劑量單位可以通過一種劑量閥來確定。所述加壓容器、泵、噴霧或霧化器可以含有活性化合物的溶液或懸浮液，例如以一種乙醇與推進(jìn)劑的混合物作為溶劑，其還可以含有一種潤(rùn)滑劑如脫水山梨醇三油酸脂。用于吸入器或吹入器中的膠囊和藥筒(例如由明膠制成)可以被配制成含有由本發(fā)明所述化合物和合適的粉狀基質(zhì)如乳糖或淀粉組成的粉末混合物。
氣溶膠或粉末制劑優(yōu)選地被配制成每一計(jì)量的劑量或“一噴”含有1至50mg的本發(fā)明所述化合物對(duì)患者給藥。采用氣溶膠進(jìn)行給藥的全天劑量的范圍是從1至50mg，所述給藥可以是在一天內(nèi)單次給藥或者更常見地是多次給藥。
所述化合物還可以被配制成適于通過霧化器進(jìn)行給藥。適用于霧化器裝置的制劑可以含有下列成分如增溶劑、乳化劑或懸浮劑水、乙醇、甘油、丙二醇、低分子量的聚乙二醇、氯化鈉、碳氟化合物、聚乙二醇醚、脫水山梨醇三油酸脂、油酸。
或者，所述化合物可以以栓劑或子宮托的形式進(jìn)行給藥，或者所述化合物可以以凝膠、水凝膠、洗液、溶液、乳膏、軟膏或撒粉的形式進(jìn)行局部給藥。所述化合物還可以進(jìn)行皮膚給藥。所述化合物還可以經(jīng)皮給藥，例如，通過采用一種皮膚貼劑來進(jìn)行給藥。所述化合物還可以通過眼睛、肺部或直腸途徑進(jìn)行給藥。
為了眼用，可以采用等滲的、調(diào)整過pH的、任選地混有一種防腐劑如苯扎氯銨的無(wú)菌鹽水將所述化合物配制成微粒懸浮液，優(yōu)選地配制成溶液。或者，采用一種軟膏如凡士林來配制所述化合物。
為了對(duì)皮膚進(jìn)行局部給藥，本發(fā)明的化合物可以被配制成一種合適的軟膏，該軟膏含有懸浮或溶解在，例如，一種混合物中的所述活性化合物，該混合物含有一種或多種下列物質(zhì)礦物油、液體凡士林、白凡士林、丙二醇、聚氧乙烯-聚氧丙烯化合物、乳化蠟和水?；蛘撸龌衔锉慌渲瞥珊线m的洗液或乳膏、該洗液或乳膏被懸浮或溶解在，例如，含有一種或多種下列物質(zhì)的混合物中礦物油、脫水山梨糖醇單硬脂酸酯、聚乙二醇、液體石蠟、多乙氧基醚60、十六烷基酯蠟、鯨蠟烯芳基醇(cetearyl alcohol)、2-辛基十二烷醇、芐醇和水。
所述化合物還可以與環(huán)糊精結(jié)合使用。已知環(huán)糊精能與藥物分子形成包含配合物和非包含配合物。藥物-環(huán)糊精配合物的形成可以改進(jìn)藥物分子的溶解性、溶解速率、生物可利用率和/或穩(wěn)定性。藥物-環(huán)糊精配合物通常被用于大多數(shù)劑型和給藥途徑。作為一種直接與藥物配位的替代物，環(huán)糊精可被用作一種輔助添加劑，例如被用作一種載體、稀釋劑或增溶劑。α-、β-和γ環(huán)糊精是使用最普遍的而且合適的實(shí)例是被記載在WO-A-91/11172，WO-A-94/02518和WO-A-98/55148中。
通常，對(duì)于人來說，對(duì)所述化合物進(jìn)行口服給藥是優(yōu)選的途徑，并且是最方便的，例如在MED中，其避免了腔內(nèi)給藥(i.c.)帶來的已經(jīng)熟知的弊端。一種在MED中用于典型患者的優(yōu)選口服給藥方案是需要25至250mg的化合物。對(duì)于受體患有吞咽障礙癥或者口服給藥后對(duì)藥的吸收能力減弱的情況來說，可以對(duì)藥物進(jìn)行非腸道給藥、舌下給藥或頰給藥。
對(duì)于獸用目的，所述化合物或其獸用鹽或獸用溶劑化物或其前體藥物以一種常規(guī)獸醫(yī)行醫(yī)適當(dāng)接受的制劑形式進(jìn)行給藥并且由獸醫(yī)確定最適合于特定動(dòng)物的給藥方案和給藥途經(jīng)。
因此本發(fā)明提供了一種含有本發(fā)明晶體化合物和一種藥用稀釋劑或載體的藥物組合物。
還提供了一種含有本發(fā)明晶體化合物和一種獸用稀釋劑或載體的獸藥制劑。
本文所定義的晶體化合物可以采用下文中的制備方法和實(shí)施例來制備。用于實(shí)施例1的起始物質(zhì)的制備制備方法1N-[3-氨基甲?；?5-乙基-1-(2-甲氧乙基)-1H-吡唑基-4-基]-2-乙氧基-5-(4-乙基-1-哌嗪基磺?；?煙酰胺 (a)2-羥基-5-磺基煙酸在50℃下、1小時(shí)內(nèi)將2-羥基煙酸(27Kg，194.2mol)分步加入30％的發(fā)煙硫酸(58.1Kg)中。由此引起的放熱反應(yīng)使得溫度上升到82℃。所述反應(yīng)混合物被進(jìn)一步加熱到140℃。將該溫度維持12小時(shí)后，將所述反應(yīng)器的內(nèi)容物冷卻到15℃后進(jìn)行過濾。然后在室溫下用丙酮(33Kg)將濾餅再次攪成漿液，過濾后進(jìn)行干燥從而得到白色固體形式的所述標(biāo)題化合物(35.3Kg，83％)。分解溫度273℃。δ(DMSOd6)7.93(1H，d)，8.42(1H，d).m/z(實(shí)測(cè)值220[M+H]+，100％。C6H6NO6S的計(jì)算值為220.17)。(b)2-羥基-5-磺基煙酸乙酯攪拌下將2-羥基-5-磺基煙酸(500g，2.28mol)溶解在乙醇(2.5L)中并加熱到80℃。30分鐘后，蒸餾掉0.5L的溶劑，然后換上新乙醇(0.5L)并使溫度回到80℃。再過60分鐘后，蒸餾掉1.0L的溶劑，然后換上新乙醇(1.0L)并使溫度回到80℃。