一種生物農(nóng)藥的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于一種生物農(nóng)藥的制備方法，該生物農(nóng)藥菌種的名稱為殺螟桿菌，該生物的制備方法包括制備母種培養(yǎng)基，接種，復(fù)壯，擴(kuò)大生產(chǎn)種，一級(jí)固體種子的制作和檢測(cè)等步驟。本發(fā)明農(nóng)藥對(duì)人類生態(tài)循環(huán)系統(tǒng)和農(nóng)作物無(wú)任何毒副作用，該方法簡(jiǎn)單實(shí)用，易于制作生產(chǎn)，制作和使用成本低，利于運(yùn)輸保存和殺蟲效果好的優(yōu)點(diǎn)。
【專利說(shuō)明】一種生物農(nóng)藥的制備方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于一種生物農(nóng)藥的制備方法。

【背景技術(shù)】
[0002]農(nóng)藥能殺滅害蟲提高農(nóng)作物產(chǎn)量，但其亦會(huì)殘留在農(nóng)作物上或進(jìn)入人類生態(tài)循環(huán)系統(tǒng)中，危害人類的身體健康，農(nóng)作物的污染途徑是通過(guò)其葉莖直接吸附和從根部滲透吸收，化學(xué)農(nóng)藥的施放，如農(nóng)藥的殘留物有機(jī)氯、有機(jī)磷等等，人們每天在攝取含有農(nóng)藥的殘留物的蔬菜、水果、飲水均會(huì)危害身心健康。
[0003]但以蟲治蟲的生物農(nóng)藥無(wú)副作，能更好地為農(nóng)作物生長(zhǎng)，提供保障，且對(duì)人類生態(tài)循環(huán)系統(tǒng)和農(nóng)作物無(wú)任何毒副作用。但目前生物農(nóng)藥品種較少，制作方法復(fù)雜，成本高，難于普及使用。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是提供一種生物農(nóng)藥的制備方法，該農(nóng)藥對(duì)人類生態(tài)循環(huán)系統(tǒng)和農(nóng)作物無(wú)任何毒副作用，該方法簡(jiǎn)單實(shí)用，易于制作生產(chǎn)，制作和使用成本低，利于運(yùn)輸保存和殺蟲效果好的優(yōu)點(diǎn)。
[0005]為此，本發(fā)明的該生物農(nóng)藥菌種的名稱為殺螟桿菌，該生物的制備方法包括如下步驟:
[0006](I)制備母種培養(yǎng)基，取無(wú)筋、無(wú)油牛肉500g切碎攪成肉漿，加水1000ml，浸泡I小時(shí)，煮沸，保溫15?20分鐘，停止保溫，待肉湯溫度降至30°C，加入雞蛋白15g，攪拌均勻、過(guò)濾去雜，加水補(bǔ)足濾液至100ml，而后在濾液中依次加入葡萄糖lg，氯化鈉4?6g，磷酸二氫鉀1.3g，磷酸氫二鉀1.5g，攪拌均勻，再加入瓊脂15g，攪拌至瓊脂溶化于濾液中，用氯化鈉調(diào)濾液的PH值為7.2 ;
[0007](2)裝試管，每支試管注入濾液4ml，試管和濾液在121°C下殺菌30分鐘，取出試管，擺成斜面，試管斜置45° ;
[0008](3)接種,取無(wú)感染試管6?8支試管接入一支菌種；
[0009](4)培養(yǎng)，將接入菌的試管在25°C?30°C下，培養(yǎng)5_7天，即可得到第一批母種；
[0010](5)復(fù)壯，將得到的第一批母種，重復(fù)步驟(3)至(4)進(jìn)行菌種復(fù)壯I?2次；
[0011](6) 一級(jí)固體種子的制作，其一級(jí)固體種子的培養(yǎng)基由麥麩65g、豆餅粉25g、牛肉湯10g、蛋白胨5g、葡萄糖lg、氯化鈉2?4g、磷酸二氫鉀1.4g、磷酸氫二鉀1.5g、酵母膏1.5g、水100ml所組成，將上述原料混合均勻，調(diào)PH為7.2 ;
