一種水仙快速繁殖方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及生物藥材水仙種子繁育擴種方法，該技術(shù)直接應(yīng)用于生物藥材繁育擴種，尤其涉及一種水仙快速繁殖方法。
【背景技術(shù)】
[0002]水仙(NarcissustazettaL.var.chinensis Roem.):又名中國水仙，是多花水仙的一個變種。是石蒜科多年生草本植物。水仙的葉由鱗莖頂端綠白色筒狀鞘中抽出花莖(俗稱箭)再由葉片中抽出。一般每個鱗莖可抽花莖1-2枝，多者可達(dá)8-11枝，傘狀花序?；ò甓酁?片，花瓣末處呈鵝黃色?；ㄈ锿饷嬗幸粋€如碗一般的保護(hù)罩。鱗莖卵狀至廣卵狀球形，外被棕褐色皮膜。葉狹長帶狀，蒴果室背開裂?；ㄆ诖杭?。
[0003]水仙鱗片是最為常用的快速繁殖的組培材料。研究表明，水仙葉片和子房也可以再生形成小苗。以鱗莖為外植體進(jìn)行再生雖然取材相對較方便，但由于鱗莖帶菌嚴(yán)重，常常導(dǎo)致消毒不徹底，培養(yǎng)過程中反復(fù)污染現(xiàn)象非常嚴(yán)重，增大工作量，而且以鱗片為外植體再生效率并不十分理想。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供，提供一種水仙快速繁殖方法。本發(fā)明的方法再生效率增高，污染率降低，通過調(diào)節(jié)培養(yǎng)基條件提高了誘導(dǎo)率，縮短了再生周期，此再生體系適用于多個水仙品種。
[0005]本發(fā)明解決上述技術(shù)問題的技術(shù)方案如下:一種水仙快速繁殖方法，包括如下步驟:
[0006]1)取露地種植2?3個月的水仙種球，消毒，剝除外層鱗片；
[0007]2)將步驟1)得到的種球剝?nèi)》N芽，平放在MS固體培養(yǎng)基上進(jìn)行不定芽的誘導(dǎo)生長培養(yǎng)，獲得帶有不定芽叢的組織塊；
[0008]3)將步驟2)得到的組織塊制成縱分組織塊，在芽伸長培養(yǎng)基上進(jìn)行芽伸長培養(yǎng)；
[0009]4)待步驟3)得到的不定芽伸長至4?6cm時，進(jìn)行切分后放入生根培養(yǎng)基中進(jìn)行誘導(dǎo)生根培養(yǎng)，獲得水仙幼苗。
[0010]本發(fā)明的有益效果是:本發(fā)明的方法利用水仙的幼嫩小芽為外植體，直接再生大量不定芽，繼而得到再生苗，與使用鱗片作為外植體進(jìn)行組織培養(yǎng)相比，本發(fā)明的方法再生效率增高，出芽率為100%左右，平均每個外植體誘導(dǎo)再生的芽數(shù)量可達(dá)30個左右，污染率降低，培養(yǎng)過程中不會出現(xiàn)反復(fù)污染的情況，通過調(diào)節(jié)培養(yǎng)基條件可提高誘導(dǎo)率并縮短再生周期。
[0011 ] 在上述技術(shù)方案的基礎(chǔ)上，本發(fā)明還可以做如下改進(jìn)。
[0012]進(jìn)一步，所述MS 固體培養(yǎng)基為 MS+BA1.8 ?2.2mg/L+NAA0.8 ?1.2mg/L，ρΗ5.8，鹿糖28?32g/L，瓊脂4?6g/Lo
[0013]進(jìn)一步，所述芽伸長培養(yǎng)基為MS+BA0.3 ?0.7mg/L+NAA0.8 ?1.2mg/L，pH5.8，蔗糖28?32g/L，瓊脂4?6g/L。
[0014]進(jìn)一步，所述生根培養(yǎng)基為MS+BA0.3 ?0.7mg/L+NAA0.8 ?1.2mg/L，pH5.8，蔗糖28 ?32g/L，瓊脂 4 ?6g/L。
[0015]進(jìn)一步，步驟2)中，所述誘導(dǎo)生長培養(yǎng)的條件為:溫度25°C，光照:15光期/8暗期。
[0016]進(jìn)一步，步驟3)中，所述芽伸長培養(yǎng)的條件為:溫度25°C，光照:15光期/8暗期。
[0017]進(jìn)一步，步驟4)中，所述誘導(dǎo)生根培養(yǎng)的條件為:溫度25°C，光照:15光期/8暗期。