再過60分鐘后，蒸餾掉1.0L的溶劑，使反應(yīng)物冷卻到22℃并攪拌16小時(shí)。過濾被沉淀的產(chǎn)物，用乙醇(0.5L)沖洗并在50℃下進(jìn)行真空干燥從而得到白色固體形式的所述標(biāo)題化合物(416g，74％)。分解溫度273℃。δ(DMSOd6)1.25(3H，t)，4.19(2H，q)，7.66(1H，d)，8.13(1H，d)。m/z(實(shí)測(cè)值248[M+H]+，100％。C8H10NO6S的計(jì)算值為248.22)。(c)2-氯-5-氯磺基煙酸乙酯攪拌下將2-羥基-5-磺基煙酸乙酯(24.7g，0.1mol)在亞硫酰氯(238g，2.0mol)和二甲基甲酰胺(1.0mL)中成漿。然后將所述反應(yīng)混合物回流加熱2.5小時(shí)。在真空下除去大量的亞硫酰氯，殘余的亞硫酰氯通過與甲苯共沸來去除從而得到黃色油狀物形式的粗制所述標(biāo)題化合物(30.7g，108％)。d(CDCI3)1.46(3H，t)，4.50(2H，q)，8.72(1H，d)，9.09(1H，d)。該化合物被直接用于下一個(gè)步驟。(d)2-氯-5-(4-乙基-1-哌嗪基磺?；?煙酸乙酯攪拌下將粗制的2-氯-5-氯磺基煙酸乙酯(假設(shè)30.7g，0.1mol)溶解在乙酸乙酯(150mL)中，然后進(jìn)行冷卻。在30分鐘內(nèi)向其中小心加入一種N-乙基哌嗪(11.4g，0.1mol)和三乙胺(22.5g，0.22mol)溶解于乙酸乙酯(50mL)的溶液，同時(shí)保持內(nèi)部溫度低于10℃。一旦加完，就將反應(yīng)物加熱到22℃并且攪拌1小時(shí)。過濾掉固體后在真空下濃縮剩下的濾液，得到以黃色膠狀物形式的粗制所述標(biāo)題化合物(37.1g，103％)。δ(CDCI3)1.10(3H，t)，1.42(3H，m)，2.50(2H，m)，2.60(4H，m)，3.19(4H，m)，4.43(2H，q)，8.40(1H，d)，8.80(1H，d)。m/z(實(shí)測(cè)值362[M+H]+，100％。C14H21ClN3O14S的計(jì)算值為362.85)。(e)2-乙氧基-5-(4-乙基-1-哌嗪基磺酰基)煙酸乙酯攪拌下將2-氯-5-(4-乙基-1-哌嗪基磺?；?煙酸乙酯(36.1g，0.1mol)溶于乙醇(180mL)中的溶液冷卻到10℃。分步加入乙醇鈉(10.2g，0.15mol)，同時(shí)保持溫度低于20℃。然后在室溫下將所述反應(yīng)混合物攪拌18小時(shí)。過濾掉沉淀物并向?yàn)V液中加水(180mL)。然后將所述濾液加熱到40℃并保持1小時(shí)。然后在環(huán)境壓力下將乙醇(180mL)蒸餾掉，將剩下的水溶液冷卻到室溫。然后濾出沉淀物，用水沖洗后在50℃下進(jìn)行真空干燥，得到淺褐色固體形式的所述標(biāo)題化合物(12.6g，34％)。熔點(diǎn)66-68℃。δ(CDCl3)1.04(3H，t)，1.39(3H，t)，1.45(3H，t)，2.41(2H，q)，2.52(4H，m)，3.08(4H，m)，4.38(2H，q)，2.57(2H，q)，8.38(1H，d)，8.61(1H，d).m/z(實(shí)測(cè)值372[M+H]+，100％。C16H26N3O5S的計(jì)算值為372.46)。(f)2-乙氧基-5-(4-乙基-1-哌嗪基磺?；?煙酸將2-乙氧基-5-(4-乙基-1-哌嗪基磺酰基)煙酸乙酯(10.2g，0.0275mol)溶解到甲苯(50mL)中并向其中加入氫氧化鈉(1.1g，0.0275mol)溶解于水(20mL)中的溶液。然后在室溫下將該兩相混合物劇烈攪拌過夜。分離出水相并用濃鹽酸調(diào)到pH＝5.6。將沉淀物與冰混合后冷卻15分鐘，過濾，水沖洗并在50℃下進(jìn)行真空干燥，得到黃白色固體形式的所述標(biāo)題化合物(4.1g，43％)。熔點(diǎn)206-207℃。δ(CDCl3)1.25(3H，t)，1.39(3H，t)，2.82(2H，q)，3.03(4H，m)，3.25(4H，m)，4.50(2H，q)，8.25(1H，d)，8.56(1H，d).m/z(實(shí)測(cè)值344[M+H]+，100％。C14H22N3O5S的計(jì)算值為344.38).(g)3-乙基-1H-吡唑-5-甲酸乙酯 在0℃下于氮?dú)猸h(huán)境中于攪拌下向2，2-二甲氧基丁烷(10g，84.7mMol)于CH2Cl2(50mL)中的溶液中加入吡啶(13.7mL，169.5mMol)。將所述反應(yīng)混合物維持在0℃并在持續(xù)攪拌的條件下于1小時(shí)內(nèi)加入三氯乙酰氯(18.9mL，169.5mMol)于CH2Cl2(35mL)中的溶液。隨著反應(yīng)的進(jìn)行，桔黃色溶液開始沉淀出一種白色固體。在20小時(shí)內(nèi)將所述反應(yīng)混合物加熱到室溫。用乙醇(150mL)稀釋所述反應(yīng)混合物，再次冷卻到℃后用水合肼(8.2ml，169.5mMol)于乙醇(35mL)中的溶液處理30分鐘。將反應(yīng)加熱到50℃后于環(huán)境壓力下將溶劑蒸發(fā)掉。升溫到78℃。再回流2小時(shí)，然后冷卻到室溫。用水(250mL)稀釋所述反應(yīng)混合物并于減壓的條件下通過蒸發(fā)除去乙醇。得到的混合物用CH2Cl2(3×200mL)來提取。