一種源于木糖的稻曲病菌抑制物的制備方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及植物病理學技術和農(nóng)藥學技術。具體是一種源于木糖的稻曲病菌抑制物的制備方法。
技術背景
[0002]由稻曲病菌(Ustilaginoidea virens (Cooke) Takahashi)侵染引起的稻曲病全球發(fā)生,屬于我國水稻生產(chǎn)的主要病害,在一些稻區(qū),稻曲病甚至超過稻瘟病而成為水稻生產(chǎn)的重大病害。限于對植物病害的成災規(guī)律缺乏足夠的認識,在當前及今后相當長時期內(nèi),植物病害的防治仍主要依賴于藥物(農(nóng)藥)防治,稻曲病的防治也是如此。因此,稻曲病防治藥物的研究與開發(fā)就成為解決稻曲病問題的重要技術工作。
[0003]在歷史上,稻曲病一直屬于為害較輕的次要病害,只是近十多年的迅猛發(fā)展,才上升為水稻生產(chǎn)的重大病害。由于歷史上未能獲得足夠的重視,稻曲病防治的有關基礎研究仍然薄弱,針對稻曲病防治的藥物研發(fā)更是滯后。事實上,限于對稻曲病菌生物學的膚淺認識,當前防治稻曲病的藥物研發(fā)幾乎局限于市面農(nóng)藥的直接借用或已有藥物復配應用,而當前農(nóng)藥的有效成分的制備技術主要是化學合成方法和微生物農(nóng)藥的發(fā)酵培養(yǎng)方法。發(fā)明人最新發(fā)現(xiàn)木糖本身對稻曲病菌是無害的,同時發(fā)現(xiàn)了來源于木糖的稻曲病菌抑制物,該抑制物強烈抑制稻曲病菌的生長發(fā)育,極具開發(fā)利用的潛力和應用前景。但該抑制物的獲得不是通過化學合成途徑,也不是通過生物發(fā)酵培養(yǎng)途徑,而是通過高溫處理途徑獲得。發(fā)明人發(fā)現(xiàn)該高溫處理方法簡單高效,與現(xiàn)有防治藥物的制備方法存在重大的區(qū)別。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0004]本發(fā)明目的是提供一種源于木糖的稻曲病菌抑制物的制備方法。
[0005]本發(fā)明解決上述技術問題的技術方案如下:
[0006]—種源于木糖的稻曲病菌抑制物的制備方法,是將對稻曲病無害的化合物木糖進行高溫處理,直至生成對稻曲病菌生長發(fā)育起抑制作用的抑制物質(zhì),制備方法的步驟如下:
[0007]1.溶液配制:
[0008]將20g木糖溶于1000ml水中,配成木糖溶液。
[0009]2.高溫處理:
[0010]將步驟1配成的木糖溶液用高壓高溫水蒸汽加熱至126°C并維持30分鐘。
[0011]3.冷卻:
[0012]停止步驟2的加熱操作,緩慢排汽減壓后,取出滅菌鍋內(nèi)的木糖溶液,室溫自然冷卻后,即成為能抑制稻曲病菌生長的抑制物質(zhì)。
[0013]4.抑菌作用的檢驗:
[0014]將步驟3冷卻后的木糖液制成培養(yǎng)基,植入稻曲病菌,在適宜溫度條件下培養(yǎng),可見稻曲病菌的生長發(fā)育被強烈抑制。顯然,對稻曲病菌無害的木糖經(jīng)步驟1至步驟3的技術處理后,分解生成了對稻曲病菌起強烈抑制作用的抑制物質(zhì)。
[0015]本發(fā)明的優(yōu)點
[0016]本發(fā)明利用高溫處理木糖獲得高效抑制稻曲病菌生長發(fā)育的抑制物質(zhì),工藝技術簡單易行。
【附圖說明】
[0017]圖1是本發(fā)明對照CK對稻曲病菌抑制功效檢驗圖。
[0018]圖2是本發(fā)明高效抑制物對稻曲病菌抑制功效檢驗圖。
【具體實施方式】
[0019]下面結合附圖與實施例對本發(fā)明作進一步描述。
[0020]發(fā)明人在稻曲病研究中發(fā)現(xiàn),化合物木糖本身對稻曲病菌是無害的,在木糖培養(yǎng)基上,稻曲病能正常生長發(fā)育,如圖1所示;但高溫處理卻能導致木糖的生物學功效發(fā)生質(zhì)的變化,原來無害的木糖經(jīng)高溫處理后,能強烈抑制稻曲病菌的正常生長發(fā)育,用高溫處理過的木糖培養(yǎng)基,培養(yǎng)稻曲病菌,稻曲病菌的生長發(fā)育受到明顯的抑制,如圖2所示。結果不僅發(fā)現(xiàn)了一種抑制稻曲病菌生長發(fā)育的抑制物,也形成了一種制備稻曲病菌抑制物質(zhì)的制備方法,即通過高溫處理技術,能從單純化合物木糖中獲得高效抑制稻曲病菌生長的抑制物質(zhì)。