【具體實施方式】
[0018]以下結(jié)合實施例對本發(fā)明的原理和特征進(jìn)行描述，所舉實例只用于解釋本發(fā)明，并非用于限定本發(fā)明的范圍。
[0019]實施例一
[0020]一種水仙快速繁殖方法，包括如下步驟:
[0021]1)取露地種植2?3個月的水仙種球，消毒，剝除外層鱗片；
[0022]2)將步驟1)得到的種球剝?nèi)》N芽，平放在MS固體培養(yǎng)基上進(jìn)行不定芽的誘導(dǎo)生長培養(yǎng)，獲得帶有不定芽叢的組織塊；
[0023]3)將步驟2)得到的組織塊制成縱分組織塊，在芽伸長培養(yǎng)基上進(jìn)行芽伸長培養(yǎng)；
[0024]4)待步驟3)得到的不定芽伸長至6cm時，進(jìn)行切分后放入生根培養(yǎng)基中進(jìn)行誘導(dǎo)生根培養(yǎng)，獲得水仙幼苗。
[0025]所述MS 固體培養(yǎng)基為 MS+BA1.8mg/L+NAA0.8mg/L，pH5.8，蔗糖 28g/L，瓊脂 4g/L。
[0026]所述芽伸長培養(yǎng)基為MS+BA0.3mg/L+NAA0.8mg/L，pH5.8，蔗糖 28g/L，瓊脂 4g/L。
[0027]所述生根培養(yǎng)基為MS+BA0.3mg/L+NAA0.8mg/L，pH5.8，蔗糖 28g/L，瓊脂 4g/L。
[0028]步驟2)中，所述誘導(dǎo)生長培養(yǎng)的條件為:溫度25°C，光照:15光期/8暗期。
[0029]步驟3)中，所述芽伸長培養(yǎng)的條件為:溫度25°C，光照:15光期/8暗期。
[0030]步驟4)中，所述誘導(dǎo)生根培養(yǎng)的條件為:溫度25°C，光照:15光期/8暗期。
[0031]實施例二
[0032]—種水仙快速繁殖方法，包括如下步驟:
[0033]1)取露地種植2?3個月的水仙種球，消毒，剝除外層鱗片；
[0034]2)將步驟1)得到的種球剝?nèi)》N芽，平放在MS固體培養(yǎng)基上進(jìn)行不定芽的誘導(dǎo)生長培養(yǎng)，獲得帶有不定芽叢的組織塊；
[0035]3)將步驟2)得到的組織塊制成縱分組織塊，在芽伸長培養(yǎng)基上進(jìn)行芽伸長培養(yǎng)；
[0036]4)待步驟3)得到的不定芽伸長至5cm時，進(jìn)行切分后放入生根培養(yǎng)基中進(jìn)行誘導(dǎo)生根培養(yǎng)，獲得水仙幼苗。
[0037]所述MS 固體培養(yǎng)基為 MS+BA2.2mg/L+NAAl.2mg/L，pH5.8，蔗糖 32g/L，瓊脂 6g/L。
[0038]所述芽伸長培養(yǎng)基為MS+BA0.7mg/L+NAAl.2mg/L，pH5.8，蔗糖 32g/L，瓊脂 6g/L。
[0039]所述生根培養(yǎng)基為MS+BA0.7mg/L+NAAl.2mg/L，pH5.8，蔗糖 32g/L，瓊脂 6g/L。
[0040]步驟2)中，所述誘導(dǎo)生長培養(yǎng)的條件為:溫度25°C，光照:15光期/8暗期。
[0041]步驟3)中，所述芽伸長培養(yǎng)的條件為:溫度25°C，光照:15光期/8暗期。
[0042]步驟4)中，所述誘導(dǎo)生根培養(yǎng)的條件為:溫度25°C，光照:15光期/8暗期。
[0043]實施例三
[0044]—種水仙快速繁殖方法，包括如下步驟:
[0045]1)取露地種植2?3個月的水仙種球，消毒，剝除外層鱗片；
[0046]2)將步驟1)得到的種球剝?nèi)》N芽，平放在MS固體培養(yǎng)基上進(jìn)行不定芽的誘導(dǎo)生長培養(yǎng)，獲得帶有不定芽叢的組織塊；
[0047]3)將步驟2)得到的組織塊制成縱分組織塊，在芽伸長培養(yǎng)基上進(jìn)行芽伸長培養(yǎng)；
[0048]4)待步驟3)得到的不定芽伸長至4cm時，進(jìn)行切分后放入生根培養(yǎng)基中進(jìn)行誘導(dǎo)生根培養(yǎng)，獲得水仙幼苗。