對(duì)合并的有機(jī)物進(jìn)行干燥(MgSO4)、過濾和減壓蒸發(fā)，得到褐色油狀物形式的所述標(biāo)題化合物，12.05g，85％。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ＝1.20(3H，t)，1.28(3H，t)，2.67(2H，q)，4.29(2H，q)，6.55(1H，s)，12.56(1H，s)。LRMS m/z＝167.1[M-H]+，C8H12N2O2的計(jì)算值為168.2。(h)3-乙基-1H-吡唑-5-甲酸乙酯 將氫氧化鈉水溶液(10M；100ml，1.0mol)分步加入制備方法1(g)的所述標(biāo)題化合物(66.0g，0.39mol)于甲醇中的攪拌懸浮液中，然后將得到的溶液回流加熱4小時(shí)。在減壓的條件下將被冷卻的反應(yīng)混合物濃縮到約200ml，再用水(200ml)進(jìn)行稀釋，然后用甲苯(3×100ml)洗滌該混合物。用濃鹽酸將得到的水相酸化到pH4并收集白色沉淀物，然后通過抽濾進(jìn)行干燥從而得到所述的標(biāo)題化合物(34.1g)。δ(DMSOd6)1.13(3H，t)，2.56(2H，q)，6.42(1H，s)。(i)4-硝基-3-正-丙基-1H-吡唑-5-甲酸將發(fā)煙硫酸(17.8ml)分步加入被攪拌的冰冷卻的發(fā)煙硝酸(16.0ml)中，將得到的溶液加熱到50℃，然后在30分鐘內(nèi)分步加入3-正-丙基-1H-吡唑-5-甲酸(Chem.Pharm.Bull.，1984，32，1568；16.4g，0.106mol)同時(shí)將溫度維持在60℃以下。在60℃下將得到的溶液加熱18小時(shí)，進(jìn)行冷卻，然后倒到冰上。收集白色沉淀物，用水洗滌并通過抽濾進(jìn)行干燥從而產(chǎn)生所述的標(biāo)題化合物(15.4g)，熔點(diǎn)為170-172℃。實(shí)測(cè)值C，42.35；H，4.56；N，21.07.C7H9N3O4的計(jì)算值為C，42.21；H，4.55；N，21.10％。δ(DMSOd6)0.90(3H，t)，1.64(2H，m)，2.83(2H，m)，14.00(1H，s)。(j)3-乙基-4-硝基-1H-吡唑-5-甲酸 通過類似于制備方法1(i)的方法由制備方法1(h)的標(biāo)題化合物得到一種褐色固體(64％)。δ(DMSOd6)1.18(3H，t)，2.84(2H，m)，13.72(1H，s)。(k)4-硝基-3-正-丙基-1H-吡唑-5-甲酰胺將制備方法1(i)的標(biāo)題化合物(15.4g，0.077mol)于亞硫酰氯(75ml)中的溶液回流加熱3小時(shí)后在減壓的條件下蒸發(fā)冷卻的反應(yīng)混合物。將所述剩余物與四氫呋喃(2×50ml)進(jìn)行共沸后懸浮在四氫呋喃(50ml)中，然后對(duì)攪拌的懸浮液進(jìn)行冰冷卻并用氨氣處理1小時(shí)。加入水(50ml)并在減壓的條件下蒸發(fā)得到的混合物從而得到一種白色固體，用水研磨該白色固體并通過抽濾進(jìn)行干燥從而得到所述的標(biāo)題化合物(14.3g)，熔點(diǎn)197-199℃。實(shí)測(cè)值C，42.35；H，5.07；N，28.38.C7H10N4O3的計(jì)算值為C，42.42；H，5.09；N，28.27％.δ(DMSOd6)0.90(3H，t)，1.68(2H，m)，2.86(2H，t)，7.68(1H，s)，8.00(1H，s)。(l)3-乙基-4-硝基-1H-吡唑-5-甲酰胺 通過類似于制備方法1(k)的方法由制備方法1(j)的標(biāo)題化合物得到一種白色固體(90％)。δ(DMSOd6)1.17(3H，t)，2.87(2H，m)，7.40(1H，s)，7.60(1H，s)，7.90(1H，s).LRMSm/z185(M+1)+。(m)(i)5-乙基-1-(2-甲氧乙基)-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酰胺 將3-乙基-4-硝基-1H-吡唑-5-甲酰胺(2.5kg，13.6Mol)、碳酸鈉(1.8Kg，17.0Mol)和2-溴乙基甲基醚(1.98kg，14.2Mol)于THF(22.5L)和水(2.5L)中的混合物攪拌回流加熱20小時(shí)。將所述混合物冷卻到室溫并且加入CH2Cl2(67.5L)和水(22.5L)。對(duì)產(chǎn)生的有機(jī)相和水相進(jìn)行分離。用CH2Cl2(22.5L)提取水相并在大氣壓下對(duì)合并的有機(jī)溶液進(jìn)行蒸餾而且用乙酸乙酯(33L)進(jìn)行取代從而使終體積達(dá)到17L。將冷卻的混合物在環(huán)境溫度下粒化2小時(shí)，過濾后用乙酸乙酯(2.5L)進(jìn)行滌洗。得到2.10kg白色晶體形式5-乙基-1-(2-甲氧乙基)-4-硝基-1H吡唑-3-甲酰胺，產(chǎn)率57％，熔點(diǎn)＝140℃。實(shí)測(cè)值C，44.46；H，5.79；N，23.01。C9H14N4O4的計(jì)算值為C，44.63；H，5.79；N，23.14％。δ(DMSOd6)1.18(3H，t)，2.98(2H，q)，3.22(3H，s)，3.77(2H，t)，4.28(2H，q)，6.03(1H，s)，7.36(1H，s)。