專利名稱：新型殺蟲抑菌生物肥料及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種生物肥，具體為一種新型殺蟲抑菌生物肥料及其制備方法。
背景技術(shù)：
微生物肥料由一種或數(shù)種有益微生物活細(xì)胞制備而成的肥料。主要有根瘤菌劑、固氮菌劑、磷細(xì)菌劑、抗生菌劑、復(fù)合菌劑等。微生物肥料生產(chǎn)成本低，應(yīng)用效果好，不污染環(huán)境，使用后不僅增產(chǎn)，而且提高農(nóng)產(chǎn)品的質(zhì)量，因此，在我國農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展中占重要地位。隨著生態(tài)農(nóng)業(yè)和綠色農(nóng)業(yè)的發(fā)展，化學(xué)農(nóng)藥和化學(xué)肥料對土壤和人類造成的危害愈來愈受到人們的重視，限制使用化學(xué)農(nóng)藥和化學(xué)肥料已成為21世紀(jì)的主流。目前微生物肥料技術(shù)方案種類眾多，其效果主要集中在提高土壤肥效的方面，對 于微生物肥殺菌的效果并沒有做深入的研究，如201010588684. 3公開的技術(shù)方案包括沼澤紅假單胞菌發(fā)酵液、酵母菌發(fā)酵液、固氮菌發(fā)酵液、解磷菌發(fā)酵液和硅酸鹽細(xì)菌發(fā)酵液的混合發(fā)酵物。在很多文章也提出，微生物肥料中也可以加入能夠分泌毒素成分的微生物而制成具有殺菌殺蟲功能的微生物肥。河北大學(xué)學(xué)報2006年7月，26卷4期公開了一種具有殺蟲效果的微生物肥料制劑的研制。其核心內(nèi)容是使用了膠質(zhì)孢芽桿菌、圓褐固氮菌、阿維鏈霉菌分別發(fā)酵擴大培養(yǎng)，然后混合。該技術(shù)方案制備的肥料具有殺蟲和提高肥效的雙重效果。但是微生物肥本身是依靠微生物活動固氮、解磷、解鉀，而加入能產(chǎn)生毒素的微生物，不可避免地對肥效產(chǎn)生一定的副作用。為此需要研制出具良好的殺蟲效果和良好的肥料效果為一體的復(fù)合生物制劑，將成為我國微生物肥料今后的發(fā)展和研究趨勢。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的技術(shù)方案為了提高微生物肥的殺菌殺蟲及肥效而提供了一種新型殺蟲抑菌生物肥料及其制備方法。本發(fā)明的技術(shù)方案是，一種新型殺蟲抑菌生物肥料，原料按重量份為
5.5億個/毫升的巨大芽孢桿菌30-50份
4.O億個/毫升的沼澤紅假單胞菌10-30份
562mg/mL的阿維鏈霉菌藥效成分Bla1-3份
糖蜜200-300份
十二烷基苯磺酸鈉O. 02-0. 04份
吐溫-80O. 03-0. 05 份
水600-800 份。一種新型殺蟲抑菌生物肥料的制備方法，步驟為
(1)分別將巨大芽孢桿菌活化發(fā)酵深層培養(yǎng)得到液體，沼澤紅假單胞菌發(fā)酵深層培養(yǎng)得到液體，阿維鏈霉菌發(fā)酵深層培養(yǎng)得到液體
(2)在I噸發(fā)酵罐中依次加入
①5. 5億個/毫升巨大芽孢桿菌液30-50份，4. O億個/毫升沼澤紅假單胞菌液10-30份，562mg/mL阿維鏈霉菌藥效成分Bla液7_13份，
②化料鍋中加入糖蜜200-300份，80°C下攪拌30分鐘后加入發(fā)酵罐中，
③化料鍋中加入十二烷基苯磺酸鈉O.02-0. 04份，吐溫O. 03-0. 05份，水，攪拌30分鐘后加入發(fā)酵罐中，
(3)最后加水，加水總量為600-800份，
(4)在30°C下發(fā)酵48小時。本發(fā)明所述的藥肥復(fù)合生物制劑及其生產(chǎn)工藝，確立巨大芽孢桿菌、沼澤紅假單胞菌和阿維鏈霉菌的發(fā)酵工藝參數(shù)，各項指標(biāo)均符合農(nóng)業(yè)部有關(guān)微生物肥料的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。本發(fā)明工藝設(shè)計先進(jìn)，液體深層發(fā)酵具有周期短、效率高、成本低、可大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)等特點。操作性強，適合于工業(yè)化生產(chǎn).本發(fā)明的產(chǎn)品藥肥復(fù)合生物制劑具有肥料和殺蟲 抑菌效果，應(yīng)用前景廣闊.