[0049]所述MS 固體培養(yǎng)基為 MS+BA2.0mg/L+NAAl.0mg/L，pH5.8，蔗糖 30g/L，瓊脂 5g/L。
[0050]所述芽伸長培養(yǎng)基為MS+BA0.5mg/L+NAAl.0mg/L, pH5.8，蔗糖 30g/L，瓊脂 5g/L。
[0051]所述生根培養(yǎng)基為MS+BA0.5mg/L+NAAl.0mg/L, pH5.8，蔗糖 30g/L，瓊脂 5g/L。
[0052]步驟2)中，所述誘導(dǎo)生長培養(yǎng)的條件為:溫度25°C，光照:15光期/8暗期。
[0053]步驟3)中，所述芽伸長培養(yǎng)的條件為:溫度25°C，光照:15光期/8暗期。
[0054]步驟4)中，所述誘導(dǎo)生根培養(yǎng)的條件為:溫度25°C，光照:15光期/8暗期。
[0055]以上所述僅為本發(fā)明的較佳實施例，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項】
1.一種水仙快速繁殖方法，其特征在于，包括如下步驟: 1)取露地種植2?3個月的水仙種球，消毒，剝除外層鱗片； 2)將步驟1)得到的種球剝?nèi)》N芽，平放在MS固體培養(yǎng)基上進(jìn)行不定芽的誘導(dǎo)生長培養(yǎng)，獲得帶有不定芽叢的組織塊； 3)將步驟2)得到的組織塊制成縱分組織塊，在芽伸長培養(yǎng)基上進(jìn)行芽伸長培養(yǎng)； 4)待步驟3)得到的不定芽伸長至4?6cm時，進(jìn)行切分后放入生根培養(yǎng)基中進(jìn)行誘導(dǎo)生根培養(yǎng)，獲得水仙幼苗。2.如權(quán)利要求1所述的一種水仙快速繁殖方法，其特征在于，所述MS固體培養(yǎng)基為MS+BA1.8 ?2.2mg/L+NAA0.8 ?1.2mg/L，ρΗ5.8，蔗糖 28 ?32g/L，瓊脂 4 ?6g/L。3.如權(quán)利要求2所述的一種水仙快速繁殖方法，其特征在于，所述芽伸長培養(yǎng)基為MS+BA0.3 ?0.7mg/L+NAA0.8 ?1.2mg/L，ρΗ5.8，蔗糖 28 ?32g/L，瓊脂 4 ?6g/L。4.如權(quán)利要求3所述的一種水仙快速繁殖方法，其特征在于，所述生根培養(yǎng)基為MS+BA0.3 ?0.7mg/L+NAA0.8 ?1.2mg/L，ρΗ5.8，蔗糖 28 ?32g/L，瓊脂 4 ?6g/L。5.如權(quán)利要求4所述的一種水仙快速繁殖方法，其特征在于，步驟2)中，所述誘導(dǎo)生長培養(yǎng)的條件為:溫度25°C，光照:15光期/8暗期。6.如權(quán)利要求5所述的一種水仙快速繁殖方法，其特征在于，步驟3)中，所述芽伸長培養(yǎng)的條件為:溫度25°C，光照:15光期/8暗期。7.如權(quán)利要求6所述的一種水仙快速繁殖方法，其特征在于，步驟4)中，所述誘導(dǎo)生根培養(yǎng)的條件為:溫度25°C，光照:15光期/8暗期。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種水仙快速繁殖方法，包括如下步驟：取水仙種球，不定芽的誘導(dǎo)生長培養(yǎng)，獲得帶有不定芽叢的組織塊，誘導(dǎo)生根培養(yǎng)獲得水仙幼苗。本發(fā)明的方法再生效率增高，出芽率為100％左右，平均每個外植體誘導(dǎo)再生的芽數(shù)量可達(dá)30個左右，污染率降低，培養(yǎng)過程中不會出現(xiàn)反復(fù)污染的情況，通過調(diào)節(jié)培養(yǎng)基條件可提高誘導(dǎo)率并縮短再生周期。
【IPC分類】A01H4/00
【公開號】CN105265315
【申請?zhí)枴緾N201510683759
【發(fā)明人】韋麗
【申請人】韋麗
【公開日】2016年1月27日
【申請日】2015年10月20日