LRMSm/z＝243(M+1)+。(m)(ii)5-乙基-1-(2-甲氧乙基)-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酰胺在室溫下將3-乙基-4-硝基-1H-吡唑-5-甲酰胺(25g，0.136Mol)、碳酸鈉(18g，0.17Mol)和碘化鈉(20.4g，0.136Mol)的混合物懸浮在甲乙酮(125mL)中。加入2-溴乙基甲基醚(12.8mL，0.142Mol)并將所述混合物攪拌回流加熱70小時(shí)。將所述混合物冷卻到環(huán)境溫度并加入水(250mL)?；亓骷訜崴玫降娜芤翰⒃谠摐囟认戮S持30分鐘，然后冷卻至室溫。將所得到的沉淀物在室溫下粒化3小時(shí)，過濾并真空干燥從而得到24.3g，74％的黃色晶體形式的5-乙基-1-(2-甲氧乙基)-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酰胺。數(shù)據(jù)如制備方法1(m)(i)所示。(n)4-氨基-5-乙基-1-(2-甲氧乙基)-1H-吡唑-3-甲酰胺 在一個(gè)密封容器中于50psi/25℃下將5-乙基-1-(2-甲氧乙基)-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酰胺(20g，82.6mMol)和5％Pd/C(1g)于甲醇(200mL)中的混合物密封攪拌15小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，通過arbocel過濾所述反應(yīng)混合物并用甲醇沖洗濾餅。在大氣下對(duì)所述的甲醇化溶液進(jìn)行蒸餾并用乙酸乙酯進(jìn)行取代從而使得終體積達(dá)到100mL。在環(huán)境溫度下將所述被冷卻的混合物?；?小時(shí)，過濾并用乙酸乙酯(20mL)沖洗從而得到15g，88％的白色晶體形式的4-氨基-5-乙基-1-(2-甲氧乙基)-1H-吡唑-3-甲酰胺。熔點(diǎn)＝131℃。實(shí)測(cè)值C，50.75；H，7.62；N，26.38.C9H16N4O2的計(jì)算值為C，50.94；H，7.55；N，26.42％。δ(CDCl3)1.20(3H，t)，2.63(2H，q)，3.32(3H，s)，3.74(2H，t)，3.95(2H，s)，4.15(2H，t)，5.27(1H，s)，6.59(1H，s)。LRMSm/z＝213(M+1)+(o)N-[3-氨基甲?；?5-乙基-1-(2甲氧乙基)-1H-吡唑-4-基]-2-乙氧基-5-(4乙基-1-哌嗪基磺酰基)煙酰胺 途徑(a)在室溫下將2-乙氧基-5-(4-乙基-1-哌嗪基磺?；?煙酸(2.31kg，6.73Mol)懸浮在乙酸乙酯(16.2L)中并加入1，1-羰基二咪唑(1.09kg，6.73Mol)。在45℃下將所述反應(yīng)混合物加熱40分鐘，然后在回流條件下將所述反應(yīng)物再攪拌40分鐘。冷卻到環(huán)境溫度后，將4-氨基-5-乙基-1-(2-甲氧乙基)-1H-吡唑-3-甲酰胺(1.5kg，7.06Mol)加到被冷卻的混合物中，在回流條件下將所述反應(yīng)物再攪拌15小時(shí)。將所述混合物冷卻過濾，并用90％水/10％乙酸乙酯沖洗濾餅(2mL/g)從而得到3.16kg，88％的黃白色晶體形式的N-[3-氨基甲?；?5-乙基-1-(2甲氧乙基)-1H-吡唑-4-基}-2-乙氧基-5-(4乙基-1-哌嗪基磺?；?煙酰胺。熔點(diǎn)＝156℃。實(shí)測(cè)值C，51.33；H，6.56；N，18.36。C23H35N7O6S的計(jì)算值為C，51.40；H，6.53；N，18.25％。δ(CDCl3)1.04(3H，t)，1.22(3H，t)，1.60(3H，t)，2.44(2H，q)，2.54(4H，m)，2.96(2H，q)，3.12(4H，m)，3.36(3H，s)，3.81(2H，t)，4.27(2H，t)，4.80(2H，q)，5.35(1H，s)，6.68(1H，s)，8.66(1H，d)，8.86(1H，d)，10.51(1H，s)。LRMSm/z＝539(M+1)+途徑(b)在室溫下將2-乙氧基-5-(4-乙基-1-哌嗪基磺?；?煙酸(27.5g，0.08Mol)懸浮在乙酸乙酯(0.193L)中并加入1，1-羰基二咪唑(13.3g，0.082Mol)。在45℃下將所述反應(yīng)混合物加熱15分鐘，然后在回流條件下將所述反應(yīng)物再攪拌60分鐘。冷卻到環(huán)境溫度后，將4-氨基-5-乙基-1-(2-甲氧乙基)-1H-吡唑-3-甲酰胺(16.5g，0.078Mol)加到被冷卻的混合物中，在回流條件下將所述反應(yīng)物再攪拌17小時(shí)。將所述溶液冷卻并加入水(0.07L)和乙酸乙酯(0.17L)。將所述漿狀物加熱到40℃并分離有機(jī)相。通過蒸發(fā)掉0.23L的溶劑來濃縮所述的有機(jī)相。冷卻所述濃縮物，在0-10℃下?；筮M(jìn)行過濾，用90％水/10％乙酸乙酯(2mL/g)沖洗濾餅從而得到38.7g，89％的灰白色晶體固體形式的N-[3-氨基甲?；?5-乙基-1-(2-甲氧乙基)-1H-吡唑-4-基}-2-乙氧基-5-(4-乙基-1-哌嗪基磺酰基)煙酰胺。熔點(diǎn)＝159-161℃。