專利名稱:提高青蒿素含量的組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及一種提高青蒿中青蒿素含量的組合物及其制備方法。
背景技術(shù):
瘧疾嚴重影響人類健康,每年造成上百萬人死亡,被稱為非洲的頭號“殺手”。從原產(chǎn)于我國的菊科植物青蒿(Artemisia annua L.)中提取的青蒿素(artemisinin,具有新型結(jié)構(gòu)的倍半萜內(nèi)酯)是目前最有效的抗瘧藥物,以青蒿素為主要原料藥的聯(lián)合療法 (Artemisinin-Combined Therapy)被世界衛(wèi)生組織WHO推薦為治療瘧疾特別是惡性瘧疾的首要療法。全球每年對青蒿素的需求量十分巨大,約為140噸/年,并且以每年10-20%的比例增長。青蒿素主要來源于青蒿植株的地上部分。然而,青蒿素在青蒿植株中的含量很低(青蒿素含量最高的部位是葉片,但也僅占葉片干重的0. 01%-1%),使得青蒿素的大規(guī)模商業(yè)化生產(chǎn)受到了限制,導(dǎo)致其價格高居不下,目前其價格已達到3200元/公斤,且呈加速上升趨勢。雖然現(xiàn)在已能人工合成青蒿素,但由于難度大,產(chǎn)量低,成本高,不具備商業(yè)化生產(chǎn)的可行性。因此如何提高青蒿中青蒿素的含量已成為滿足全球?qū)η噍锼匦枨笕找嬖黾拥闹匾U?。前人也嘗試采用多種方法如利用組織培養(yǎng)及基因工程來生產(chǎn)青蒿素或提高青蒿中青蒿素的含量。但青蒿素在青蒿愈傷組織中含量低于干重的0. 1%,在芽中最高也只有干重的0. 16%,在根中幾乎檢測不到青蒿素,因此利用組織培養(yǎng)來生產(chǎn)青蒿素的可行性不大。 而采用基因工程來提高青蒿中青蒿素的含量還處于嘗試階段,且受到國家對轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品安全性生產(chǎn)的嚴格限制,因此預(yù)測在未來3-5年內(nèi)很難實現(xiàn)商業(yè)化生產(chǎn)。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足,提供一種提高青蒿中青蒿素含量的組合物及其制備方法。本發(fā)明提供的提高青蒿中青蒿素含量的組合物,其組分為脫落酸與殼聚糖,其中脫落酸與殼聚糖溶液的濃度(μΜ)比例為ι :ιο(Γιοο :ι。優(yōu)選脫落酸與殼聚糖的濃度(μΜ)比例為50 :50。所述提高青蒿中青蒿素含量的組合物的制備方法,包括如下步驟將脫落酸與殼聚糖分別溶于水后,混合,達到最終濃度比例;在混合液中加入吐溫-20 (Tween-20)混勻后即得。本發(fā)明具有如下的有益效果本發(fā)明的組合物其活性成分為脫落酸與殼聚糖,具有顯著的協(xié)同增效作用,可以明顯提高青蒿中青蒿素含量。由于脫落酸與殼聚糖來源廣泛, 價格低廉,因此具有廣闊的市場前景。
具體實施方式
本實施例在以本發(fā)明技術(shù)方案為前提下進行實施,給出了詳細的實施方式和過程,但本發(fā)明的保護范圍不限于下述的實施例。下列實施例中未注明具體條件的實驗方法, 通常按照常規(guī)條件,或按照制造廠商所建議的條件。實施例1
不同比例組合物對提高青蒿中青蒿素含量的影響
在青蒿種子(來源于湖南湘西青蒿素含量較高的青蒿品種)播種前一天灑水濕潤苗床, 播種時先將種子拌成種灰,勻撒畦面,然后薄蓋1層草木灰以遮住種子,10 - 15天即出苗。 出苗后再進行間苗,按株距IOcm左右留苗。當青蒿苗長到10 - 15cm時,將其移栽定植于大田。移栽前,結(jié)合深翻深耕,施氮、磷、鉀復(fù)合肥50公斤,栽后淋足定根水。按株行距60 厘米X 70厘米畦內(nèi)挖穴,每穴栽1株,每畝種植1500株。在植株開花前期(植株生長到1米左右高),用不同比例組合物處理青蒿植株,同時用水處理的青蒿植株作為對照。3-5天后,收獲整株青蒿葉片,用高效液相色譜測定青蒿素含量。結(jié)果如表1所示,所得實驗數(shù)據(jù)均采用 ^ 士 SD表示,組間差異用方差分析法檢驗,使用的軟件為SPSS軟件,版本為version 10。
結(jié)果表明,對照組中青蒿素含量占干重的0. 70%,而單獨用脫落酸處理或殼聚糖處理后植株中青蒿素含量有顯著提高,其中用50μΜ脫落酸處理或50μΜ殼聚糖處理后植株中青蒿素含量分別比對照提高65%和57%。而脫落酸+殼聚糖不同比例的組合具有更加明顯的提高青蒿中青蒿素含量的效果,其中用50μΜ脫落酸+50μΜ殼聚糖的組合效果最好,比對照提高了 98%,達到葉片干重的1. 39%,此種提高的效果是單獨的脫落酸或殼聚糖處理所不具備的。表1脫落酸、殼聚糖及組合物對提高青蒿中青蒿素含量的影響
權(quán)利要求
1.一種提高青蒿中青蒿素含量的組合物,其特征在于,其組分為脫落酸與殼聚糖,其中脫落酸與殼聚糖溶液的濃度(μΜ)比例為ι :10(Γ100 :ι。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高青蒿中青蒿素含量的組合物,其特征是,所述脫落酸與殼聚糖溶液的濃度(μΜ)比例為50 :50。
3.—種如權(quán)利要求1所述提高青蒿中青蒿素含量的組合物的制備方法,其特征在于, 將脫落酸與殼聚糖分別溶于水后,混合,達到最終濃度比例;在混合液中加入吐溫-20混勻后即得。
全文摘要
本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域,具體為一種提高青蒿中青蒿素含量的組合物及其制備方法。所述組合物組分為脫落酸與殼聚糖,其中脫落酸與殼聚糖溶液的濃度(μM)比例為1100~1001。該組合物的制備方法包括如下步驟將脫落酸與殼聚糖分別溶于水后,混合,達到最終濃度比例;在混合液中加入吐溫-20(Tween-20)混勻后即得。本發(fā)明組合物的活性成分具有顯著的協(xié)同增效作用,可以明顯提高青蒿中青蒿素含量。
文檔編號A01N43/16GK102273455SQ20111014342
公開日2011年12月14日 申請日期2011年5月31日 優(yōu)先權(quán)日2011年5月31日
發(fā)明者葉忠, 孫光新 申請人:上海柏泰來生物技術(shù)有限公司