[0012]將該培養(yǎng)基裝入三角瓶中，每瓶50g，瓶口塞緊棉花塞，其外面再包一層牛皮紙；
[0013]將該瓶置121°C滅菌30分鐘，自然冷卻至18°C?21°C ；
[0014]每支斜面可接母菌種10瓶，接種前可將一木棍從料中插眼一公分深，接種時(shí)，將菌種放入孔中，然后置于25-28°C培養(yǎng)箱培育5天，即得一級(jí)固體種子；
[0015](7)擴(kuò)大生產(chǎn)種，其生產(chǎn)種的培養(yǎng)基的原料重量百分比為麥麩25%、豆餅粉25%、細(xì)糠15%、粗糠35%、鈣鎂磷肥1%，將上述原料混合均勻，加入米湯水使其與上述原料的重量比為1.3: 1，再混合均勻，用碳酸鈉調(diào)節(jié)上述培養(yǎng)基的PH為9 ;
[0016]將上述培養(yǎng)基裝入蒸籠，用大型高壓滅菌鍋在121°C下滅菌40分鐘，冷卻至28°C?32°C，按每100斤該培養(yǎng)基中放一級(jí)固體種子一瓶，混均，而后將其鋪在經(jīng)過(guò)滅菌的下墊一層白色尼龍布能通氣的竹床上，該培養(yǎng)基厚度為22?26公分，上面蓋層紗布，每天翻動(dòng)一次，在28°C的培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)3-5天，其上全部長(zhǎng)滿菌絲后，進(jìn)行曬干或60°C低溫烘干，得生產(chǎn)種；
[0017](8)檢測(cè)，稱取Ig生廣種加滅囷水100ml，稀釋后，在600倍顯微鏡下和在血球計(jì)數(shù)片上，檢測(cè)，測(cè)定成品的含菌量為可達(dá)50-100億個(gè)的標(biāo)準(zhǔn)，為殺蟲干藥料；
[0018](9)使用方法；
[0019](一)、500g殺蟲干藥料可兌水25_30kg，噴霧施殺，散涂；
[0020]( 二)、500g殺蟲干藥料加5kg溫水，浸泡30分鐘過(guò)濾，濾液加水250_300kg，噴霧施殺，散涂；
[0021]使用該生物農(nóng)藥時(shí)，應(yīng)比其它農(nóng)藥早施2-3天，氣溫在20°C以上施用；
[0022]殺滅對(duì)象，水稻類的螟蟲、稻苞蟲、稻飛虱、卷葉蟲、浮塵子、稻螟鈴、葉跳蟲、薊馬；蔬菜類的菜青蟲、小菜蛾、造橋蟲、粘蟲、地老虎；果樹類的刺蛾、皮蟲、催棉蟲、介殼蟲、紅蜘蛛、天牛、茶毛蟲；林業(yè)類的松毛蟲、磷翅幼蟲；棉花類的燈蛾、苧蔴蟲；浮萍類的萍螟、萍灰螟。
[0023]所述的制備母種培養(yǎng)基，取無(wú)筋、無(wú)油牛肉500g切碎攪成肉漿，加水1000ml，浸泡I小時(shí)，煮沸，保溫15?20分鐘，停止保溫，待肉湯溫度降至30°C，加入雞蛋白15g，攪拌均勻、過(guò)濾去雜，加水補(bǔ)足濾液至100ml，而后在濾液中依次加入葡萄糖lg，氯化鈉4?6g，磷酸二氫鉀1.3g，磷酸氫二鉀1.5g，攪拌均勻，再加入瓊脂15g，攪拌至瓊脂溶化于濾液中，用氯化鈉調(diào)濾液的PH值為7.2。
[0024]所述的其一級(jí)固體種子的培養(yǎng)基由麥麩65g、豆餅粉25g、牛肉湯10g、蛋白胨5g、葡萄糖lg、氯化鈉2?4g、磷酸二氫鉀1.4g、磷酸氫二鉀1.5g、酵母膏1.5g、水100ml所組成，將上述原料混合均勻，調(diào)PH為7.2。
[0025]所述的菌種復(fù)壯可用傳統(tǒng)的其它方法進(jìn)行。
[0026]所述的殺蟲干藥料的含菌量為50-100億個(gè)的標(biāo)準(zhǔn)。
[0027]上述方法達(dá)到了本發(fā)明的目的。
[0028]本發(fā)明的農(nóng)藥對(duì)人類生態(tài)循環(huán)系統(tǒng)和農(nóng)作物無(wú)任何毒副作用，該方法簡(jiǎn)單實(shí)用，易于制作生產(chǎn)，制作和使用成本低，利于運(yùn)輸保存和殺蟲效果好的優(yōu)點(diǎn)。