δ(CDCl3)1.04(3H，t)，1.22(3H，t)，1.61(3H，t)，2.42(2H，q)，2.54(4H，m)，2.96(2H，q)，3.12(4H，m)，3.36(3H，s)，3.81(2H，t)，4.27(2H，t)，4.78(2H，q)，5.35(1H，s)，6.68(1H，s)，8.66(1H，d)，8.86(1H，d)，10.51(1H，s)。LRMSm/z＝538(M+1)+實(shí)施例2的起始物的制備a)吡啶-2-氨基-5-磺酸 在30分鐘內(nèi)將2-氨基吡啶(80g，0.85mol)分步加入發(fā)煙硫酸中(320g)并將得到的溶液在140℃下加熱到4小時(shí)。在冷卻過程中，將所述反應(yīng)物倒在冰(200g)上并在冰/鹽浴中將該混合物再攪拌2小時(shí)。過濾所得到的懸浮液，用冰水(22ml)和冷卻的IMS(22ml)洗滌得到的固體并通過抽濾進(jìn)行干燥從而得到固體形式的所述標(biāo)題化合物111.3g；LRMSm/z 175(M+1)+。b)吡啶-2-氨基-3-溴-5-磺酸 在1小時(shí)內(nèi)將溴(99g，0.62mol)分步加入由步驟a)得到的產(chǎn)物(108g，0.62mol)溶于水(600mol)中的熱溶液中以便維持穩(wěn)定的回流狀態(tài)。一旦加完，就對(duì)所述反應(yīng)物進(jìn)行冷卻并對(duì)得到的混合物進(jìn)行過濾。用水沖洗所述固體并通過抽濾進(jìn)行干燥從而得到53.4g的所述標(biāo)題化合物；δ(DMSOd6，300MHz)8.08(1H，s)，8.14(1H，s)；LRMSm/z 253(M)+。c)吡啶-3-溴-2-氯-5-磺酰氯
將亞硝酸鈉(7.6g，110.0mmol)于水(30ml)中的溶液分步加入到步驟b)的產(chǎn)物(25.3g，100.0mmol)于鹽酸水溶液(115ml，20％)中的經(jīng)冰冷卻的溶液中，以便將溫度維持在6℃以下。在0℃下將所述反應(yīng)物攪拌30分鐘后再在室溫下攪拌1小時(shí)。在減壓的條件下蒸發(fā)所述反應(yīng)混合物并在70℃下將剩余物真空干燥72小時(shí)。在125℃下將該五氯化磷固體(30.0g，144mmol)和氯化氧磷(1ml，10.8mmol)的混合物加熱3小時(shí)。將所述反應(yīng)混合物倒在冰(100g)上并過濾得到的固體，然后用水洗滌。將所述產(chǎn)物溶解在二氯甲烷中，進(jìn)行干燥(MgSO4)并在減壓的條件下進(jìn)行蒸發(fā)從而得到26.58g的黃色固體形式的所述標(biāo)題化合物；δ(CDCl3，300MHz)8.46(1H，s)，8.92(1H，s)。d)3-溴-2-氯-5-(4-乙基哌嗪-1-基磺?；?吡啶 將1-乙基哌嗪(11.3ml，89.0mmol)和三乙胺(12.5ml，89.0mmol)于二氯甲烷(150mL)中的溶液分步加入到步驟c)的產(chǎn)物(23.0g，79.0mmol)于二氯甲烷(150ml)中的經(jīng)冰冷卻的溶液中并在0℃下將該反應(yīng)攪拌1小時(shí)。在減壓的條件下濃縮該反應(yīng)混合物，然后采用二氯甲烷∶甲醇(99∶1至97∶3)的洗脫梯度，通過硅膠柱層析純化殘余的褐色油狀物，從而得到了14.5g的桔黃色固體形式的所述標(biāo)題化合物；δ(CDCl3，300MHz)1.05(3H，t)，2.42(2H，q)，2.55(4H，m)，3.12(4H，m)，8.24(1H，s)，8.67(1H，s)。e)3-溴-2-乙氧基-5(4-乙基哌嗪-1基磺?；?吡啶 將步驟d)的產(chǎn)物(6.60g，17.9mmol)和乙醇鈉(6.09g，89.55mmol)于乙醇(100ml)中的混合物回流加熱18小時(shí)，然后冷卻。在減壓的條件下濃縮所述反應(yīng)混合物，剩余物被分成水相(100ml)和乙酸乙酯相(100mL)，將該兩相分開。用乙酸乙酯(2×100ml)提取水相，將合并的有機(jī)溶液進(jìn)行干燥(MgSO4)并在減壓條件下進(jìn)行蒸發(fā)從而得到6.41g的褐色固體形式的所述標(biāo)題化合物；實(shí)測(cè)值C，41.27；H，5.33；N，11.11，C13H20BrN3O3S的計(jì)算值為C，41.35；H，5.28；N，10.99％；δ(CDCl3，300MHz)1.06(3H，t)，1.48(3H，t)，2.42(2H，q)，2.56(4H，m)，3.09(4H，m)，4.54(2H，q)，8.10(1H，s)，8.46(1H，s)；LRMSm/z 378，380(M+1)+。f)吡啶2-乙氧基-5-(4-乙基哌嗪-1-基磺?；?-3-甲酸乙酯 將步驟e)的產(chǎn)物(6.40g，16.92mol)、三乙胺(12ml，86.1mmol)和三(三苯膦)鈀(0)于乙醇(60ml)中的混合物在100℃和200psi下于一氧化碳環(huán)境中加熱18小時(shí)，然后冷卻。在減壓的條件下蒸發(fā)所述反應(yīng)混合物，然后采用二氯甲烷∶甲醇(100∶0至97∶3)的洗脫梯度，通過硅膠柱層析純化殘余物從而得到橙色油狀物形式的所述標(biāo)題化合物，6.2g；δ(CDCl3，300MHz)1.02(3H，t)，1.39(3H，t)，1.45(3H，t)，2.40(2H，q)，2.54(4H，m)，3.08(4H，m)，4.38(2H，q)，4.55(2H，q)，8.37(1H，s)，8.62(1H，s)；LRMSm/z 372(M+1)+。