一種海月水母成熟卵子的獲得方法
【專利摘要】一種海月水母成熟卵子的獲得方法，屬于腔腸動物繁育技術(shù)，把海月水母失活的精子滴到性腺發(fā)育成熟的雌性海月水母胃生殖溝處，暫養(yǎng)后，在雌性海月水母的口腕中便會出現(xiàn)卵子。本發(fā)明提供一種經(jīng)濟可行并簡單快速的獲得大量成熟優(yōu)質(zhì)的海月水母卵子的方法。
【專利說明】一種海月水母成熟卵子的獲得方法
【技術(shù)領(lǐng)域】:
[0001]本發(fā)明屬于腔腸動物繁育【技術(shù)領(lǐng)域】，具體的涉及一種海月水母成熟卵子的獲得方法。
【背景技術(shù)】
[0002]海月水母隸屬缽水母綱、旗口水母目、洋須水母科、海月水母屬，在70° N~40° S海區(qū)的淺海海域均有分布，是一種廣泛分布于世界各海區(qū)的大型水母，在我國大連、煙臺、威海和青島等地沿海均有分布。近年來，由于人類活動和氣候異常等因素導(dǎo)致了海月水母的大量暴發(fā)，給世界海洋漁業(yè)造成惡性影響，對海洋生態(tài)環(huán)境造成巨大危害。
[0003]海月水母的生活史包括2種不同形態(tài)的生活世代:營固著生活的無性水螅體世代和營浮游生活的有性水母體世代。海月水母雌雄異體，性腺發(fā)育成熟的雄性海月水母釋放精子到體外，性腺發(fā)育成熟的雌性海月水母收集精子，通過相關(guān)的水管系統(tǒng)進入體內(nèi)，完成受精。受精卵在口腕中發(fā)育為浮浪幼蟲后再釋放到體外。海月水母的成熟卵子在正常情況下是不會排放到體外的，正是由于海月水母的這種繁殖方式使得科研工作者們難以獲得其成熟的卵子，因而關(guān)于海月水母有性繁殖的研究報道較少，阻礙了人們認識海月水母的繁殖規(guī)律，發(fā)明一種簡單可行的海月水母成熟卵子的獲得方法已成為迫切需求。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種海月水母成熟卵子的獲得方法，快速簡單獲得大量海月水母成熟卵子。
[0005]本發(fā)明是通過如下技術(shù)方案實現(xiàn)的:
[0006]一種海月水母成熟卵子的獲得方法，把海月水母失活的精子滴到性腺發(fā)育成熟的雌性海月水母胃生殖溝處，暫養(yǎng)后，在雌性海月水母的口腕中便會出現(xiàn)卵子。
[0007]—種海月水母成熟卵子的獲得方法，具體步驟如下:
[0008]1)將性腺成熟的雄性海月水母置于水溫22-24 °C，鹽度28-32，DO ^ 6mg/L,pH7.8-8.2環(huán)境條件下，誘導(dǎo)其排精；
[0009]2)將步驟1)中性腺成熟的雄性海月水母排出的精子收集起來置于盛有海水的容器中，24h后鏡檢確認精子失活；
[0010]3)將步驟2)中失活的精子滴到性腺成熟的雌性海月水母胃生殖溝處，將雌性海月水母置于水溫22-24°C的海水中，3~4h后，在雌性海月水母口周圍的口腕中便會出現(xiàn)卵子;
[0011]4)將步驟3)中性腺成熟的雌性海月水母口腕中的卵子吸出，鏡檢并保存?zhèn)溆谩?br> [0012]步驟1)中所述的性腺成熟的雄性海月水母傘徑為15cm以上，性腺飽滿。
[0013]步驟2)中所述的海月水母精子收集方法為:用膠頭滴管將雌性海月水母收集于傘緣感覺緣瓣處的精子團吸出，置于盛有自然海水的培養(yǎng)皿中。
[0014]步驟3)中所述的性腺成熟的雌性海月水母傘徑為15cm以上，性腺飽滿。[0015]本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比的有益效果:
[0016]本發(fā)明提供的是一種經(jīng)濟可行并簡單快速的獲得大量成熟優(yōu)質(zhì)的海月水母卵子的方法。在不損傷實驗水母的條件下，通過失活的精子來誘導(dǎo)性腺發(fā)育成熟的雌性海月水母排出卵子，而在正常情況下，海月水母的卵子是無法排放出來的。本發(fā)明操作簡單，不受時間、地點限制，可一次性獲得大量成熟海月水母的卵子，從而滿足海月水母的體外人工受精、分子生物學(xué)、繁殖生物學(xué)等研究的需求。
【具體實施方式】