[0029]試驗(yàn)表明本發(fā)明的殺蟲率為85%以上，有良好的使用效果。制作和使用成本僅是傳統(tǒng)農(nóng)藥成本的50%左右，制作環(huán)境沒有要求，適合農(nóng)村個(gè)人制作，可大幅度降低殺蟲費(fèi)用。

【具體實(shí)施方式】
[0030]一種生物農(nóng)藥的制備方法:
[0031]該生物農(nóng)藥菌種的名稱為殺螟桿菌，該生物的制備方法包括如下步驟:
[0032](I)制備母種培養(yǎng)基，取無(wú)筋、無(wú)油牛肉500g切碎攪成肉漿，加水1000ml，浸泡I小時(shí)，煮沸，保溫15?20分鐘，停止保溫，待肉湯溫度降至30°C，加入雞蛋白15g，攪拌均勻、過(guò)濾去雜，加水補(bǔ)足濾液至100ml，而后在濾液中依次加入葡萄糖lg，氯化鈉4?6g，磷酸二氫鉀1.3g，磷酸氫二鉀1.5g，攪拌均勻，再加入瓊脂15g，攪拌至瓊脂溶化于濾液中，用氯化鈉調(diào)濾液的PH值為7.2。
[0033](2)裝試管，每支試管注入濾液4ml，試管和濾液在121°C下殺菌30分鐘，取出試管，擺成斜面，試管斜置45°。
[0034](3)接種,取無(wú)感染試管6?8支試管接入一支菌種。
[0035](4)培養(yǎng)，將接入菌的試管在25°C?30°C下，培養(yǎng)5_7天，即可得到第一批母種。
[0036](5)復(fù)壯，將得到的第一批母種，重復(fù)步驟(3)至(4)進(jìn)行菌種復(fù)壯I?2次。
[0037](6) 一級(jí)固體種子的制作，其一級(jí)固體種子的培養(yǎng)基由麥麩65g、豆餅粉25g、牛肉湯10g、蛋白胨5g、葡萄糖lg、氯化鈉2?4g、磷酸二氫鉀1.4g、磷酸氫二鉀1.5g、酵母膏
1.5g、水100ml所組成。將上述原料混合均勻，調(diào)PH為7.2 (用氯化鈉調(diào)整)。
[0038]將該培養(yǎng)基裝入三角瓶中，每瓶50g，瓶口塞緊棉花塞，其外面再包一層牛皮紙。
[0039]將該瓶置121°C滅菌30分鐘，自然冷卻至18°C?21°C。
[0040]每支斜面可接母菌種10瓶，接種前可將一木棍從料中插眼一公分深，接種時(shí)，將菌種放入孔中，然后置于25-28°C培養(yǎng)箱培育5天，即得一級(jí)固體種子。
[0041](7)擴(kuò)大生產(chǎn)種，其生產(chǎn)種的培養(yǎng)基的原料重量百分比為麥麩25%、豆餅粉25%、細(xì)糠15%、粗糠35%、鈣鎂磷肥1%，將上述原料混合均勻，加入米湯水使其與上述原料的重量比為1.3: 1，再混合均勻，用碳酸鈉調(diào)節(jié)上述培養(yǎng)基的PH為9。能過(guò)孔眼內(nèi)徑為Imm篩或羅的為細(xì)糠，否則為粗糠。
[0042]將上述培養(yǎng)基裝入蒸籠，用大型高壓滅菌鍋在121°C下滅菌40分鐘，冷卻至28°C?32°C，按每100斤該培養(yǎng)基中放一級(jí)固體種子一瓶，混均，而后將其鋪在經(jīng)過(guò)滅菌的下墊一層白色尼龍布能通氣的竹床上，該培養(yǎng)基厚度為22?26公分，上面蓋層紗布，每天翻動(dòng)一次，在28°C的培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)3-5天，其上全部長(zhǎng)滿菌絲后，進(jìn)行曬干或60°C低溫烘干，得生產(chǎn)種。
[0043](8)檢測(cè)，稱取Ig生廣種加滅囷水100ml，稀釋后，在600倍顯微鏡下和在血球計(jì)數(shù)片上，檢測(cè)，測(cè)定成品(生產(chǎn)種)的含菌量為可達(dá)50-100億個(gè)的標(biāo)準(zhǔn)，為殺蟲干藥料。