g)吡啶2-乙氧基-5-(4-乙氧基哌嗪-1-基磺?；?-3-甲酸 在室溫下將步驟f)的產(chǎn)物(4.96g，13.35mmol)和氫氧化鈉水溶液(25ml，2N，50.0mmol)于乙醇(25mL)中的混合物攪拌兩小時(shí)。在減壓的條件下將所述反應(yīng)混合物濃縮到其一半的體積，用乙醚沖洗并用4N的鹽酸酸化到pH5。用二氯甲烷(3×30ml)提取所述水溶液，對(duì)合并的有機(jī)提取物進(jìn)行干燥(MgSO4)并在減壓的條件下進(jìn)行蒸發(fā)從而得到4.02g的褐色固體形式的所述標(biāo)題化合物；δ(DMSOd6，300MHz)1.18(3H，t)，1.37(3H，t)，3.08(2H，q)，3.17-3.35(8H，m)，4.52(2H，q)，8.30(1H，s)，8.70(1H，s)。h)4-[2-乙氧基-5-(4-乙基哌嗪-1-基磺?；?吡啶-3-基甲酰胺基]-1H-3-乙基吡唑-5-甲酰胺 將4-氨基-3-乙基-1H-吡唑-5-甲酰胺(WO 9849166，制備方法8)(9.2g，59.8mmol)于N，N-二甲基甲酰胺(60ml)中的溶液加到步驟g)的產(chǎn)物(21.7g，62.9mmol)、1-羥基苯并三唑水合物(10.1g，66.0mmol)和三乙胺(13.15ml，94.3mmol)于二氯甲烷(240ml)中的溶液中。加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(13.26g，69.2mmol)并在室溫下將所述反應(yīng)物攪拌6小時(shí)。在減壓的條件下除去二氯甲烷，將剩余的溶液倒入乙酸乙酯(400ml)中，用碳酸氫鈉水溶液(400ml)洗滌該混合物。過濾產(chǎn)生的晶體沉淀物，用乙酸乙酯洗滌并在真空下進(jìn)行干燥，從而得到22g白色粉狀的所述標(biāo)題化合物；δ(CDCl3+1滴DMSOd6)0.96(3H，t)，1.18(3H，t)，1.50(3H，t)，2.25-2.56(6H，m)，2.84(2H，q)，3.00(4H，m)，4.70(2H，q)，5.60(1H，br s)，6.78(1H，br s)，8.56(1H，d)，8.76(1H，d)，10.59(1H，s)，12.10-12.30(1H，s)；LRMSm/z 480(M+1)+。i)2-甲氧基乙基-4-[2-乙氧基-5-(4-乙基哌嗪-1-基磺?；?吡啶-3-基甲酰胺基]-3-乙基吡唑-5-甲酰胺
將2-乙氧基-5-(4-乙基-1-哌嗪基磺酰基)煙酸(2.31kg，6.73Mol)懸浮在乙酸乙酯(16.2L)中并在室溫下加入1，1-羰基二咪唑(1.09kg，6.73Mol)。在45℃下將所述反應(yīng)混合物加熱40分鐘，然后在回流的條件下再將所述反應(yīng)物攪拌40分鐘。冷卻到室溫后，將4-氨基-5-乙基-1-(2-甲氧乙基)-1H-吡唑-3-甲酰胺(1.5kg，7.06Mol)加到被冷卻的所述混合物中，并在回流的條件下再攪拌15小時(shí)。將所述混合物冷卻過濾并用90％水/10％乙酸乙酯(2mL/g)沖洗濾餅從而得到3.16kg，88％的灰白色晶體形式的N-[3-氨基甲?；?5-乙基-1-(2-甲氧乙基)-1H-吡唑-4-基}-2-乙氧基-5-(4-乙基-1-哌嗪基磺?；?煙酰胺。熔點(diǎn)＝156℃。實(shí)測(cè)值C，51.33；H，6.56；N，18.36。C23H35N7O6S的計(jì)算值為C，51.40；H，6.53；N，18.25％。δ(CDCl3)1.04(3H，t)，1.22(3H，t)，1.60(3H，t)，2.44(2H，q)，2.54(4H，m)，2.96(2H，q)，3.12(4H，m)，3.36(3H，s)，3.81(2H，t)，4.27(2H，t)，4.80(2H，q)，5.35(1H，s)，6.68(1H，s)，8.66(1H，d)，8.86(1H，d)，10.51(1H，s)。LRMSm/z＝539(M+1)+制備方法31-(6-乙氧基-5-[3-乙基]-6，7-二氫-2-(2-甲氧乙基)-7-氧代-2H-吡唑并[4，3d]嘧啶-5-基]-3-吡啶基磺酰基)-4-乙基哌嗪·乙酸乙酯溶劑化物 途徑(a)為了制備制備方法3的化合物，將制備方法1的標(biāo)題化合物、N-[3-氨基甲?；?5-乙基-1-(2-甲氧乙基)-1H-吡唑-4-基}-2-乙氧基-5-(4-乙基-1-哌嗪基磺酰基)煙酰胺(1.18kg，2.2Mol)、叔丁醇鉀(500g，4.4mol)和乙酸乙酯(193g)于乙醇(11.8L)中的混合物在120℃下加熱20小時(shí)。然后在減壓的條件下濃縮所述反應(yīng)混合物，總共蒸發(fā)了大約10L的溶劑。向剩余物中加入水(2.9L)并在室溫下攪拌所述混合物，同時(shí)加入HCl的水溶液直到將溶液調(diào)到pH7.5。加入乙酸乙酯(7.5L)并將兩相混合物加熱到55℃。分離出有機(jī)相后再用乙酸乙酯提取水相(3.0L)。在大氣壓下將合并的有機(jī)相蒸餾到終體積為4L。在5℃下將被沉淀的固體?；?小時(shí)，過濾并用乙酸乙酯(1.2L)沖洗，然后進(jìn)行真空干燥。由此得到877g，78％的淺黃色晶體形式的1-(6-乙氧基-5-[3-乙基]-6，7-二氫-2-(2-甲氧乙基)-7-氧代-2H-吡唑[4，3-d]嘧啶-5-基]-3-吡啶磺酰基)-4-乙基哌嗪。