本發(fā)明的特點和優(yōu)點(1)本發(fā)明把巨大芽孢桿菌、沼澤紅假單胞菌和阿維鏈霉菌組合，其中巨大芽孢桿菌能分解土壤卵磷脂62%，分解核酸56%，分解有機化合物，釋放91%的磷素。可以將土壤中固定的磷、鉀轉(zhuǎn)化為植物可以吸收利用的速效磷和速效鉀，補充作物磷鉀養(yǎng)分的不足；(2)沼澤紅假單胞菌具固氮能力，提高土壤氮水平；促進(jìn)土壤物質(zhì)轉(zhuǎn)化，改善土壤結(jié)構(gòu)，提高土壤肥力；消除土壤中的有害物質(zhì)，促進(jìn)污染物的轉(zhuǎn)化；產(chǎn)生脯氨酸、維生素、輔酶Q等生理活性物質(zhì)，激活細(xì)胞，促進(jìn)根系發(fā)育，提高光合作用和生長能力；鈍化病原物致病力，激活土壤中放線菌等有益微生物，抑制絲狀真菌等致病菌，增強作物抗病防病能力。(3)阿維鏈霉菌可以產(chǎn)生阿維菌素，可有效殺死棉鈴蟲、玉米螟、美洲斑潛蠅等地上和根結(jié)線蟲、地老虎、嘍骷、金針蟲等，減少化學(xué)農(nóng)藥的用量。而且三種菌之間互相干擾小，肥效顯著。具有高活性、高穩(wěn)定性、作用效果快、成本低、具有固氮、解磷、解鉀、殺蟲、抑菌多種功能。
具體實施例方式實施例I
一種新型殺蟲抑菌生物肥料及其制備方法，步驟為
(I)菌種活化將3菌株的保存菌種分別接種在各自的種子斜面培養(yǎng)基上，巨大芽孢桿菌和沼澤紅假單胞菌30°C恒溫培養(yǎng)48h，阿維鏈霉菌28°C培養(yǎng)14d。(2)種子培養(yǎng)1L三角瓶中分別分裝3菌株的種子培養(yǎng)基，1200C，30min滅菌，冷卻至室溫后分別接種各自的斜面種子，恒溫?fù)u床振蕩培養(yǎng)，阿維鏈霉菌30°C，180r/min培養(yǎng)48h，鏡檢無雜菌，菌絲粗壯，種子液PH為6. 5左右；巨大芽孢桿菌和沼澤紅假單胞菌30°C,200r/min培養(yǎng)14_18h，鏡檢菌體成對或單個排列，菌體粗壯，結(jié)晶紫染色均勻，PH為
6.0-6. 3.
(3)200L自動發(fā)酵罐發(fā)酵將各自的發(fā)酵培養(yǎng)基加到3個發(fā)酵罐中，12rC，30min滅菌，冷卻至室溫后，分別接種巨大芽孢桿菌的接種量為7%，培養(yǎng)條件為溫度32°C，罐壓
O.05-0. 06MP,攪拌轉(zhuǎn)速150-180r/min，無菌空氣流量I :0. 5，發(fā)酵周期30_32h。沼澤紅假單胞菌接種量為10%，培養(yǎng)條件為溫度30°C，罐壓O. 05-0. 06MP,不開攪拌器，無菌空氣流量I :0. 5，發(fā)酵周期20-24h。阿維鏈霉菌的接種量為10%，培養(yǎng)條件為溫度30°C，罐壓
O.05-0. 06MP,攪拌轉(zhuǎn)速為200r/min通風(fēng)比為1:0. 5，發(fā)酵周期8_9d.(4)將制成的巨大芽孢桿菌沼澤紅假單胞菌阿維鏈霉菌按照比例混合加入I噸發(fā)酵罐中，加入糖蜜、吐溫-80、十二烷基苯磺酸鈉，水，30 V培養(yǎng)48h。所述的比例為
5.5億個/暈升的巨大芽孢桿菌40重量份
4.O億個/毫升的沼澤紅假單胞菌20重量份
562mg/mL的阿維鏈霉菌藥效成分Bla10重量份
糖蜜240重量份
十二烷基苯磺酸鈉O. 03重量份
吐溫-80O. 04重量份
水690重量份
上述方法中所涉及菌種的發(fā)酵培養(yǎng)基
(I)巨大芽孢桿菌菌斜面培養(yǎng)基(g/L)組成為葡萄糖10g，(NH4 ) 2 S04 0.5 g，酵母O. 5g, NaClO. 3g, KC10. 3g, MgS04 · 7H200. 3g, FeS04 · 7H200. 03 g，MnS04 · 4H2 00. 03g,卵磷 0. 4g, CaC031. 0 g,瓊脂 12g, H201000 mL，pH7. 0-7. 5。種子培養(yǎng)基(g/L) LB培養(yǎng)基，胰化蛋白胨10g，酵母提取物5g，NaCllOgo液體發(fā)酵培養(yǎng)基(g/L):玉米粉20 g，黃豆粉 IOg，K2HP041. 5 g，MgS04 · 7 H20
I.5 g，C a C03 I. 5g，瓊 18_20g，ρΗ7· 5。(2)沼澤紅假單胞菌斜面培養(yǎng)基(g/L):牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaC15g,瓊脂14. Og和無菌水1000mL。種子培養(yǎng)基(g/L):葡萄糖2g,乙酸鈉2g, NH4C12g,酵母膏I. 5g,微量元素I. 5g,ρΗ7· 0-7. 5。液體發(fā)酵培養(yǎng)基(g/L):同種子培養(yǎng)基。(3)阿維鏈霉菌斜面培養(yǎng)基(g/L):可溶性淀粉20g，KN031g, K2HP040. 5g，MgS04·7H200. 5g, NaClO. 5g, FeS04· 7H200. 01g，瓊脂 20g,自來水 IOOOmL, pH7. 2-7. 4。種子培養(yǎng)基(g/L):葡萄糖5. 0g，黃豆餅粉5. 0g，硫酸銨0. 5g，磷酸氫二鉀0. 5g，PH 為 6· 8。液體培養(yǎng)基(g/L):葡萄糖5. 0g，黃豆餅粉5. 0g，硫酸銨0. 5g，磷酸二氫鉀0. 15g，硫酸鎂0. 025g,磷酸氫二鉀0. 25g，PH為6. 6.
