專利名稱：洛伐他汀的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及洛伐他汀的一種制備方法。 (二)、背景技術(shù)洛伐他汀在體內(nèi)竟?fàn)幮缘匮鲋颇懝檀己铣蛇^程中的限速酶羥 甲或二酰輔酶A還原酶，使膽固醇合成減少，對動脈粥樣硬化和冠心病具有防治作用。 洛伐他汀由微生物發(fā)酵經(jīng)提取精制獲得，發(fā)酵單位的高低直接影響產(chǎn)量的高低。
傳統(tǒng)發(fā)酵培養(yǎng)基配方由于其營養(yǎng)結(jié)構(gòu)，酸堿環(huán)境不合理，普遍存在發(fā)酵單位低 ( 一般在S000單位左右)，發(fā)酵周期長( 一般為8天左右)的缺點(diǎn)。(三)、發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是，提供一種新的洛伐他汀的制 備方法，通過改善發(fā)酵培養(yǎng)基的配方結(jié)構(gòu)，提高發(fā)酵單位，縮短發(fā)酵周期。
為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用了以下技術(shù)方案。 —種洛伐他汀的制備方法，其特征在于主要包括以下步驟在培養(yǎng)基中加入 培養(yǎng)基重量0.4% 0.8%的檸檬酸，培養(yǎng)基重量0.4% 0.64%的醋酸鈉，培養(yǎng)基重量 0.016% 0.032%的氫氧化鈉，培養(yǎng)基重量0.08% 0.24%的碳酸鈣，制成新培養(yǎng)基；新 培養(yǎng)基滅菌；將洛伐他汀菌種接入新培養(yǎng)基中；培養(yǎng)。 本發(fā)明的積極效果是本發(fā)明通過在洛伐他汀發(fā)酵配方中加入特定種類和比例 的添加劑，改善了發(fā)酵培養(yǎng)基的配方結(jié)構(gòu)，優(yōu)化了發(fā)酵酸堿環(huán)境，與原有方法相比較， 洛伐他汀發(fā)酵單位提高30%左右，發(fā)酵周期由過去的8天縮短為5天。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步描述。
實(shí)施例一
原料配方如下( — )、培養(yǎng)基水1000克，葡萄糖200克，大豆粉40克，蛋白胨10克，麥芽 提取物0.5克，101^040.5克，MgSO40.5克，NaC12克。 (二)、添加劑檸檬酸7.5克，醋酸鈉6.5克，氫氧化鈉0.3克，碳酸鈣2克。
制備方法如下 將全部原料在發(fā)酵罐內(nèi)混勻，制成新培養(yǎng)基，攪拌下12(TC、 30分鐘滅菌；將 洛伐他汀菌種接入經(jīng)滅菌的新培養(yǎng)基中；26t:下，通入無菌空氣，培養(yǎng)5天。其他工藝 步驟和條件均按常規(guī)。經(jīng)檢測，發(fā)酵單位9000單位。
實(shí)施例二
原料配方如下( — )、培養(yǎng)基水1000克，葡萄糖200克，大豆粉40克，蛋白胨10克，麥芽 提取物0.5克，101^040.5克，MgSO40.5克，NaC12克。 (二)、添加劑檸檬酸5克，醋酸鈉8克，氫氧化鈉0.2克，碳酸鈣3克。
制備方法如下 將全部原料在發(fā)酵罐內(nèi)混勻，制成新培養(yǎng)基，攪拌下12(TC、 30分鐘滅菌；將 洛伐他汀菌種接入經(jīng)滅菌的新培養(yǎng)基中；26t:下，通入無菌空氣，培養(yǎng)5天。其他工藝 步驟和條件均按常規(guī)。經(jīng)檢測，發(fā)酵單位9500單位。
實(shí)施例三
原料配方如下( — )、培養(yǎng)基水1000克，葡萄糖200克，大豆粉40克，蛋白胨10克，麥芽 提取物0.5克，101^040.5克，MgSO40.5克，NaC12克。 (二)、添加劑檸檬酸10克，醋酸鈉5克，氫氧化鈉0.4克，碳酸鈣1克。
制備方法如下 將全部原料在發(fā)酵罐內(nèi)混勻，制成新培養(yǎng)基，攪拌下12(TC、 30分鐘滅菌；將 洛伐他汀菌種接入經(jīng)滅菌的新培養(yǎng)基中；26t:下，通入無菌空氣，培養(yǎng)5天。其他工藝 步驟和條件均按常規(guī)。經(jīng)檢測，發(fā)酵單位11000單位。 發(fā)酵液中洛伐他汀含量的分析檢測方法中，樣品制備方法是1)、從培養(yǎng)瓶或 發(fā)酵罐中(10± 1天)取發(fā)酵液20ml，用6N的HC1調(diào)節(jié)pH值至4 5(20ml發(fā)酵液大約 需要2 3滴的6N的HC1) ; 2)、加2倍量的乙酸；3)、用鋁箔或塑料膜密封燒瓶；4)、 燒瓶震蕩l小時以便將產(chǎn)物提取入有機(jī)溶媒中；5)、 HPLC分析制備有機(jī)提取液與甲醇 溶液(1 : 20)，混合后12000rpm離心3分鐘，取上清液作HPLC分析。
權(quán)利要求
一種洛伐他汀的制備方法，其特征在于主要包括以下步驟在培養(yǎng)基中加入培養(yǎng)基重量0.4％～0.8％的檸檬酸，培養(yǎng)基重量0.4％～0.64％的醋酸鈉，培養(yǎng)基重量0.016％～0.032％的氫氧化鈉，培養(yǎng)基重量0.08％～0.24％的碳酸鈣，制成新培養(yǎng)基；新培養(yǎng)基滅菌；將洛伐他汀菌種接入新培養(yǎng)基中；培養(yǎng)。
全文摘要
本發(fā)明是一種洛伐他汀的制備方法，在培養(yǎng)基中加入培養(yǎng)基重量0.4％～0.8％的檸檬酸，培養(yǎng)基重量0.4％～0.64％的醋酸鈉，培養(yǎng)基重量0.016％～0.032％的氫氧化鈉，培養(yǎng)基重量0.08％～0.24％的碳酸鈣；經(jīng)常規(guī)滅菌、接種、培養(yǎng)制成。改善了發(fā)酵培養(yǎng)基的配方結(jié)構(gòu)，優(yōu)化了發(fā)酵酸堿環(huán)境，進(jìn)而較原有方法提高發(fā)酵單位30％左右，發(fā)酵周期由過去的8天縮短為5天。
文檔編號C12P17/02GK101691590SQ20091021044
公開日2010年4月7日 申請日期2009年11月3日 優(yōu)先權(quán)日2009年11月3日
發(fā)明者劉志強(qiáng), 李克強(qiáng), 楊俊發(fā), 葛祥斌 申請人:煙臺只楚藥業(yè)有限公司