熔點(diǎn)＝157℃。實(shí)測(cè)值C，52.65；H，6.46；N，17.76。C23H33N7O5S.0.2C2H5CO2CH3的計(jì)算值為C，53.21；H，6.49；N，18.25％。δ(CDCI3)1.07(3H，t)，1.42(3H，t)，1.61(3H，t)，2.44(2H，q)，2.57(4H，m)，3.08(2H，q)，3.15(4H，m)，3.32(3H，s)，3.92(2H，q)，4.48(2H，q)，4.77(2H，q)，8.65(1H，d)，9.06(1H，d)。光譜也具有與乙酸乙酯的溶劑化物對(duì)應(yīng)的信號(hào)。LRMSm/z＝520(M+1)+途徑(b)為了制備制備方法3的化合物，將制備方法1的標(biāo)題化合物、N-[3-氨基甲酰基-5-乙基-1-(2-甲氧乙基)-1H-吡唑-4-基]-2-乙氧基-5-(4-乙基-1-哌嗪基磺?；?煙酰胺(34.6g，0.064Mol)、叔丁醇鉀(14.8g，0.132moles)和乙酸乙酯(8.5g 0.096mol)于乙醇(0.26L)中的混合物在105-107℃下加熱17小時(shí)。然后在減壓的條件下濃縮所述混合物，總共蒸發(fā)了大約0.16L的溶劑。向剩余的油狀物中加入水(0.28L)中并在室溫下攪拌所述混合物，同時(shí)加入含水HCl直至將溶液調(diào)到pH7.5。在-10℃至0℃下將被沉淀的固體?；?小時(shí)，過濾并用乙醇(0.4L)沖洗，然后進(jìn)行真空干燥。由此得到23.3g，69.7％的淺黃色晶體形式的1-(6-乙氧基-5-[3-乙基]-6，7-二氫-2-(2-甲氧乙基)-7-氧代-2H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-5-基]-3-吡啶基磺酰基)-4-乙基哌嗪。熔點(diǎn)＝168-170℃。δ(CDCl3)1.07(3H，t)，1.42(3H，t)，1.61(3H，t)，2.44(2H，q)，2.57(4H，m)，3.08(2H，q)，3.15(4H，m)，3.32(3H，s)，3.92(2H，q)，4.48(2H，q)，4.77(2H，q)，8.64(1H，d)，9.05(1H，d)。LRMSm/z＝520(M+1)+實(shí)施例11-{6-乙氧基-5-[3-乙基-6，7-二氫-2-(2-甲氧乙基)-7-氧代-2H-吡唑并[4，3 d]嘧啶-5-基]-3-吡啶基磺?；鶀-4-乙基哌嗪 向10g(0.019mol)制備方法3(a)的標(biāo)題化合物1-{6-乙氧基-5-[3-乙基-6，7-二氫-2-(2-甲氧乙基)-7-氧代-2H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-5-基]-3-吡啶基磺酰基}-4-乙基哌嗪乙酸乙酯溶劑化物中加入12ml/g(120ml)的16％的水于乙醇中的溶液。對(duì)該混合液體進(jìn)行加熱回流從而得到一種溶液，然后在大氣壓下蒸發(fā)掉6ml/g(60ml)的溶劑。然后將該溶液冷卻到室溫，在冷卻過程中于40℃時(shí)發(fā)生了結(jié)晶。然后將此漿液冷卻到5-10℃并?；?0分鐘，然后進(jìn)行過濾并用2ml/g乙醇(20ml)進(jìn)行沖洗。在55-60℃下過夜真空干燥濕固體從而得到一種白色晶體(產(chǎn)率7.6g，76％)。熔點(diǎn)為162-165℃。δ(CDCl3)1.05(3H，t)，1.42(3H，t)，1.58(3H，t)，2.43(2H，q)，2.57(4H，t)，3.09(2H，t)，3.15(4H，t)，3.30(3H，s)，3.93(2H，t)，4.48(2H，t)，4.90(2H，q)，8.65(1H，d)，9.05(1H，d)，10.65(1H，s)。
實(shí)施例21-{6-乙氧基-5-[3-乙基-6，7-二氫-2-(2-甲氧乙基)-7-氧代-2H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-5-基]-3-吡啶基磺?；?4-乙基哌嗪 向10g(0.019mol)制備方法3(b)的標(biāo)題化合物1-{6-乙氧基-5-[3-乙基-6，7-二氫-2-(2-甲氧乙基)-7-氧代-2H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-5-基]-3-吡啶基磺?；鶀-4-乙基哌嗪乙酸乙酯溶劑化物中加入12ml/g(120ml)的16％的水于乙醇中的溶液。對(duì)該混合液體進(jìn)行加熱回流從而得到一種溶液，然后在大氣壓下蒸發(fā)掉9.5ml/g(60ml)的溶劑。將該溶液冷卻到室溫，在冷卻過程中于40℃時(shí)發(fā)生了結(jié)晶。然后將結(jié)晶漿液冷卻到0-10℃并?；?0分鐘，然后進(jìn)行過濾并用2ml/g乙醇(20ml)進(jìn)行沖洗。在55-60℃下過夜真空干燥濕固體從而得到-種白色晶體(產(chǎn)率9.4g，94％)。熔點(diǎn)為158-160℃。δ(CDCl3)1.05(3H，t)，1.42(3H，t)，1.58(3H，t)，2.43(2H，q)，2.57(4H，t)，3.09(2H，t)，3.15(4H，t)，3.30(3H，s)，3.93(2H，t)，4.48(2H，t)，4.90(2H，q)，8.65(1H，d)，9.05(1H，d)，10.65(1H，s)。