[0044](9)使用方法；
[0045](一)、500g殺蟲干藥料可兌水25_30kg,噴霧施殺,散涂；
[0046]( 二)、500g殺蟲干藥料加5kg溫水，浸泡30分鐘過(guò)濾，濾液加水250_300kg，噴霧施殺，散涂；
[0047]使用該生物農(nóng)藥時(shí)，應(yīng)比其它農(nóng)藥早施2-3天，氣溫在20°C以上施用；
[0048]殺滅對(duì)象，殺滅對(duì)象，水稻類的螟蟲、稻苞蟲、稻飛虱、卷葉蟲、浮塵子、稻螟鈴、葉跳蟲、薊馬；蔬菜類的菜青蟲、小菜蛾、造橋蟲、粘蟲、地老虎；果樹類的刺蛾、皮蟲、催棉蟲、介殼蟲、紅蜘蛛、天牛、茶毛蟲；林業(yè)類的松毛蟲、磷翅幼蟲；棉花類的燈蛾、苧蔴蟲；浮萍類的萍螟、萍灰螟。
[0049]所述的制備母種培養(yǎng)基，取無(wú)筋、無(wú)油牛肉500g切碎攪成肉漿，加水1000ml，浸泡I小時(shí)，煮沸，保溫15?20分鐘，停止保溫，待肉湯溫度降至30°C，加入雞蛋白15g，攪拌均勻、過(guò)濾去雜，加水補(bǔ)足濾液至100ml，而后在濾液中依次加入葡萄糖lg，氯化鈉4?6g，磷酸二氫鉀1.3g，磷酸氫二鉀1.5g，攪拌均勻，再加入瓊脂15g，攪拌至瓊脂溶化于濾液中，用氯化鈉調(diào)濾液的PH值為7.2。
[0050]所述的其一級(jí)固體種子的培養(yǎng)基由麥麩65g、豆餅粉25g、牛肉湯10g、蛋白胨5g、葡萄糖lg、氯化鈉2?4g、磷酸二氫鉀1.4g、磷酸氫二鉀1.5g、酵母膏1.5g、水100ml所組成，將上述原料混合均勻，調(diào)PH為7.2。
[0051]所述的菌種復(fù)壯可用傳統(tǒng)的其它方法進(jìn)行。如移植活化，分離選優(yōu)，改善培養(yǎng)基成份和改善氣象環(huán)境中的任選。
[0052]所述的殺蟲干藥料的含菌量為50-100億個(gè)的標(biāo)準(zhǔn)。
[0053]本發(fā)明農(nóng)藥對(duì)人類生態(tài)循環(huán)系統(tǒng)和農(nóng)作物無(wú)任何毒副作用，該方法簡(jiǎn)單實(shí)用，易于制作生產(chǎn)，制作和使用成本低，利于運(yùn)輸保存和殺蟲效果好的優(yōu)點(diǎn)。
【權(quán)利要求】
1.一種生物農(nóng)藥的制備方法，其特征在于:該生物農(nóng)藥菌種的名稱為殺螟桿菌，該生物的制備方法包括如下步驟， (1)制備母種培養(yǎng)基，取無(wú)筋、無(wú)油牛肉500g切碎攪成肉漿，加水1000ml，浸泡I小時(shí)，煮沸，保溫15?20分鐘，停止保溫，待肉湯溫度降至30°C，加入雞蛋白15g，攪拌均勻、過(guò)濾去雜，加水補(bǔ)足濾液至1000ml，而后在濾液中依次加入葡萄糖lg，氯化鈉4?6g，磷酸二氫鉀1.3g，磷酸氫二鉀1.5g，攪拌均勻，再加入瓊脂15g，攪拌至瓊脂溶化于濾液中，用氯化鈉調(diào)濾液的PH值為7.2 ; (2)裝試管，每支試管注入濾液4ml，試管和濾液在121°C下殺菌30分鐘，取出試管，擺成斜面，試管斜置45° ; (3)接種，取無(wú)感染試管6?8支試管接入一支菌種； (4)培養(yǎng)，將接入菌的試管在25°C?30°C下，培養(yǎng)5-7天，即可得到第一批母種； (5)復(fù)壯，將得到的第一批母種，重復(fù)步驟(3)至(4)進(jìn)行菌種復(fù)壯I?2次； (6)一級(jí)固體種子的制作，其一級(jí)固體種子的培養(yǎng)基由麥麩65g、豆餅粉25g、牛肉湯10g、蛋白胨5g、葡萄糖lg、氯化鈉2?4g、磷酸二氫鉀1.4g、磷酸氫二鉀1.5g、酵母膏1.5g、水100ml所組成，將上述原料混合均勻，調(diào)PH為7.2 ; 將該培養(yǎng)基裝入三角瓶中，每瓶50g，瓶口塞緊棉花塞，其外面再包一層牛皮紙； 