[0017]下面結(jié)合實例對本發(fā)明的技術(shù)方案作進一步描述，但本發(fā)明不受實施例任何形式上的限制。
[0018]實施例1
[0019]2013年6月13日，在青島金沙灘水產(chǎn)有限公司，利用實驗室培育成熟的雌雄海月水母各6只，進行實驗，雌雄海月水母傘徑為15cm以上，性腺飽滿。實驗進行前一天停止投喂雌雄海月水母，這樣便于觀察受精卵和卵子。在水溫22°C，鹽度28，D0~6mg/L，pH7.8-8.2的條件下，雄性海月水母于上午11時開始排出精子細絲，精子粘附于精子細絲上，排精過程持續(xù)了 30min左右。雌性海月水母將精子收集于感覺緣瓣處形成精子團，此時，將精子團從感覺緣瓣處取下來置于培養(yǎng)皿中，盡量取凈精子團，防止精子進入雌性海月水母體內(nèi)影響下一步實驗。將培養(yǎng)皿中加入少許海水暗處保存。24h后鏡檢精子失活。2013年6月14日11時左右，成熟的雄性海月水母再次排精。排精過程持續(xù)30min。將6只成熟的雌性海月水母分成3組:A組(2只)雌性海月水母正常收集剛排出的精子細絲，B組(2只)將失活的精子團 滴到雌性海月水母胃生殖溝處，使其收集失活的精子。C組(2只)雌性海月水母使其不收集任何精子。3組處理后在同樣的環(huán)境條件下培養(yǎng)3h，結(jié)果發(fā)現(xiàn):A、B兩組均在口周圍的口腕中發(fā)現(xiàn)了晶瑩的受精卵(或卵子)，而C組未發(fā)現(xiàn)。將A、B兩組雌性海月水母口腕中的受精卵(或卵子)吸出，鏡檢觀察，A組為受精卵(已分裂為2細胞)，B組為卵子(未分裂，含第一極體)，受精7h后，A組已發(fā)育到多細胞階段，而B組還處于初始狀態(tài)，即為卵子，將成熟卵子收集起來，保存?zhèn)溆谩?br> 【權(quán)利要求】
1.一種海月水母成熟卵子的獲得方法，其特征在于把海月水母失活的精子滴到性腺發(fā)育成熟的雌性海月水母胃生殖溝處，暫養(yǎng)后，在雌性海月水母的口腕中便會出現(xiàn)卵子。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種海月水母成熟卵子的獲得方法，其特征在于具體步驟如下:1)將性腺成熟的雄性海月水母置于水溫22-24°C，鹽度28-32，DO^ 6mg/L，pH7.8-8.2環(huán)境條件下，誘導(dǎo)其排精；2)將步驟1)中性腺成熟的雄性海月水母排出的精子收集起來置于盛有海水的容器中，24h后鏡檢確認精子失活； 3)將步驟2)中失活的精子滴到性腺成熟的雌性海月水母胃生殖溝處，將雌性海月水母置于水溫22-24°C的海水中，3~4h后，在雌性海月水母口周圍的口腕中便會出現(xiàn)卵子；4)將步驟3)中性腺成熟的雌性海月水母口腕中的卵子吸出，鏡檢并保存?zhèn)溆谩?br> 3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種海月水母成熟卵子的獲得方法，其特征在于所述的步驟1)中所述的性腺成熟的雄性海月水母傘徑為15cm以上，性腺飽滿。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種海月水母成熟卵子的獲得方法，其特征在于所述的步驟2)中所述的海月水母精子收集方法為:用膠頭滴管將雌性海月水母收集于傘緣感覺緣瓣處的精子團吸出，置于盛有自然海水的培養(yǎng)皿中。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種海月水母成熟卵子的獲得方法，其特征在于所述的步驟3)中所述的性腺成熟的雌性海月水母傘徑為15cm以上，性腺飽滿。
【文檔編號】A01K61/00GK103636547SQ201310726720
【公開日】2014年3月19日 申請日期:2013年12月25日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月25日
【發(fā)明者】陳四清, 陳昭廷, 莊志猛, 劉長琳, 劉春勝, 趙鵬 申請人:中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所