肥效實驗
I試驗地點山西太原郊區(qū)玉米園 2試驗時間2011年5月 3試驗對象玉米
4配方新型殺蟲抑菌生物肥料原液50倍侵種；并于齊苗后噴施500倍液噴施一次。5試驗方案
于太原郊區(qū)選取土質(zhì)肥沃，地力均勻的田塊，于2011年5月進(jìn)行玉米栽植。種植前用本產(chǎn)品50倍液浸種，并于齊苗后用500倍液處理I次。對照藥劑為背景技術(shù)中所述的具有殺蟲效果的微生物肥料。本試驗每小區(qū)為壟寬3. 25m,長15m，設(shè)置3次重復(fù)。處理及對照隨機排列，于種植后8d和14d調(diào)查出苗率，并于5-6葉期調(diào)查其葉片最上緣至地表高度，根數(shù)量以及地上地下部鮮重。6試驗效果
表I新型菌劑對玉米苗期影響
權(quán)利要求
1.ー種新型殺蟲抑菌生物肥料，其特征在于原料按重量份為 .5.5億個/毫升的巨大芽孢桿菌30-50份 .4.0億個/毫升的沼澤紅假單胞菌10-30份 .562mg/mL的阿維鏈霉菌藥效成分Bla 1-3份 糖蜜 200-300份 十二烷基苯磺酸鈉 0. 02-0. 04份 吐溫-80 0. 03-0. 05 份 水 600-800 份。
2.ー種新型殺蟲抑菌生物肥料的制備方法，其特征在于步驟為 (1)分別將巨大芽孢桿菌活化發(fā)酵深層培養(yǎng)得到液體，沼澤紅假單胞菌發(fā)酵深層培養(yǎng)得到液體，阿維鏈霉菌發(fā)酵深層培養(yǎng)得到液體 (2)在I噸發(fā)酵罐中依次加入 ①5.5億個/毫升巨大芽孢桿菌液30-50份，4. 0億個/毫升沼澤紅假單胞菌液10-30份，562mg/mL阿維鏈霉菌藥效成分Bla液7_13份， ②化料鍋中加入糖蜜200-300份，80°C下攪拌30分鐘后加入發(fā)酵罐中， ③化料鍋中加入十二烷基苯磺酸鈉0.02-0. 04份，吐溫0. 03-0. 05份，水，攪拌30分鐘后加入發(fā)酵罐中， (3)最后加水，加水總量為600-800份， (4)在30°C下發(fā)酵48小吋。
3.根據(jù)權(quán)利要去I所述的新型殺蟲抑菌生物肥料，其特征在于 原料按重量份為 .5.5億個/暈升的巨大芽孢桿菌40重量份. 4.0億個/毫升的沼澤紅假單胞菌20重量份 562mg/mL的阿維鏈霉菌藥效成分Bla 10重量份 糖蜜 240重量份 十二烷基苯磺酸鈉 0. 03重量份 吐溫-80 0. 04重量份 水 690重量份。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種生物肥，具體為一種新型殺蟲抑菌生物肥料及其制備方法。提高微生物肥的殺菌殺蟲效果及肥效。一種新型殺蟲抑菌生物肥料，由5.5億個/毫升的巨大芽孢桿菌30-50份，4.0億個/毫升的沼澤紅假單胞菌10-30份，562mg/mL的阿維鏈霉菌藥效成分B1a1-3份，糖蜜200-300份，十二烷基苯磺酸鈉0.02-0.04份，吐溫-80 0.03-0.05份，水600-800份組成。本發(fā)明所述的藥肥復(fù)合生物制劑及其生產(chǎn)工藝，確立巨大芽孢桿菌、沼澤紅假單胞菌和阿維鏈霉菌的發(fā)酵工藝參數(shù)，各項指標(biāo)均符合農(nóng)業(yè)部有關(guān)微生物肥料的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。本發(fā)明的產(chǎn)品藥肥復(fù)合生物制劑具有肥料和殺蟲抑菌效果，應(yīng)用前景廣闊。
文檔編號C05G3/02GK102775233SQ20121027666
公開日2012年11月14日 申請日期2012年8月6日 優(yōu)先權(quán)日2012年8月6日
發(fā)明者高秀紅 申請人:定襄縣神宇科技示范基地有限公司, 崔純珍, 董海龍