在實(shí)施例的方法中，可以采用水和藥用醇如甲醇、乙醇、丙醇，優(yōu)選地是乙醇或異丙醇及其混合物。這些方法還可以被用于所述標(biāo)題化合物的重結(jié)晶。
如化學(xué)領(lǐng)域的技術(shù)人員所了解的，溶劑化物可以通過本技術(shù)領(lǐng)域中多種已知方法來制備。
1-{6-乙氧基-5-[3-乙基-6，7-二氫-2-(2-甲氧乙基)-7-氧代-2H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-5-基]-3-吡啶基磺?；鶀-4-乙基哌嗪的其它溶劑化物可以由乙酸乙酯溶劑化物(制備方法3的化合物)或由實(shí)施例1或2的化合物來制備。所述其它溶劑化物例如可以通過以下方式來制備(a)通過較長(zhǎng)的時(shí)間(例如約兩星期)將起始化合物與待測(cè)溶劑(例如乙腈)制成漿液，過濾出固體物質(zhì)，然后對(duì)所述“濕的”即非干燥的固體(溶劑化的)物質(zhì)進(jìn)行PXRD分析(如上文所定義的)；(b)將起始化合物溶解在待測(cè)溶劑(例如乙腈)中，然后通過適當(dāng)?shù)姆椒ㄈ缋鋮s或蒸發(fā)技術(shù)將所需的溶劑化物從所述溶液中重結(jié)晶出來，然后對(duì)所述“濕的”即非干燥的固體(溶劑化的)物質(zhì)進(jìn)行分析(利用本技術(shù)領(lǐng)域中已知的常規(guī)PXRD技術(shù)或紅外線分析方法)。
上文所定義的晶體化合物可以利用本技術(shù)領(lǐng)域中的常規(guī)技術(shù)如利用加熱處理(優(yōu)選地在約100℃至約150℃的溫度下)或利用真空技術(shù)(從環(huán)境溫度至環(huán)境溫度以上)或通過在非溶劑化溶劑中制漿(例如實(shí)施例1和2中所示)對(duì)其溶劑化物進(jìn)行去溶劑化來制備。
化學(xué)領(lǐng)域的技術(shù)人員可以利用可替代的干燥技術(shù)來制備上文所定義的晶體化合物。
已經(jīng)制備的1-{6-乙氧基-5-[3-乙基-6，7-二氫-2-(2-甲氧乙基)-7-氧代-2H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-5-基]-3-吡啶基磺酰基}-4-乙基哌嗪的其它溶劑化物包括正-丁醇、甲乙酮(MEK)、乙腈、四氫呋喃、甲苯。溶劑化物的存在可以通過PXRD來描述。
例如1-{6-乙氧基-5-[3-乙基-6，7-二氫-2-(2-甲氧乙基)-7-氧代-2H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-5-基]-3-吡啶基磺?；鶀-4-乙基哌嗪的乙腈溶劑化物可以通過以下方法來制備首先將所述物質(zhì)溶解在熱乙腈中，然后緩慢冷卻，接著在環(huán)境溫度下進(jìn)行過夜?；Ｈ缓笤谡婵障逻^濾所述溶液并在環(huán)境溫度和壓力下干燥得到的固體物質(zhì)(溶劑化物)。利用PXRD檢測(cè)所述溶劑化物的存在。一種檢測(cè)溶劑化物的替代方法是通過TGA監(jiān)控重量的損失。盡管可能形成其它溶劑化物但由乙腈形成的溶劑化物以半溶劑化物的形式存在。
由差式掃描量熱法(DSC)測(cè)得的結(jié)果表明，在約150℃下進(jìn)行干燥時(shí)，這些溶劑化物能夠產(chǎn)生無(wú)定形的1-{6-乙氧基-5-[3-乙基-6，7-二氫-2-(2-甲氧乙基)-7-氧代-2H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-5-基]-3-吡啶基磺?；鶀-4-乙基哌嗪的游離堿。
本文的DSC實(shí)驗(yàn)是通過以20℃/分鐘的加熱速率利用PerkinElmer DSC7/TGA7進(jìn)行測(cè)量來進(jìn)行的。
所附的

圖1表示具有如表1中所示PXRD花樣的所述晶體物質(zhì)(實(shí)施例1的化合物)的DSC曲線；乙酸乙酯溶劑化物(制備方法3的化合物)的DSC曲線；乙腈溶劑化物(實(shí)施例1的化合物，其中所述溶劑化物按照上文詳述的方法來制備)的DSC曲線。
權(quán)利要求
1.1-{6-乙氧基-5-[3-乙基-6，7二氫-2-(2-甲氧乙基)-7-氧代-2H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-5-基]-3-吡啶基磺?；鶀-4-乙基哌嗪多晶型物，其具有實(shí)質(zhì)上如下所定義的主峰的模擬粉末X-射線衍射花樣
其中所述PXRD花樣是通過利用波長(zhǎng)為1.54178埃的銅K-α1 X-射線產(chǎn)生的。
全文摘要
1－{6－乙氧基－5－[3－乙基－6，7二氫－2－(2－甲氧乙基)－7－氧代－2H－吡唑并[4，3－d]嘧啶－5－基]－3－吡啶基磺?；鶀－4－乙基哌嗪的多晶型物。
文檔編號(hào)A61P43/00GK1444585SQ01813392
公開日2003年9月24日 申請(qǐng)日期2001年7月18日 優(yōu)先權(quán)日2000年7月28日
發(fā)明者L·J·哈里斯, R·A·斯托利, A·S·伍德 申請(qǐng)人:輝瑞大藥廠