將該瓶置121°C滅菌30分鐘，自然冷卻至18°C?21 °C ； 每支斜面可接母菌種10瓶，接種前可將一木棍從料中插眼一公分深，接種時(shí)，將菌種放入孔中，然后置于25-28°C培養(yǎng)箱培育5天，即得一級(jí)固體種子； (7)擴(kuò)大生產(chǎn)種，其生產(chǎn)種的培養(yǎng)基的原料重量百分比為麥麩25%、豆餅粉25 %、細(xì)糠15%、粗糠35 %、鈣鎂磷肥I %，將上述原料混合均勻，加入米湯水使其與上述原料的重量比為1.3: 1，再混合均勻，用碳酸鈉調(diào)節(jié)上述培養(yǎng)基的PH為9 ; 將上述培養(yǎng)基裝入蒸籠，用大型高壓滅菌鍋在121°C下滅菌40分鐘，冷卻至28°C?320C，按每100斤該培養(yǎng)基中放一級(jí)固體種子一瓶，混均，而后將其鋪在經(jīng)過(guò)滅菌的下墊一層白色尼龍布能通氣的竹床上，該培養(yǎng)基厚度為22?26公分，上面蓋層紗布，每天翻動(dòng)一次，在28°C的培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)3-5天，其上全部長(zhǎng)滿菌絲后，進(jìn)行曬干或60°C低溫烘干，得生產(chǎn)種； (8)檢測(cè)，稱取Ig生產(chǎn)種加滅菌水100ml，稀釋后，在600倍顯微鏡下和在血球計(jì)數(shù)片上，檢測(cè)，測(cè)定成品的含菌量為可達(dá)50-100億個(gè)的標(biāo)準(zhǔn)，為殺蟲干藥料； (9)使用方法； (一 )>500g殺蟲干藥料可兌水25-30kg，噴霧施殺，散涂； (二)>500g殺蟲干藥料加5kg溫水，浸泡30分鐘過(guò)濾，濾液加水250-300kg，噴霧施殺，散涂； 使用該生物農(nóng)藥時(shí)，應(yīng)比其它農(nóng)藥早施2-3天，氣溫在20°C以上施用； 殺滅對(duì)象，水稻類的螟蟲、稻苞蟲、稻飛虱、卷葉蟲、浮塵子、稻螟鈴、葉跳蟲、薊馬；蔬菜類的菜青蟲、小菜蛾、造橋蟲、粘蟲、地老虎；果樹類的刺蛾、皮蟲、催棉蟲、介殼蟲、紅蜘蛛、天牛、茶毛蟲；林業(yè)類的松毛蟲、磷翅幼蟲；棉花類的燈蛾、苧蔴蟲；浮萍類的萍螟、萍灰螟。
2.按權(quán)利要求1所述的的制備方法，其特征在于:所述的制備母種培養(yǎng)基，取無(wú)筋、無(wú)油牛肉500g切碎攪成肉漿，加水1000ml，浸泡I小時(shí)，煮沸，保溫15?20分鐘，停止保溫，待肉湯溫度降至30°C,加入雞蛋白15g,攪拌均勻、過(guò)濾去雜,加水補(bǔ)足濾液至100ml,而后在濾液中依次加入葡萄糖lg，氯化鈉4?6g，磷酸二氫鉀1.3g，磷酸氫二鉀1.5g，攪拌均勻，再加入瓊脂15g，攪拌至瓊脂溶化于濾液中，用氯化鈉調(diào)濾液的PH值為7.2。
3.按權(quán)利要求1所述的的制備方法，其特征在于:所述的其一級(jí)固體種子的培養(yǎng)基由麥麩65g、豆餅粉25g、牛肉湯10g、蛋白胨5g、葡萄糖lg、氯化鈉2?4g、磷酸二氫鉀1.4g、磷酸氫二鉀1.5g、酵母膏1.5g、水100ml所組成，將上述原料混合均勻，調(diào)PH為7.2。
4.按權(quán)利要求1所述的的制備方法，其特征在于:所述的菌種復(fù)壯可用傳統(tǒng)的其它方法進(jìn)行。
5.按權(quán)利要求1所述的的制備方法，其特征在于:所述的殺蟲干藥料的含菌量為50-100億個(gè)的標(biāo)準(zhǔn)。
【文檔編號(hào)】A01P7/04GK104126614SQ201410403112
【公開日】2014年11月5日 申請(qǐng)日期:2014年8月18日 優(yōu)先權(quán)日:2014年8月18日
【發(fā)明者】熊吉元, 唐志泉 申請(qǐng)人:熊吉元, 唐志泉