[0021]實施例
[0022]—種源于木糖的稻曲病菌抑制物的制備方法,是將木糖溶液進行高溫處理,按如下步驟操作:
[0023]1.溶液配制:
[0024]將20g木糖溶于1000ml水中,配成木糖溶液。
[0025]2.高溫處理:
[0026]將步驟1配成的木糖溶液用高壓高溫水蒸汽加熱至126°C并維持30分鐘。
[0027]3.冷卻:
[0028]停止步驟2的加熱操作,緩慢排汽減壓后,取出滅菌鍋內(nèi)的木糖溶液,室溫自然冷卻后,即成為能抑制稻曲病菌生長的抑制物質(zhì)。
[0029]4.抑菌作用的檢驗:將步驟3冷卻后的木糖溶液制成培養(yǎng)基,具體操作如下:
[0030]先制備馬鈴薯瓊脂基礎培養(yǎng)基,配比為:馬鈴薯200g、瓊脂40g,水1000ml,常規(guī)高溫滅菌;然后將該基礎培養(yǎng)基與步驟3冷卻后的木糖溶液進行等量混合,形成配比為:馬鈴薯100g、木糖10g、瓊脂20g、蒸餾水1000ml的抑制物培養(yǎng)基,倒平板后成為抑制物培養(yǎng)平板。
[0031]對照CK是,用細菌過濾器將步驟1配成的木糖溶液過濾滅菌,然后將該過濾滅菌的木糖溶液,與上述制備的馬鈴薯瓊脂基礎培養(yǎng)基,在60°C狀態(tài)下進行等量混合,形成同樣的配比:馬鈴薯100g、木糖10g、瓊脂20g、蒸餾水1000ml的CK培養(yǎng)基,倒平板后成為對照CK培養(yǎng)平板。對照CK與前述抑制物培養(yǎng)基的差別是,對照CK的木糖未經(jīng)過高溫處理。
[0032]在培養(yǎng)平板上植入稻曲病菌,每培養(yǎng)平板植入9點孢子液,置于28°C溫度恒溫培養(yǎng),5天后取出觀察。
[0033]對照CK(未經(jīng)高溫處理的木糖)培養(yǎng)平板上,生長出9個清晰的稻曲病菌菌落,如圖1所示。
[0034]而在抑制物培養(yǎng)平板上,9個孢子植入點均未見生長跡象,如圖2所示。顯然,經(jīng)過126 V高溫處理的木糖溶液產(chǎn)生了抑制稻曲病菌生長的抑制物質(zhì)。
[0035]利用本發(fā)明的技術,在加熱設備的安全范圍內(nèi),高溫處理的溫度越高、高溫處理的時長越長,木糖高溫處理產(chǎn)物的抑制效能越高。
【主權項】
1.一種源于木糖的稻曲病菌抑制物的制備方法,其特征在于,將化合物木糖進行高溫處理,直至生成對稻曲病菌生長發(fā)育起抑制作用的抑制物質(zhì),方法的步驟如下: 1)木糖溶液配制: 將20g木糖溶于100ml水中,配成木糖溶液; 2)高溫處理: 將步驟I)配成的木糖溶液用高壓高溫水蒸汽加熱至126°C并維持30分鐘; 3)冷卻: 停止步驟2)的加熱操作,并緩慢排汽減壓后,取出滅菌鍋內(nèi)的木糖溶液,室溫自然冷卻后,即成為能抑制稻曲病菌生長的抑制物質(zhì); 4)抑菌作用的檢驗: 將步驟3)冷卻后的木糖液制成培養(yǎng)基,植入稻曲病菌,在適宜溫度條件下培養(yǎng),可見稻曲病菌的生長發(fā)育被強烈抑制;顯然,對稻曲病菌無害的木糖經(jīng)步驟I)至步驟3)的技術處理后,分解生成了對稻曲病菌起強烈抑制作用的抑制物質(zhì)。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種源于木糖的稻曲病菌抑制物的制備方法,該方法的步驟如下:1)將化合物木糖配成木糖溶液;2)在高壓高溫加熱鍋內(nèi)將木糖溶液加熱至126℃并維持30分鐘;3)取出加熱鍋內(nèi)的木糖溶液,室溫自然冷卻后即成為稻曲病菌的抑制物;4)抑制物的抑菌作用檢驗:將獲得的抑制物配制成培養(yǎng)基,植入稻曲病菌,在適宜溫度條件下培養(yǎng),可見木糖高溫處理后的產(chǎn)物能強烈抑制稻曲病菌的生長發(fā)育。本發(fā)明的優(yōu)點是,用簡單的高溫處理技術,就能從化合物木糖中獲得高效抑制稻曲病菌生長發(fā)育的抑制物質(zhì)。
【IPC分類】A01P3/00, A01N61/00
【公開號】CN105325459
【申請?zhí)枴緾N201510928822
【發(fā)明人】王忠文, 楊平, 浦相君, 時婷婷, 曾東強, 張君成
【申請人】廣西大學
【公開日】2016年2月17日
【申請日】2015年12月14日